專利名稱：一種含1,3,4-噁二唑結(jié)構(gòu)單元的羅丹明B類pH熒光探針及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含1，3，4-噁二唑結(jié)構(gòu)單元的羅丹明B類pH熒光探針及其作為活細(xì)胞內(nèi)PH熒光探針的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
細(xì)胞中如細(xì)胞新陳代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡和自噬等重要的生理過程都與PH值緊密相關(guān)。細(xì)胞中pH值的微小變化就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂，影響機(jī)體生理功能從而導(dǎo)致多種疾病，如癌癥、阿爾茨海默氏病等的發(fā)生。細(xì)胞中的溶酶體具有弱酸性環(huán)境(pH4. 5 - 5. 5)，其中包含大量的水解酶和分泌蛋白，具有重要的功能。因此，監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中PH值的變化對(duì)于研究細(xì)胞功能及生理和病理過程是必須的。羅丹明B具有量子產(chǎn)率高、摩爾消光系數(shù)大、光穩(wěn)定性好、背景干擾少等優(yōu)點(diǎn)，其衍生物被廣泛應(yīng)用于“關(guān)-開”型金屬離子熒光探針。羅丹明B類探針通常包含一個(gè)螺內(nèi)酰胺或螺內(nèi)酯結(jié)構(gòu)。在中性及堿性溶液中，螺環(huán)結(jié)構(gòu)保持不變，溶液為無色且不發(fā)熒光；在酸性溶液中，螺環(huán)結(jié)構(gòu)打開，溶液呈現(xiàn)紅色并發(fā)出強(qiáng)熒光。這些性質(zhì)使羅丹明B衍生物非常適合用來檢測(cè)酸性pH。盡管目前已有部分報(bào)道的羅丹明B類pH探針用于監(jiān)測(cè)溶酶體中的PH值，但這些探針往往會(huì)引起“堿性效應(yīng)”，即長(zhǎng)時(shí)間孵化后會(huì)引起溶酶體內(nèi)的pH值升高，影響監(jiān)測(cè)結(jié)果。因此設(shè)計(jì)合成新型羅丹明B類pH熒光探針具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一種含1，3，4-噁二唑結(jié)構(gòu)單元的羅丹明B類pH熒光探針及其作為活細(xì)胞內(nèi)pH熒光探針的應(yīng)用。本發(fā)明所述含1，3，4-噁二唑結(jié)構(gòu)單元的羅丹明B類pH熒光探針，其結(jié)構(gòu)如式(I)
所示
權(quán)利要求
1.一種含1，3，4-噁二唑結(jié)構(gòu)單元的羅丹明B類pH熒光探針，其結(jié)構(gòu)如式(I)所示
2.權(quán)利要求1所述含1，3，4-噁二唑結(jié)構(gòu)單元的羅丹明B類pH熒光探針在活細(xì)胞內(nèi)監(jiān)測(cè)PH值變化及特異性標(biāo)記溶酶體的應(yīng)用。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述活細(xì)胞選Hela細(xì)胞或HUVEC細(xì)胞。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含1,3,4-噁二唑結(jié)構(gòu)單元的羅丹明B類pH熒光探針，其結(jié)構(gòu)如式(I)所示。本發(fā)明還公開了所述探針在活細(xì)胞內(nèi)監(jiān)測(cè)pH值變化及特異性標(biāo)記溶酶體的應(yīng)用。本發(fā)明的探針在中性和堿性條件下不發(fā)熒光，在pH值小于7后，熒光強(qiáng)度隨pH值的降低迅速增強(qiáng)，在pH約為4.4時(shí)強(qiáng)度達(dá)到最大值，其熒光檢測(cè)的敏感pH范圍為6.7-4.4，并在4.7-5.7之間熒光強(qiáng)度與pH呈線性關(guān)系，且在酸性條件下對(duì)各種金屬離子有很好的抗干擾能力，非常適合在復(fù)雜的活細(xì)胞內(nèi)環(huán)境下進(jìn)行pH值實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，特別是特異性標(biāo)記溶酶體和監(jiān)測(cè)溶酶體內(nèi)pH值變化。
文檔編號(hào)G01N21/64GK103012418SQ201210512569
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月4日
發(fā)明者趙寶祥, 苗俊英, 張尚立, 呂洪水, 劉靜 申請(qǐng)人:山東大學(xué)