檢測(cè)有機(jī)磷類農(nóng)藥中茶葉的前處理方法及其應(yīng)用以及檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的茶葉的前處理方法，所述方法包括如下步驟：（1）將粉碎后的茶葉粉末浸于提取溶劑中，渦旋振蕩4-8min，振蕩后在4000-6000rpm下離心4-6min，所述提取溶劑能夠溶解茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥但不溶解茶葉；（2）取步驟（1）離心后的上清液，加入固體吸附劑，渦旋振蕩3-5min，振蕩后在11000-13000rpm下離心5-7min；（3）將步驟（2）離心后的上清液過孔徑為0.22-0.45μm的濾膜，得到待測(cè)溶液。還公開上述方法在檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥中的應(yīng)用及檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的方法。本發(fā)明方法處理時(shí)間短，消耗溶劑少，成本低。
【專利說明】檢測(cè)有機(jī)磷類農(nóng)藥中茶葉的前處理方法及其應(yīng)用以及檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)藥檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地，涉及檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的茶葉的前處理方法，及該方法在檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥中的應(yīng)用，以及通過該方法進(jìn)行的檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]有機(jī)磷類農(nóng)藥是用于防治植物病、蟲、害的含有機(jī)磷農(nóng)藥的有機(jī)化合物。這一類農(nóng)藥品種多、藥效高，用途廣，易分解，在人、畜體內(nèi)一般不積累，在農(nóng)藥中是極為重要的一類化合物。但有不少品種對(duì)人、畜的急性毒性很強(qiáng)。有機(jī)磷類農(nóng)藥是我國(guó)使用范圍最廣、用量最大的一類廣譜、高效的農(nóng)藥。
[0003]為了提高產(chǎn)量和改善茶葉外形，農(nóng)民在茶樹種植過程中往往噴灑了大量的化學(xué)農(nóng)藥。據(jù)統(tǒng)計(jì)，約有98%的茶葉在栽培過程中要使用農(nóng)藥和化肥。茶葉的需求和產(chǎn)量的矛盾導(dǎo)致必須使用農(nóng)藥和化肥。我國(guó)是世界第一產(chǎn)茶大國(guó)，茶葉的進(jìn)出口貿(mào)易帶來了大量外匯儲(chǔ)備。同時(shí)茶葉中農(nóng)藥殘留超限量已成為我國(guó)茶葉出口歐盟、北美和日本等發(fā)達(dá)地區(qū)和國(guó)家的主要技術(shù)性貿(mào)易壁壘。確保這些茶葉的質(zhì)量安全，大量的茶葉生產(chǎn)商需要農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)對(duì)茶葉原料和成品進(jìn)行農(nóng)藥殘留的監(jiān)控。
[0004]茶葉較多的保留了鮮葉中的嘌呤類生物堿、糖類、色素、維生素和礦物質(zhì)，基質(zhì)復(fù)雜，對(duì)痕量的農(nóng)藥殘留檢測(cè)有嚴(yán)重干擾。采用色譜法分離檢測(cè)有機(jī)磷類農(nóng)藥時(shí)大多需要前處理方法對(duì)茶葉樣品進(jìn)行處理。目前，國(guó)內(nèi)外研究茶葉中農(nóng)藥殘留的前處理方法主要有索氏提取、振蕩提取、超聲提取、加速溶劑萃取、分散液液微萃取、固相萃取、凝膠滲透色譜等方法。這些方法有些步驟較多，有些耗時(shí)較長(zhǎng)，有些需操作人員與大量的有機(jī)溶劑接觸，污染環(huán)境，成本較高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中處理時(shí)間長(zhǎng)、消耗溶劑多、成本高的缺點(diǎn)，為茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥檢測(cè)提供一種快速、有效和低成本的前處理方法。
[0006]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，一方面，本發(fā)明提供了一種用于檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的茶葉的前處理方法，所述方法包括如下步驟:
[0007](I)將粉碎后的茶葉粉末浸于提取溶劑中，渦旋振蕩4-8min，振蕩后在4000-6000rpm下離心4_6min,所述提取溶劑能夠溶解茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥但不溶解茶葉；
[0008](2)取步驟(I)離心后的上清液，加入固體吸附劑，渦旋振蕩3_5min，振蕩后在11000-13000rpm 下離心 5_7min ；
[0009](3)將步驟(2)離心后的上清液過孔徑為0.22-0.45 μ m的濾膜，得到待測(cè)溶液。
[0010]優(yōu)選地,步驟(I)中，茶葉粉末的粒徑< 2mm。
[0011]優(yōu)選地，步驟(I)中，相對(duì)于Ig茶葉粉末，提取溶劑的用量為l_3mL。[0012]優(yōu)選地，所述提取溶劑選自乙腈、丙酮、乙酸乙酯和正己烷中的一種或多種；更優(yōu)選地，所述提取溶劑為乙酸乙酯與正己烷的混合溶液，乙酸乙酯與正己烷的體積比為1:0.5-1.5ο
[0013]優(yōu)選地，步驟(2)中，相對(duì)于Ig茶葉粉末，固體吸附劑的用量為50_150mg。
[0014]優(yōu)選地，所述固體吸附劑選自石墨化炭黑、N-丙基乙二胺鍵合硅膠和C18鍵合硅膠中的一種或多種；更優(yōu)選地，所述固體吸附劑為石墨化炭黑和N-丙基乙二胺鍵合硅膠的混合物，石墨化炭黑和N-丙基乙二胺鍵合硅膠的重量比為1:0.125-1。
[0015]另一方面，本發(fā)明提供了如上所述的方法在檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥中的應(yīng)用。
[0016]第三方面，本發(fā)明提供了一種檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的方法，所述方法包括:
[0017](I)將茶葉進(jìn)行前處理，得到待測(cè)溶液；
[0018](2)將步驟(1)得到的待測(cè)溶液進(jìn)行氣相色譜分析，
[0019]其中，步驟(1)中前處理的方法為如上所述的方法。
[0020]本發(fā)明的檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的前處理方法處理時(shí)間短，消耗溶劑少，成本低。為檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥提供了快速、有效、低成本的操作技術(shù)。
[0021]本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的【具體實(shí)施方式】部分予以詳細(xì)說明。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0022]圖1:0.010 μ g/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的GC-FPD色譜圖。
[0023]附圖標(biāo)記說明
[0024]I敵敵畏；2樂果；3甲基對(duì)硫磷；4殺螟硫磷；5對(duì)硫磷；6水胺硫磷；7三唑磷；8苯硫憐；9伏殺硫憐。
【具體實(shí)施方式】
[0025]以下對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的【具體實(shí)施方式】?jī)H用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限制本發(fā)明。
[0026]一方面，本發(fā)明提供了一種用于檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的茶葉的前處理方法，所述方法包括如下步驟:
[0027](I)將粉碎后的茶葉粉末浸于提取溶劑中，渦旋振蕩4-8min，振蕩后在4000-6000rpm下離心4_6min,提取溶劑能夠溶解茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥但不溶解茶葉；
[0028](2)取步驟(1)離心后的上清液，加入固體吸附劑，渦旋振蕩3_5min，振蕩后在11000-13000rpm 下離心 5_7min ；
[0029](3)將步驟(2)離心后的上清液過孔徑為0.22-0.45 μ m的濾膜，得到待測(cè)溶液。
[0030]本發(fā)明中，步驟(1)中，茶葉粉末的粒徑優(yōu)選≤2mm。
[0031 ] 本發(fā)明中，步驟(1)中，渦旋振蕩4-8min通常為渦旋振蕩2_4min，再重復(fù)一次，即禍旋振蕩4-8min。
[0032]本發(fā)明中，步驟(1)中，相對(duì)于Ig茶葉粉末，提取溶劑的用量?jī)?yōu)選為l_3mL。
[0033]本發(fā)明中，提取溶劑可以為本領(lǐng)域常用的各種提取茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的提取溶劑，例如可以為乙腈、丙酮、乙酸乙酯和正己烷中的一種或多種。優(yōu)選情況下，提取溶劑為乙酸乙酯與正己烷的混合溶液，乙酸乙酯與正己烷的體積比優(yōu)選為1:0.5-1.5。[0034]本發(fā)明中，步驟(2 )中，相對(duì)于Ig茶葉粉末，固體吸附劑的用量?jī)?yōu)選為50-150mg。
[0035]本發(fā)明中，固體吸附劑可以為本領(lǐng)域常用的固體吸附劑，例如，可以為石墨化炭黑、N-丙基乙二胺鍵合硅膠和C18鍵合硅膠中的一種或多種，優(yōu)選情況下，固體吸附劑為石墨化炭黑和N-丙基乙二胺鍵合硅膠的混合物，石墨化炭黑和N-丙基乙二胺鍵合硅膠的重量比優(yōu)選為1:0.125-1。
[0036]另一方面，本發(fā)明提供了如上所述的方法在檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥中的應(yīng)用。
[0037]第三方面，本發(fā)明提供了一種檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的方法，該方法包括:
[0038]( I)將茶葉進(jìn)行前處理，得到待測(cè)溶液；
[0039](2)將步驟(1)得到的待測(cè)溶液進(jìn)行氣相色譜分析，
[0040]其中，步驟(1)中前處理的方法為如上所述的檢測(cè)有機(jī)磷類農(nóng)藥中茶葉的前處理方法。
[0041]本發(fā)明中，對(duì)于氣象色譜分析的條件可以采用本領(lǐng)域常用的條件，此為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知，在此不再贅述。
[0042]實(shí)施例
[0043]以下的實(shí)施例將對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，但并不因此限制本發(fā)明。
[0044]在以下實(shí)施例中:
[0045]將購(gòu)買的茶葉用粉碎機(jī)粉碎，用圓孔篩篩出< 2.0mm茶葉粉末。
[0046]GC-2010Plus氣相色譜儀(配FPD檢測(cè)器，日本島津公司)。
[0047]乙酸乙酯、正己燒(色譜純，J.T.Baker公司)。
[0048]石墨化碳黑(GCB)、N-丙基乙二胺鍵合硅膠(PSA) (BESEP公司)
[0049]有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品包括:敵敵畏、樂果、甲基對(duì)硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、水胺硫磷、三唑磷、苯硫磷、伏殺硫磷，購(gòu)于美國(guó)J.T.Baker公司。
[0050]將有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品用乙酸乙酯-正己烷(V:V=1:1)稀釋并配制成各自濃度為10 μ g/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。用乙酸乙酯-正己烷(V:V=1:1)將10 μ g/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋為濃度為0.250,0.100,0.050,0.020,0.010,0.005 μ g/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用GC-2010Plus氣相色譜儀進(jìn)行色譜分析，色譜柱條件如下，以濃度對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(0.010 μ g/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的GC-FPD色譜圖見圖1)，線性方程及相關(guān)系數(shù)見表1。
[0051]色譜柱:DB_5ms毛細(xì)管柱，30mX0.25mmX0.25 μ m,恒線速度模式，初始流速0.8mL/min ;進(jìn)樣口:不分流模式，溫度250 °C，進(jìn)樣量2 μ L ;升溫程序:50°C保持Imin, 50 °C /min 升至 10CTC,保持 lmin, 8 °C /min 升至 280 °C,保持 5min ;載氣:N2,純度≥ 99.999% ；FPD 檢測(cè)器:磷模式，溫度 300°C，H262.5mL/min, Air90mL/min。
[0052]表1
[0053]
【權(quán)利要求】
1.一種用于檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的茶葉的前處理方法，所述方法包括如下步驟: (1)將粉碎后的茶葉粉末浸于提取溶劑中，渦旋振蕩4-8min，振蕩后在4000-6000rpm下離心4-6min，所述提取溶劑能夠溶解茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥但不溶解茶葉； (2)取步驟(1)離心后的上清液，加入固體吸附劑，渦旋振蕩3-5min，振蕩后在11000-13000rpm 下離心 5_7min ； (3)將步驟(2)離心后的上清液過孔徑為0.22-0.45 μ m的濾膜，得到待測(cè)溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟(1)中，茶葉粉末的粒徑<2mm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟(1)中，相對(duì)于Ig茶葉粉末，提取溶劑的用量為l_3mL。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的方法，其中，所述提取溶劑選自乙腈、丙酮、乙酸乙酯和正己烷中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中，所述提取溶劑為乙酸乙酯與正己烷的混合溶液，乙酸乙酯與正己烷的體積比為1:0.5-1.5。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟(2)中，相對(duì)于Ig茶葉粉末，固體吸附劑的用量為50-150mg。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或6所述的方法，其中，所述固體吸附劑選自石墨化炭黑、N-丙基乙二胺鍵合硅膠和C18鍵合硅膠中的一種或多種。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述固體吸附劑為石墨化炭黑和N-丙基乙二胺鍵合硅膠的混合物，石墨化炭黑和N-丙基乙二胺鍵合硅膠的重量比為1:0.125-1。
9.權(quán)利要求1-8中任意一項(xiàng)所述的方法在檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥中的應(yīng)用。
10.一種檢測(cè)茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥的方法，所述方法包括: (1)將茶葉進(jìn)行前處理，得到待測(cè)溶液； (2)將步驟(1)得到的待測(cè) 溶液進(jìn)行氣相色譜分析， 其中，步驟(1)中前處理的方法為權(quán)利要求1-8中任意一項(xiàng)所述的方法。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK103901137SQ201210587434
【公開日】2014年7月2日 申請(qǐng)日期:2012年12月28日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月28日
【發(fā)明者】陳世恒, 章晴, 楊永壇 申請(qǐng)人:中糧營(yíng)養(yǎng)健康研究院有限公司, 中糧集團(tuán)有限公司