用于前列腺癌的診斷、預(yù)測(cè)和治療的游離PSA抗體本申請(qǐng)要求2011年10月25日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)序列號(hào)61/551,195的優(yōu)先權(quán)，其整體通過引用并入本申請(qǐng)。

背景技術(shù)：
前列腺癌是男性中最常診斷出的癌癥之一，并且是僅次于肺癌的最常見的導(dǎo)致癌癥相關(guān)死亡的原因。罹患前列腺癌的風(fēng)險(xiǎn)隨著年齡的增大顯著增加，特別是在50歲以上的男性中。隨著過去的三十年中標(biāo)志性的人口老齡化和預(yù)期壽命的增加，前列腺癌在美國(guó)的發(fā)生率可能接近六分之一的男性。盡管有大量的研究探討了前列腺癌的分子原因，但是其仍難以治療。目前治療的金標(biāo)準(zhǔn)是手術(shù)，通常是將前列腺摘除，再進(jìn)行放療或化療。然而，這些方法并不完全有效并且影響個(gè)體恢復(fù)性功能的可能性。此外，前列腺癌細(xì)胞和轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞能夠通過過表達(dá)雄激素受體或模擬活化雄激素受體信號(hào)的其他適應(yīng)性突變補(bǔ)償通過治療減少的雄激素水平。而且，目前的方法不足以識(shí)別和治療已浸潤(rùn)其他組織(例如淋巴結(jié)和骨)的轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞。與作為其來源的前列腺腫瘤一樣，轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞保留了雄激素敏感性，并且雄激素的存在驅(qū)動(dòng)了轉(zhuǎn)移性腫瘤生長(zhǎng)。發(fā)明概述本發(fā)明的實(shí)施方式基于一個(gè)驚人的發(fā)現(xiàn)，即對(duì)游離PSA(“fPSA”)具有特異性的單克隆抗體和抗體多肽能夠與瘤內(nèi)的fPSA或與前列腺腫瘤密切結(jié)合的其他fPSA結(jié)合。與腫瘤結(jié)合的fPSA水平能夠?yàn)槟[瘤本身的雄激素受體信號(hào)提供高特異性和可定量的檢測(cè)。因此，根據(jù)本發(fā)明，單克隆抗體或抗體多肽結(jié)合到與腫瘤結(jié)合的fPSA上有助于在原位監(jiān)測(cè)和/或?qū)⑿奂に厥荏w信號(hào)可視化并且其為抗癌治療的有效性提供了一種優(yōu)越的檢測(cè)措施。與常規(guī)的血清PSA檢測(cè)相比，通過fPSA對(duì)雄激素受體信號(hào)原位監(jiān)測(cè)提供了明顯更好的結(jié)果。例如，原位fPSA水平是前列腺癌特異性的，并且如本申請(qǐng)所證實(shí)的其與雄激素的應(yīng)答性和治療效果直接相關(guān)。因此，本申請(qǐng)公開的本發(fā)明的實(shí)施方式提供了檢測(cè)與腫瘤結(jié)合的fPSA的表達(dá)的非侵入性方法，其更加清楚地反映了在PSA表達(dá)中雄激素受體驅(qū)動(dòng)的改變。而且，在患有彌散性疾病的患者中單克隆抗體和抗體多肽能夠檢測(cè)轉(zhuǎn)移灶并且能夠區(qū)分惡性和非惡性疾病。此外，單克隆抗體和抗體多肽針對(duì)與腫瘤結(jié)合的fPSA的結(jié)合特異性能夠用在直接針對(duì)前列腺腫瘤或轉(zhuǎn)移位點(diǎn)的靶向療法中(例如化療、放射性同位素的遞送或基因療法)。本發(fā)明的實(shí)施方式提供了用于原位監(jiān)測(cè)對(duì)前列腺癌的治療或療法的應(yīng)答的方法。在特定實(shí)施方式中，所述方法包括給予與游離PSA(“fPSA”)的表位結(jié)合的抗體多肽；確定治療前在主體的腫瘤或組織中fPSA的表達(dá)或活性水平；給予主體前列腺癌治療或療法；再次給予與fPSA的表位結(jié)合的抗體多肽；確定治療后在主體的腫瘤或組織中fPSA的表達(dá)或活性水平；將治療后在腫瘤或組織中fPSA的表達(dá)或活性水平與治療前的水平進(jìn)行比較；以及基于所述比較，根據(jù)所展示出的原位fPSA活性或表達(dá)的降低情況，確定療法或治療是否有效。在一個(gè)特定實(shí)施方式中，所述fPSA的表位在催化裂隙中或與之鄰近。在另一個(gè)特定實(shí)施方式中，所述前列腺癌的治療或療法是抗雄激素療法。在某些實(shí)施方式中，所述抗體多肽是單克隆抗體。一些實(shí)施方式進(jìn)一步包括，在給藥步驟前，將所述抗體多肽與檢測(cè)實(shí)體組合。在特定實(shí)施方式中，所述檢測(cè)實(shí)體選自由鋯-89(89Zr)、碘-124(124I)、碘-131(131I)、碘-125(125I)、鉍-212(212Bi)、鉍-213(213Bi)、砹-221(211At)、銅-67(67Cu)、銅-64(64Cu)、錸-186(186Re)、錸-186(188Re)、磷-32(32P)、釤-153(153Sm)、镥-177(117Lu)、锝-99m(99mTc)、鎵-67(67Ga)、銦-Ill(111In)和鉈-201(201Tl)組成的組。在一些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)步驟包括通過單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層成像技術(shù)(SPECT)、正電子發(fā)射斷層成像技術(shù)(PET)或磁共振成像(MRI)檢測(cè)。在特定實(shí)施方式中，所述前列腺癌治療或療法選自包括去勢(shì)、RU58642、LG120907、LG105、RD162、MDV3100、BMS-641988、CH5137291、阿徹瑞克酸(ataricacid)、N-丁基苯磺酰胺、醋酸環(huán)丙孕酮、羥基氟他胺、比卡魯胺、尼魯米特、肽拮抗劑、TAK700、ARN-509(醋酸阿比特龍)、卡博替尼(cabozantimib)、伊匹單抗(ipilimumab)、庫(kù)司替森、BPX-101、阿爾法萊丁(alpharadin)、德尼單抗(denosumab)和Protsvac-VF的組。用于本發(fā)明實(shí)施方式的其他前列腺癌的治療包括氯化鐳-223、卡博替尼(cabozantinib)和比卡魯胺(康士德)。在某些實(shí)施方式中，通過治療后fPSA的表達(dá)或活性水平與治療前fPSA的表達(dá)或活性水平相比降低指示有效的治療。在所述方法的其他實(shí)施方式中，提供了一種在主體中原位監(jiān)測(cè)雄激素受體信號(hào)的方法。在特定實(shí)施方式中，所述方法包括給予主體與位于或鄰近PSA的催化裂隙的至少一個(gè)表位結(jié)合的抗體多肽，其中所述抗體多肽與檢測(cè)實(shí)體復(fù)合；通過成像方案，檢測(cè)在前列腺腫瘤或其轉(zhuǎn)移細(xì)胞中檢測(cè)實(shí)體的存在情況；其中所述檢測(cè)實(shí)體的存在情況與雄激素受體信號(hào)相關(guān)。在一個(gè)特定實(shí)施方式中，雄激素受體信號(hào)在體外成像。在另一個(gè)實(shí)施方式中，雄激素受體信號(hào)在體內(nèi)成像。其他實(shí)施方式進(jìn)一步包括對(duì)所述檢測(cè)實(shí)體的存在情況進(jìn)行定量以確定fPSA的表達(dá)或活性的檢測(cè)，其中所述fPSA表達(dá)的檢測(cè)與雄激素受體信號(hào)定量地相關(guān)。在特定實(shí)施方式中，所述成像方案選自包括單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層成像技術(shù)(SPECT)、正電子發(fā)射斷層成像技術(shù)(PET)或磁共振成像(MRI)的組。本發(fā)明的一些實(shí)施方式提供了在主體中治療前列腺癌或其轉(zhuǎn)移性疾病的方法。在某些實(shí)施方式中，所述方法包括向主體給予對(duì)與抗癌劑組合或偶聯(lián)的fPSA具有特異性的包括抗體多肽的靶向?qū)嶓w。如本申請(qǐng)中所討論的，所述fPSA實(shí)質(zhì)上在瘤內(nèi)或與前列腺癌細(xì)胞結(jié)合。在一些實(shí)施方式中，對(duì)fPSA具有特異性的抗體或其抗原結(jié)合片段用于生產(chǎn)針對(duì)前列腺癌的藥物治療或藥物。在一些實(shí)施方式中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段是人源或小鼠單克隆抗體。在某些實(shí)施方式中，所述抗體是5A10。示例性的抗癌劑可以選自包括光敏劑、核酸、放射敏化劑、放射性同位素、超抗原、前藥、前藥活化酶、抗血管生成劑和抗雄激素療法的組。在一些實(shí)施方式中，所述抗癌劑可以是MDV3100、ARN-509和阿霉素。在一些實(shí)施方式中，所述抗-fPSA抗體多肽對(duì)位于或鄰近fPSA的催化裂隙的表位具有特異性。本發(fā)明的其他實(shí)施方式提供了包括對(duì)fPSA具有特異性的單克隆抗體或其片段的藥物組合物。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，提供了一種用于監(jiān)測(cè)原位雄激素受體信號(hào)的試劑盒，所述試劑盒包括對(duì)fPSA具有特異性的抗體多肽；能夠檢測(cè)fPSA的表達(dá)或活性水平的試劑；對(duì)照；以及用于對(duì)由該試劑盒實(shí)施的檢測(cè)和根據(jù)該檢測(cè)確定雄激素受體信號(hào)提供指導(dǎo)的說明書。附圖說明下文所述的圖，在一起組成附圖，其僅供說明之用，不用于限制。圖1顯示了典型的粗制(灰色)和純化(黑色)89Zr-5A10的放射性-ITLC色譜圖。洗脫液為50mMDTPA,pH7。89Zr-5A10保持在基線(Rf＝0.0)，雜質(zhì)與溶劑前沿一起移動(dòng)(Rf＝1.0)。圖2顯示了確定89Zr-5A10對(duì)fPSA的相對(duì)親和性的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合檢測(cè)。通過在使用固化的fPSA包被的孔中將89Zr-5A10與可變濃度的未標(biāo)記的5A10孵育確定89Zr-5A10對(duì)fPSA的相對(duì)親和性。將孵育后孔中仍保留的活性解釋為89Zr-5A10對(duì)fPSA的特異性結(jié)合。將實(shí)驗(yàn)值對(duì)理想(理論)值作圖，其基于DFO和89Zr與5A10的偶聯(lián)不會(huì)改變mAb對(duì)fPSA親和性的假設(shè)計(jì)算。使用線性回歸確定線性(y＝x)偏差，并且顯示了一個(gè)89Zr-5A10制備物的代表性數(shù)據(jù)。檢測(cè)重復(fù)進(jìn)行兩次，使用兩個(gè)獨(dú)立濃度范圍的5A10(共n＝4)。圖3顯示了89Zr-5A10特別地位于多個(gè)AR-和fPSA-陽性前列腺癌的臨床前模型中。圖3a顯示了在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠所選定組織的生物分布數(shù)據(jù)，圖中顯示在24h時(shí)所觀察到的89Zr-5A10的瘤內(nèi)攝取達(dá)峰。隨著時(shí)間的推移，以血液和心臟為代表的血池的活性耗竭，并且像很多單克隆抗體一樣，在肝臟中觀察到了持續(xù)的高攝取。圖3b顯示了攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠的代表性橫斷面(Trans.)和冠狀PET切片，圖中顯示了89Zr-5A10定位于腫瘤(T)和在小鼠肝臟(L)中的攝取。圖3c顯示了與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10在多個(gè)s.c.前列腺癌模型和若干處置條件下的完好雄性小鼠中的生物分布數(shù)據(jù)。通過同時(shí)注射過量的未標(biāo)記5A10(1mg未標(biāo)記的mAb)，89Zr-5A10對(duì)LNCaP-AR的定位被完全競(jìng)爭(zhēng)掉。非特異性放射性示蹤劑89Zr-IgG未定位于LNCaP-AR，并且89Zr-5A10未定位于PC3，PC3為不表達(dá)AR-和PSA-的前列腺癌模型。觀察到89Zr-5A10居間地定位于CWR22Rv1異種移植瘤，同LNCaP-AR相比，該中間定位在該模型中與較低的PSA基線表達(dá)一致。*表示與所有條件下比較P<0.01。"表示與PC3比較P<0.01。圖3d顯示了在攜帶LNCaP-AR腫瘤的去勢(shì)小鼠中手術(shù)植入s.c.睪酮顆粒后導(dǎo)致與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10增加，但在其他器官的攝取未發(fā)生改變。生物分布數(shù)據(jù)在注射后24h采集。*表示與未經(jīng)處置(NoTx)的比較P<0.01。誤差線表示平均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差。圖4顯示了注射89Zr-5A10的攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠的生物分布曲線。給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10，并在注射后的指定時(shí)間將其處死并且收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。圖5顯示了注射89Zr-5A10和過量未標(biāo)記的5A10的攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠的生物分布曲線。共同給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10和過量5A10(1mg/小鼠)，并在注射后24h將其處死并且收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差報(bào)告。*表示與單獨(dú)的示蹤劑比較在給予未標(biāo)記5A10的動(dòng)物中89Zr-5A10的瘤內(nèi)攝取P<0.01。圖6顯示了注射89Zr-IgG的攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠的生物分布曲線。給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-IgG，并在注射后的指定時(shí)間將其處死并且收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。圖7顯示了注射89Zr-5A10的攜帶LNCaP-AR、PC3或CWR22Rv1異種移植瘤的完好雄性小鼠的生物分布曲線。給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10，并在注射后24h將其處死并且收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差報(bào)告。圖8顯示了注射89Zr-5A10的具有或不具有皮下睪酮顆粒的攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠的生物分布曲線。手術(shù)植入睪酮顆?；驘o操作(NoTx)六天后，給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10，并在注射后24h將其處死并且收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差報(bào)告。*表示與NoTx比較在給予睪酮的動(dòng)物中89Zr-5A10的瘤內(nèi)攝取P<0.01。圖9顯示了注射89Zr-5A10的具有或不具有皮下睪酮顆粒的攜帶CWR22Rv1異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠的生物分布曲線。手術(shù)植入睪酮顆?；驘o操作(NoTx)六天后，給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10，并在注射后24h將其處死并且收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均cpm/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差報(bào)告。*表示與NoTx比較在給予睪酮的動(dòng)物中89Zr-5A10的瘤內(nèi)攝取P<0.05。圖10顯示了89Zr-5A10在體內(nèi)對(duì)雄激素受體(“AR”)藥理學(xué)抑制的檢測(cè)。圖10a顯示了攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠的生物分布數(shù)據(jù)，圖中顯示MDV3100抑制89Zr-5A10對(duì)腫瘤的定位。連續(xù)7d給予動(dòng)物賦形劑或指定劑量的MDV3100，并在第7天時(shí)注射89Zr-5A10，p.i.24h后收集用于生物分布研究的動(dòng)物。*表示與賦形劑或10mg/kgMDV3100比較40mg/kg和80mg/kg劑量的MDV3100的P<0.01。圖10b顯示了攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠右側(cè)面的代表性橫斷面(Trans.)和冠狀PET切片，經(jīng)過s.c.睪酮顆粒，或者連續(xù)7天每日灌胃給予賦形劑或MDV3100(80mg/kg)處理，再p.i.89Zr-5A1024h后成像。組間可見與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10存在明顯的肉眼可見差異。箭頭表示腫瘤(T)和小鼠肝臟(L)的位置。在圖10c中，對(duì)PET研究中腫瘤目的區(qū)域進(jìn)行分析的結(jié)果顯示，與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10出現(xiàn)了統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著變化。*表示與賦形劑比較P<0.01。誤差線表示平均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差。圖11顯示了給予賦形劑或MDV3100，并且注射89Zr-5A10的攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠的生物分布曲線。給予攜帶腫瘤的去勢(shì)雄性小鼠賦形劑，或指定劑量的MDV3100(每日灌胃給藥)。在第6天時(shí)，注射給予小鼠89Zr-5A10，并在注射24h后，將其處死并收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均值％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式報(bào)告。*表示與賦形劑比較MDV310040mg/kg和80mg/kg的P<0.01。40and80mg/kg劑量的MDV3100與10mg/kg劑量的MDV3100比較P<0.05。圖12顯示了小鼠在左側(cè)脛骨接種LNCaP-AR的典型生物發(fā)光圖像。將完好的雄性小鼠在左側(cè)脛骨接種LNCaP-AR，利用生物發(fā)光監(jiān)測(cè)進(jìn)展，并且通過MRI和血清PSA分析(見正文)對(duì)腫瘤的進(jìn)展進(jìn)行確證。顯示了在接種5周后一群攜帶腫瘤小鼠的典型圖像。這些動(dòng)物患有經(jīng)確證的疾病。圖13顯示了表示腫瘤侵入骨的典型MRI。將完好的雄性小鼠在左側(cè)脛骨接種LNCaP-AR，并且使用MRI目測(cè)檢查和血清PSA分析對(duì)腫瘤的進(jìn)展進(jìn)行確證。左后肢的對(duì)比區(qū)域(面向MRI切片的右側(cè))表示腫瘤塊局限在紅色區(qū)域。圖14顯示了89Zr-5A10特異性靶向體內(nèi)骨微環(huán)境中的前列腺癌。在圖14a中，配準(zhǔn)的三維、容積重建PET/CT圖像顯示89Zr-5A10定位于完好雄性小鼠左側(cè)脛骨中的骨LNCaP-AR移植物中。PET數(shù)據(jù)，以藍(lán)綠色比例尺表示，顯示了與右側(cè)(正常)脛骨相比，在動(dòng)物的左側(cè)(攜帶腫瘤)的脛骨具有更高的放射性。在圖14b中，配準(zhǔn)PET/MRI圖像顯示了通過MRI檢測(cè)的與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10正電子發(fā)射共定位的對(duì)比度。在圖14c中，對(duì)完好雄性小鼠脛骨進(jìn)行骨折處理，并在手術(shù)后10天使用18F-NaF評(píng)估骨重塑情況。利用PET鑒定骨折的脛骨中對(duì)比度清晰的區(qū)域。首次成像2天后，同時(shí)注射給予動(dòng)物99mTc-MDP和89Zr-5A10。SPECT成像顯示99mTc-MDP也定位于骨折愈合區(qū)域，這與預(yù)期一致。而相反的是，PET成像顯示在損傷部位無可檢測(cè)的89Zr-5A10，這表明與目前在臨床上使用的放射性示蹤劑相比該試劑對(duì)前列腺癌具有更高的特異性。圖15顯示了表明89Zr-5A10與腫瘤在脛骨中調(diào)準(zhǔn)的配準(zhǔn)PET/MRI切片。將完好的雄性小鼠的左側(cè)脛骨接種LNCaP-AR，并且使用MRI目測(cè)檢查和血清PSA分析對(duì)腫瘤的進(jìn)展進(jìn)行確證。在注射89Zr-5A1024h后采集配準(zhǔn)的PET/MRI圖像。給出右側(cè)(正常)后肢的圖像用于比較。圖16顯示了給予攜帶骨LNCaP-AR異種移植瘤的小鼠89Zr-5A10(左圖)和89ZrCl(右圖)后的組織學(xué)和重疊放射自顯影，圖中顯示了89Zr-5A10定位于腫瘤組織，而89ZrCl定位于正常骨。通過組織學(xué)(定義為H&E染色)目測(cè)檢查區(qū)分腫瘤組織，在4×下用藍(lán)框標(biāo)出，在10×下用箭頭突出。選定的更高放大倍數(shù)的組織區(qū)域用黃框標(biāo)出。圖17顯示了給予賦形劑或MDV3100，并且注射89Zr-J591的攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠的生物分布曲線。給予攜帶腫瘤的去勢(shì)小鼠賦形劑，或者指定劑量的MDV3100(每日灌胃)。在第6天時(shí)，注射給予小鼠89Zr-J591，并在注射24h后，將其處死并收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式報(bào)告。定義動(dòng)物：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“動(dòng)物”指動(dòng)物界的任意成員。在一些實(shí)施方式中，“動(dòng)物”指任意性別和任意發(fā)育階段的人。在一些實(shí)施方式中，“動(dòng)物”指任意發(fā)育階段的非人動(dòng)物。在某些實(shí)施方式中，所述非人動(dòng)物是哺乳動(dòng)物(例如嚙齒動(dòng)物、小鼠、大鼠、家兔、猴、犬、貓、綿羊、牛、靈長(zhǎng)類和/或豬)。在一些實(shí)施方式中，動(dòng)物包括，但不限于哺乳動(dòng)物、鳥類、爬蟲類、兩棲類、魚、昆蟲和/或蠕蟲。在某些實(shí)施方式中，所述動(dòng)物易被HCV感染。在一些實(shí)施方式中，動(dòng)物可以是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、基因工程動(dòng)物和/或克隆。拮抗劑：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“拮抗劑”指試劑i)抑制、減少或降低另一種試劑的作用，例如使受體失活；和/或ii)抑制、減少、降低或推遲一種或多種生物事件，例如活化一種或多種受體或刺激一個(gè)或多個(gè)生物通路。在特定實(shí)施方式中，拮抗劑抑制一種或多種雄激素受體的活化和/或活性。拮抗劑可以是或包括任意化學(xué)分類的試劑，包括例如小分子、多肽、核酸、碳水化合物、脂質(zhì)、金屬和/或任意其他顯示出相關(guān)抑制活性的實(shí)體。拮抗劑可以是直接的(在這種情況下其直接影響受體)或間接的(在這種情況下其通過與受體結(jié)合以外的方式影響受體，例如改變受體的表達(dá)或翻譯；改變直接由受體活化的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，改變受體激動(dòng)劑的表達(dá)、翻譯或活性)。在特定實(shí)施方式中，雄激素受體拮抗劑可以選自由小分子拮抗劑(例如RU58642、LG120907、LG105、RD162、MDV3100、BMS-641988、CH5137291、阿徹瑞克酸(ataricacid)、N-丁基苯磺酰胺)、甾體化合物(例如醋酸環(huán)丙孕酮)、非甾體化合物(例如羥基氟他胺、比卡魯胺、尼魯米特)、肽拮抗劑及其組合組成的組。或者或此外，在本發(fā)明的實(shí)施方式中使用的抗雄激素療法包括但不限于TAK700、ARN-509、卡博替尼(cabozantimib)、伊匹單抗(ipilimumab)、庫(kù)司替森、BPX-101、阿爾法萊丁(alpharadin)、德尼單抗(denosumab)、Protsvac-VF及其組合。抗體多肽：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“抗體多肽”或“抗體”，或者“其抗原結(jié)合片段”，其可以互換使用，指能夠與表位結(jié)合的多肽。在一些實(shí)施方式中，抗體多肽是全長(zhǎng)抗體，并且在一些實(shí)施方式中，其長(zhǎng)度小于全長(zhǎng)但包括至少一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)(包括至少一個(gè)，以及優(yōu)選地至少兩個(gè)具有抗體“可變區(qū)”結(jié)構(gòu)的序列)。在一些實(shí)施方式中，術(shù)語“抗體多肽”包括具有與免疫球蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域同源或基本上同源的結(jié)合結(jié)構(gòu)域的任意蛋白。在特定實(shí)施方式中，“抗體多肽”包括具有結(jié)合結(jié)構(gòu)域的多肽，所述結(jié)合結(jié)構(gòu)域顯示出與免疫球蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域至少99％的一致性。在一些實(shí)施方式中，“抗體多肽”是具有結(jié)合結(jié)構(gòu)域的任意蛋白，所述結(jié)合結(jié)構(gòu)域顯示出與免疫球蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(例如對(duì)照免疫球蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域)具有至少70％、80％、85％、90％或95％的一致性。所包括的“抗體多肽”可以具有與天然來源的抗體相同的氨基酸序列。根據(jù)本發(fā)明的抗體多肽可以采用任意可用的方法制備，包括例如從天然來源或抗體文庫(kù)中分離、在其中或使用宿主細(xì)胞的重組生產(chǎn)、化學(xué)合成等或其組合?？贵w多肽可以是單克隆的或多克隆的?？贵w多肽可以是任意免疫球蛋白類型的成員，包括任意的人源類型：IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。在某些實(shí)施方式中，抗體可以是IgG免疫球蛋白類型的成員。如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“抗體多肽”或“抗體的特征部分”可以互換使用，指具有與目的表位結(jié)合的能力的任意抗體衍生物。在某些實(shí)施方式中，“抗體多肽”是保留了全長(zhǎng)抗體的特異性結(jié)合能力的至少一個(gè)顯著部分的抗體片段?？贵w片段的例子包括但不限于Fab、Fab’、F(ab’)2、scFv、Fv、dsFv、雙功能抗體和Fd片段?；蛘呋虼送?，抗體片段可以包括多條連接在一起的鏈，例如通過二硫鍵。在一些實(shí)施方式中，抗體多肽可以是人源抗體。在一些實(shí)施方式中，抗體多肽可以是人源化的。人源化的抗體多肽包括可以是嵌合的免疫球蛋白、免疫球蛋白鏈或抗體多肽(如Fv、Fab、Fab'、F(ab')2或抗體的其他抗原結(jié)合序列)，其含有最低限度的來源于非人源免疫球蛋白的序列。在通常情況下，人源化的抗體是接受體的互補(bǔ)性決定區(qū)(CDR)殘基被非人物種(供體抗體)如具有所需特異性、親和性和容量的小鼠、大鼠或家兔CDR的殘基取代的人源免疫球蛋白(接受體抗體)。在特定實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體多肽與fPSA或PSA的特定表位(例如在催化裂隙中)結(jié)合；在一些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明使用的抗體多肽對(duì)fPSA或PSA的特定表位(例如位于或與催化裂隙鄰近)具有特異性。特定的示例性抗體參見StenmanUH等，“SummaryreportoftheTD-3workshop:characterizationof83antibodiesagainstprostate-specificantigen”,TumourBiol.,1999,20:1-12，其通過引用并入本申請(qǐng)。在一些實(shí)施方式中，抗體多肽是5A10或4G10單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段。大約：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“大約”或“約”，應(yīng)用于一個(gè)或多個(gè)目的值，指與規(guī)定的參考值近似的值。在某些實(shí)施方式中，術(shù)語“大約”或“約”指任意方向上(高于或低于)落入規(guī)定的參考值25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或更低范圍內(nèi)的值的范圍，除非另有說明或上下文另有明示(除非這樣的數(shù)值將超出可能值的100％)。生物活性：如本申請(qǐng)所使用的，短語“生物活性”指在生物系統(tǒng)中(例如細(xì)胞培養(yǎng)物，生物體等)具有活性的任意物質(zhì)的特征。例如，當(dāng)將某物質(zhì)給予生物體時(shí)對(duì)該生物體具有的生物學(xué)作用被認(rèn)為是生物活性。在特定實(shí)施方式中，當(dāng)?shù)鞍谆蚨嚯氖蔷哂猩锘钚詴r(shí)，通常將蛋白或多肽中具有至少一種生物活性的蛋白或多肽的一部分稱為“生物活性”部分。特征部分：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語物質(zhì)的“特征部分”在廣義上是指在某種程度上與整個(gè)物質(zhì)的序列或結(jié)構(gòu)保持一致性。在某些實(shí)施方式中，特征部分具有完好物質(zhì)的至少一個(gè)功能性特征。例如，蛋白或多肽的“特征部分”指含有氨基酸的連續(xù)延伸或者氨基酸的連續(xù)延伸的集合，其在一起組成了蛋白或多肽的特征。在一些實(shí)施方式中，每個(gè)這種連續(xù)的延伸通常含有至少2、5、10、15、20、50或更多個(gè)氨基酸。在通常情況下，除了上文所述的序列和/或結(jié)構(gòu)的一致性以外，物質(zhì)的特征部分(例如蛋白、抗體等的)指具有相關(guān)完好物質(zhì)至少一個(gè)功能性特征；表位結(jié)合特異性就是一個(gè)例子。在一些實(shí)施方式中，特征部分可以是生物活性。聯(lián)合療法：術(shù)語“聯(lián)合療法”，如本申請(qǐng)所使用的，指在重疊的方案中給予用于治療疾病的兩種或多種不同藥劑以使得主體同時(shí)暴露于至少兩種藥劑的那些情況。在一些實(shí)施方式中，不同的藥劑同時(shí)給予。在一些實(shí)施方式中，一種藥劑與至少一種其他藥劑重疊給予。在一些實(shí)施方式中，不同的藥劑按順序給予以使得所述藥劑在主體體內(nèi)同時(shí)發(fā)揮生物活性。檢測(cè)實(shí)體：術(shù)語“檢測(cè)實(shí)體”如本申請(qǐng)所使用的指有利于檢測(cè)與之連接的試劑(例如抗體)的任意元素、分子、官能團(tuán)、化合物、其片段或部分。檢測(cè)實(shí)體的例子包括但不限于：不同的配體、放射性核素(例如3H、14C、18F、19F、32P、35S、135I、125I、123I、64Cu、187Re、111In、90Y、99mTc、177Lu、89Zr等)、熒光染料(具體的示例性熒光染料，見下文)、化學(xué)發(fā)光劑(例如吖啶酯、穩(wěn)定的二氧雜環(huán)丁烷等)、生物發(fā)光劑、光譜可分辨的無機(jī)熒光半導(dǎo)體納米晶體(即量子點(diǎn))、金屬納米粒子(例如金、銀、銅、鉑等)、納米簇、順磁性金屬離子、酶(酶的特定例子，見下文)、比色分析標(biāo)記(例如染料、膠體金等)、生物素、地高辛、半抗原和針對(duì)其抗血清或單克隆抗體是可用的蛋白。診斷信息：如本申請(qǐng)所使用的，診斷信息或用于診斷的信息是指在確定是否患者患有疾病或狀況和/或在將疾病或狀況分類至表型類別或?qū)︻A(yù)測(cè)疾病或狀況或者對(duì)所述疾病或狀況的可能療效(一般性治療或任意特殊的治療)具有意義的任意類別有用的任意信息。類似地，診斷指提供任意類型的診斷信息，包括但不限于，是否主體可能患有疾病或狀況(如前列腺癌)、狀態(tài)、主體表現(xiàn)出的疾病或狀況的階段或特征、與腫瘤的性質(zhì)或分類有關(guān)的信息、與預(yù)后有關(guān)的信息和/或用于選擇適宜治療的信息。治療選擇可以包括對(duì)特定治療(例如化療)劑或其他治療形式的選擇，如手術(shù)、放療等，對(duì)是否停止或提供治療的選擇、與給藥方案相關(guān)的選擇(例如一種或多種劑量的特定治療劑或治療劑組合的頻率或水平)等。劑型：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“劑型”和“單位劑型”指給予主體的治療組合物的物理上分離的單位。各單位均含有預(yù)計(jì)量的活性材料(例如治療劑如抗-fPSA抗體)。在一些實(shí)施方式中，所述預(yù)計(jì)量在給藥方案中作為劑量給予時(shí)與理想的療效相關(guān)。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將理解給予特定主體的治療組合物或藥劑的總量由一名或多名主治醫(yī)師確定，并且可以涉及多個(gè)劑型的給藥。給藥方案：“給藥方案”(或“治療方案”)，作為本申請(qǐng)中使用的術(shù)語，是指單獨(dú)給予主體的一組單位劑量(通常多于一個(gè))，其通常間隔一段時(shí)間。在一些實(shí)施方式中，給定的治療劑具有推薦的給藥方案，其可以涉及一個(gè)或多個(gè)劑量。在一些實(shí)施方式中，給藥方案包括多個(gè)劑量，其均由相同長(zhǎng)度的時(shí)間間隔彼此分隔；在一些實(shí)施方式中，給藥方案包括多個(gè)劑量并且至少由兩個(gè)不同的時(shí)間間隔分隔各劑量。在一些實(shí)施方式中，當(dāng)給予患者群體時(shí)，給藥方案是或者已經(jīng)與理想的治療效果具有相關(guān)性。表達(dá)：如本申請(qǐng)所使用的，核酸序列的“表達(dá)”指一個(gè)或多個(gè)下述事件：(1)來自DNA序列的RNA模板的產(chǎn)生(例如通過轉(zhuǎn)錄)；(2)RNA轉(zhuǎn)錄本的加工(例如通過剪接、編輯、5’帽形成和/或3’末端形成)；(3)將RNA翻譯成多肽或蛋白；和/或(4)多肽或蛋白的翻譯后修飾。游離PSA：術(shù)語“游離PSA”或“fPSA”，如本申請(qǐng)所使用的，指任意形式的PSA或PSA前體，其不與蛋白酶抑制劑結(jié)合，如α1-抗凝乳蛋白酶，并且其緊鄰或與前列腺癌細(xì)胞或其轉(zhuǎn)移性疾病結(jié)合(即不是血清標(biāo)記物)。功能性：如本申請(qǐng)所使用的，“功能性”生物分子是指以表現(xiàn)出其性質(zhì)和/或活性的形式的生物分子，該生物分子以該性質(zhì)和/或活性為特征。生物分子可以具有兩種功能(即雙功能的)或多種功能(即多功能的)?；颍喝绫旧暾?qǐng)所使用的，術(shù)語“基因”具有如本領(lǐng)域所公知的含義。在一些實(shí)施方式中，術(shù)語“基因”可以包括基因調(diào)控序列(例如啟動(dòng)子、增強(qiáng)子等)和/或內(nèi)含子序列。在一些實(shí)施方式中，所述術(shù)語指不編碼蛋白但是編碼功能性RNA分子如tRNA、RNAi-誘導(dǎo)劑等的核酸?；蛘呋虼送猓诙鄠€(gè)實(shí)施方式中，術(shù)語“基因”，如本申請(qǐng)所使用的，指編碼蛋白的核酸部分。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員根據(jù)上下文將清楚是否所述術(shù)語包括其他序列(例如非編碼序列、調(diào)控序列等)?；虍a(chǎn)物或表達(dá)產(chǎn)物：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“基因產(chǎn)物”或“表達(dá)產(chǎn)物”通常指由基因轉(zhuǎn)錄的RNA(前-和/或后-加工)或者由基因轉(zhuǎn)錄的RNA編碼的多肽(前-和/或后-修飾)。同源性：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“同源性”指聚合分子之間的總體相關(guān)性，例如在多肽分子之間。在一些實(shí)施方式中，如果其序列具有至少80％、85％、90％、95％或99％的一致性，則認(rèn)為聚合分子如抗體彼此之間是“同源的”。在一些實(shí)施方式中，如果其序列具有至少80％、85％、90％、95％或99％的相似性，則認(rèn)為聚合分子彼此之間是“同源的”。標(biāo)記物：標(biāo)記物，如本申請(qǐng)所使用的，指其存在或水平表征特定腫瘤或其轉(zhuǎn)移性疾病的試劑。例如，在一些實(shí)施方式中，所述術(shù)語指表征特定腫瘤、腫瘤亞類、腫瘤階段等的基因表達(dá)產(chǎn)物?；蛘呋虼送?，在一些實(shí)施方式中，特定標(biāo)記物的存在或水平與特定信號(hào)通路的活性(或活性水平)相關(guān)，例如其可以表征特定類型的腫瘤。標(biāo)記物存在或不存在的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性可以隨著特定標(biāo)記物的不同而改變。在一些實(shí)施方式中，標(biāo)記物的檢測(cè)具有高度的特異性，其反映了腫瘤是某種特定的亞類的較高概率。這種特異性可能是以靈敏度為代價(jià)的(即，即使所述腫瘤是預(yù)計(jì)表達(dá)該標(biāo)記物的腫瘤，但也可能出現(xiàn)陰性結(jié)果)。相反的是，具有較高靈敏度的標(biāo)記物其特異性可能低于具有較低靈敏度的那些。根據(jù)本發(fā)明有用的標(biāo)記物不需要以100％的準(zhǔn)確度區(qū)分特定亞類的腫瘤。患者：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“患者”或“主體”指給予或可以給予所提供的組合物的任意生物體，例如用于實(shí)驗(yàn)、診斷、預(yù)防、美容和/或治療目的。典型的患者包括動(dòng)物(例如哺乳動(dòng)物如小鼠、大鼠、家兔、非人靈長(zhǎng)類和/或人)。在一些實(shí)施方式中，患者是人。在一些實(shí)施方式中，患者罹患或?qū)σ环N或多種病癥或狀況易感。在一些實(shí)施方式中，患者顯示出病癥或狀況的一種或多種癥狀。在一些實(shí)施方式中，患者已確診患有一種或多種病癥或狀況。在一些實(shí)施方式中，所述病癥或狀況是或包括癌癥，或存在一種或多種腫瘤。在一些實(shí)施方式中，這種癌癥或腫瘤是或包括前列腺癌，或者前列腺腫瘤。在一些實(shí)施方式中，所述病癥或狀況是轉(zhuǎn)移性前列腺癌。肽：術(shù)語“肽”指兩個(gè)或多個(gè)氨基酸通過肽鍵或經(jīng)修飾的肽鍵彼此連接。在特定實(shí)施方式中，“肽”指具有長(zhǎng)度小于約100個(gè)氨基酸、小于約50個(gè)氨基酸、小于20個(gè)氨基酸或者小于10個(gè)氨基酸的多肽。藥學(xué)上可接受的：術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”如本申請(qǐng)所使用的指物質(zhì)在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)適宜用于與人類和動(dòng)物的組織接觸，不具有過度的毒性、刺激性、變態(tài)反應(yīng)或者其他問題或并發(fā)癥，同時(shí)具有合理的收益/風(fēng)險(xiǎn)比。多肽：如本申請(qǐng)所使用的，“多肽”一般來說是至少兩個(gè)氨基酸通過肽鍵彼此連接的串。在一些實(shí)施方式中，多肽可以包括至少3-5個(gè)氨基酸，其均通過至少一個(gè)肽鍵的方式與其他氨基酸連接。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將理解多肽有時(shí)包括“非天然”的氨基酸或能夠任選地整合至多肽鏈的其他實(shí)體。預(yù)后和預(yù)測(cè)性信息：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語預(yù)后和預(yù)測(cè)性信息可以互換使用指在不存在或存在治療的條件下可以用于指示疾病或狀況過程的任意方面的任意信息。這種信息可以包括但不限于患者的平均預(yù)期壽命，患者在給定的時(shí)間量?jī)?nèi)存活(例如6個(gè)月、1年、5年等)的可能性，患者將被治愈疾病的可能性，患者的疾病將對(duì)特定療法產(chǎn)生應(yīng)答的可能性(其中可以以任意不同的方式對(duì)應(yīng)答進(jìn)行定義)。預(yù)后和預(yù)測(cè)性信息包括在診斷信息的大類中。蛋白：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“蛋白”指多肽(即，至少3-5個(gè)氨基酸通過肽鍵彼此連接的串)。蛋白可以包括氨基酸以外的部分(例如可以是糖蛋白、蛋白聚糖等)和/或可以被另外加工或修飾。在一些實(shí)施方式中，“蛋白”可以是在細(xì)胞中生產(chǎn)和/或活化的完整多肽(具有或不具有信號(hào)序列)；在一些實(shí)施方式中，“蛋白”是或包括特征部分如在細(xì)胞中生產(chǎn)和/或活化的多肽。在一些實(shí)施方式中，蛋白包括一個(gè)以上的多肽鏈。例如，多肽鏈可以由一個(gè)或多個(gè)二硫鍵連接或者通過其他方式連接。在一些實(shí)施方式中，如本申請(qǐng)所述的蛋白或多肽可以包含L-氨基酸、D-氨基酸、或其二者，和/或可以包含本領(lǐng)域公知的多種氨基酸修飾或類似物中的任意一種。有用的修飾包括例如末端乙?；Ⅴ０坊?、甲基化等。在一些實(shí)施方式中，蛋白或多肽可以包括天然的氨基酸、非天然的氨基酸、合成氨基酸和/或其組合。在一些實(shí)施方式中，蛋白是或包括抗體、抗體多肽、抗體片段、其具有生物活性的部分和/或其特征部分。應(yīng)答：如本申請(qǐng)所使用的，對(duì)治療的應(yīng)答可以指在主體的狀況中發(fā)生的任何有益的改變，這種改變是治療的結(jié)果或與治療相關(guān)。這種改變可以包括使?fàn)顩r穩(wěn)定(例如在沒有治療的情況下阻止可能會(huì)發(fā)生的惡化)、改善狀況的癥狀和/或改善狀況的治療前景等。其可以指主體的應(yīng)答或腫瘤的應(yīng)答?？梢愿鶕?jù)各種各樣的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量腫瘤或主體的應(yīng)答，包括臨床標(biāo)準(zhǔn)和客觀標(biāo)準(zhǔn)。用于評(píng)估應(yīng)答的技術(shù)包括但不限于臨床檢查、正電子發(fā)射斷層掃描、胸部X-射線掃描、MRI、超聲、內(nèi)窺鏡、腹腔鏡、在來自主體的樣品中腫瘤標(biāo)記物的存在情況或水平、細(xì)胞學(xué)和/或組織學(xué)。這些技術(shù)中的許多是用來嘗試確定腫瘤的大小，或者以其他方式確定總腫瘤負(fù)荷。用于評(píng)估對(duì)治療產(chǎn)生應(yīng)答的方法和指導(dǎo)原則在Therasse等，“Newguidelinestoevaluatetheresponsetotreatmentinsolidtumors”,EuropeanOrganizationforResearchandTreatmentofCancer,NationalCancerInstituteoftheUnitedStates,NationalCancerInstituteofCanada,J.Natl.CancerInst.,2000,92(3):205-216中進(jìn)行了討論。可以以任意適宜的方式選擇準(zhǔn)確的應(yīng)答標(biāo)準(zhǔn)，只要當(dāng)對(duì)腫瘤和/或患者的組進(jìn)行比較時(shí)，待比較的組是基于相同或相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)來評(píng)估以確定應(yīng)答率的。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將能夠選擇適宜的標(biāo)準(zhǔn)。樣品：如本申請(qǐng)所使用的，來自主體的樣品可以包括但不限于以下任一一項(xiàng)或全部：一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞，組織、血液、血清、腹水、尿液、唾液以及其他體液、分泌物或排泄物的一部分。術(shù)語“樣品”還包括來源于通過處理這種樣品得到的任意材料。所得到的樣品可以包括由樣品提取或通過技術(shù)如將mRNA擴(kuò)增或逆轉(zhuǎn)錄等對(duì)樣品進(jìn)行處理得到的核苷酸分子或多肽。特異性結(jié)合：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“特異性結(jié)合”或“針對(duì)……具體特異性”或“對(duì)……具有特異性”指靶實(shí)體(例如靶蛋白或多肽)與結(jié)合劑(例如抗體如所提供的抗體)之間的相互作用(通常是非共價(jià)的)。如本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)理解的，如果在存在其他相互作用的情況下對(duì)其具有偏好，則認(rèn)為相互作用是“特異性的”。在多個(gè)實(shí)施方式中，相互作用通常依賴于靶分子存在特定結(jié)構(gòu)特征如被結(jié)合分子識(shí)別的抗原決定簇或表位。例如，如果抗體對(duì)表位A具有特異性，在含有游離的標(biāo)記的A及其抗體的反應(yīng)中存在含有表位A的多肽或存在游離的未標(biāo)記A，則將減少與其抗體結(jié)合的標(biāo)記的A的量。應(yīng)理解特異性不需要是絕對(duì)的。例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員公知，除了存在于靶分子上的那些表位，很多抗體還與其他表位發(fā)生交叉反應(yīng)。這種交叉反應(yīng)或許是可以接受的，這要視所述待用抗體的應(yīng)用而定。在特定實(shí)施方式中，對(duì)fPSA具有特異性的抗體與同蛋白酶抑制劑(例如ACT)結(jié)合的PSA具有低于10％的交叉反應(yīng)性。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將能夠選擇具有足夠高特異性的抗體以在任意給定的應(yīng)用中適宜的實(shí)施該抗體(例如用于檢測(cè)靶分子、用于治療目的等)?？梢栽诟郊右蛩氐谋尘跋聦?duì)特異性進(jìn)行評(píng)估如針對(duì)所述靶分子結(jié)合分子的親和性對(duì)比針對(duì)其他靶點(diǎn)(例如競(jìng)爭(zhēng)物)結(jié)合分子的親和性。如果結(jié)合分子顯示出針對(duì)所需檢測(cè)的靶分子具有較高的親和性和針對(duì)非靶分子具有較低的親和性，則認(rèn)為所述抗體對(duì)于免疫診斷將可能是可接受的試劑。一旦在一個(gè)或多個(gè)背景下建立了結(jié)合分子的特異性，它可以用于其他的背景中(優(yōu)選相似的背景)而無需重新評(píng)估其特異性。癌癥分期：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“癌癥分期”指對(duì)癌癥進(jìn)展水平的定性或定量評(píng)估。用于確定癌癥分期的標(biāo)準(zhǔn)包括但不限于腫瘤的大小和轉(zhuǎn)移程度(例如局部或遠(yuǎn)距離)?；旧希喝绫旧暾?qǐng)所使用的，術(shù)語“基本上”指目的特征或性質(zhì)顯示出全部或接近全部的范圍或程度的定性條件。生物領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將理解生物或化學(xué)現(xiàn)象很少，如果有的話，進(jìn)行完全和/或進(jìn)行完整或者達(dá)到或避免絕對(duì)的結(jié)果。因此在本申請(qǐng)中使用的術(shù)語“基本上”表示多種生物和化學(xué)現(xiàn)象中固有的潛在的完整性缺乏。罹患：“罹患”疾病、病癥或狀況(前列腺癌)的個(gè)體指已確診和/或顯示出疾病、病癥或狀況的一種或多種癥狀。前列腺腫瘤通常沒有癥狀。在一些實(shí)施方式中，個(gè)體罹患前列腺癌前列腺腫瘤，但是未顯示出前列腺癌的任何癥狀和/或未被確診為前列腺癌。在一些實(shí)施方式中，罹患前列腺癌的個(gè)體指與未患前列腺癌的個(gè)體相比與腫瘤結(jié)合的或瘤內(nèi)fPSA或PSA增加的個(gè)體。癥狀減輕：根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)一種或多種特定疾病、病癥或狀況的癥狀在程度(例如強(qiáng)度、嚴(yán)重程度等)和/或頻率上降低時(shí)，表示“癥狀減輕”。出于澄清的目的，特定的發(fā)病的推遲被認(rèn)為是該癥狀頻率降低的一種形式。很多具有較小腫瘤的前列腺癌患者沒有癥狀。本發(fā)明并不僅限定于癥狀消除的情況。本發(fā)明具體地涉及使得一種或多種癥狀減輕的治療(和主體的狀況因此被“改善”)，盡管沒有將其完全消除。治療劑：如本申請(qǐng)所使用的，短語“治療劑”指當(dāng)給予主體時(shí)，具有治療作用和/或引起所需的生物學(xué)和/或藥理學(xué)作用的任意藥劑。治療有效量：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“治療有效量”指賦予所治療主體治療作用的治療性蛋白(例如fPSA抗體)的量，其處于適用于任何藥物治療的合理的收益/風(fēng)險(xiǎn)比。所述治療作用可以是客觀的(即，可以通過某些測(cè)試或標(biāo)記物檢測(cè))或主觀的(即，由主體給出描述或?qū)ψ饔玫母杏X)。特別地，“治療有效量”指治療性蛋白或組合物有效地治療、改善或阻止預(yù)期的疾病或狀況，或顯示出可檢測(cè)的治療或預(yù)防作用的量，如改善與疾病相關(guān)的癥狀、阻止或推遲發(fā)病和/或降低疾病癥狀的嚴(yán)重程度或頻率。通常采用可以包含多個(gè)劑量單位的給藥方案給予治療有效量。對(duì)于任意的特定治療性蛋白而言，治療有效量(和/或在有效的給藥方案中適宜的單位劑量)是可以改變的，例如其取決于給藥途徑以及與其他藥劑的組合。而且，對(duì)于任意特定患者的具體治療有效量(和/或單位劑量)可能取決于多種因素，包括所治療的病癥和病癥的嚴(yán)重程度；所使用的具體藥劑的活性；所使用的具體組合；患者的年齡、體重、大致健康狀況、性別和飲食；所使用的具體融合蛋白的給藥時(shí)間、給藥途徑和/或排泄或代謝速率；治療持續(xù)時(shí)間；以及藥物領(lǐng)域公知的其他因素。治療：如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“治療”(也稱為“treat”或“treating”)指使特定疾病、病癥和/或狀況(例如前列腺癌)的一種或多種癥狀、特征和/或病因部分或完全減輕、改善、再生、抑制、推遲發(fā)病、減輕嚴(yán)重程度和/或降低發(fā)生率的任意物質(zhì)的給予(例如抗-fPSA抗體或AR拮抗劑)。這種治療可以針對(duì)未顯示出相關(guān)疾病、病癥和/或狀況的主體和/或針對(duì)僅顯示出疾病、病癥和/或狀況的早期征兆的主體?；蛘呋虼送?，這種治療可以針對(duì)顯示出相關(guān)疾病、病癥和/或狀況一種或多種已確定征兆的主體。在一些實(shí)施方式中，治療可以針對(duì)已確診罹患相關(guān)疾病、病癥和/或狀況的主體。在一些實(shí)施方式中，治療可以針對(duì)已知具有一種或多種易感因素的主體，所述因素在統(tǒng)計(jì)學(xué)上與相關(guān)疾病、病癥和/或狀況發(fā)展風(fēng)險(xiǎn)的增加具有相關(guān)性。某些實(shí)施方式的詳述臨床標(biāo)記物被頻繁地用于診斷前列腺癌以及評(píng)估療效。前列腺癌最普遍的臨床標(biāo)記物是前列腺特異性抗原(“PSA”)。PSA是絲氨酸蛋白酶和蛋白酶的組織激肽釋放酶家族的成員。其主要由前列腺導(dǎo)管和腺泡上皮產(chǎn)生并分泌至腔內(nèi)，其功能為裂解精液凝結(jié)物中的精液凝結(jié)蛋白I和II。然而，癌癥和多種更加良性的狀況都改變了前列腺的結(jié)構(gòu)，使得PSA滲漏進(jìn)入血管周圍的空隙并且進(jìn)入血液中。PSA，盡管在前列腺組織中大量表達(dá)，但是其在前列腺健康的男性血清中幾乎檢測(cè)不到。出現(xiàn)PSA水平升高通常提示前列腺損傷或疾病。血清PSA以兩種形式存在：游離的、催化活性形式和與其他蛋白復(fù)合或結(jié)合的形式。標(biāo)準(zhǔn)PSA檢測(cè)測(cè)定這兩種形式的相對(duì)或定量的量，其有助于區(qū)分是否導(dǎo)致PSA升高的原因是前列腺癌或某些其他狀況。血清PSA檢測(cè)確定血液中游離或未復(fù)合PSA(“fPSA”)與總PSA(游離加結(jié)合PSA)之比。fPSA與總PSA之比較低表明個(gè)體事實(shí)上患前列腺癌的可能性升高。總血清PSA水平高于10ng/ml也表明根據(jù)臨床實(shí)踐指導(dǎo)原則患前列腺癌的幾率超過50％。血清PSA水平在4-10ng/ml之間是需要進(jìn)行前列腺組織活檢以確證實(shí)際上是否存在癌癥的臨床指征。盡管如此，即使是更精確水平的血清檢測(cè)也顯示出了顯著的局限性，特別是在評(píng)估治療的療效方面。越是從治療焦點(diǎn)(即腫瘤)上除去生物標(biāo)記物或抗原，越是難以評(píng)估生物標(biāo)記物或抗原水平的波動(dòng)是否是真實(shí)的治療結(jié)果或者是表示由干預(yù)現(xiàn)象導(dǎo)致的假象。簡(jiǎn)言之，原因與結(jié)果之間的相關(guān)性更難以確定。而且，由于所有的血清標(biāo)記物均與疾病來源是分離的，因此定量水平與疾病的嚴(yán)重程度或進(jìn)展之間的相關(guān)性必然是不完善的。而且，涉及分期、腫瘤特征、痊愈的可能性和治療評(píng)估的信息通常需要更高級(jí)的成像或侵入性組織活檢。尚無基于血清的標(biāo)記物能夠真實(shí)地提供具體的、實(shí)時(shí)的信息，包括潛在的形態(tài)學(xué)，其能夠來源于瘤內(nèi)診斷。PSA在前列腺的管腔上皮細(xì)胞中具有高水平的表達(dá)，但在其他組織中不存在或表達(dá)水平極低。雄激素通過若干雄激素應(yīng)答基因調(diào)控元件導(dǎo)致PSA的表達(dá)增加，并且前列腺癌的發(fā)展特別地由雄激素特別是睪酮驅(qū)動(dòng)。因此，對(duì)抗雄激素作用的療法(即抗-雄激素療法)，包括除去產(chǎn)生雄激素的組織，代表了治療前列腺癌具有吸引力的靶點(diǎn)。傳統(tǒng)的抗-雄激素療法直接作用于雄激素受體以阻止其被雄激素活化而發(fā)揮作用。PSA遠(yuǎn)非前列腺癌理想的血清標(biāo)記物。事實(shí)上多種更加良性的狀況均能夠?qū)е缕浯嬖谟谘逯校@使得出現(xiàn)假陽性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)顯著升高。前列腺炎、感染和良性前列腺增生(“BPH”)均能夠使血清PSA的水平增加。換言之，實(shí)際上尚無特異性針對(duì)前列腺癌的血清PSA形式。而且，血清PSA水平不完全與疾病和治療的療效相關(guān)。例如，事實(shí)上在經(jīng)過一個(gè)治療過程后PSA水平下降一半無關(guān)于且并不代表體內(nèi)癌細(xì)胞數(shù)量下降一半。檢測(cè)血清中PSA的能力不僅僅要求PSA的表達(dá)，還要求PSA分泌和滲漏至循環(huán)中的，而這是兩個(gè)知之甚少的過程。其他的困難來自僅有極少百分比的腫瘤產(chǎn)生的PSA分泌至血管周圍空隙以及進(jìn)入血清循環(huán)的限速步驟尚不明確。標(biāo)準(zhǔn)血清總PSA檢測(cè)還對(duì)檢測(cè)大部分早期腫瘤缺乏敏感性和特異性并且完全不足以檢測(cè)來源于前列腺癌的轉(zhuǎn)移性腫瘤。例如，骨是前列腺癌轉(zhuǎn)移擴(kuò)散最常見的位點(diǎn)，但是對(duì)其進(jìn)行鑒定特別具有挑戰(zhàn)性，因?yàn)榇蟛糠謾z測(cè)技術(shù)(例如核醫(yī)學(xué)技術(shù)如99mTc-MDP、18F-NaF)均不能對(duì)轉(zhuǎn)移性疾病進(jìn)行直接成像，但卻會(huì)靶向附近的正常骨修復(fù)。因此，現(xiàn)有的技術(shù)不能區(qū)分惡性和非惡性疾病。而且，由于對(duì)腫瘤導(dǎo)致的骨修復(fù)的分辨可能落后于臨床應(yīng)答數(shù)月或數(shù)年，因此無法對(duì)抗-雄激素療法的應(yīng)答進(jìn)行有效的評(píng)估。本發(fā)明的實(shí)施方式涉及基于抗體對(duì)通過與腫瘤結(jié)合的或瘤內(nèi)的fPSA對(duì)雄激素受體(“AR”)信號(hào)進(jìn)行監(jiān)測(cè)和定量以及基于抗體靶向瘤內(nèi)fPSA的治療應(yīng)用。一個(gè)驚人的發(fā)現(xiàn)部分地促進(jìn)了本申請(qǐng)公開的發(fā)明，即特異性針對(duì)催化裂隙PSA的抗體和抗體多肽選擇性地與fPSA結(jié)合，其包括和優(yōu)選地為本申請(qǐng)首次披露的與腫瘤結(jié)合的和瘤內(nèi)的fPSA。催化裂隙特異性抗體與fPSA在腫瘤原位結(jié)合的能力能夠用于多種診斷和治療應(yīng)用。例如，定量地與同腫瘤結(jié)合的fPSA結(jié)合的標(biāo)記抗體能夠直接在原位監(jiān)測(cè)對(duì)抗-雄激素療法的應(yīng)答而非間接地通過血清PSA水平監(jiān)測(cè)。成功治療的結(jié)果是AR信號(hào)減少(例如通過阻斷受體活性的藥物化合物)，其可以反映在可檢測(cè)的標(biāo)記抗體信號(hào)的減少。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，本發(fā)明的實(shí)施方式適用于阻斷雄激素受體或?qū)е碌蛲?例如化療)的任意療法，以及直接或間接降低AR水平(即，siRNA)的任意治療。此外，本申請(qǐng)公開的方法具有診斷和治療擴(kuò)散性前列腺疾病的能力；即來源于前列腺的癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移至身體其他器官或組織的轉(zhuǎn)移性疾病。如上文所討論的，已證實(shí)檢測(cè)、監(jiān)測(cè)和治療轉(zhuǎn)移性前列腺癌特別困難。例如，手術(shù)切除轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)，常常無法除去可能存在的全部癌細(xì)胞，這極大增加了復(fù)發(fā)的可能性。而且，目前監(jiān)測(cè)骨轉(zhuǎn)移的方法是完全不適宜的，因?yàn)槠湓谡９切迯?fù)附近成像而非直接在腫瘤部位成像，這意味著大部分的掃描無法區(qū)分惡性和非惡性疾病(即導(dǎo)致骨重塑的其他疾病)。血清中的PSA主要與血清蛋白酶抑制劑α1-抗凝乳蛋白酶(ACT)共價(jià)結(jié)合并且將其稱為復(fù)合的PSA(“cPSA”)。相對(duì)較少的部分以非復(fù)合的fPSA形式存在。然而，已發(fā)現(xiàn)更大比例的fPSA結(jié)合在靠近前列腺腫瘤的地方或者甚至結(jié)合在腫瘤內(nèi)部。fPSA包含不同的分子形式，分別為活化的和未活化的PSA。fPSA的亞形式，如本申請(qǐng)所定義的，包括BPSA和原-PSA(“pPSA”)。BPSA與天然的成熟PSA相同，但是在Lys182和Lys145具有兩個(gè)內(nèi)部肽鍵裂隙。其與在內(nèi)部部分或前列腺“過渡區(qū)”的結(jié)節(jié)增生結(jié)合，而癌癥通常在外部部分或“外周區(qū)”發(fā)展。BPSA在前列腺的過渡區(qū)升高并且與病理性BPH結(jié)合。pPSA與前列腺腫瘤本身結(jié)合。這些形式一起代表具有高度疾病特異性的fPSA的個(gè)體形式。當(dāng)與分子成像結(jié)合使用時(shí)，fPSA在對(duì)前列腺癌和擴(kuò)散性疾病的評(píng)估和治療方面的能力尤為顯著。在腫瘤學(xué)中的分子成像是對(duì)作為人類腫瘤學(xué)基礎(chǔ)的關(guān)鍵分子和基于分子的事件的非侵入性成像。其能夠提供此前無法獲得的關(guān)于檢測(cè)，鑒別診斷、指示適合的治療過程的腫瘤生物學(xué)、分期、復(fù)發(fā)和對(duì)治療的應(yīng)答的信息。特別是核醫(yī)學(xué)技術(shù)其本身就是分子成像。通過放射性檢測(cè)器，生物分子的放射性示蹤劑可以用于檢測(cè)腫瘤、癌細(xì)胞和分化的正常組織的實(shí)時(shí)生物化學(xué)，由此提供關(guān)于人腫瘤和組織的定性或定量的生物化學(xué)或功能性信息。單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展和改進(jìn)為分子成像的進(jìn)步提供了便利。除了其已確立的用于癌癥靶向藥物的潛在用途以外，單克隆抗體可以用作診斷成像用的疾病特異性造影劑。例如，通過將高靈敏度和分辨率的正電子發(fā)射斷層成像(“PET”)相機(jī)與單克隆抗體組合得到免疫-PET，即PET和單克隆抗體的組合，其是一個(gè)有吸引力的、新的選擇以改善診斷性腫瘤表征。然而，將理解本申請(qǐng)中披露的概念并非基于任何單一的成像技術(shù)。事實(shí)上，這是一項(xiàng)變化多端的技術(shù)，其適于使用幾乎任何的成像參數(shù)以推斷人腫瘤和組織的定性或定量的生物化學(xué)或功能性信息。本公開涵蓋的分子成像方法包括γ相機(jī)成像、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層掃描、正電子發(fā)射斷層掃描、磁共振波譜、磁共振成像、光學(xué)成像(宏觀光譜成像)和超聲波。免疫-PET相當(dāng)于全面的體內(nèi)免疫組化染色，出于此目的必需使用正電子發(fā)射體對(duì)單克隆抗體進(jìn)行標(biāo)記，以使其能夠使用PET相機(jī)可視化。然而，除了現(xiàn)有的PET示蹤劑以外，仍需要開發(fā)新一代的基于單克隆抗體的成像探針或新型的放射性示蹤劑，目前非腫瘤特異性代謝示蹤劑18-氟-2-脫氧-D葡萄糖(18FDG)的使用占全部PET成像程序的>90％。已證實(shí)特別地將放射性示蹤劑工程化改造使其成功地檢測(cè)腫瘤是具有挑戰(zhàn)性的，結(jié)果導(dǎo)致新型放射性示蹤劑在臨床上具有較高的消耗率。放射性示蹤劑的靶點(diǎn)必需以其潛在的使用背景(即，檢測(cè)、應(yīng)答指示劑)作為框架，并且候選物的選擇通常是基于指示在癌癥中上調(diào)的臨床前證據(jù)。在這一點(diǎn)上，在未透徹理解靶點(diǎn)上調(diào)的病理生物學(xué)機(jī)制的情況下在患者中對(duì)新型放射性示蹤劑進(jìn)行適宜地評(píng)估可能是具有挑戰(zhàn)性的。本發(fā)明的特定實(shí)施方式在這一點(diǎn)上已經(jīng)獲得了成功，這是通過使用來源于對(duì)與腫瘤結(jié)合的fPSA具有特異性的適宜標(biāo)記的抗體的新型放射性示蹤劑非侵入性的對(duì)前列腺特異的、雄激素受體調(diào)節(jié)的基因表達(dá)和所得到的翻譯產(chǎn)物的變化情況進(jìn)行檢測(cè)而證實(shí)的。本申請(qǐng)公開的放射性示蹤劑是雄激素受體依賴性的對(duì)前列腺癌細(xì)胞具有高度特異性并且能夠檢測(cè)雄激素調(diào)節(jié)的fPSA表達(dá)的增加，這表明其能夠反映瘤內(nèi)的雄激素受體信號(hào)。與本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的成像技術(shù)偶聯(lián)后，本申請(qǐng)公開的新型放射性示蹤劑通過對(duì)雄激素受體藥理學(xué)抑制的響應(yīng)而導(dǎo)致的fPSA合成的改變能夠在原位對(duì)雄激素受體信號(hào)進(jìn)行定量。而且，所述放射性示蹤劑對(duì)骨中的轉(zhuǎn)移性前列腺癌腫瘤具有獨(dú)特的特異性并且其能夠清楚地區(qū)分真正的骨前列腺癌病灶和骨重塑。本發(fā)明的實(shí)施方式對(duì)雄激素受體信號(hào)進(jìn)行監(jiān)測(cè)和成像的能力適用于廣泛的診斷方法。本發(fā)明的實(shí)施方式能夠提供涉及前列腺癌和轉(zhuǎn)移的前列腺癌細(xì)胞的診斷信息以及預(yù)后和預(yù)測(cè)性信息。如前所述，監(jiān)測(cè)腫瘤相關(guān)雄激素受體信號(hào)的能力有助于極其準(zhǔn)確地對(duì)治療的療效進(jìn)行檢測(cè)，特別是當(dāng)使用抗-雄激素治療時(shí)。在這方面的能力，當(dāng)癌細(xì)胞已經(jīng)出現(xiàn)適應(yīng)性突變使所述細(xì)胞不響應(yīng)雄激素受體信號(hào)時(shí)本發(fā)明的實(shí)施方式能夠做出提示。而且，本發(fā)明的實(shí)施方式能夠用于評(píng)估癌癥的分期和/或?qū)χ委煹目赡芎蠊峁┬畔ⅰ１景l(fā)明的實(shí)施方式還能夠預(yù)測(cè)是否給定的治療過程將取得成功。例如，與基線的參考值相比雄激素受體信號(hào)水平的升高可能提示抗-雄激素治療特別積極的過程。還應(yīng)理解的是，本申請(qǐng)公開的抗-fPSA抗體和抗體多肽與腫瘤結(jié)合的特異性和瘤內(nèi)特異性使得可以將抗-雄激素和抗-癌治療靶向至表達(dá)和/或展示fPSA的細(xì)胞。腫瘤相關(guān)的fPSA抗體可以與放射性元素、細(xì)胞毒性核酸類似物、凋亡誘導(dǎo)劑和目前已知或?qū)⒈婚_發(fā)的能夠?qū)?zhǔn)確遞送至特定細(xì)胞群有益的潛在的任意療法偶聯(lián)。通過僅結(jié)合至PSA的催化裂隙，其在血清中被ACT所阻斷，本申請(qǐng)公開的fPSA抗體和抗體多肽具有直接將療法靶向至前列腺特異性腫瘤和前列腺癌細(xì)胞(例如前列腺癌來源的轉(zhuǎn)移性骨病)的能力。不被任何特定理論所束縛，據(jù)信fPSA以具有蛋白水解活性的整合膜蛋白的形式瞬時(shí)存在，然后在細(xì)胞外周空隙中瞬時(shí)存在，隨后其被細(xì)胞外結(jié)核蛋白(例如ACT)所隔離，該蛋白阻止fPSA被催化裂隙特異性抗體所識(shí)別。本發(fā)明的實(shí)施方式和本申請(qǐng)公開的方法可以包括目前已知的或?qū)⒈话l(fā)現(xiàn)的能夠特異性與fPSA特別是與腫瘤結(jié)合的fPSA結(jié)合的任意抗體。如上文所描述的，本發(fā)明還涵蓋能夠與fPSA特異性結(jié)合的抗體片段和抗體的特征部分(例如5A10)。選定的抗體和抗體片段可以單獨(dú)或組合使用。當(dāng)組合使用時(shí)，選定的抗體和抗體片段可以同時(shí)或序貫使用。本發(fā)明的抗體和抗體片段在給予后約12-48小時(shí)與腫瘤的結(jié)合達(dá)峰，并且在特定的實(shí)施方式中為給予后20-30小時(shí)內(nèi)。在特定實(shí)施方式中，在給予后約24小時(shí)觀察到與腫瘤的結(jié)合活性達(dá)峰。本發(fā)明的一些實(shí)施方式利用了僅當(dāng)PSA未被復(fù)合時(shí)(即未與ACT或其他蛋白結(jié)合)能夠特異性與PSA表位結(jié)合的單克隆或多克隆抗體(或其特征片段)。在本發(fā)明的實(shí)施方式中使用的抗體可以來自任意種屬如人、小鼠、家兔等。如上文所描述的，對(duì)在催化裂隙內(nèi)或其附近(例如鄰近)的表位的可達(dá)性是fPSA(特別是瘤內(nèi)或與細(xì)胞結(jié)合的fPSA)與血清PSA之間的重要區(qū)別特征。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，所述表位在催化裂隙內(nèi)。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，所述表位與催化裂隙鄰近。在本發(fā)明的實(shí)施方式中使用的一個(gè)這種抗體是5A10，其是特異性識(shí)別與fPSA的催化裂隙鄰近的表位的小鼠單克隆抗體。5A10是針對(duì)精液中的PSA而獲得的，并且其表位幾乎無法接近與ACT復(fù)合的PSA。參見例如Lilja,H.等，Clin.Chem.,1991,37:1618-1625。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，所述抗體是4G10。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明使用的抗體可以與包括fPSA中的氨基酸80-91的線性表位結(jié)合，其形成稱為激肽釋放酶環(huán)的一部分。在一些實(shí)施方式中，所述抗體與fPSA序列SWGSEPC(在PSA中的氨基酸204-210)結(jié)合。該SWG位點(diǎn)形成對(duì)fPSA具有特異性的MAb表位的一部分。氨基酸204–207(SWGS)形成凹槽的邊緣，其含有與凹槽另一側(cè)的區(qū)域80-91對(duì)面的PSA活性位點(diǎn)殘基。在一些實(shí)施方式中，抗體結(jié)合fPSA序列HPQKV(在PSA中的氨基酸164-168)，其位于與氨基酸204-207鄰近的位置并且可以形成對(duì)fPSA具有特異性的單克隆抗體表位的一部分。在一些實(shí)施方式中，所述抗體在fPSA的氨基酸164-168的區(qū)域結(jié)合。在一個(gè)特定實(shí)施方式中，所述抗體與5A10的氨基酸164-168的區(qū)域結(jié)合。在一些實(shí)施方式中，抗體特異性地與PSA三個(gè)不同構(gòu)象的環(huán)中至少一個(gè)的殘基結(jié)合，即氨基酸80–91、164–168和204–207。參見Leinonen,J.等，Clin.Chem.,2002,48(12):2208-2216。基于已公開的PSA表位特征/結(jié)構(gòu)分析對(duì)其他fPSA-特異性抗體的開發(fā)在本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能力的范圍內(nèi)并且下面將立即對(duì)所述方法進(jìn)行討論。示例性的PSA表位的表征參見：Lilja,H.等，Clin.Chem.,1991,37:1618-1625；Pettersson,K.等，Clin.Chem.,1995,41:1480-1488；Piironen,T.,ProteinSci.,1998,7:259-269；和Menez,R.,J.Mol.Biol.,2008,376(4):1021-1033；Leinonen,J.等，Clin.Chem.,2002,48(12):2208-2216，以及VilloutreixB.O.等，ProteinSci.,1994,3:2033-2044，其均通過引用整體并入本申請(qǐng)。人源化的和表面修飾的抗體可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)方法開發(fā)本發(fā)明的實(shí)施方式中使用的單克隆抗體；雜交瘤技術(shù)只是一個(gè)例子。參見例如G.Kohler和C.Milstein,Nature,1975,256:495-497。單克隆抗體的生產(chǎn)方案和生產(chǎn)其的細(xì)胞系是本領(lǐng)域公知的。參見例如Gerhard等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1978,75:1510；MonoclonalAntibodies(R.Kennett,T.McKearn,&K.Bechtoleds.1980)；MonoclonalAntibodiesandT-CellHybridomas(G.Hammerling,U.Hammerling,&J.Kearneyeds.1981)；Kozbor等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1982,79:6651；Jonak等，Hybridoma,1983,2:124；MonoclonalAntibodiesandFunctionalCellLines(R.Kennett,K.Bechtol,&T.McKearneds.1983)；以及Shulman等，Nature,1982,276:269-270。在某些實(shí)施方式中，特別地當(dāng)使用抗-fPSA抗體用于治療目的時(shí)，人源化的或表面修飾的抗體可以用于降低任意可能的免疫原反應(yīng)。在通常情況下，人源化的或表面修飾的抗體將限制非人抗體在人受體中治療應(yīng)用的持續(xù)時(shí)間和有效性的不需要的免疫應(yīng)答降至最低?，F(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)描述了多種用于制備包括來源于非人抗體的抗原結(jié)合部分的人源化抗體的方法。特別地，具有與人源恒定結(jié)構(gòu)域融合的嚙齒動(dòng)物可變區(qū)及其結(jié)合的互補(bǔ)性決定區(qū)(CDR)的抗體已被描述(參見例如Winter等，Nature,1991,349:293；Lobuglio等，Proc.Nat.Acad.Sci.USA,1989,86:4220；Shaw等，J.Immunol.,1987,138:4534；以及Brown等，CancerRes.,1987,47:3577)。在與適宜的人源抗體恒定結(jié)構(gòu)域融合前將嚙齒動(dòng)物CDR移入人源支持性框架區(qū)(FR)(例如參見Riechmann等，Nature,1988,332:323；Verhoeyen等，Science,1988,239:1534；以及Jones等，Nature,1986,321:522)以及通過重組的表面修飾的嚙齒動(dòng)物FR支持的嚙齒動(dòng)物CDR也已被描述(參見例如EPO專利公開號(hào)519,596)。完全人源的抗體是人患者的治療特別需要的。可以使用轉(zhuǎn)基因小鼠生產(chǎn)這種抗體，所述轉(zhuǎn)基因小鼠不能表達(dá)內(nèi)源性免疫球蛋白重鏈和輕鏈基因，但是其能夠表達(dá)人源重鏈和輕鏈基因(例如，參見Lonberg和Huszar,Int.Rev.Immunol.,1995,13:65-93以及美國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?,545,806；5,569,825；5,625,126；5,633,425；和5,661,016)。還能夠從人源抗體文庫(kù)中鑒定和分離完全人源的抗體或其抗原結(jié)合片段。例如，還能夠使用催化裂隙的全部和/或其抗原部分篩選包含理論上多樣性的人源抗體(1012種不同的抗體)或其物理上可實(shí)施的亞部分的多核苷酸文庫(kù)的表達(dá)產(chǎn)物以鑒定新型的相互作用抗體或片段。示例性的文庫(kù)包括來自免疫個(gè)體的噬菌體展示文庫(kù)(參見例如Barbas等，J.Mol.Biol.,1993,230:812-823)、生殖細(xì)胞序列文庫(kù)(Griffiths等，EMBOJ.,1994,13:3245-3260)以及天然的B-細(xì)胞庫(kù)(Vaughan等，NatureBiotech.,1996,14:309-314)。在特定實(shí)施方式中，可以使用來源于罹患前列腺癌的供體的文庫(kù)。在這種文庫(kù)中，PSA抗原刺激使得B細(xì)胞中mRNA的產(chǎn)生增加，其有助于分離傾向于與PSA結(jié)合的重鏈和輕鏈可變基因。還可以使用合成文庫(kù)，在其中生殖細(xì)胞抗體基因片段(VH、DH、和JH或Vκ/λ和Jκ/λ)在體外被組合地克隆和排布，以產(chǎn)生編碼完整的VH和VL鏈的重構(gòu)基因(參見例如Winter,FEBSLetters,1998,430:92-94)。參見例如deKruif等，J.Mol.Biol.,1995,248:97-105；Griffiths等，EMBOJ.,1994,13:3245-3260；Hoogenboom和Winter,J.Mol.Biol.,1992,227:381-388；以及Nissim等，EMBOJ.,1994,13:692-698。還可以使用半合成文庫(kù)，其通過選擇一個(gè)或多個(gè)抗體框架作為支架以及將CDR環(huán)中的序列隨機(jī)化產(chǎn)生。特定文庫(kù)可以具有重鏈和/或輕鏈完全或部分隨機(jī)化的CDR3高變區(qū)(參見例如Huls等，Nat.Biotech.,1999,17:276-281；Knappik等，J.Mol.Biol.,2000,296:57-86)。通常參見Fuh,G.Expert.Opin.Biol.Ther.,2007,7(1):73-87；Kim等，Mol.Cells,2005,20(1):17-29。可以使用噬菌體、酵母、大腸桿菌和核糖體展示技術(shù)用于文庫(kù)篩選。在本發(fā)明的方法中還可以使用表面修飾版本的抗-fPSA抗體。表面修飾的過程涉及選擇性的使用人源FR殘基取代來源于例如鼠源重鏈或輕鏈可變區(qū)的FR殘基以提供包括仍基本上保留了所有天然FR蛋白折疊結(jié)構(gòu)的抗原結(jié)合部分的抗體。表面修飾技術(shù)基于對(duì)抗原結(jié)合特性的理解，其主要由對(duì)抗原結(jié)合表面中的重鏈和輕鏈CDR集合的結(jié)構(gòu)和相對(duì)配置情況所決定(例如參見Davies等，Ann.Rev.Biochem.,1990,59:439)。因此，僅在人源化抗體中能夠保留抗原結(jié)合的特異性，其中CDR結(jié)構(gòu)、其彼此間的相互作用以及其與其余可變區(qū)結(jié)構(gòu)域的相互作用被仔細(xì)的保留。通過使用表面修飾技術(shù)，選擇性地用人源殘基取代免疫系統(tǒng)易于遇到的外部(例如溶劑-易接近的)FR殘基以提供含有弱免疫原性或者基本上無免疫原性表面修飾的雜交分子。診斷應(yīng)用在一些實(shí)施方式中，所提供的抗體用于診斷應(yīng)用。借助本申請(qǐng)公開的抗體對(duì)與腫瘤結(jié)合的fPSA的特異性，可以將其引入診斷檢測(cè)以原位監(jiān)測(cè)相對(duì)于通過血清PSA的間接方法不同的多種基于在腫瘤實(shí)際位置中的雄激素受體信號(hào)的療法的作用。例如，PSA基因產(chǎn)物的產(chǎn)生受到雄激素受體(“AR”)的正向調(diào)節(jié)。AR是通過與胞質(zhì)中的雄激素結(jié)合活化的核受體。活化的AR轉(zhuǎn)位至核中，在其中其能夠與靶基因調(diào)控區(qū)的雄激素應(yīng)答元件結(jié)合。這樣，阻斷或降低雄激素水平或AR活性的前列腺癌治療反映在雄激素調(diào)控基因產(chǎn)物如fPSA的相應(yīng)減少上。發(fā)明人的一些實(shí)施方式在原位對(duì)這種作用進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。診斷應(yīng)用還能夠檢測(cè)轉(zhuǎn)移性前列腺癌疾病的存在與否，例如在肝臟、淋巴結(jié)或骨中。在通常情況下，本申請(qǐng)?zhí)峁┑膄PSA特異性抗體可以在任意前列腺癌相關(guān)治療(例如抗-雄激素治療)之前、期間或之后給予，以評(píng)估與主體特異性基線或來源于患者群體的基線相比治療對(duì)雄激素受體信號(hào)的作用。在特定實(shí)施方式中，來源于群體的基線值可以包括患者或未罹患前列腺癌的主體群體中fPSA表達(dá)或活性的平均或中位雄激素受體信號(hào)水平。在某些實(shí)施方式中，如下述章節(jié)中討論的，可以通過將檢測(cè)實(shí)體加入所提供的抗體中檢測(cè)結(jié)合情況。在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的檢測(cè)技術(shù)包括陰性對(duì)照，其可以包括將所述檢測(cè)用于對(duì)照樣品(例如來自正常的非癌組織)，這樣可以將來自其的信號(hào)與來自待測(cè)樣品的信號(hào)進(jìn)行比較。在本發(fā)明的實(shí)施方式中使用的特定診斷技術(shù)包括但不限于酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)(“ELISA”)、正電子發(fā)射斷層掃描、Western印跡、免疫組化和磁共振成像。檢測(cè)實(shí)體在一些實(shí)施方式中，抗-fPSA特異性抗體用于檢測(cè)應(yīng)用?？梢允褂帽旧暾?qǐng)所述的多功能劑，除了如本申請(qǐng)所描述的所提供的抗體以外，其還包括至少一個(gè)檢測(cè)實(shí)體。檢測(cè)實(shí)體可以是在目標(biāo)組織例如前列腺癌細(xì)胞或骨中的fPSA結(jié)合后能夠檢測(cè)fPSA抗體或抗體多肽的任意實(shí)體?？梢允褂枚喾N檢測(cè)劑中的任意一種作為所提供抗體的多功能抗體劑中的檢測(cè)實(shí)體(例如標(biāo)記部分)。檢測(cè)實(shí)體可以直接檢測(cè)或間接檢測(cè)。檢測(cè)實(shí)體的例子包括但不限于：各種配體、放射性核素(例如3H、14C、18F、19F、32P、35S、135I、125I、123I、64Cu、187Re、111In、90Y、99mTc、177Lu、89Zr等)、熒光染料(具體的示例性熒光染料，見下文)、化學(xué)發(fā)光劑(例如吖啶酯、穩(wěn)定的二氧雜環(huán)丁烷等)、生物發(fā)光劑、光譜可分辨的無機(jī)熒光半導(dǎo)體納米晶體(即量子點(diǎn))、金屬納米粒子(例如金、銀、銅、鉑等)納米簇、順磁性金屬離子、酶(酶的特定例子，見下文)、比色分析標(biāo)記(例如染料、膠體金等)、生物素、地高辛、半抗原和針對(duì)其抗血清或單克隆抗體是可用的蛋白。在某些實(shí)施方式中，檢測(cè)實(shí)體包括熒光標(biāo)記。具有多種化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理特性的多種已知熒光標(biāo)記部分均適用于本發(fā)明。適宜的熒光染料包括但不限于熒光素和熒光染料(例如熒光素異硫氰酸酯或FITC、萘熒光素、4',5'-二氯-2',7'-二甲氧基熒光素、β羧基熒光素或FAM等)、羰花青、部花青、苯乙烯基染料、氧雜菁染料、藻紅素、赤蘚紅、曙紅、羅丹明染料(例如羧基四甲基-羅丹明或TAMRA、羧基羅丹明6G、羧基-X-羅丹明(ROX)、麗絲胺羅丹明B、羅丹明6G、羅丹明綠、羅丹明紅、四甲基羅丹明(TMR)等)、香豆素和香豆素染料(例如甲氧基香豆素、二烷基氨基香豆素、羥基香豆素、氨基甲基香豆素(AMCA)等)、俄勒岡綠染料(例如俄勒岡綠488、俄勒岡綠500、俄勒岡綠514等)、德克薩斯紅、德克薩斯紅-X、光譜紅TM、光譜綠TM、花青染料(例如Cy-3TM、Cy-5TM、Cy-3.5TM、Cy-5.5TM等)、AlexaFluor染料(例如AlexaFluor350、AlexaFluor488、AlexaFluor532、AlexaFluor546、AlexaFluor568、AlexaFluor594、AlexaFluor633、AlexaFluor660、AlexaFluor680等)、BODIPY染料(例如BODIPYFL、BODIPYR6G、BODIPYTMR、BODIPYTR、BODIPY530/550、BODIPY558/568、BODIPY564/570、BODIPY576/589、BODIPY581/591、BODIPY630/650、BODIPY650/665等)、IRDyes(例如IRD40、IRD700、IRD800等)等等。適宜的熒光染料以及將熒光染料與其他化學(xué)實(shí)體如蛋白和肽偶聯(lián)的方法的更多例子參見例如“TheHandbookofFluorescentProbesandResearchProducts”,9111Ed.,MolecularProbes,Inc.,Eugene,OR。熒光標(biāo)記劑試劑有利的性質(zhì)包括具有較高的摩爾吸光系數(shù)、較高的熒光量子產(chǎn)率和光穩(wěn)定性。在某些實(shí)施方式中，標(biāo)記熒光團(tuán)在可見光(即在400和750nm之間)范圍內(nèi)顯示出所需的吸收和發(fā)射波長(zhǎng)而非在光譜的紫外范圍內(nèi)(即低于400nm)。在某些實(shí)施方式中，檢測(cè)實(shí)體包括酶。適宜的酶的例子包括但不限于那些在ELISA中使用的，例如辣根過氧化物酶、β-半乳糖苷酶、熒光素酶、堿性磷酸酶等。其他例子包括β-葡萄糖醛酸苷酶、β-D-葡萄糖苷酶、脲酶、葡萄糖氧化酶等?？梢允褂媒宇^基團(tuán)如碳二亞胺、二異氰酸酯、戊二醛等將酶與靶實(shí)體(例如氯毒素部分)偶聯(lián)。對(duì)適宜接頭更詳細(xì)的描述參見本申請(qǐng)的其他部分。在某些實(shí)施方式中，檢測(cè)實(shí)體包括放射性同位素，其可以被單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層成像(SPECT)或位置發(fā)射斷層成像(PET)所檢測(cè)。PET的高分辨率和定量成像特別適用于本發(fā)明的某些實(shí)施方式。這種放射性核素的例子包括但不限于鋯-89(89Zr)、碘-124(124I)、碘-131(131I)、碘-125(125I)、鉍-212(212Bi)、鉍-213(213Bi)、砹-221(211At)、銅-67(67Cu)、銅-64(64Cu)、錸-186(186Re)、錸-186(188Re)、磷-32(32P)、釤-153(153Sm)、镥-177(117Lu)、锝-99m(99mTc)、鎵-67(67Ga)、銦-Ill(111In)和鉈-201(201Tl)。用于生產(chǎn)和使用89Zr-標(biāo)記的單克隆抗體的特定程序參見Verel,I.等，“89Zr-Immuno-PET:ComprehensiveProceduresfortheProductionof89Zr-LabeledMonoclonalAntibodies”,J.Nucl.Med.2003；44:1271-1281，其通過引用并入本申請(qǐng)。在某些實(shí)施方式中，標(biāo)記部分包括可以被γ照相機(jī)檢測(cè)的放射性同位素。這種放射性同位素的例子包括但不限于碘-131(131I)和锝-99m(99mTc)。在某些實(shí)施方式中，檢測(cè)實(shí)體包括順磁性金屬離子，其是磁共振成像(MRI)良好的對(duì)比度增強(qiáng)劑。這種順磁性金屬離子的例子包括但不限于釓III(Gd3+)、鉻III(Cr3+)、鏑III(Dy3+)、鐵III(Fe3+)、錳II(Mn2+)和鐿III(Yb3+)。在某些實(shí)施方式中，檢測(cè)實(shí)體包括釓III(Gd3+)。釓是經(jīng)FDA認(rèn)證的用于MRI的造影劑，其累積在異常組織中使得這些異常區(qū)域在磁共振成像中變得非常明亮(增強(qiáng))。已知釓在機(jī)體不同區(qū)域的正常和異常組織之間提供了極大的對(duì)比，特別是在腦中。在某些實(shí)施方式中，標(biāo)記部分包括可以被核磁共振光譜(MRS)檢測(cè)的穩(wěn)定的順磁性同位素。適宜的穩(wěn)定的順磁性同位素的例子包括但不限于碳-13(13C)和氟-19(19F)。藥物組合物本發(fā)明還提供了一種包括一種或多種所提供的抗體或其片段或特征部分的組合物。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了至少一種抗體和至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑。這種藥物組合物可以任選地包括和/或與一種或多種其他治療性或生物活性物質(zhì)組合給予。在一些實(shí)施方式中，所提供的藥物組合物用于藥物或藥物的生產(chǎn)。在一些實(shí)施方式中，所提供的藥物組合物用于在前列腺癌及其轉(zhuǎn)移的治療或預(yù)防中的預(yù)防劑(即疫苗)。在一些實(shí)施方式中，所提供的藥物組合物用于治療應(yīng)用，例如在罹患前列腺癌的個(gè)體中；例如作為能夠特異性靶向細(xì)胞毒劑或阻斷雄激素受體信號(hào)的化合物的遞送載體。在一些實(shí)施方式中，所述藥物組合物同時(shí)用于診斷應(yīng)用和治療應(yīng)用。在一些實(shí)施方式中，將藥物組合物制劑用于給予人類。在一些實(shí)施方式中，所述藥物組合物包括與本申請(qǐng)所定義的抗癌劑組合或偶聯(lián)的抗-fPSA抗體。例如，可以以無菌可注射形式提供藥物組合物(例如適于皮下注射或靜脈輸注的形式)。在一些實(shí)施方式中，以適于注射的液體劑型提供藥物組合物。在一些實(shí)施方式中，以粉劑提供藥物組合物(例如凍干和/或滅菌)，任選地在真空條件下，在注射前使用水性稀釋劑(例如水、緩沖劑、鹽溶液等)將其復(fù)溶。在一些實(shí)施方式中，在水、氯化鈉溶液、醋酸鈉溶液、苯甲醇溶液、磷酸鹽緩沖液等溶液中將藥物組合物稀釋和/或復(fù)溶。在一些實(shí)施方式中，應(yīng)將粉劑輕柔地與水性稀釋劑混合(例如不能振搖)。在一些實(shí)施方式中，所提供的藥物組合物包括一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑(例如防腐劑、惰性稀釋劑、分散劑、表面活性劑和/或乳化劑、緩沖劑等)。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包括一種或多種防腐劑。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物不包括防腐劑。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物以可以冷藏和/或冷凍的形式提供。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物以不能冷藏和/或冷凍的形式提供。在一些實(shí)施方式中，復(fù)溶的溶液和/或液體劑型可以在復(fù)溶后貯存一段時(shí)間(例如2小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、2天、5天、7天、10天、2周、1個(gè)月、2個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間)。在一些實(shí)施方式中，抗體組合物的貯存時(shí)間長(zhǎng)于指定時(shí)間導(dǎo)致了抗體降解。液體劑型和/或復(fù)溶溶液可以包括顆粒物質(zhì)和/或給藥前變色。在一些實(shí)施方式中，如果出現(xiàn)變色或混濁和/或如果過濾后仍存在顆粒物質(zhì)，則不應(yīng)使用溶液。本申請(qǐng)所述的藥物組合物可以采用藥理學(xué)領(lǐng)域已知的或此后開發(fā)的任意方法制備。在一些實(shí)施方式中，這種制備方法包括將活性成分加入一種或多種賦形劑和/或一種或多種其他輔助成分使之結(jié)合的步驟，然后如有必要和/或需要，將產(chǎn)品成型和/或包裝成所需的單一或多劑量單位?？梢詫⒏鶕?jù)本發(fā)明的藥物組合物以單一單位劑量和/或多個(gè)單一單位劑量的形式制備、包裝和/或總包銷售，。如本申請(qǐng)所使用的，“單位劑量”指不連續(xù)量的包括預(yù)計(jì)量活性成分的藥物組合物；例如抗-fPSA抗體和抗-雄激素療法?；钚猿煞值牧客ǔ５扔趯⒔o予主體的劑量和/或等于這種劑量便于計(jì)算拆分的一部分，例如這種劑量的二分之一或三分之一?？梢愿淖兏鶕?jù)本發(fā)明的藥物組合物中活性成分、藥學(xué)上可接受的賦形劑和/或任意其他成分的相對(duì)量，依據(jù)所治療主體的鑒別、體型和/或狀況和/或待給予組合物的給藥途徑。例如，所述組合物可以包括0.1％至100％(w/w)之間的活性成分。本發(fā)明的藥物組合物還可以包括藥學(xué)上可接受的賦形劑，其如本申請(qǐng)所使用的可以是或包括溶劑、分散介質(zhì)、稀釋劑或其他液體溶劑、分散或混懸助劑、表面活性劑、等張劑、增稠或乳化劑、防腐劑、固體粘合劑、潤(rùn)滑劑等，以適于所需的特定劑型。Remington’sTheScienceandPracticeofPharmacy第21版，A.R.Gennaro(Lippincott,Williams&Wilkins,Baltimore,MD,2006)中公開了用于將藥物組合物制劑的多種賦形劑以及用于制備其的公知技術(shù)。除了與原料藥或其衍生物不相容的任意常規(guī)賦形劑以外，如產(chǎn)生任意不良的生物效應(yīng)或以有害方式與藥物組合物的任意其他成分相互作用，可以將任意常規(guī)賦形劑包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。一般的偶聯(lián)物本申請(qǐng)所述的多功能劑包括多種實(shí)體，其均具有至少一種功能(例如與化療劑偶聯(lián)的對(duì)在fPSA的催化裂隙中或其附近的表位具有特異性的單克隆抗體)。所涉及的多功能劑的某些實(shí)施方式包括靶向?qū)嶓w和至少一種下述實(shí)體：檢測(cè)實(shí)體、治療實(shí)體和診斷實(shí)體。在一些實(shí)施方式中，多功能劑包括抗-fPSA抗體，其包含靶向?qū)嶓w和治療實(shí)體但不包含檢測(cè)實(shí)體。在一些實(shí)施方式中，多功能劑包括抗-fPSA抗體，其包含靶向?qū)嶓w和檢測(cè)實(shí)體但不包含治療實(shí)體。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明的多功能劑包括靶向?qū)嶓w、治療實(shí)體和檢測(cè)實(shí)體。在一些實(shí)施方式中，藥劑的實(shí)體可以彼此間偶聯(lián)。不同實(shí)體偶聯(lián)以形成多功能劑不限于特定的偶聯(lián)方式。例如，兩種實(shí)體可以直接彼此間共價(jià)偶聯(lián)。或者，兩種實(shí)體可以間接彼此間共價(jià)偶聯(lián)，如通過接頭實(shí)體。在一些實(shí)施方式中，多功能劑可以包括在所述試劑中不同類型的偶聯(lián)，以使得所述試劑的一些實(shí)體直接偶聯(lián)而所述試劑的其他實(shí)體通過一個(gè)或多個(gè)接頭間接偶聯(lián)。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明的多功能劑包括單一類型的接頭實(shí)體。在其他實(shí)施方式中，本發(fā)明的多功能劑包括一種以上類型的接頭實(shí)體。在一些實(shí)施方式中，多功能劑包括不同長(zhǎng)度單一類型的接頭實(shí)體。在一些實(shí)施方式中，在多功能劑中包括實(shí)體之間的共價(jià)連接。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，所述部分彼此之間可以直接或間接地連接(例如通過接頭，如下文所述)。在一些實(shí)施方式中，其中多功能劑的一個(gè)實(shí)體(如靶向?qū)嶓w)和另一個(gè)實(shí)體彼此間直接共價(jià)連接，如可以通過鍵直接共價(jià)偶聯(lián)(例如接頭或接頭實(shí)體)，如酰胺、酯、碳-碳、二硫、氨基甲酸酯、醚、硫醚、脲、胺或碳酸鹽鍵?？梢酝ㄟ^利用多功能劑的第一個(gè)實(shí)體和/或第二個(gè)實(shí)體上存在的官能團(tuán)完成共價(jià)偶聯(lián)?；蛘撸梢允褂昧硪粋€(gè)氨基酸取代非關(guān)鍵氨基酸以引入用于偶聯(lián)目的的有用基團(tuán)(如氨基、羧基或巰基)。或者，可以在多功能劑的至少一個(gè)實(shí)體上添加氨基以引入用于偶聯(lián)目的的有用基團(tuán)(如氨基、羧基或巰基)。能夠用于將部分連接在一起的適宜官能團(tuán)包括但不限于胺、酸酐、羥基、羧基、巰基等?？梢允褂没罨瘎┤缣级啺芬孕纬芍苯拥逆I。多種活化劑是本領(lǐng)域公知的并且適于將一個(gè)實(shí)體與另一個(gè)實(shí)體偶聯(lián)。在其他實(shí)施方式中，本發(fā)明涵蓋的多功能劑實(shí)體通過接頭基團(tuán)間接地共價(jià)連接。還可以將這種接頭基團(tuán)稱為接頭或連接實(shí)體?？梢允褂帽绢I(lǐng)域公知的任意數(shù)量穩(wěn)定的雙功能劑實(shí)現(xiàn)這一目的，包括同功能和異功能劑(這種試劑的例子，參見例如PierceCatalogandHandbook)。雙功能接頭與活化劑的作用不同，前者使得在所得到的偶聯(lián)物(劑)中含有連接部分，而后者通過反應(yīng)將兩部分直接偶聯(lián)。雙功能接頭的作用為可以使兩個(gè)其他的惰性部分之間反應(yīng)?；蛘呋虼送?，可以對(duì)成為反應(yīng)產(chǎn)物一部分的雙功能接頭進(jìn)行選擇以使其對(duì)抗-fPSA抗體具有某種程度的構(gòu)象柔性(例如包括含有若干原子的直鏈烷基的雙功能接頭，例如含有2和10個(gè)之間碳原子的直連烷基)。或者或此外，可以對(duì)雙功能接頭進(jìn)行選擇以使得在所提供的抗體與治療劑之間形成的鍵是可裂解的，例如可水解的(這種接頭的例子，參見例如美國(guó)專利號(hào)5,773,001；5,739,116和5,877,296，其均通過引用整體并入本申請(qǐng))。例如，當(dāng)在偶聯(lián)物水解后觀察到更高活性的某些實(shí)體如靶向劑(例如所提供的fPSA特異性抗體)和/或治療實(shí)體時(shí)，可以使用這種接頭。實(shí)體可以從多功能劑中裂解出來的示例性機(jī)制包括溶酶體在酸性pH下水解(腙、縮醛和順式烏頭酸樣酰胺)、肽通過溶酶體酶的裂解(組織蛋白酶(capthepins)和其他溶酶體酶)和二硫鍵的還原。使這種實(shí)體從多功能劑中裂解出來的另一種機(jī)制包括在生理pH下的細(xì)胞外或細(xì)胞內(nèi)水解。當(dāng)將一種實(shí)體與另一種實(shí)體偶聯(lián)使用的交聯(lián)劑是生物可降解的/生物蝕解的組分如葡聚糖等時(shí)適用這種機(jī)制。例如，可以通過引入羰基基團(tuán)制備含腙的多功能劑，羰基基團(tuán)提供所需的釋放性質(zhì)。還可以制備具有接頭的多功能劑，所述接頭包括在一端具有二硫基和在另一端具有肼衍生物的烷基鏈。含有腙以外官能團(tuán)的接頭也具有在溶酶體的酸性環(huán)境中被裂解的可能。例如，可以由巰基反應(yīng)性接頭制備多功能劑，其包括腙以外的在胞內(nèi)裂解的基團(tuán)，如酯、酰胺和縮醛/縮酮。pH敏感性接頭分類的另一個(gè)例子是順式烏頭酸，其具有與酰胺基緊鄰的羧酸基團(tuán)。羧酸在酸性溶酶體中加速酰胺水解。還能夠使用若干其他結(jié)構(gòu)類型的達(dá)到相似類型水解速率加速的接頭。抗-fPSA抗體偶聯(lián)物的另一種可能的釋放方法是通過溶酶體酶使肽酶解。在一個(gè)例子中，所提供的抗體通過酰胺鍵與對(duì)-氨基苯甲醇連接，然后在苯甲醇與治療劑之間形成氨基甲酸酯或碳酸酯。肽的裂解使得氨基苯甲基氨基甲酸酯或氨基苯甲基碳酸酯脫落，并釋放治療劑。在另一個(gè)例子中，可以通過從接頭上裂解脫落酚代替氨基甲酸酯。在另一個(gè)變化中，使用還原二硫鍵使得對(duì)-巰基氨基甲酸苯甲酯或?qū)?巰基苯甲基碳酸酯脫落。本申請(qǐng)中提供的可以作為多功能劑的連接實(shí)體的有用的接頭包括但不限于：聚乙二醇、乙二醇的共聚物、聚丙二醇、丙二醇的共聚物、羧甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1,3-二氧戊環(huán)、聚-1,3,6-三聚甲醛、乙烯/馬來酸酐共聚物、聚氨基酸、葡聚糖n-乙烯基吡咯烷酮、聚n-乙烯基吡咯烷酮、丙二醇均聚物、環(huán)氧丙烷聚合物、環(huán)氧乙烷聚合物、聚氧乙烯多元醇、聚乙烯醇、直鏈或支鏈的糖基化的鏈、聚縮醛、長(zhǎng)鏈脂肪酸、長(zhǎng)鏈?zhǔn)杷灾净?。本發(fā)明的一些實(shí)施方式利用包括至少一種非共價(jià)結(jié)合的實(shí)體的多功能劑。非共價(jià)相互作用的例子包括但不限于疏水性相互作用、靜電相互作用、偶極相互作用、范德華相互作用和氫鍵鍵合。不考慮結(jié)合、相互作用或偶聯(lián)的性質(zhì)，第一實(shí)體和第二實(shí)體的結(jié)合，在一些實(shí)施方式中，具有足夠的選擇性、特異性和強(qiáng)度，以使得在所述試劑中含有的第二實(shí)體在轉(zhuǎn)運(yùn)/遞送至和進(jìn)入靶點(diǎn)之前或之中不會(huì)與第一實(shí)體分離。因此，可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的任意化學(xué)、生化、酶學(xué)或遺傳偶聯(lián)實(shí)現(xiàn)多功能劑中的多功能實(shí)體之間的結(jié)合。治療性偶聯(lián)物如本申請(qǐng)所述的，抗-fPSA抗體可以包括具有與前列腺癌相關(guān)的治療用途的多功能劑部分。在本公開的背景下治療用途的例子包括但不限于與靶向相關(guān)的用途(例如fPSA特異性單克隆抗體)、與治療作用相關(guān)的用途(例如細(xì)胞毒性和/或細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用、抗-增殖作用、抗血管生成作用、減輕癥狀等)和與診斷、檢測(cè)或標(biāo)記相關(guān)的用途等。靶向?qū)嶓w是能夠包括在試劑中的分子結(jié)構(gòu)，其通過與目的靶點(diǎn)特異性的相互作用或?qū)ζ渚哂杏H和性影響或控制作用位點(diǎn)。作為一個(gè)例子，靶點(diǎn)可以是存在于細(xì)胞表面的分子或分子復(fù)合物，例如某些細(xì)胞類型、組織等。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，所述靶點(diǎn)是與腫瘤結(jié)合的或瘤內(nèi)的fPSA并且所述靶向?qū)嶓w是抗-fPSA抗體。本申請(qǐng)公開的抗-fPSA靶向?qū)嶓w可以憑借其與僅在未復(fù)合的PSA中的表位的親和性特別地或優(yōu)選地與fPSA相互作用。針對(duì)試劑如治療劑靶向部分的使用是本領(lǐng)域公知的。在本申請(qǐng)的背景下，原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞是所述靶點(diǎn)。也就是說，在分子水平，靶點(diǎn)是存在(例如優(yōu)選地表達(dá))于前列腺癌細(xì)胞上的分子或細(xì)胞成分，以使得其能夠在接觸后特異性地或優(yōu)選地與抗-fPSA抗體結(jié)合。本發(fā)明的抗-fPSA抗體對(duì)其靶點(diǎn)(例如前列腺癌細(xì)胞的fPSA)顯示出特異性并且能夠定位于并與靶點(diǎn)結(jié)合。在一些實(shí)施方式中，抗-fPSA抗體靶向?qū)嶓w定位于前列腺癌細(xì)胞并且保持在一段時(shí)間內(nèi)與之結(jié)合。在一些實(shí)施方式中，所述fPSA靶點(diǎn)在瘤內(nèi)和/或是整合的膜蛋白。在一些實(shí)施方式中，所述抗-fPSA抗體是包括fPSA靶向?qū)嶓w的多功能劑，其基本上由與一種或多種抗癌劑偶聯(lián)的fPSA特異性抗體或其抗原結(jié)合片段組成。在這種實(shí)施方式中，因此，所述多功能劑是抗體偶聯(lián)物。下文中還提供了可以用于診斷或評(píng)估前列腺癌、治療前列腺癌和生產(chǎn)前列腺癌藥物的有用的抗-fPSA抗體偶聯(lián)物的非限制性實(shí)施方式。在一些實(shí)施方式中，將抗-fPSA抗體與用作治療(例如抗癌)劑的核酸分子偶聯(lián)。多種化學(xué)類型和結(jié)構(gòu)形式的核酸能夠適用于這樣的策略。這些包括，通過非限制性的例子，DNA包括單鏈(ssDNA)和雙鏈(dsDNA)；RNA包括但不限于ssRNA、dsRNA、tRNA、mRNA、rRNA、酶促RNA；RNA:DNA雜交體、三鏈DNA(例如與短的寡核苷酸結(jié)合的dsDNA)等。在一些實(shí)施方式中，所述核酸劑在約5至2000個(gè)核苷酸長(zhǎng)度之間。在一些實(shí)施方式中，所述核酸劑是至少約6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50或更長(zhǎng)的核苷酸長(zhǎng)度。在一些實(shí)施方式中，所述核酸劑是少于約2000、1900、1800、1700、1600、1500、1400、1300、1200、1100、1000、900、800、700、600、500、450、400、350、300、250、200、150、100、50、45、40、35、30、25、20或更短的核苷酸長(zhǎng)度。在一些實(shí)施方式中，所述核酸劑包括調(diào)控轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子和/或其他序列。這樣的實(shí)施方式可以包括例如與雄激素應(yīng)答元件對(duì)應(yīng)的核苷酸序列(例如PSA雄激素應(yīng)答元件AGCACTTGCTGTTCT(SEQIDNO:1))，因此其可以充當(dāng)誘餌與活化的AR結(jié)合。在一些實(shí)施方式中，所述核酸劑包括復(fù)制起點(diǎn)和/或調(diào)控復(fù)制的其他序列。在一些實(shí)施方式中，所述核酸劑不包括啟動(dòng)子和/或復(fù)制起點(diǎn)。用于本發(fā)明實(shí)踐的核酸抗癌劑包括靶向與腫瘤發(fā)生和細(xì)胞生長(zhǎng)或細(xì)胞轉(zhuǎn)化相關(guān)的基因(例如原癌基因，其編碼刺激細(xì)胞分化的蛋白)、血管生成/抗-血管生成基因、腫瘤抑制基因(其編碼抑制細(xì)胞分化的蛋白)、編碼與腫瘤生長(zhǎng)和/或腫瘤遷移相關(guān)蛋白的基因和自殺基因(其誘導(dǎo)凋亡或其他形式的細(xì)胞死亡)，特別是在快速分化的細(xì)胞中最活躍的自殺基因的那些藥劑。與腫瘤發(fā)生和/或細(xì)胞轉(zhuǎn)化相關(guān)的基因的例子包括雄激素受體基因、MLL融合基因、BCR-ABL、TEL-AML1、EWS-FLI1、TLS-FUS、PAX3-FKHR、Bc1-2、AML1-ETO、AML1-MTG8、Ras、FosPDGF、RET、APC、NF-1、Rb、p53、MDM2等；過表達(dá)的基因如多藥耐藥性基因；細(xì)胞周期蛋白；β-連環(huán)蛋白；端粒酶基因；c-myc、n-myc、Bc1-2、Erb-B1和Erb-B2；以及突變的基因如Ras、Mos、Raf和Met。腫瘤抑制基因的例子包括但不限于p53、p21、RB1、WT1、NF1、VHL、APC、DAP激酶、p16、ARF、神經(jīng)纖維瘤蛋白和PTEN。能夠被在抗癌療法中使用的核酸劑靶向的基因的例子包括編碼與腫瘤遷移相關(guān)蛋白的基因如整合素、選擇素和金屬蛋白酶；編碼促進(jìn)新血管生成的蛋白的抗血管生成基因如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)或VEGFr；編碼抑制新生血管生成的蛋白的抗血管生成基因如內(nèi)皮抑素、血管抑素和VEGF-R2；以及編碼蛋白如白介素、干擾素、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(α-FGF和β-FGF)、胰島素樣生長(zhǎng)因子(例如IGF-1和IGF-2)、血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)、腫瘤壞死因子(TNF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(例如TGF-α和TGF-β)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)、干細(xì)胞因子及其受體c-Kit(SCF/c-Kit)配體、CD40L/CD40、VLA-4VCAM-1、ICAM-1/LFA-1、透明質(zhì)酸酶hyalurin/CD44等的基因。適于與抗-fPSA抗體偶聯(lián)的核酸劑可以具有任意多種用途包括例如用作抗癌或其他治療劑、探針、引物等。核酸劑可以具有酶活性(例如核酶活性)、基因表達(dá)抑制活性(例如作為反義或siRNA劑等)和/或其他活性。核酸劑可以是本身具有活性或可以是遞送活性核酸劑的載體(例如通過所遞送核酸的復(fù)制和/或轉(zhuǎn)錄)。對(duì)于本說明書的目的來說，如果其編碼或以其他方式遞送治療活性劑，即使其本身不具有治療活性，則認(rèn)為這種載體核酸是“治療劑”。在某些實(shí)施方式中，抗-fPSA抗體的偶聯(lián)物包括包含或編碼反義化合物的核酸治療劑。術(shù)語“反義化合物或藥劑”、“反義寡聚體”、“反義寡核苷酸”和“反義寡核苷酸類似物”在本申請(qǐng)中互換使用，并且指核苷酸堿基的序列以及亞單位與亞單位骨架，其允許反義化合物與RNA中的靶序列通過Watson-Crick堿基配對(duì)方式雜交以在靶序列中形成RNA寡聚物異源雙鏈。所述寡聚物可以在靶序列中具有精確的序列互補(bǔ)性或近似互補(bǔ)性。這種反義寡聚物可以阻止或抑制含有靶序列的mRNA的翻譯，或抑制基因轉(zhuǎn)錄。反義寡聚物可以與雙鏈或單鏈序列結(jié)合。適于在本發(fā)明的實(shí)踐中使用的反義寡核苷酸的例子包括例如在下述綜述中提到的那些：R.AStahel等，LungCancer,2003,41:S81-S88；K.F.Pirollo等，Pharmacol.Ther.,2003,99:55-77；A.C.Stephens和R.P.Rivers,Curr.Opin.Mol.Ther.,2003,5:118-122；N.M.Dean和C.F.Bennett,Oncogene,2003,22:9087-9096；N.Schiavone等，Curr.Pharm.Des.,2004,10:769-784；L.Vidal等，Eur.J.Cancer,2005,41:2812-2818；T.Aboul-Fadl,Curr.Med.Chem.,2005,12:2193-2214；M.E.Gleave和B.P.Monia,Nat.Rev.Cancer,2005,5:468-479；Y.S.Cho-Chung,Curr.Pharm.Des.,2005,11:2811-2823；E.Rayburn等，Lett.DrugDesign&Discov.,2005,2:1-18；E.R.Rayburn等，ExpertOpin.Emerg.Drugs,2006,11:337-352；I.Tamm和M.Wagner,Mol.Biotechnol.,2006,33:221-238(其均通過引用整體并入本申請(qǐng))。適宜的反義寡核苷酸的例子包括EZN-4176，其是基于核酸的下調(diào)ARmRNA的反義寡核苷酸(Zhang,Y.等，Mol.CancerTherapeutics,2011,10:2309)；AR寡聚脫氧核苷酸，其抑制LNCaP前列腺腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞生長(zhǎng)(Eder,I.E.等，Nature,2000,7(7):997-1008)；以及奧利默森鈉(也稱為G31239，由Genta,Inc.,BerkeleyHeights,NJ研發(fā))，其是靶向bc1-2mRNA起始編碼區(qū)的磷硫酰寡聚物。Bc1-2是凋亡的有效抑制劑并且在多種癌癥中過表達(dá)，包括濾泡性淋巴瘤、乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌和中/高分級(jí)淋巴瘤(C.A.Stein等，Semin.Oncol.,2005,32:563-573；S.R.Frankel,Semin.Oncol.,2003,30:300-304)。其他適宜的反義寡核苷酸包括GEM-231(HYB0165,Hybridon,Inc.,Cambridge,MA)，其是直接針對(duì)cAMP依賴性蛋白激酶A(PKA)的混合骨架寡核苷酸(S.Goel等，Clin.CancerRes.,2003,9:4069-4076)；Affinitak(ISIS3521或阿普卡生，ISISpharmaceuticals,Inc.,Carlsbad,CA)，其是PKC-α的反義抑制劑；OGX-011(Isis112989,IsisPharmaceuticals,Inc.)，其是針對(duì)凝聚素的2'-甲氧乙基修飾的反義寡核苷酸，凝聚素是一種參與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、組織重塑、脂質(zhì)運(yùn)輸和細(xì)胞死亡的糖蛋白，其在乳腺、前列腺和結(jié)腸癌癥中過表達(dá)；ISIS5132(Isis112989,IsisPharmaceuticals,Inc.)，其是與c-raf-1mRNA的3'-非翻譯區(qū)序列互補(bǔ)的磷硫酰寡核苷酸(S.P.Henry等，AnticancerDrugDes.,1997,12:409-420；B.P.Monia等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1996,93:15481-15484；C.M.Rudin等，Clin.CancerRes.,2001,7:1214-1220)；ISIS2503(IsisPharmaceuticals,Inc.)，其是人H-rasmRNA表達(dá)的磷硫酰寡核苷酸反義抑制劑(J.Kurreck,Eur.J.Biochem.,2003,270:1628-1644)；靶向X-連的鎖凋亡蛋白抑制劑(XIAP)的寡核苷酸，其阻斷凋亡通路中的主要部分，如GEM640(AEG35156,AegeraTherapeuticsInc.andHybridon,Inc.)或靶向存活素，其為凋亡蛋白的抑制劑(IAP)，如ISIS23722(IsisPharmaceuticals,Inc.)，其是2'-O-甲氧乙基嵌合寡核苷酸；MG98，其靶向DNA甲基轉(zhuǎn)移酶；和GTI-2040(LorusTherapeutics,Inc.Toronto,Canada)，其是20-mer的寡核苷酸，與人核糖核苷酸還原酶R2小亞基部分mRNA中的編碼區(qū)互補(bǔ)。其他適宜的反義寡核苷酸包括針對(duì)Her-2/neu、c-Myb、c-Myc和c-Raf研發(fā)的反義寡核苷酸(參見例如A.Biroccio等，Oncogene,2003,22:6579-6588；Y.Lee等，CancerRes.,2003,63:2802-2811；B.Lu等，CancerRes.,2004,64:2840-2845；K.F.Pirollo等，Pharmacol.Ther.,2003,99:55-77；和A.Rait等，Ann.N.Y.Acad.Sci.,2003,1002:78-89)。在某些實(shí)施方式中，抗-fPSA抗體的偶聯(lián)物包括核酸抗癌劑，其包括或編碼干擾RNA分子。術(shù)語“干擾RNA”和“干擾RNA分子”在本申請(qǐng)中互換使用，并且指能夠以序列特異性方式抑制或下調(diào)基因表達(dá)或沉默基因的RNA分子，例如通過介導(dǎo)RNA干擾(RNAi)。RNA干擾(RNAi)是一種由雙鏈RNA(dsRNA)觸發(fā)的進(jìn)化保守的、具有序列特異性的機(jī)制，其誘導(dǎo)互補(bǔ)的靶向單鏈mRNA的降解以及“沉默”相應(yīng)的翻譯序列(McManus和Sharp,2002,NatureRev.Genet.,2002,3:737)。通過酶裂解使較長(zhǎng)的dsRNA鏈形成具有生物活性的長(zhǎng)度約為21-23個(gè)核苷酸的“短-干擾RNA”(siRNA)序列以發(fā)揮RNAi的功能(Elbashir等，GenesDev.,2001,15:188)。RNA干擾已經(jīng)成為一種有希望的治療癌癥的方法?？梢砸匀舾尚问街械娜我庖环N提供適于在本發(fā)明的實(shí)踐中使用的干擾RNA。例如，可以以分離的短干擾RNA(siRNA)、雙鏈RNA(dsRNA)、微-RNA(miRNA)或短發(fā)夾RNA(shRNA)中的一種或多種形式提供干擾RNA。適于在本發(fā)明中使用的干擾RNA分子的例子包括例如在下述綜述中舉出的iRNA：O.Milhavet等，Pharmacol.Rev.,2003,55:629-648；F.Bi等，Curr.Gene.Ther.,2003,3:411-417；P.Y.Lu等，Curr.Opin.Mol.Ther.,2003,5:225-234；I.Friedrich等，Semin.CancerBiol.,2004,14:223-230；M.Izquierdo,CancerGeneTher.,2005,12:217-227；P.Y.Lu等，Adv.Genet.,2005,54:117-142；G.R.Devi,CancerGeneTher.,2006,13:819-829；M.A.Behlke,Mol.Ther.,2006,13:644-670；和L.N.Putral等，DrugNewsPerspect.,2006,19:317-324(其內(nèi)容均通過引用整體并入本申請(qǐng))。其他適宜的干擾RNA分子的例子包括但不限于p53干擾RNA(例如T.R.Brummelkamp等，Science,2002,296:550-553；M.T.Hemman等，Nat.Genet.,2003,33:396-400)；靶向癌基因的干擾RNA，如Raf-1(T.F.Lou等，Oligonucleotides,2003,13:313-324)、K-Ras(T.R.Brummelkamp等，CancerCell,2002,2:243-247)和erbB-2(G.Yang等，J.Biol.Chem.,2004,279:4339-4345)。在某些實(shí)施方式中，抗-fPSA抗體的偶聯(lián)物包括核酸治療劑，其是核酶。如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“核酶”指能夠以靶向特異性方式裂解其他RNA分子的催化性RNA分子。核酶能夠用于下調(diào)任何不需要的目的基因產(chǎn)物的表達(dá)。能夠在本發(fā)明的實(shí)踐中使用的核酶的例子包括但不限于對(duì)雄激素受體mRNA具有特異性的那些核酶。在某些實(shí)施方式中，在抗-fPSA抗體的偶聯(lián)物中的實(shí)體或部分包括在光動(dòng)力療法(PDT)中使用的光敏劑。在PDT中，局部或全身給予患者光敏劑，隨后使用光照射，其被待治療的組織或器官中的光敏劑所吸收。光敏劑的光吸收產(chǎn)生對(duì)細(xì)胞有害的反應(yīng)性物質(zhì)(例如自由基)。為了達(dá)到最大效能，光敏劑通常是適于給藥的形式，并且還是能夠在靶位點(diǎn)易于細(xì)胞內(nèi)化的形式，其相對(duì)于正常組織常常具有一定程度的選擇性?？梢詫⑴c光敏劑結(jié)合的抗-fPSA抗體偶聯(lián)物作為PDT中的新遞送系統(tǒng)。除了減少光敏劑的聚集以外，根據(jù)本發(fā)明的光敏劑的遞送還顯示出其他優(yōu)勢(shì)如光敏劑針對(duì)靶組織/器官的特異性和細(xì)胞內(nèi)化作用增加。適于在本發(fā)明中使用的光敏劑包括多種合成的和天然存在的具有在PDT中使用的光敏性質(zhì)的分子中的任意一種。在某些實(shí)施方式中，所述光敏劑的吸收光譜在可見光范圍內(nèi)，通常在350nm至1200nm之間，優(yōu)選地在400nm至900nm之間，例如在600nm至900nm之間。根據(jù)本發(fā)明的能夠與毒素偶聯(lián)的適宜的光敏劑包括但不限于卟啉和卟啉衍生物(例如二氫卟酚、菌綠素、異菌綠素、酞菁和萘酞菁)；金屬卟啉、金屬酞菁、當(dāng)歸根素、硫?qū)僭氐倪拎}(chalcogenopyrylium,chalcogenapyrrillium)染料、葉綠素、香豆素、黃素及其相關(guān)化合物如咯嗪和核黃素、富勒烯、脫鎂葉綠酸、焦脫鎂葉綠酸、青色素(例如部花青素540)、脫鎂葉綠素、噻呋啉(sapphyrin)、特沙弗林(texaphyrin)、紅紫素、葉琳烯(porphycene)、吩噻嗪鹽(phenothiazinium)、亞甲基藍(lán)衍生物、萘酰亞胺、尼羅藍(lán)衍生物、醌、二萘嵌苯醌(例如金絲桃素、竹紅菌素和尾孢菌素)、補(bǔ)骨脂素、醌、類視黃醇、羅丹明、噻吩、喔地斯(verdins)、呫噸染料(例如曙紅、赤蘚紅、玫瑰紅)、卟啉的二聚體和低聚物形式以及前藥如5-氨基乙酰丙酸(R.W.Redmond和J.N.Gamlin,Photochem.Photobiol.,1999,70:391-475)。適于在本發(fā)明中使用的示例性光敏劑包括在美國(guó)專利號(hào)5,171,741；5,171,749；5,173,504；5,308,608；5,405,957；5,512,675；5,726,304；5,831,088；5,929,105；和5,880,145中描述的那些(其全部?jī)?nèi)容均通過引用整體并入本申請(qǐng))。在某些實(shí)施方式中，抗-fPSA特異性抗體偶聯(lián)物包括放射增敏劑。如本申請(qǐng)所使用的，術(shù)語“放射增敏劑”指使腫瘤細(xì)胞對(duì)放療更加敏感的分子、化合物或試劑。給予接受放療的患者放射增敏劑通常會(huì)增強(qiáng)放療的作用。將放射增敏劑與靶實(shí)體(例如能夠靶向瘤內(nèi)fPSA的抗-fPSA抗體)偶聯(lián)的優(yōu)勢(shì)為僅在靶細(xì)胞具有放射增敏作用。為了便于使用，即使是將其全身給予，放射增敏劑也應(yīng)該能夠發(fā)現(xiàn)靶細(xì)胞。然而，目前可用的放射增敏劑通常不是對(duì)腫瘤具有選擇性的，并且其通過擴(kuò)散在哺乳動(dòng)物機(jī)體中分布?？梢詫⒈景l(fā)明的fPSA抗體偶聯(lián)物作為新型的放射增敏劑遞送系統(tǒng)使用。多種放射增敏劑是本領(lǐng)域公知的。適于在本發(fā)明中使用的放射增敏劑的例子包括但不限于紫杉醇卡鉑、順鉑和奧沙利鉑(Amorino等，Radiat.Oncol.Investig.,1999,7:343-352；Choy,Oncology,1999,13:22-38；Safran等，CancerInvest.,2001,19:1-7；Dionet等，AnticancerRes.,2002,22:721-725；Cividalli等，Radiat.Oncol.Biol.Phys.,2002,52:1092-1098)；吉西他濱(Choy,Oncology,2000,14:7-14；Mornex和Girard,AnnalsofOncology,2006,17:1743-1747)；依他硝唑(Inanami等，Int.J.Radiat.Biol.,2002,78:267-274)；米索硝唑(Tamulevicius等，Br.J.Radiology,1981,54:318-324；Palcic等，Radiat.Res.,1984,100:340-347)、替拉扎明(Masunaga等，Br.J.Radiol.,2006,79:991-998；Rischin等，J.Clin.Oncol.,2001,19:535-542；Shulman等，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.,1999,44:349-353)；以及核酸堿基衍生物，例如鹵代嘌呤或嘧啶如5-氟脫氧尿嘧啶(Buchholz等，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.,1995,32:1053-1058)。在某些實(shí)施方式中，抗-fPSA抗體偶聯(lián)物包括放射性同位素。適宜的放射性同位素的例子包括任意的α-、β-或γ-發(fā)射體，當(dāng)將其定位于腫瘤部位時(shí)，其導(dǎo)致細(xì)胞破壞(S.E.Order,“Analysis,Results,andFutureProspectiveoftheTherapeuticUseofRadiolabeledAntibodyinCancerTherapy”,MonoclonalAntibodiesforCancerDetectionandTherapy,R.W.Baldwin等(Eds.),AcademicPress,1985)。這種放射性同位素的例子包括但不限于碘-131(131I)、碘-125(125I)、鉍-212(212Bi)、鉍-213(213Bi)、砹-211(211At)、錸-186(186Re)、錸-188(188Re)、磷-32(32P)、釔-90(90Y)、釤-153(153Sm)和镥-177(177Lu)。在某些實(shí)施方式中，抗-fPSA抗體偶聯(lián)物包括超級(jí)抗原或其生物活性部分。超級(jí)抗原的構(gòu)成為一群細(xì)菌和病毒蛋白，其在活化大部分T細(xì)胞群方面具有極強(qiáng)的作用。超級(jí)抗原直接與主要組織相容性復(fù)合物(MHC)結(jié)合而不需要加工。事實(shí)上，超級(jí)抗原結(jié)合MHCII類分子上未經(jīng)加工的外部抗原-結(jié)合槽，以避免常規(guī)肽結(jié)合位點(diǎn)大部分的多態(tài)性。已將基于超級(jí)抗原的腫瘤治療方法開發(fā)為用于治療實(shí)體腫瘤。在這種方法中，將靶向部分(例如抗-fPSA抗體或其抗原結(jié)合片段)與超級(jí)抗原偶聯(lián)，提供靶向的超級(jí)抗原。如果所述抗體或抗體片段識(shí)別與腫瘤結(jié)合的抗原，則與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的靶向超級(jí)抗原能夠觸發(fā)超級(jí)抗原活化的細(xì)胞毒性T細(xì)胞通過超級(jí)抗原依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性直接殺死腫瘤細(xì)胞。(參見例如等，(1996)“Antibody-targetedsuperantigensincancerimmunotherapy,”Immunotechnology,2(3):151-162，其全部?jī)?nèi)容通過引用并入本申請(qǐng))。在本發(fā)明的實(shí)施方式中使用的超級(jí)抗原的例子包括具有野生型葡萄球菌腸毒素A(SEA)的融合蛋白(Giantonio等，J.Clin.Oncol.,1997,15:1994-2007；Alpaugh等，Clin.CancerRes.,1998,4:1903-1914；Cheng等，J.Clin.Oncol.,2004,22:602-609；其全部?jī)?nèi)容均通過引用并入本申請(qǐng))；腸毒素基因簇(egc)葡萄球菌超級(jí)抗原(Terman等，Clin.ChestMed.,2006,27:321-324，其全部?jī)?nèi)容通過引用并入本申請(qǐng))，以及葡萄球菌腸毒素B(SEB)(Perabo等，Int.J.Cancer,2005,115:591-598，其全部?jī)?nèi)容通過引用并入本申請(qǐng))。超級(jí)抗原或其生物活性部分能夠與抗-fPSA抗體結(jié)合以形成包括抗體和超級(jí)抗原的偶聯(lián)物。適于在本發(fā)明中使用的超級(jí)抗原的其他例子包括但不限于葡萄球菌腸毒素E(SEE)、膿性鏈球菌外毒素(SPE)、葡萄球菌中毒性休克綜合征毒素(TSST-1)、鏈球菌有絲分裂外毒素(SME)和鏈球菌超級(jí)抗原(SSA)。在某些實(shí)施方式中，抗-fPSA抗體偶聯(lián)物可以用于定向酶前藥療法。在定向酶前藥療法方法中，將定向/靶向酶和前藥給予主體，其中所述靶向酶特別地定位于在主體機(jī)體中將前藥轉(zhuǎn)化成活性藥物的部分?？梢栽谝徊?通過靶向酶)或多于一步中將前藥轉(zhuǎn)化為活性藥物。例如，可以通過靶向酶將前藥轉(zhuǎn)化為活性藥物的前體。然后通過例如一種或多種其他靶向酶、給予主體的一種或多種非靶向酶、在主體中或主體中的靶位點(diǎn)天然存在的一種或多種酶(例如蛋白酶、磷酸酶、激酶或聚合酶)的催化活性，通過給予主體藥劑和/或通過不具有酶催化作用的化學(xué)過程(例如氧化、水解、同分異構(gòu)化、差向異構(gòu)化等)將前體轉(zhuǎn)化為活性藥物。在本發(fā)明的一些實(shí)施方式使用抗體導(dǎo)向酶前藥療法(ADEPT)，其中將抗-fPSA抗體與酶連接并注射給予主體，以使得所述酶與同腫瘤結(jié)合的或轉(zhuǎn)移性fPSA選擇性結(jié)合。如上文所討論的，本申請(qǐng)公開的抗-fPSA抗體(例如5A10)能夠充分地區(qū)分瘤內(nèi)fPSA和血清PSA。隨后，給予主體前藥。僅通過在前列腺癌細(xì)胞中或附近的酶，將前藥轉(zhuǎn)化成其活性形式。選擇性是通過抗-fPSA抗體的特異性以及通過推遲前藥給予直至在前列腺癌和正常組織的酶水平之間形成較大差異得以實(shí)現(xiàn)。還可以使用編碼前藥活化酶的基因靶向前列腺癌細(xì)胞。這種方法被稱為病毒導(dǎo)向酶前藥療法(VDEPT)或更通常地稱為GDEPT(基因?qū)蛎盖八幆煼?，并且其在實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)中已得到了較好的結(jié)果。導(dǎo)向酶前藥療法的其他版本包括PDEPT(聚合物-導(dǎo)向酶前藥療法)、LEAPT(凝集素-導(dǎo)向酶活化前藥療法)和CDEPT(梭菌-導(dǎo)向酶前藥療法)。適于在本發(fā)明中使用的酶/前藥/活性藥物組合的非限制性例子參見例如Bagshawe等，CurrentOpinionsinImmunology,1999,11:579-583；Wilman,“ProdrugsinCancerTherapy”,BiochemicalSocietyTransactions,14:375-382,615thMeeting,Belfast,1986；Stella等，“Prodrugs:AChemicalApproachToTargetedDrugDelivery”,in“DirectedDrugDelivery”,Borchardtetal.,(Eds),pp.247-267(HumanaPress,1985)。酶/前藥/活性抗癌藥物組合的非限制性例子參見例如Rooseboom等，Pharmacol.Reviews,2004,56:53-102。前藥活化酶的例子包括但不限于硝基還原酶、細(xì)胞色素P450、嘌呤-核苷磷酸化酶、胸腺嘧啶激酶、堿性磷酸酶、β-葡糖醛酸酶、羧肽酶、青霉素酰化酶、β-內(nèi)酰胺酶、胞嘧啶脫氨酶和甲硫氨酸γ-裂解酶。能夠通過由前藥活化酶將前藥在體內(nèi)活化形成抗癌藥的例子包括但不限于5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基-氨基-2-硝基-苯甲酰胺、異磷酰胺氮芥、磷酰胺氮芥、2-氟腺嘌呤、6-甲基嘌呤、更昔洛韋-三磷酸核苷酸、依托泊苷、絲裂霉素C、對(duì)-[N,N-雙(2-氯乙基)氨基]苯酚(POM)、多柔比星、惡唑烷酮、9-氨基喜樹堿、芥子、甲氨蝶呤、苯甲酸芥子、阿霉素、柔紅霉素、洋紅霉素、博來霉素、埃斯培拉霉素、美法侖、巖沙?？舅?、4-去乙酰長(zhǎng)春堿-3-羧酸酰肼、苯二胺芥子、4'-羧基鄰苯二甲酸基(1,2-環(huán)己烷-二胺)鉑、紫杉醇、5-氟尿嘧啶、甲基硒醇和硫代碳酰二氟化物(carbonothionicdifluoride)。在某些實(shí)施方式中，治療(例如抗癌)劑包括一種或多種抗-fPSA抗體和抗血管生成劑的偶聯(lián)物。適于在本發(fā)明中使用的抗血管生成劑包括阻斷、抑制、減緩或降低血管生成過程，或者由先前存在的血管發(fā)展成新血管形式的過程的任意分子、化合物或因子。這種分子、化合物或因子能夠通過阻斷、抑制、減緩或降低血管生成中涉及的任意步驟來阻止血管生成，包括(但不限于)步驟(1)起源血管膜的溶解，(2)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和增殖和(3)由遷移細(xì)胞形成新的血管?？寡苌蓜┑睦影ǖ幌抻谪惙慰谷麃砦舨純?nèi)皮抑素、沙利度胺、EMD121974(西侖吉肽)、TNP-470、角鯊胺、考布他汀A4、干擾素-α、抗-VEGF抗體、SU5416、SU6668、PTK787/2K22584、Marimistal、AG3340、COL-3、新伐司他和BMS-275291。在一些實(shí)施方式中，治療劑包括一種或多種抗-fPSA抗體和抗-雄激素療法的偶聯(lián)物，如雄激素受體(“AR”)拮抗劑。在本發(fā)明的這些和其他實(shí)施方式中使用的AR拮抗劑包括小分子拮抗劑(例如RU58642、LG120907、LG105、RD162、MDV3100、BMS-641988、CH5137291、阿徹瑞克酸(ataricacid)、N-丁基苯磺酰胺)、甾體化合物(例如醋酸環(huán)丙孕酮)、非甾體化合物(例如羥基氟他胺、比卡魯胺、尼魯米特)和肽拮抗劑。在本申請(qǐng)的實(shí)施方式中使用的其他抗雄激素療法包括TAK700、ARN-509、卡博替尼、伊匹單抗、庫(kù)司替森、BPX-101、阿爾法萊丁(alpharadin)、德尼單抗和Protsvac-VF。在本發(fā)明的特定實(shí)施方式中使用的其他前列腺癌治療劑包括鐳-223氯化物、卡博替尼、抗-OX40抗體和比卡魯胺(康士德)。給藥可以根據(jù)任意適宜的途徑和方案給予根據(jù)本發(fā)明的fPSA單克隆抗體和/或抗體多肽以及本發(fā)明的藥物組合物。在一些實(shí)施方式中，途徑或方案是與積極的治療益處相關(guān)的。在一些實(shí)施方式中，精確的給藥量在不同主體之間可以不同，這取決于在醫(yī)療領(lǐng)域公知的一個(gè)或多個(gè)因素。這些因素可以包括例如主體的人種、年齡、一般狀況，所給予的特定組合、其給藥方式，其活化方式，前列腺癌的嚴(yán)重程度；所使用的具體的fPSA抗體的活性；所給予的具體的藥物組合物；給藥后組合物的半衰期；主體的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食；給藥時(shí)間、給藥途徑和所使用的具體化合物的排泄速率；治療持續(xù)時(shí)間；與所使用的具體化合物組合或同時(shí)使用的藥物等等中的一個(gè)或多個(gè)?？梢詫⑺幬锝M合物制成劑量單位形式以便于給藥和使劑量的統(tǒng)一。然而，應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明組合物的每日總使用量將由主治醫(yī)師在合理的醫(yī)學(xué)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)確定。可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的任意途徑給予本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，可以通過口服(PO)、靜脈(IV)、肌肉內(nèi)(IM)、動(dòng)脈內(nèi)、髓內(nèi)、鞘內(nèi)、皮下(SQ)、心室內(nèi)、透皮、皮間、皮內(nèi)、直腸(PR)、陰道、腹腔(IP)、胃內(nèi)(IG)、局部(例如使用粉劑、軟膏、乳膏、凝膠、洗劑和/或滴劑)、粘膜、鼻內(nèi)、口腔、腸內(nèi)、玻璃體內(nèi)、舌下；通過氣管內(nèi)滴入、支氣管內(nèi)滴入和/或吸入；以口腔噴霧、鼻內(nèi)噴霧和/或氣霧劑、和/或通過門靜脈導(dǎo)管給予本發(fā)明的組合物。在具體實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的fPSA抗體和/或其藥物組合物可以靜脈給予，例如通過靜脈輸注。在具體實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的fPSA抗體和/或其藥物組合物可以通過肌肉注射給予。在具體實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的fPSA抗體和/或其藥物組合物可以通過前列腺內(nèi)注射給予。在具體實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的fPSA抗體和/或其藥物組合物可以通過皮下注射給予。在具體實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的fPSA抗體和/或其藥物組合物可以通過門靜脈導(dǎo)管給予。然而，本發(fā)明通過考慮藥物遞送科學(xué)中可能益處的任意適宜途徑涵蓋根據(jù)本發(fā)明的fPSA抗體和/或其藥物組合物的遞送。在某些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的fPSA抗體和/或其藥物組合物可以以足以遞送約0.001mg/kg至約100mg/kg、約0.01mg/kg至約50mg/kg、約0.1mg/kg至約40mg/kg、約0.5mg/kg至約30mg/kg、約0.01mg/kg至約10mg/kg、約0.1mg/kg至約10mg/kg、約1mg/kg至約25mg/kg的主體體重每天的劑量水平給予以獲得所需的治療效果?？梢砸悦咳杖我陨?、每日三次、每日兩次、每日益處、隔日一次、每三日一次、每周一次、每?jī)芍芤淮巍⒚咳芤淮?、每四周一次、每?jī)蓚€(gè)月一次、每六個(gè)月一次或者每十二個(gè)月一次遞送所需的劑量。在某些實(shí)施方式中，可以使用多次給藥遞送所需的劑量(例如兩次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次、十次、十一次、十二次、十三次、十四次或更多次給藥)。預(yù)防性應(yīng)用在一些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的fPSA抗體可以用于預(yù)防性應(yīng)用。在一些實(shí)施方式中，預(yù)防性應(yīng)用涉及在易感和/或已顯示出前列腺癌癥狀的個(gè)體中預(yù)防、抑制其進(jìn)展和/或推遲前列腺癌和/或其他與fPSA相關(guān)的癥狀發(fā)病的系統(tǒng)和方法。聯(lián)用療法應(yīng)理解，可以將根據(jù)本發(fā)明的fPSA抗體及其治療活性偶聯(lián)物和/或其藥物組合物引入聯(lián)合療法中以輔助診斷和/或治療?！奥?lián)合”并不旨在暗示所述藥劑必需同時(shí)給予和/或制成共同遞送的藥劑，盡管這些遞送方法在本發(fā)明的范圍內(nèi)。組合物可以同時(shí)、先于或后于一種或多種所需的療法或醫(yī)療程序給予。應(yīng)理解，可以將組合使用的治療活性劑在單一組合物中共同給予或者在不同組合物中分別給予。在通常情況下，各藥劑將以針對(duì)該藥劑確定的劑量和/或時(shí)間方案給予。在特定實(shí)施方式中，本申請(qǐng)公開的抗fPSA特異性抗體在抗癌劑或抗-雄激素療法之前、之后或同時(shí)給予?？?雄激素療法包括手術(shù)(例如去勢(shì))、化療、放療和雄激素受體(“AR”)拮抗劑。在本發(fā)明的這些和其他實(shí)施方式中使用的AR拮抗劑包括小分子拮抗劑(例如RU58642、LG120907、LG105、RD162、MDV3100、BMS-641988、CH5137291、阿徹瑞克酸(ataricacid)、N-丁基苯磺酰胺)、甾體化合物(例如醋酸環(huán)丙孕酮)、非甾體化合物(例如羥基氟他胺、比卡魯胺、尼魯米特)、肽拮抗劑及其組合組成的組。在本發(fā)明的實(shí)施方式中使用的其他抗雄激素療法包括但不限于TAK700、ARN-509(阿比特龍)、卡博替尼、伊匹單抗、庫(kù)司替森、BPX-101、阿爾法萊丁(alpharadin)、德尼單抗、Protsvac-VF。在本發(fā)明的特定實(shí)施方式中使用的其他前列腺癌治療劑包括鐳-223氯化物、卡博替尼、抗-OX40抗體和比卡魯胺(康士德)。在聯(lián)用方案中使用的特定療法的組合(例如療法或程序)將考慮所需療法和/或程序的相容性以及將達(dá)到的所需的治療效果。還應(yīng)理解，可以在聯(lián)用療法(例如聯(lián)用化療療法)中使用的本申請(qǐng)公開的抗-fPSA抗體的藥物組合物是可以同時(shí)、先于或后于一種或多種其他所需的療法和/或化療程序給予的藥物組合物?？梢詫⒖?fPSA抗體或其藥學(xué)上可接受的組合物與化療劑聯(lián)合給予以治療原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性前列腺癌。在一些實(shí)施方式中，活性成分是化療劑例如但不限于阿霉素、地塞米松、長(zhǎng)春新堿、環(huán)磷酰胺、氟尿嘧啶、托泊替康、紫杉醇、干擾素、鉑衍生物、紫杉烷(例如紫杉醇)、長(zhǎng)春花生物堿(例如長(zhǎng)春堿)、蒽環(huán)類抗生素(例如多柔比星)、表鬼臼毒素(例如依托泊苷)、順鉑、甲氨蝶呤、放線菌素D、放線菌素D、多拉司他汀10、秋水仙堿、依米丁、三甲曲沙、氯苯氨啶、環(huán)孢菌素、柔紅霉素、替尼泊苷、兩性霉素、烷化劑(例如苯丁酸氮芥)、5-氟尿嘧啶、喜樹堿、順鉑、甲硝唑、伊馬替尼、格列衛(wèi)TM、舒尼替尼和索及其組合。在某些實(shí)施方式中，將抗-fPSA抗體、及其偶聯(lián)物或其藥學(xué)上可接受的組合物與選自下述一種或多種的抗增殖或化療劑聯(lián)合給予：阿巴瑞克、阿地白介素、阿地白介素、阿侖單抗、阿利維A酸、別嘌呤醇、六甲蜜胺、氨磷汀、阿那曲唑、三氧化二砷、天冬酰胺酶、阿扎胞苷、活卡介苗、貝伐單抗(Bevacuzimab)、阿瓦斯丁、氟尿嘧啶、貝沙羅汀、博來霉素、硼替佐米、白消安、卡普睪酮、卡培他濱、喜樹堿、卡鉑、卡莫司汀、塞來昔布、西妥昔單抗、苯丁酸氮芥、順鉑、克拉屈濱、氯苯拉濱、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、更生霉素、阿法達(dá)貝泊汀、柔紅霉素、地尼白介素、右雷佐生、多西他賽、多柔比星(中性)、鹽酸多柔比星、屈他雄酮丙酸酯、表柔比星、促紅細(xì)胞生成素α、埃羅替尼、雌莫司汀、磷酸依托泊苷、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟尿苷氟達(dá)拉濱、氟維司群、吉非替尼、吉西他濱、吉姆單抗、醋酸戈舍瑞林、醋酸組氨瑞林、羥基脲、替伊莫單抗、伊達(dá)比星、異環(huán)磷酰胺、甲磺酸伊馬替尼、干擾素α-2a、干擾素α-2b、伊立替康、來那度胺、來曲唑、亞葉酸鈣、醋酸亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、醋酸甲地孕酮、美法侖、巰基嘌呤、6-MP、美司鈉、甲氨蝶呤、甲氧沙林、絲裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、諾龍、奈拉濱、諾非單抗、奧普瑞白介素、奧沙利鉑、紫杉醇、帕利夫明、帕米膦酸、培加酶、培門冬酶、培非格司亭、培美曲塞二鈉、噴司他丁、哌泊溴烷、普卡霉素、卟吩姆鈉、甲基芐肼、奎納克林、拉布立酶、利妥昔單抗、沙格司亭、索拉非尼、鏈脲佐菌素、馬來酸舒尼替尼、滑石、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、VM-26、睪內(nèi)酯、硫鳥嘌呤、6-TG、塞替派、托泊替康、托瑞米芬、托西莫單抗、曲妥珠單抗、維甲酸、ATRA、尿嘧啶氮芥、戊柔比星、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春瑞濱、唑來膦酸或唑來膦酸。在聯(lián)用方案中使用的特定療法(例如多柔比星、ARN-509和針對(duì)fPSA的治療性抗體等)的組合通常考慮所需治療和/或程序的相容性和將達(dá)到的所需的治療效應(yīng)。還將理解，所使用的療法和/或化療針對(duì)相同病癥可以達(dá)到所需效果(例如，可以將本發(fā)明的抗原與另一種化療劑同時(shí)給予)，或者其可以達(dá)到不同效果。將理解，所使用的療法針對(duì)相同目的可以達(dá)到所需效果(例如，可以將用于治療、預(yù)防和/或推遲前列腺癌發(fā)病的fPSA特異性抗體與用于治療、預(yù)防和/或推遲前列腺癌發(fā)病的另一種藥劑同時(shí)給予)，或者其可以達(dá)到不同效果(例如對(duì)任何不良反應(yīng)進(jìn)行控制)。本發(fā)明包括將藥物組合物與可以在體內(nèi)改善其生物利用度、降低和/或改善其代謝、抑制其排泄和/或改善其體內(nèi)分布的藥劑聯(lián)合遞送。在特定實(shí)施方式中，抗-fPSA抗體與ARN-509(阿比特龍)和/或多柔比星聯(lián)合或偶聯(lián)給予。用于本發(fā)明這種實(shí)施方式的其他前列腺癌治療劑包括鐳-223氯化物、卡博替尼、抗-OX40抗體和比卡魯胺(康士德)。在一些實(shí)施方式中，藥劑在聯(lián)用時(shí)的使用水平不超過其單用時(shí)的水平。在一些實(shí)施方式中，聯(lián)用時(shí)的水平將低于其在單用時(shí)的水平。在一些實(shí)施方式中，聯(lián)用療法可能涉及給予多種導(dǎo)向單一表位(例如單一構(gòu)象的表位)的抗體。在一些實(shí)施方式中，聯(lián)用療法可能包括識(shí)別不同表位的多種抗體。試劑盒本發(fā)明提供了多種試劑盒以方便地和/或有效地實(shí)施根據(jù)本發(fā)明的方法。試劑盒通常包括根據(jù)本發(fā)明的一種或多種fPSA特異性抗體或抗體多肽(例如5A10)。在一些實(shí)施方式中，試劑盒包括用于不同目的的(例如診斷、治療和/或預(yù)防)不同fPSA特異性抗體的集合。通常地，試劑盒將包括足量的fPSA特異性抗體，以允許用戶進(jìn)行向主體多次給予和/或進(jìn)行多次實(shí)驗(yàn)。在一些實(shí)施方式中，試劑盒提供或包括一種或多種已由買方指定的fPSA特異性抗體。在某些實(shí)施方式中，在根據(jù)本發(fā)明中使用的試劑盒可以包括一種或多種對(duì)照樣品；說明書(例如用于處理樣品、用于進(jìn)行檢測(cè)、用于解讀結(jié)果、用于溶解fPSA特異性抗體、用于儲(chǔ)存fPSA特異性抗體等等)；緩沖液；和/或進(jìn)行檢測(cè)所必需的其他試劑。在某些實(shí)施方式中，試劑盒可以包括抗體盤。試劑盒的其他組分可以包括細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、組織和/或組織培養(yǎng)基。在一些實(shí)施方式中，試劑盒包括多個(gè)包含fPSA特異性抗體的單位劑量的藥物組合物?？梢蕴峁┯洃涊o助工具，例如以數(shù)字、字母和/或其他標(biāo)記和/或帶有日歷插入物的形式，在治療方案中標(biāo)明可以施用劑量的天/時(shí)間。可以在試劑盒中包括與藥物組合物形式類似或劑量不同的安慰劑劑量和/或鈣膳食補(bǔ)充劑，其劑量為每日一次。試劑盒可以包括一個(gè)或多個(gè)器皿或容器，以使得某些單獨(dú)的組分或試劑可以單獨(dú)放置。試劑盒可以包括一種用于將各容器相對(duì)密閉的密封以供商業(yè)銷售的方式，例如塑料盒，說明書、包裝材料如發(fā)泡膠等均可以被密封在其中。在一些實(shí)施方式中，試劑盒用于治療、診斷和/或預(yù)防罹患和/或?qū)η傲邢侔┮赘械闹黧w。在一些實(shí)施方式中，這種試劑盒包括(i)至少一種fPSA特異性抗體；(ii)注射器、針頭、涂抹器等，用于將至少一種fPSA特異性抗體給予主體；和(iii)使用說明書。將通過對(duì)下述實(shí)施例的考慮進(jìn)一步理解本發(fā)明的這些和其他方面，其旨在解釋本發(fā)明某些特定的實(shí)施方式，而非旨在限制由權(quán)利要求所定義的其范圍。實(shí)施例一般的細(xì)節(jié)信息所有化學(xué)藥品，除非另有說明，否則均購(gòu)自SigmaAldrich(St.Louis,MO)并且無需進(jìn)一步純化即可使用。fPSA-特異性5A10單克隆抗體購(gòu)自芬蘭的土爾庫(kù)大學(xué)并且無需進(jìn)一步純化即可使用。水以流速<1.0mL/min通過10cmchelex樹脂柱(Bio-RadLaboratories,Hercules,CA)進(jìn)行純化(在25℃時(shí)>18.2MΩ·cm，Milli-Q,Millipore,Billerica,MA)。根據(jù)此前發(fā)布的常規(guī)質(zhì)量控制程序?qū)λ袃x器進(jìn)行校正和維護(hù)。使用以89Zr作為校正因子的CapintecCRC-15R劑量校準(zhǔn)器(Capintec,Ramsey,NJ)對(duì)放射性物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)于放射性的準(zhǔn)確定量，使用針對(duì)89Zr的動(dòng)態(tài)能量窗800–1000keV(909keV發(fā)射)的經(jīng)校正的PerkinElmer(Waltham,MA)自動(dòng)Wizard2γ計(jì)數(shù)器對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品計(jì)數(shù)1min。通過使用硅膠浸漬的玻璃纖維瞬時(shí)薄層色譜(ITLC-SG)紙(PallCorp.,EastHills,NY)對(duì)89Zr-放射性標(biāo)記反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)并且在放射-TLC板閱讀器(與BioscanAutochanger1000(BioscanInc.,Washington,DC，使用Win-ScanRadio-TLC軟件，2.2版)偶聯(lián)的BioscanSystem200成像掃描儀)上進(jìn)行分析。溶劑系統(tǒng)包括在水中的二乙烯三胺五乙酸(DTPA,50mM,pH7)和磷酸鹽緩沖液(PBS)。MDV3100由在MSKCC的有機(jī)合成核心實(shí)驗(yàn)室制備，并且在DMSO中復(fù)溶無需進(jìn)一步純化。睪酮顆粒購(gòu)自美國(guó)的InnovativeRes.。實(shí)施例1：89Zr-標(biāo)記的單克隆fPSA抗體的生產(chǎn)蛋白偶聯(lián)將單克隆抗體5A10和鼠源性IgG1與去鐵胺B(DFO；Calbiochem,SpringValley,CA)偶聯(lián)并且使用89Zr-草酸鹽進(jìn)行放射性標(biāo)記以獲得89Zr-5A10，其使用來自于此前對(duì)用于免疫-PET的放射性標(biāo)記的單克隆抗體進(jìn)行研究的程序；例如Holland,J.P.等，89Zr-DFO-J591forimmunoPETofprostate-specificmembraneantigenexpressioninvivo,JNucl,Med.,2010,51(8),1293-1300，其通過引用并入本申請(qǐng)。通過放射-ITLC對(duì)標(biāo)記抗體的純度進(jìn)行評(píng)估。圖1顯示了粗品(紅色)和純化的(藍(lán)色)89Zr-5A10的典型放射-ITLC層析圖。洗脫液為50mMDTPA,pH7。89Zr-5A10仍保留在基線(Rf＝0.0)，雜質(zhì)與溶劑前沿一起移動(dòng)(Rf＝1.0)。DFO與蛋白的偶聯(lián)按照如下所示將DFO與蛋白偶聯(lián)：將5A10加入離心管(3mg/mL,1mL)并使用1.0M和0.1M的Na2CO3(aq.)的分裝物將pH調(diào)整至9.5-10.0。然后使用自動(dòng)移液管加入4當(dāng)量的[Fe(N-succDFO-TFP)]并輕柔地混合溶液。不加以攪拌在室溫下使反應(yīng)進(jìn)行1h，隨后通過緩慢加入<10μL0.25MH2SO4(aq.)分裝物將pH調(diào)整至3.9-4.2。然后加入相對(duì)于[Fe(N-succDFO-TFP)]過量>10-倍的乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA2-.2Na+(aq.)，0.0674moldm-3在經(jīng)過去離子水處理的chelex100樹脂中)。將反應(yīng)物在38℃的水浴中孵育1h，在這段時(shí)間中溶液由澄清的黃色變?yōu)闊o色。通過分子排阻色譜(葡聚糖凝膠G-25M，PD-10柱，>30kDa,GEHealthcare；死體積＝2.5mL，使用200μL無菌鹽水洗脫以獲得總體積為1.8mL的分離蛋白)對(duì)DFO偶聯(lián)的5A10進(jìn)行純化。使用相同的程序制備DFO-鼠源性IgG。放射性標(biāo)記根據(jù)此前報(bào)道的方法，在EBCOTR19/9可變電子束能量回旋加速器(EbcoIndustriesInc.,Richmond,BritishColumbia,Canada)上通過89Y(p,n)89Zr嬗變反應(yīng)生產(chǎn)鋯-89(Zr-89)。在高放射性核素中分離89Zr-草酸鹽并且其放射化學(xué)純度(RCP)>99.9％，其有效的比活度為195–497MBq/μg(5.27–13.31mCi/μg)。分別通過89Zr-草酸鹽與DFO偶聯(lián)的5A10和IgG的絡(luò)合反應(yīng)制備89Zr-5A10和89Zr-IgG。根據(jù)此前報(bào)道的使用89Zr標(biāo)記單克隆抗體的方法進(jìn)行常規(guī)的放射性標(biāo)記反應(yīng)。用于生產(chǎn)89Zr-5A10的常規(guī)條件作為例子給出。使用相同的方法生產(chǎn)89Zr-IgG。簡(jiǎn)言之，使用1.0MNa2CO3(aq.)將在1.0M草酸(250μL)中的89Zr-草酸鹽(429MBq,[11.6mCi])調(diào)整至pH7.1-7.7。注意：酸中和釋放CO2(g)，應(yīng)注意以確保無放射性物質(zhì)從微量離心管中溢逸出。待CO2釋放停止后，加入DFO-偶聯(lián)的5A10(500μL,2.0mg/mL[1.0mg蛋白]，在無菌鹽水中)并且使用移液管吹打輕柔地將反應(yīng)物混合。在室溫下孵育反應(yīng)物1-2h并且通過ITLC(DTPA,50mM,pH7)監(jiān)測(cè)隨著時(shí)間推移的絡(luò)合進(jìn)程。2h后，得到放射性標(biāo)記的粗品并且RCP通常>80-90％。通過使用旋轉(zhuǎn)-柱離心(總體積4mL，顆粒截留>30kDa，AmiconUltra-4,Millipore,Billerica,MA；使用4×3mL無菌鹽水洗滌)對(duì)89Zr-5A10進(jìn)行純化。通過ITLC和分子排阻色譜對(duì)最終的89Zr-5A10(形式：pH5.5–6.0；<500μL；無菌鹽水)的放射化學(xué)純度(RCP)進(jìn)行檢測(cè)。在ITLC實(shí)驗(yàn)中，89Zr-5A10、89Zr-IgG和89Zr-DFO仍保留在基線(Rf＝0.0)，而89Zr4+(aq.)離子和復(fù)合的89Zr-DTPA洗脫至溶劑前沿(Rf＝1.0)。經(jīng)純化的89Zr-5A10最終的放射化學(xué)收率通常>70％并且產(chǎn)物在無菌鹽水中配制，其RCP>99％(n＝5)，并且蛋白比活度為195.0±8.0MBq/mg(5.27±0.2mCi/mg)。圖1顯示了粗品和經(jīng)純化(配制的)89Zr-5A10的典型放射-ITLC層析圖。螯合物的數(shù)量根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法通過放射性同位素稀釋檢測(cè)測(cè)定與5A10或IgG偶聯(lián)的可接近的DFO螯合物的數(shù)量(例如Holland,J.P.等，MeasuringthepharmacokineticeffectsofanovelHsp90inhibitoronHER2/neuexpressioninmiceusing89Zr-DFO-trastuzumab,PLoSONE,2010,5(1),e8859；Anderson,C.J.等，Preparation,biodistributionanddosimetryofcopper-64-labeledanti-colorectalcarcinomamonoclonalantibodyfragments1A3-F(ab')2,J.Nucl.Med.,1995,36(5),850-858)。將來自母液的89Zr-氯化物分裝物(5μL,370kBq[10μCi],pH7.7–8.1，使用1.0MNa2CO3調(diào)節(jié)pH)加入12份含有不具有放射活性的ZrCl4(aq.)的1:2系列稀釋的溶液中(分裝量50μL；1000–0.5pmol,pH7.7–8.1)。將混合物渦旋30s，隨后加入5μL5A10的分裝物(1.36mg/mL,6.8μgmAb,0.045nmol；無菌鹽水)。將反應(yīng)物在室溫下孵育2h，隨后使用DTPA(20μL,50mM,pH7)淬滅。通過對(duì)照實(shí)驗(yàn)確證89Zr與DFO偶聯(lián)的蛋白在<2h內(nèi)完全絡(luò)合。通過使ITLC試紙(DTPA,50mM)顯色以及計(jì)數(shù)基線和溶劑前沿的活度評(píng)估絡(luò)合的程度。將89Zr-放射性標(biāo)記蛋白的分?jǐn)?shù)(Ab)對(duì)不具有放射活性的ZrCl4的加入量作圖。通過測(cè)定僅50％的蛋白被標(biāo)記時(shí)ZrCl4的濃度，乘以系數(shù)2，再除以反應(yīng)中存在蛋白的摩爾數(shù)計(jì)算螯合物的數(shù)量。同位素稀釋檢測(cè)的結(jié)果顯示，分別對(duì)于5A10和IgG1而言，每個(gè)蛋白分子平均有2-3個(gè)可接近的螯合物。89Zr-標(biāo)記的5A10的親和性檢測(cè)為確定89Zr-5A10對(duì)fPSA的親和性，進(jìn)行了競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合檢測(cè)。通過在使用固化的fPSA包被的孔中將89Zr-5A10與可變濃度的未經(jīng)標(biāo)記的5A10孵育測(cè)定了89Zr-5A10針對(duì)fPSA的相對(duì)親和性。使用低熒光Maxisorp板條(Nunc,Roskilde,Denmark)將捕獲mAb通過物理吸附固化于酶標(biāo)板上。在100L含0.2mol/LNaH2PO4緩沖劑的緩沖液中使用1μgmAbH117將孔在35℃下包被過夜。使用DELFIA洗滌溶液洗滌已包被的孔兩次，然后使用300μL含二乙烯三胺五乙酸(DTPA)處理的BSA(1g/L)、山梨醇(60g/L)、GermallII(1g/L)和50mmolNaH2PO4的溶液將其在室溫(RT)下飽和3h。飽和后，將孔抽吸、干燥并于4℃下在含干燥劑的密封塑料袋中保存直至使用。使用新制的89Zr-5A10樣品，通過將fPSA(25μL,47.7ng/mL)在100μLDELFIA檢測(cè)緩沖液中的溶液加入預(yù)先制備的板的各孔中進(jìn)行親和性檢測(cè)。在室溫下孵育1h后，將溶液吸出，并使用檢測(cè)緩沖液洗滌孔兩次。通過加入200μL含20μg89Zr-5A10以及0.0、0.002、0.02、0.2、0.5、1、2、4、6、8或10μg未經(jīng)標(biāo)記的5A10的檢測(cè)緩沖液分裝物啟動(dòng)結(jié)合檢測(cè)。所有反應(yīng)物均設(shè)置雙復(fù)管。緩慢振搖下將反應(yīng)物孵育2h，到時(shí)間后將孔抽吸并使用DELFIA洗滌溶液洗滌4次。在NaI(Tl)-孔計(jì)數(shù)器(PerkinElmer2480自動(dòng)γ計(jì)數(shù)器)中測(cè)定結(jié)合活性。將孵育后孔中保留的活性作為89Zr-5A10與fPSA的特異性結(jié)合。將實(shí)驗(yàn)值對(duì)理想(理論)值作圖，基于DFO和89Zr對(duì)5A10的偶聯(lián)不會(huì)改變mAb對(duì)fPSA親和性的假設(shè)計(jì)算。使用線性回歸確定線性(y＝x)的偏離，并且顯示了來自一個(gè)89Zr-5A10制備物的代表性數(shù)據(jù)。檢測(cè)重復(fù)進(jìn)行兩次，使用兩個(gè)獨(dú)立濃度范圍的5A10(總計(jì)n＝4)。圖2中的結(jié)果表明89Zr-DFO與5A10的生物偶聯(lián)不會(huì)導(dǎo)致其對(duì)純化的fPSA的親和性喪失，并且89Zr-5A10保持了對(duì)fPSA的特異性。實(shí)施例2：89Zr-5A10在體內(nèi)的結(jié)合通過將89Zr-5A10給予皮下(s.c.)接種了LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠進(jìn)行體內(nèi)研究，根據(jù)所描述的LNCaP-AR是來源于過表達(dá)野生型雄激素受體的親代前列腺癌細(xì)胞的PSA-陽性的人前列腺癌模型(Chen,C.D.等，MolecularDeterminantsofResistancetoAndrogenTherapy,Nat.Med.,2004,10:33-39)。所有的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均依據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理和使用委員會(huì)(IACUC)的指導(dǎo)原則和《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理和使用指南》進(jìn)行。雄性CB-17SCID小鼠(6-8周齡)來自TaconicFarmsInc.(Hudson,NY)，通過皮下(s.c.)注射含1.0×106個(gè)細(xì)胞的200μL細(xì)胞懸液將LNCaP-AR、22Rv1和PC3腫瘤接種至右側(cè)翼，所述細(xì)胞懸液為培養(yǎng)基與復(fù)溶的基底膜(BDMatrigelTM,CollaborativeBiomedicalProductsInc.,Bedford,MA)1:1v/v的混合物。經(jīng)過3-7周后發(fā)展成可觸及的腫瘤(50–250mm3)。在異氟烷麻醉?xiàng)l件下采樣公知的方案進(jìn)行手術(shù)去勢(shì)和顆粒植入。根據(jù)此前已報(bào)道的方法通過外部游標(biāo)卡尺測(cè)量估計(jì)腫瘤的體積(V/mm3)(Holland,J.P.等，MeasuringthepharmacokineticeffectsofanovelHsp90inhibitoronHER2/neuexpressioninmiceusing89Zr-DFO-trastuzumab,PLoSONE,2010,5(1),e8859)。在注射后(p.i.)的多個(gè)時(shí)間點(diǎn)收集組織以確定放射性示蹤劑生物分布的動(dòng)力學(xué)(圖3a)。進(jìn)行生物分布研究以評(píng)估在人前列腺癌異種移植瘤模型中89Zr-5A10的攝取情況。使用熱燈將小鼠逐漸溫暖5min，隨后通過尾靜脈注射(t＝0h)靜脈(i.v.)給予89Zr-5A10(1.11–1.85MBq,[30–50μCi]，5.7–9.5μg蛋白，在200μL無菌注射用鹽水中)。在注射后1、4、12、24、48、72、96和120h通過CO2(g)窒息將動(dòng)物(n＝4–5，每組)安樂死并且取出16個(gè)組織(包括腫瘤)，在水中沖洗，空氣干燥5min，稱重并且在γ計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)，以測(cè)定89Zr-放射活性的累積情況。測(cè)定注射至各只動(dòng)物的89Zr-5A10制劑的質(zhì)量并且通過與已知放射活性和質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)注射器比較用于確定計(jì)數(shù)的總數(shù)(每分鐘的計(jì)數(shù)，[c.p.m.])。對(duì)計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)進(jìn)行背景-和衰變-校正并且各樣品測(cè)定的組織攝取以每克注射劑量的百分率作為單位(％ID/g)通過歸一化至注射的放射活性的總量計(jì)算。在注射后約24小時(shí)觀察到腫瘤結(jié)合活性的峰值(19.59±4.9％ID/g)，并且除了少數(shù)例外，在宿主組織中幾乎沒有觀察到89Zr-5A10的累積(圖3a；圖4)。如圖4所示，給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10，并且在注射后的所示時(shí)間點(diǎn)，處死動(dòng)物以及收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均值％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差報(bào)告。表1顯示了在右肩部攜帶皮下LNCaP-AR腫瘤的完好雄性SCID小鼠中i.v.給藥后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)89Zr-5A10(n＝4)的離體生物分布數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(S.D.)表示。腫瘤與組織比值和組織與肌肉比值的誤差根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)偏差的幾何平均數(shù)計(jì)算。表1表2顯示了在注射89Zr-5A10的攜帶LNCaP-AR腫瘤的完好雄性小鼠中通過ELISA對(duì)腫瘤組織中PSA的表達(dá)水平的分析。使用89Zr-5A10對(duì)小鼠進(jìn)行注射，并且在注射后的規(guī)定時(shí)間點(diǎn)將其處死用于PSA分析。手術(shù)切取腫瘤組織。使用PSA-導(dǎo)向的ELISA確定fPSA和總PSA(“tPSA”)，并且將所述值歸一化至總蛋白濃度。fPSA的濃度以平均ng/ml(a)報(bào)告、總PSA(“tPSA”)濃度以ng/mL(b)報(bào)告和總蛋白濃度以ng/mg(c)報(bào)告。按照如下所示對(duì)血清和腫瘤組織中的PSA進(jìn)行ELISA檢測(cè)。根據(jù)生產(chǎn)廠商的推薦使用雙標(biāo)記免疫熒光檢測(cè)(DELFIAProstatusTMPSA游離/總PSA；Perkin-ElmerLifeSciences)對(duì)fPSA和tPSA進(jìn)行檢測(cè)。該檢測(cè)以等摩爾形式測(cè)定fPSA和復(fù)合的PSA(cPSA)8，以及PSA-ACT針對(duì)fPSA的交叉反應(yīng)性<0.2％9。針對(duì)tPSA的檢測(cè)下限為0.05μg/L(CV＝5.0％，在2.32μg/L時(shí))和針對(duì)fPSA為0.04μg/L(CV＝5.9％，在0.25μg/L時(shí))。使用Perkin-ElmerLifeSciences的1235自動(dòng)免疫檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。通過從tPSA中扣除fPSA計(jì)算cPSA的濃度。表2PET研究中顯示的在腫瘤中的對(duì)比區(qū)域支持生物分布數(shù)據(jù)(圖3b)。圖3b提供了攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠的代表性的橫截(Trans.)和冠狀PET切片，其顯示了89Zr-5A10在腫瘤(T)的定位和小鼠肝臟(L)的攝取情況。PET成像實(shí)驗(yàn)在微PET焦點(diǎn)120掃描儀(ConcordeMicrosystems)上進(jìn)行。在重復(fù)研究中(n＝4)，通過i.v.尾靜脈注射給予小鼠89Zr-5A10的制劑(10.4-12.6MBq,[280–340μCi],53.1–64.5μg蛋白，在200μL無菌注射用鹽水中)。在記錄PET圖像前約5min，通過吸入1–2％異氟烷(BaxterHealthcare,Deerfield,IL)/氧氣的混合物將小鼠麻醉并將其置于掃描儀的床上。在注射后1-120h之間的不同時(shí)間點(diǎn)記錄PET圖像。在10至30min之間使用350–750keV的γ-射線能量窗以及6ns的符合時(shí)間窗(coincidencetimingwindow)采集列表模式數(shù)據(jù)。對(duì)于所有的靜態(tài)圖像而言，調(diào)整掃描時(shí)間以確保最少記錄2000萬個(gè)符合事件。通過傅里葉重新分級(jí)將數(shù)據(jù)分選成2-維直方圖，并且通過濾波反投影法(FBP)將橫截的圖像重建成128×128×63(0.72×0.72×1.3mm)的矩陣。針對(duì)89Zr重建的空間分辨率為在視場(chǎng)(FOV)中心的1.9mm半高全寬(FWHM)。對(duì)圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化以針對(duì)PET應(yīng)答的非均一性、死時(shí)間的計(jì)數(shù)損失、正電子分支比和注射時(shí)間的物理衰變進(jìn)行校正，但不使用衰變、散射或部分體積平均校正。使用針對(duì)小鼠的經(jīng)驗(yàn)確定系統(tǒng)校正系數(shù)(單位為[mCi/mL]/[cps/立體像素])將立體像素計(jì)數(shù)率轉(zhuǎn)化為活性濃度。然后將所得到的圖像數(shù)據(jù)歸一化到所給予的活性以將圖像參數(shù)化，并用％ID/g表示。使用手工繪制的2-維目的區(qū)域(ROI)或3-維目的體積(VOI)以確定在不同組織中的最大和平均％ID/g(以注射時(shí)間校正衰變)。使用ASIProVMTM軟件(ConcordeMicrosystems)對(duì)圖像進(jìn)行分析。使用100倍過量的未經(jīng)標(biāo)記的5A10競(jìng)爭(zhēng)89Zr-5A10的攝取，確證了89Zr-5A10和LNCaP-AR之間生物相互作用的特異性(圖3c、圖5、表3和表4)。同時(shí)給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10和過量的5A10(1mg/小鼠)，并且在注射后24h，將其處死并收集用于生物分布研究的血液和組織。圖3c中提供的生物分布數(shù)據(jù)顯示了在完好雄性小鼠中的多個(gè)s.c.PCa模型和若干處理?xiàng)l件下的腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10。通過共同注射過量的未經(jīng)標(biāo)記的5A10(1mg未經(jīng)標(biāo)記的mAb)完全競(jìng)爭(zhēng)了89Zr-5A10向LNCaP-AR的定位。非特異性放射性示蹤劑89Zr-IgG未定位于LNCaP-AR，并且89Zr-5A10未定位于PC3，其為不表達(dá)AR-和PSA-的前列腺癌模型。觀察到89Zr-5A10居間地定位于CWR22Rv1異種移植瘤，這與同LNCaP-AR相比在該模型中PSA具有較低的基線表達(dá)一致。*表示與所有條件下比較P<0.01。"表示與PC3比較P<0.01。表3顯示了在攜帶LNCaP-AR腫瘤的完整小鼠中，共同注射過量的未經(jīng)標(biāo)記的5A10后，89Zr-5A10攝取的生物分布數(shù)據(jù)。其為在右肩部攜帶皮下LNCaP-AR腫瘤的完好雄性SCID小鼠中，共同注射1mg5A10后，在i.v.給藥后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)針對(duì)89Zr-5A10(n＝4)的離體生物分布數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(S.D.)表示。針對(duì)所述比值的誤差以標(biāo)準(zhǔn)偏差的幾何平均數(shù)計(jì)算。表3表4中包括在攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠中，共同注射給予89Zr-5A10和過量的未經(jīng)標(biāo)記的5A10，對(duì)腫瘤中PSA的檢測(cè)結(jié)果。注射給予小鼠89Zr-5A10和過量的未經(jīng)標(biāo)記的5A10(1mg)，并且在注射后的規(guī)定時(shí)間點(diǎn)將其處死用于PSA分析。手術(shù)切取腫瘤組織。使用PSA導(dǎo)向的ELISA(如上文所示)確定fPSA和tPSA，并將所述值歸一化至總蛋白濃度。afPSA的濃度以ng/ml報(bào)告，b總PSA濃度以ng/mL報(bào)告，c總蛋白濃度以ng/mg報(bào)告。縮寫：fPSA，fPSA；tPSA，總PSA。表4而且，在24hp.i.后，幾乎沒有非特異性放射性示蹤劑89Zr-標(biāo)記的小鼠IgG摻入LNCaP-AR中(圖3c、圖6、表5和表6)。圖6顯示了注射89Zr-5A10的攜帶LNCaP-AR、PC3或CWR22Rv1異種移植瘤的完好雄性小鼠的生物分布圖。給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10，并且在注射24h后，將其處死收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差報(bào)告。表5顯示了在攜帶LNCaP-AR腫瘤的完好小鼠中針對(duì)89Zr-IgG攝取的生物分布數(shù)據(jù)。在右肩部攜帶皮下LNCaP-AR腫瘤的完好雄性SCID小鼠中在i.v.給藥后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)89Zr-IgG(n＝4)的離體生物分布數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(S.D.)表示。所述比值的誤差以標(biāo)準(zhǔn)偏差的幾何平均數(shù)計(jì)算。表5表6顯示了在攜帶LNCaP-AR腫瘤的完好雄性小鼠中，注射89Zr-IgG后，通過ELISA對(duì)腫瘤PSA表達(dá)水平的分析。注射給予小鼠89Zr-IgG，并且在注射后的規(guī)定時(shí)間點(diǎn)，將其處死用于PSA分析。手術(shù)切取腫瘤組織。使用PSA導(dǎo)向的ELISA(如上文所示)確定fPSA和tPSA，并且在瘤內(nèi)PSA的情況下，將所述值歸一化至總蛋白濃度。afPSA的濃度以ng/ml報(bào)告，b總PSA濃度以ng/mL報(bào)告，c總蛋白濃度以ng/mg報(bào)告?？s寫：fPSA，fPSA；tPSA，總PSA。表6小鼠注釋fPSAatPSAbf/tPSA比值總蛋白cfPSA/t蛋白tPSA/t蛋白14h132.6180.274％5.623.732.2271.294.076％4.814.719.43114.6155.574％6.717.123.2461.478.578％5.411.314.5512h174.2250.470％6.925.136.1659.379.175％4.712.616.87161.7232.270％6.325.636.88259.8369.570％7.136.652.1924h105.2140.075％6.216.922.510147.4214.969％6.921.431.311141.3199.371％6.123.232.712115.9155.275％5.521.228.41348h55.575.873％5.99.412.81473.187.084％6.311.513.71539.447.483％3.710.712.81640.953.177％4.59.111.81772h110.9152.973％6.217.924.618114.5145.279％6.717.221.819203.3277.873％7.228.138.42093.5124.875％7.213.017.32196h22.630.774％3.17.410.022116.4147.779％7.415.820.02395.8123.478％6.614.518.724189.4251.875％6.828.037.225120h101.9135.375％6.615.320.42687.0112.577％5.914.819.127214.4304.470％7.528.740.728132.0179.474％6.221.228.729未注射217.9303.872％7.728.239.330未注射157.2215.373％7.122.030.131未注射183.0239.776％6.030.539.932未注射49.763.079％4.311.614.7與預(yù)期結(jié)果一致，PC3異種移植瘤，其為AR-和PSA-陰性的人PCa模型，在24hp.i.后，幾乎未顯示出對(duì)89Zr-5A10的親和力(圖3c、圖7和表7)。在圖7中，給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10，并且在注射后24h將其處死并收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g+一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式報(bào)告。表7顯示了在攜帶PC3腫瘤的完好雄性小鼠中89Zr-5A10攝取的生物分布數(shù)據(jù)。其為在具有皮下腫瘤的完好雄性小鼠中(n＝4)89Zr-5A10攝取的離體生物分布數(shù)據(jù)。在i.v.給藥后24h采集數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(S.D.)表示。所述比值的誤差以標(biāo)準(zhǔn)偏差的幾何平均數(shù)計(jì)算。表7最后，測(cè)定了s.c.CWR22Rv1異種移植瘤對(duì)89Zr-5A10的親和力，其為另一種AR-和PSA-陽性的PCa模型(圖3c、圖7和表8)。表8提供了在攜帶CWR22Rv1腫瘤的完好雄性小鼠中89Zr-5A10攝取的生物分布數(shù)據(jù)。其為在攜帶皮下CWR22Rv1腫瘤的完好雄性小鼠中(n＝4)89Zr-5A10攝取的離體生物分布數(shù)據(jù)。在i.v.給藥后24h采集數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(S.D.)表示。所述比值的誤差以標(biāo)準(zhǔn)偏差的幾何平均數(shù)計(jì)算。表8實(shí)施例3：89Zr-5A10對(duì)雄激素調(diào)節(jié)fPSA表達(dá)升高的檢測(cè)下述實(shí)施例表明89Zr-5A10能夠檢測(cè)雄激素調(diào)節(jié)的fPSA表達(dá)的升高。將去勢(shì)雄性小鼠接種LNCaP-AR，并且在腫瘤形成后，將動(dòng)物不進(jìn)行處理或手術(shù)s.c.植入睪酮顆粒。處置7d后給予89Zr-5A10，并在24hp.i.后進(jìn)行生物分布研究。與對(duì)照相比在給予睪酮的LNCaP-AR異種移植瘤中89Zr-5A10的定位顯著增加(圖3d、圖8和表9)。圖8顯示了攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠中，具有或不具有皮下睪酮顆粒，注射89Zr-5A10的生物分布曲線。手術(shù)植入睪酮顆?；虿贿M(jìn)行處理(NoTx)6天后，給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10，并且在注射后24h將其處死并收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g+一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式報(bào)告。*表示與NoTx相比在給予睪酮的動(dòng)物中89Zr-5A10的瘤內(nèi)攝取P<0.01。如表9所示，給予雄激素治療后，89Zr-5A10在攜帶LNCaP-AR腫瘤的去勢(shì)雄性小鼠中的生物分布攝取顯著升高。其為顯示在攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠中89Zr-5A10攝取的離體生物分布數(shù)據(jù)。動(dòng)物(n＝4)未進(jìn)行處理(NoTx)或給予皮下睪酮顆粒(Test.)。7d后，注射給予動(dòng)物89Zr-5A10，并且在放射性示蹤劑i.v.24h后采集生物分布數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(S.D.)表示。所述比值的誤差以標(biāo)準(zhǔn)偏差的幾何平均數(shù)計(jì)算。表9與預(yù)期結(jié)果一致，瘤內(nèi)PSA水平也升高(表10)。表10提供了在攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠中，未進(jìn)行處理或皮下給予睪酮顆粒后的瘤內(nèi)PSA濃度。對(duì)攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠未進(jìn)行處理(VEH#)或皮下給予睪酮顆粒(TEST#)，處理6天后，注射給予89Zr-5A10。注射后24小時(shí)，處死小鼠用于PSA分析。手術(shù)切取腫瘤組織。使用PSA導(dǎo)向的ELISA(如上文所示)確定fPSA和tPSA，并且在瘤內(nèi)PSA的情況下，將所述值歸一化至總蛋白濃度。afPSA的濃度以ng/ml報(bào)告，b總PSA濃度以ng/mL報(bào)告，c總蛋白濃度以ng/mg報(bào)告?？s寫：fPSA，fPSA；tPSA，總PSA。表10在CWR22Rv1異種移植瘤中觀察到了類似結(jié)果(圖8、表11和表12)。在圖8中，手術(shù)植入睪酮顆?；虿贿M(jìn)行處理(NoTx)6天后，給予攜帶腫瘤的小鼠89Zr-5A10，并且在注射后24h將其處死并且收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均cpm/g+一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式報(bào)告。*表示與NoTx相比在給予睪酮的動(dòng)物中89Zr-5A10的瘤內(nèi)攝取P<0.05。表11提供了顯示在攜帶CWR22Rv1異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠中89Zr-5A10攝取的離體生物分布數(shù)據(jù)。在給予89Zr-5A107天前，對(duì)動(dòng)物(n＝4)不進(jìn)行處理(NoTx)或皮下給予其睪酮顆粒(Test.)。在放射性示蹤劑i.v.后24h采集生物分布數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(S.D.)表示。所述比值的誤差以標(biāo)準(zhǔn)偏差的幾何平均數(shù)計(jì)算。表11表12提供了在攜帶22Rv1腫瘤的去勢(shì)雄性小鼠中，注射給予89Zr-5A10后，通過ELISA對(duì)腫瘤中PSA的表達(dá)水平的分析。攜帶22Rv1異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠未進(jìn)行處理(VEH#)或皮下給予睪酮顆粒(TEST#)，并且在處理6天后，注射給予89Zr-5A10。注射24小時(shí)后，處死小鼠用于PSA分析。手術(shù)切取腫瘤組織。使用PSA導(dǎo)向的ELISA(如上文所示)確定fPSA和tPSA，并且將所述值歸一化至總蛋白濃度。afPSA的濃度以ng/ml報(bào)告，b總PSA濃度以ng/mL報(bào)告，c總蛋白濃度以ng/mg報(bào)告?？s寫：fPSA，fPSA；tPSA，總PSA。表12小鼠fPSAatPSAb總蛋白cfPSA/t蛋白tPSA/t蛋白VEH14.8313.935.880.822.44VEH27.3722.918.470.872.62VEH310.8720.847.741.402.62VEH44.3216.128.380.521.93VEH510.027.427.941.273.41TEST132.967.207.864.198.37TEST231.069.528.623.608.12TEST426.871.439.472.847.50TEST529.861.428.673.446.78總之，這些結(jié)果表明89Zr-5A10能夠真實(shí)地反映瘤內(nèi)AR信號(hào)。實(shí)施例4：使用89Zr-5A10對(duì)體內(nèi)雄激素受體信號(hào)的體內(nèi)定量下述實(shí)施例顯示了fPSA特異性單克隆抗體在體內(nèi)對(duì)雄激素受體信號(hào)進(jìn)行定量的能力。在這一特定實(shí)施方式中，使用抗雄激素MDV3100通過89Zr-5A10PET在體內(nèi)對(duì)AR的藥理學(xué)抑制情況進(jìn)行定量，MDV3100的臨床活性與在LNCaP-AR模型中的應(yīng)答具有相關(guān)性。將MDV3100溶解在DMSO中，以使得當(dāng)給予動(dòng)物時(shí)DMSO的終濃度為5％。賦形劑的配方為1％羧甲基纖維素、0.1％吐溫-80和5％DMSO。MDV3100或賦形劑通過灌胃每日給予。根據(jù)此前已報(bào)道的方法通過外部游標(biāo)卡尺測(cè)量估計(jì)腫瘤的體積(V/mm3)(Holland,J.P.等，MeasuringthepharmacokineticeffectsofanovelHsp90inhibitoronHER2/neuexpressioninmiceusing89Zr-DFO-trastuzumab,PLoSONE,2010,5(1),e8859)。s.c.給予去勢(shì)雄性小鼠LNCaP-AR異種移植瘤，并且將攜帶腫瘤的小鼠隨機(jī)分成每日一次灌胃給予賦形劑或者10、40或80mg/kgMDV3100的組。開始給藥7天后，給予89Zr-5A10，并且在24hp.i后進(jìn)行生物分布研究(圖10a、圖11和表13)。在圖10a中，攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠的生物分布數(shù)據(jù)顯示MDV3100抑制89Zr-5A10向腫瘤的定位。連續(xù)7d給予動(dòng)物賦形劑或者規(guī)定劑量的MDV3100，第7天時(shí)注射89Zr-5A10，并且在24p.i.后收集用于生物分布研究的動(dòng)物。*表示與賦形劑或10mg/kgMDV3100相比40mg/kg和80mg/kg劑量的MDV3100P<0.01。圖11是攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠，給予賦形劑或MDV3100，并且注射89Zr-5A10的生物分布曲線，其同樣顯示了MDV3100以劑量依賴性的方式抑制89Zr-5A10定位于前列腺癌。給予攜帶腫瘤的去勢(shì)小鼠賦形劑或規(guī)定劑量的MDV3100(每日灌胃給藥)。在第6天時(shí)，注射給予小鼠89Zr-5A10，并且在注射24h后，將其處死并收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式報(bào)告。*表示與賦形劑相比MDV310040mg/kg和80mg/kg的P<0.01。與10mg/kg劑量的MDV3100相比40和80mg/kg劑量的P<0.05。表13顯示了表示在攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠中89Zr-5A10攝取的離體生物分布數(shù)據(jù)。通過每日灌胃給予動(dòng)物(n＝4)溶劑或規(guī)定劑量的MDV3100(MDV)。在第6天時(shí)，i.v.給予89Zr-5A10。在i.v.給予放射性示蹤劑24h后采集生物分布數(shù)據(jù)。表13與預(yù)期結(jié)果一致，各劑量的MDV3100均抑制AR信號(hào)和fPSA合成(表14)。表14提供了在給予抗雄激素的攜帶LNCaP-AR腫瘤的去勢(shì)雄性小鼠中通過ELISA確定的腫瘤PSA表達(dá)水平分析的數(shù)據(jù)。每日灌胃給予攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠溶劑(VEH#)、10mg/kg(MDV10#)、40mg/kg(MDV40#)或80mg/kg(MDV80#)。處理后6天，注射給予小鼠89Zr-5A10。注射后24小時(shí)，處死小鼠用于PSA分析。手術(shù)切取腫瘤組織。使用PSA導(dǎo)向的ELISA(如上文所示)確定fPSA和tPSA，并且在瘤內(nèi)PSA的情況下，將所述值歸一化至總蛋白濃度。afPSA的濃度以ng/ml報(bào)告，b總PSA濃度以ng/mL報(bào)告，c總蛋白濃度以ng/mg報(bào)告?？s寫：fPSA，fPSA；tPSA，總PSA。表14小鼠fPSAatPSAbf/tPSA比值總蛋白cfPSA/t蛋白tPSA/t蛋白VEH191.37139.750.658.3110.9916.81VEH296.19125.860.766.8614.0318.36VEH3285.18419.600.687.6837.1554.66VEH4159.43198.580.808.3819.0223.69MDV101474.40690.480.699.2051.5775.06MDV10219.1226.210.735.823.294.50MDV10448.9886.720.566.927.0712.52MDV1053.966.640.604.500.881.48MDV40171.2479.600.896.1311.6112.98MDV40343.2551.090.857.046.147.25MDV40498.26122.150.806.5015.1318.81MDV8035.9710.550.575.051.182.09MDV80477.83112.530.697.5210.3414.96MDV80557.3197.800.595.749.9917.05相應(yīng)地，給予40和80mg/kg劑量的MDV3100使得與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10顯著降低(圖10a)。顯著地，通過PET我們還觀察到在每日灌胃給予動(dòng)物賦形劑或80mg/kg的MDV3100的組之間與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10出現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的改變(圖10b和10c，表16)。圖10b顯示了在右側(cè)翼攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的完好雄性小鼠的代表性橫截(Trans.)和冠狀PET切片，在使用s.c.睪酮顆粒處理或者連續(xù)7d每日灌胃給予賦形劑或MDV3100(80mg/kg)后，89Zr-5A1024hp.i.成像。在這兩組之間可見與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10具有清楚的目測(cè)可見的差異。箭頭指示腫瘤(T)和小鼠肝臟(L)的位置。在圖10c中，對(duì)PET研究中腫瘤目的區(qū)域進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10出現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的顯著改變。*表示與賦形劑相比P<0.01。"表示與賦形劑相比P<0.05。誤差線表示平均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差。表16提供了對(duì)皮下LNCaP-AR腫瘤目的區(qū)域進(jìn)行分析確定的SUV平均值列表。表16此外，在接受s.c.睪酮顆粒給予的小鼠的單獨(dú)處理的臂中觀察到了與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10的顯著增加?？傊?，這些結(jié)果突出了89Zr-5A10具有測(cè)定在瘤內(nèi)AR信號(hào)中藥理學(xué)觸發(fā)的改變的能力。實(shí)施例5：89Zr-5A10能夠分辨骨骼中的前列腺癌病灶如上文所討論的，已發(fā)現(xiàn)常規(guī)前列腺癌診斷顯著的局限性為不能分辨真正的骨骼轉(zhuǎn)移性疾病和附近的骨重塑，其與轉(zhuǎn)移性疾病無關(guān)或者與治療的時(shí)間分隔開，進(jìn)而阻礙了分析。在本實(shí)施例中，已證實(shí)了fPSA單克隆抗體具有分辨真正的骨骼前列腺癌病灶的能力。如下所示，通過在完好雄性小鼠左側(cè)后肢的脛骨上注射LNCaP-AR建立骨腫瘤。手術(shù)前，使用氯胺酮麻醉去勢(shì)雄性SCID小鼠，并且在左后肢上開一個(gè)切口。使用骨鉆在脛骨上鉆孔，并將1x105個(gè)細(xì)胞(22Rv1或LNCaP-AR)注射至骨髓中。使用骨蠟將穿刺封閉，縫合切口，并在手術(shù)后連續(xù)3天每日一次給予動(dòng)物姑息劑量的卡洛芬(5mg/kg)。使用生物發(fā)光成像追蹤腫瘤的發(fā)展，并使用MRI對(duì)其進(jìn)行確證。制備與骨腫瘤模型類似的骨折模型，除了不注射細(xì)胞和使用骨蠟以外。在7周后，通過MRI確證腫瘤的發(fā)展情況(圖12和圖13)。圖12顯示了在左側(cè)脛骨接種LNCaP-AR的小鼠的典型生物發(fā)光圖像。完好的雄性小鼠在脛骨上接種LNCaP-AR，通過生物發(fā)光監(jiān)測(cè)進(jìn)展，通過MRI和血清PSA分析對(duì)腫瘤的發(fā)展進(jìn)行確證。顯示了在接種5周后一組攜帶腫瘤小鼠的典型圖像。這些動(dòng)物已確證患有疾病和生物發(fā)光為陽性。在200MHz下運(yùn)轉(zhuǎn)以及配有400mT/mID12cm梯度線圈的Bruker4.7TBiospec掃描儀(BrukerBiospinMRIGmbH,Ettlingen,Germany)上采集小鼠的磁共振圖像。使用ID為32mm的定制正交鳥籠式諧振器用于RF激發(fā)和采集(StarkContrastMRICoilsResearchInc.,Erlangen,Germany)。使用氧和1％異氟烷氣體麻醉小鼠。使用小動(dòng)物生理監(jiān)測(cè)系統(tǒng)(SAInstruments,Inc.,StonyBrook,NewYork)監(jiān)測(cè)動(dòng)物的呼吸。首先采集三個(gè)正交方向上的T2加權(quán)偵查圖像用于確定動(dòng)物的位置。使用T2-加權(quán)的快速自旋回波RARE序列(弛豫增強(qiáng)的快速采集)采集軸向小鼠骨盆圖像，切片厚度為0.8mm、FOV30mm×34mm和空間分辨率117×133μm。使用下述采集參數(shù)TR＝4.5s、TE＝40ms、RARE因子8和采集時(shí)間20分鐘。圖13顯示的為典型的受腫瘤累及的骨的MRI切片。在完好雄性小鼠的脛骨上接種LNCaP-AR，使用MRI目測(cè)檢查和血清PSA分析對(duì)腫瘤的進(jìn)展進(jìn)行確證。左后肢的對(duì)比區(qū)域(面向MRI切片的右側(cè))表示用紅色圈出的腫瘤塊。與對(duì)側(cè)后肢相比，攜帶腫瘤的后肢在PET/CT研究中顯示了較高的對(duì)比度(圖14a)。對(duì)于PET/CT研究而言，使用軸向8.5cm和橫斷5.0cm的FOV在小動(dòng)物Siemens/CTImicroCATII(SiemensMedicalSolutions,Malvern,PA)掃描儀上采集計(jì)算機(jī)斷層(CT)圖像。根據(jù)此前已報(bào)道的方法將配準(zhǔn)的PET/CT圖像記錄并映射至矩陣。在圖14a中，配準(zhǔn)的三維、容積重建PET/CT圖像顯示89Zr5A10定位于完好雄性小鼠左側(cè)脛骨的骨LNCaP-AR移植瘤上。PET數(shù)據(jù)，以藍(lán)綠色比例尺表示，顯示了與右側(cè)(正常)脛骨相比，在動(dòng)物的左側(cè)(攜帶腫瘤)的脛骨具有更高的放射性。與這一觀察結(jié)果一致，配準(zhǔn)的PET/MRI圖像顯示了對(duì)脛骨中PET和MRI對(duì)比度的調(diào)準(zhǔn)(圖14b和圖15)。在圖14b中，配準(zhǔn)的PET/MRI圖像像顯示了通過MRI檢測(cè)的與腫瘤結(jié)合的89Zr-5A10正電子發(fā)射共定位的對(duì)比度。圖15顯示了表明89Zr-5A10與脛骨中腫瘤調(diào)準(zhǔn)的配準(zhǔn)的PET/MRI切片。將完好的雄性小鼠在左側(cè)脛骨接種LNCaP-AR，并且使用MRI目測(cè)檢查和血清PSA分析對(duì)腫瘤的進(jìn)展進(jìn)行確證。在注射89Zr-5A1024h后采集配準(zhǔn)的PET/MRI圖像。給出右側(cè)(正常)后肢的圖像用于比較。對(duì)手術(shù)切除的脛骨進(jìn)行死后放射自顯影顯示89Zr-5A10的正電子發(fā)射與由組織學(xué)定義的LNCaP-AR損傷的剖析圖對(duì)齊(圖16)。進(jìn)行如下所示的程序：在將小鼠處死后，手術(shù)切取包括腫瘤的脛骨并將其包埋于OCT中(MilesInc.,Elkhart,IN)并且在低溫模具中使用干冰速凍。使用MicromHM500冰凍切片機(jī)(MicromInternational,Walldorf,Germany)切取若干組每組為10個(gè)連續(xù)的5μm厚的組織切片，并將其帖附在聚-L-賴氨酸包被的玻璃顯微鏡玻片上。使用10％磷酸鹽緩沖的福爾馬林固定組織切片5min，洗滌兩次，空氣干燥并使用蘇木素和伊紅(H&E)染色。將染色后的組織切片置于與Fuji膠片BAS-MS2325成像板(FujiPhotoFilmCo,Tokyo,Japan)配合的膠片暗盒中以采集數(shù)字放射自顯影照片(DAR)。在注射89ZrCl或89Zr-5A10～168h后，將切片曝光48h。使用FujifilmBAS-1800II生物圖像分析儀(FujiPhotoFilmCo,Tokyo,Japan)讀取已曝光的磷板以產(chǎn)生具有50μm像素維數(shù)的數(shù)字圖像。使用配有電控平臺(tái)(PriorScientificInc,Rockland,MA)的OlympusBX60系統(tǒng)顯微鏡(OlympusAmericaInc,Melville,NY)獲取數(shù)字圖像。隨后，以相同的分辨率采集H&E圖像，作為DAR數(shù)據(jù)。使用剛性平面變換盒，將DAR圖像與H&E圖像手工對(duì)齊。圖16顯示了給予攜帶骨LNCaP-AR移植瘤的小鼠89Zr-5A10(左圖)和89ZrCl(右圖)后的組織學(xué)和重疊放射自顯影，圖中顯示了89Zr-5A10定位于腫瘤組織，而89ZrCl定位于正常骨。通過組織學(xué)(通過H&E染色定義)目測(cè)檢查區(qū)分腫瘤組織，在4×下用藍(lán)框標(biāo)出，在10×下用箭頭突出。選定的更高放大倍數(shù)的組織區(qū)域用黃框標(biāo)出。為進(jìn)一步確證89Zr-5A10不與骨重塑存在交叉反應(yīng)，在一個(gè)單獨(dú)的小鼠組中通過穿刺右后肢的脛骨手術(shù)誘導(dǎo)骨折。18F-NaF和99mTc-MDP均容易地定位于修復(fù)部位，而89Zr-5A10則沒有(圖14c)。在圖14c中，使得完好的雄性小鼠脛骨骨折，并在10天后手術(shù)，使用18F-NaF對(duì)骨重塑進(jìn)行評(píng)估。通過PET在骨折的脛骨中鑒定得到的清楚的對(duì)比區(qū)域。首次成像2天后，共同注射給予動(dòng)物99mTc-MDP和89Zr-5A10。與預(yù)期結(jié)果一致，SPECT成像顯示99mTc-MDP也定位于愈合的骨的區(qū)域。而相反的是，PET成像顯示在創(chuàng)傷部位未檢測(cè)到89Zr-5A10，這表面與目前在臨床上使用的放射性示蹤劑相比該試劑對(duì)PCa顯示出高度的特異性?？傊?，這些結(jié)果突出了89Zr-5A10對(duì)骨中前列腺癌來源的腫瘤具有獨(dú)特的特異性。實(shí)施例6：總結(jié)和比較數(shù)據(jù)已證實(shí)使用與對(duì)fPSA具有特異性的單克隆抗體連接的新型放射性示蹤劑能夠非侵入性的測(cè)定雄激素受體調(diào)節(jié)的、前列腺特異性基因產(chǎn)物PSA表達(dá)的改變。89Zr-5A10容易地定位于多種雄激素受體-和PSA-陽性前列腺癌模型，并且在臨床驗(yàn)證有效的前列腺癌異種移植瘤模型中定量檢測(cè)到了其使得抗雄激素療法誘導(dǎo)的fPSA合成下降，這均支持其適于對(duì)雄激素受體信號(hào)進(jìn)行定量檢測(cè)。由于89Zr-5A10特異性的靶向于前列腺癌細(xì)胞而非非惡性骨病變，其在骨掃描中表型模擬癌癥導(dǎo)致的改變，因此本發(fā)明的放射性示蹤劑為更準(zhǔn)確地分期和更好的對(duì)治療進(jìn)行選擇提供了機(jī)會(huì)。在這一點(diǎn)上，本發(fā)明的實(shí)施方式為研究異質(zhì)性疾病的個(gè)體損傷以增強(qiáng)我們對(duì)腫瘤生物學(xué)的理解提供了前所未有的機(jī)會(huì)。此前已報(bào)道了表達(dá)受雄激素受體信號(hào)抑制的細(xì)胞表面蛋白前列腺特異性膜抗原(PSMA)的改變也能夠作為用于雄激素受體信號(hào)成像的非侵入性標(biāo)記物。然而，PSMA的表達(dá)并不是前列腺特異性的，尚不知曉雄激素受體導(dǎo)向療法對(duì)PSMA表達(dá)的臨床影響。而且，在LNCaP-AR異種移植瘤中的正式比較顯示與相同標(biāo)記的針對(duì)PSMA的單克隆抗體(89Zr-J591)相比在腫瘤定位后療法中89Zr-5A10PET產(chǎn)生更引人注目的變化(圖17)。圖17顯示了給予賦形劑或MDV3100，并且注射89Zr-J591的攜帶LNCaP-AR異種移植瘤的去勢(shì)雄性小鼠的生物分布曲線。給予攜帶腫瘤的去勢(shì)小鼠賦形劑，或者指定劑量的MDV3100(每日灌胃)。在第6天時(shí)，注射給予小鼠89Zr-J591，并在注射24h后，將其處死并收集用于生物分布研究的血液和組織。數(shù)據(jù)以平均％ID/g±一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式報(bào)告。在圖17中能夠清楚的看出，在腫瘤定位后療法中針對(duì)PMSA的單克隆抗體不能顯示出任何具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性的差異，從而證明了本發(fā)明實(shí)施方式的優(yōu)效性和預(yù)料不到的效果。等效物和范圍僅使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)，所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員將識(shí)別或能夠確定本申請(qǐng)所述的本發(fā)明特定實(shí)施方式的多個(gè)等效物。本發(fā)明的范圍并不旨在限于以上描述。同樣地，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將理解前述僅代表本發(fā)明的某些優(yōu)選實(shí)施方式。在不脫離如下述權(quán)利要求所示的本發(fā)明的精神或范圍的前提下，可以對(duì)上文所述的程序和組分進(jìn)行多種改變和修飾。在權(quán)利要求書中，除非有相反指示或從上下文其他方面顯而易見，否則例如“一種(a、an)”和“所述”可以指一種或一種以上。因此，舉例來說，對(duì)“一個(gè)抗體”的提及包括多個(gè)所述抗體，且對(duì)“所述細(xì)胞”的提及包括對(duì)所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的一種或一種以上細(xì)胞的提及等等。除非相反指示或從上下文其他方面顯而易見，否則如果一個(gè)、一個(gè)以上或全部的群組成員存在于、用于所給出的產(chǎn)物或過程中或以其他方式與所給出的產(chǎn)物或過程有關(guān)，那么認(rèn)為符合一個(gè)或多個(gè)群組成員之間包括“或”的權(quán)利要求或描述。本發(fā)明包括正好一個(gè)群組成員存在于、用于所給出的產(chǎn)物或過程中或以其他方式與所給出的產(chǎn)物或過程有關(guān)的實(shí)施例。本發(fā)明包括一個(gè)以上或全部的群組成員存在于、用于所給出的產(chǎn)物或過程中或以其他方式與所給出的產(chǎn)物或過程有關(guān)的實(shí)施例。此外，應(yīng)了解本發(fā)明涵蓋一個(gè)或更多限制、要素、從句、描述性術(shù)語等從一項(xiàng)或一項(xiàng)以上所列權(quán)利要求引入另一項(xiàng)權(quán)利要求中的所有變化、組合和排列。舉例來說，任何從屬于另一項(xiàng)權(quán)利要求的權(quán)利要求都可進(jìn)行修改，以包括一個(gè)或更多在任何其他從屬于同一基礎(chǔ)權(quán)利要求的權(quán)利要求中發(fā)現(xiàn)的限制。此外，在權(quán)利要求敘述一種組合物的情況下，除非另外指示或除非所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員清楚會(huì)產(chǎn)生矛盾或不一致，否則應(yīng)了解包括使用該組合物的方法以達(dá)成本申請(qǐng)所揭示的任何目的，且包括根據(jù)本申請(qǐng)所揭示的任何制造方法或所述領(lǐng)域中已知的其他方法制造所述組合物的方法。在例如以馬庫(kù)什群組格式(Markushgroupformat)將要素呈現(xiàn)為清單的情況下，應(yīng)了解也公開了所述要素的每個(gè)子群，且任何要素都可從所述群組中去除。應(yīng)了解，一般說來，在提及本發(fā)明或本發(fā)明的方面包含特定要素、特征等的情況下，某些本發(fā)明實(shí)施例或本發(fā)明方面由這些要素、特征等組成，或基本上由這些要素、特征等組成。為簡(jiǎn)單起見，本申請(qǐng)中未以這些詞語(inhaecverba)明確闡述這些實(shí)施例。應(yīng)注意，術(shù)語“包含”意欲為開放性的且允許包括其他要素或步驟。在給出范圍的情況下，包括端點(diǎn)。此外，應(yīng)了解，除非另外指示或從上下文和所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解的其他方面顯而易見，否則表示為范圍的值在不同的本發(fā)明實(shí)施例中可采用所述范圍內(nèi)的任何具體值或子范圍，除非上下文另外清楚規(guī)定，否則達(dá)到此范圍下限的個(gè)位數(shù)的十分之一的程度。另外，應(yīng)了解，現(xiàn)有技術(shù)內(nèi)的任何特定的本發(fā)明實(shí)施例都可明確地排除在任一項(xiàng)或一項(xiàng)以上權(quán)利要求之外。因?yàn)檎J(rèn)為這些實(shí)施例為所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員已知，所以即使本申請(qǐng)中未明確闡述排除在外，也可將其排除在外。本發(fā)明組合物的任何特定實(shí)施例都可因任一原因而排除在任一項(xiàng)或一項(xiàng)以上權(quán)利要求之外，而不管是否與現(xiàn)有技術(shù)的存在相關(guān)。以上所討論且貫穿正文的出版物只在本申請(qǐng)案的申請(qǐng)日期之前提供其揭示內(nèi)容。本申請(qǐng)中不應(yīng)認(rèn)為承認(rèn)本發(fā)明人根據(jù)之前的公開內(nèi)容無權(quán)提前公開所述內(nèi)容。