一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法，首先配制一系列不同濃度的待測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液；將標(biāo)準(zhǔn)溶液依次分別與核酸適配體可見光電極作用，然后以核酸適配體可見光電極為工作電極，鉑電極為輔助電極，飽和甘汞電極為參比電極，在可見光照射下，施加偏壓，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的光電流，根據(jù)光電流與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的線性關(guān)系繪制工作曲線；測(cè)定實(shí)際樣品的光電流，并根據(jù)工作曲線計(jì)算實(shí)際樣品的濃度。與現(xiàn)有技術(shù)相比，核酸適配體可見光電極具有良好的分子識(shí)別能力，避免了檢測(cè)過程中其他共存小分子的干擾，并且檢測(cè)方法具有良好的重現(xiàn)性和較高的靈敏度，采用核酸適配體可見光電極能檢測(cè)10-11mol·L-1數(shù)量級(jí)的待測(cè)物質(zhì)。
【專利說明】—種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及光電化學(xué)分析與環(huán)境監(jiān)測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是涉及一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(Endocrine Disrupting Chemicals,即EDCs)是一種外源性干擾內(nèi)分泌系統(tǒng)的化學(xué)物質(zhì)。農(nóng)藥中的各種殺蟲劑、除草劑以及塑料制品中的增塑劑等都是重要的內(nèi)分泌干擾物。目前水體中內(nèi)分泌干擾物污染主要來源于工業(yè)廢水、農(nóng)田廢水的排放，并可以通過飲用水的攝入進(jìn)入人體造成累積，是導(dǎo)致性早熟，生育能力下降以及惡性腫瘤等問題的重要因素。因此，對(duì)水源以及引用水中內(nèi)分泌干擾物進(jìn)行監(jiān)測(cè)和定量分析具有重要的環(huán)境意義。雙酚A(Bisphenol Α,ΒΡΑ)是世界上使用廣泛的工業(yè)化合物之一，通過塑料容器BPA可以進(jìn)入食品和飲料，尤其是影響通過飲食而連續(xù)暴露于BPA中的嬰幼兒。動(dòng)物試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雙酚A有模擬雌激素的效果，具有一定的胚胎毒性和致畸性。因此，它是的準(zhǔn)確量化及低濃度檢測(cè)具有十分重要的意義。
[0003]目前，許多行之有效的分析方法是基于分光光度法和熒光測(cè)定法、毛細(xì)管電泳法、氣相色譜法和氣-質(zhì)聯(lián)用法、液相色譜法和液-質(zhì)聯(lián)用法等。然而，這些方法復(fù)雜、費(fèi)時(shí)、成本高，尤其是需要笨重的儀器，而且樣品制備步驟繁瑣，非常不適合用于具有復(fù)雜組成成分的實(shí)際水體中單一物質(zhì)的全自動(dòng)實(shí)時(shí)在線監(jiān)測(cè)。因此，開發(fā)響應(yīng)快速，成本低廉，具有高選擇性和高靈敏度的，便攜型適合在場(chǎng)檢測(cè)的分析方法具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
[0004]眾所周知，電化學(xué)方法具有靈敏度高、分析速度快、操作簡(jiǎn)便和成本低廉的特性，而雙酚A分子中含有的酚羥基在一定條件下可以被電化學(xué)氧化，使其具有良好的電化學(xué)活性，因此使電化學(xué)方法一直被認(rèn)為是檢測(cè)雙酚A的最佳方式。但是我們也了解到，雙酚A的酚羥基的氧化可以在電極表面形成聚合物薄膜，這將不可避免的帶來電極的鈍化；此外，其產(chǎn)生的氧化中間產(chǎn)物也會(huì)強(qiáng)烈的吸附在電極表面，導(dǎo)致雙酚A的氧化不充分。這些都嚴(yán)重的影響了雙酚A檢測(cè)的靈敏度。為了解決上述問題，我們希望通過開發(fā)一種新穎的傳感方法來靈敏的檢測(cè)雙酚Α。
[0005]光電化學(xué)分析方法是近年來發(fā)展起來的一種快速，價(jià)廉且高靈敏的傳感技術(shù)，它利用待測(cè)物質(zhì)在光陽(yáng)極表面的光催化氧化反應(yīng)，在施加一定偏壓的條件下產(chǎn)生靈敏的光電流，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)待測(cè)物質(zhì)的定量檢測(cè)。這種光催化氧化反應(yīng)是一種高效的氧化過程，可以迅速、徹底地氧化BPA及其中間體，消除中間體的富集，可以明顯的抑制電化學(xué)方法帶來的電極表面的鈍化和電極失活。但是同時(shí)我們也注意到光電檢測(cè)缺乏選擇性的問題，如何通過電極表面微觀結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)和修飾，賦予光陽(yáng)極良好的選擇性識(shí)別能力是實(shí)現(xiàn)BPA的高選擇性分析的關(guān)鍵所在。
[0006]核酸適配體是一種通過指數(shù)富集的配基系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)(SELEX)篩選得到的單鏈DNA，對(duì)目標(biāo)分子具有特異性結(jié)合能力。它與抗體相似，對(duì)蛋白質(zhì)、小分子、氨基酸甚至細(xì)胞等目標(biāo)分子具有很高的特異性和親和力。與此同時(shí)，適配體具有超過抗體的各種優(yōu)點(diǎn)，包括更小的尺寸，更容易人工合成和修飾，更好的抗熱穩(wěn)定性以及酸滅菌。因此，我們認(rèn)為可以將BPA的適配體負(fù)載于光陽(yáng)極的表面，利用適配體與BPA之間的特異性結(jié)合能力實(shí)現(xiàn)BPA的選擇性分析。
[0007]然而，雖然核酸適配體相對(duì)于抗體穩(wěn)定性好，但是在光照，尤其是紫外光照下仍然易于變性，失去其選擇性識(shí)別能力。那么我們選擇了光電化學(xué)的方法來提高檢測(cè)的靈敏度，選擇了核酸適配體來提高檢測(cè)的選擇性，如何使這兩者完美的結(jié)合？這就要求我們尋求一種具有生物兼容性，同時(shí)具有可見光吸收的電極材料來保持生物分子的活性，從而發(fā)揮其高選擇性。T1-Fe合金板上電化學(xué)陽(yáng)極化方法得到的直立有序合金納米管實(shí)現(xiàn)了鈦鐵兩種半導(dǎo)體氧化物原子級(jí)別的摻雜，可以大大提高可見光利用率和光電轉(zhuǎn)化效率，進(jìn)而提高傳感方法的靈敏度；同時(shí)合金納米管具有高的比表面積以及三維空間結(jié)構(gòu)，利于生物分子的負(fù)載，同時(shí)納米管表面具有良好的生物相容性和高親水性，可以使生物分子可以保留其生物活性和高穩(wěn)定性。
[0008]因此，本發(fā)明采用電化學(xué)陽(yáng)極化方法在Ti_6Fe合金基底上制備鈦鐵合金氧化物納米管陣列，通過構(gòu)筑納米管結(jié)構(gòu)和高效的異質(zhì)結(jié)提高可見光吸收性能和光電催化活性，同時(shí)利用其良好地生物相容性與雙酚A適配體結(jié)合，制得生物適配體傳感器aptamer/Ti02-Fe203NTs,建立生物電化學(xué)界面提高雙酚A核酸適配體的穩(wěn)定性，生物分子的負(fù)載量以及電子轉(zhuǎn)移速率也得到了明顯的提高，實(shí)現(xiàn)高靈敏度高選擇性的檢測(cè)環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A。同時(shí)，研究工作中也利用此生物光電傳感器對(duì)實(shí)際樣品中雙酚A含量進(jìn)行檢測(cè)，以評(píng)估飲用水和塑料制品的污染風(fēng)險(xiǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種簡(jiǎn)單易行、檢測(cè)靈敏度高、適用范圍廣的采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法。
[0010]本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn):
[0011]一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法，包括以下步驟:
[0012](I)配制一系列不同濃度的待測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液；
[0013](2)將步驟(1)配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液依次分別與核酸適配體可見光電極作用，然后以核酸適配體可見光電極為工作電極，鉬電極為輔助電極，飽和甘汞電極為參比電極，以0.1mol -l-1的磷酸鹽緩沖液作為電解液，在可見光照射下，施加偏壓0.4~0.6V，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的光電流，根據(jù)光電流與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的線性關(guān)系繪制工作曲線；
[0014](3)采用與步驟(2)相同的操作條件測(cè)定實(shí)際樣品的光電流，并根據(jù)工作曲線計(jì)算實(shí)際樣品的濃度。
[0015]所述的核酸適配體可見光電極通過以下步驟制作得到:
[0016](a)以鈦鐵合金板基底陽(yáng)極氧化的方法制得可見光TiO2-Fe2O3NTs電極；
[0017](b)將可見光TiO2-Fe2O3NTs電極用AB膠封合，只留有7mmX 7mm大小的電極面積；
[0018](c)用75%的酒精對(duì)電極進(jìn)行滅菌消毒，再將核酸適配體溶液滴涂到可見光TiO2-Fe2O3NTs電極表面，在4°C下隔夜組裝；
[0019](d)用0.1mol.L-1的磷酸鹽緩沖液沖洗電極，以除去物理吸附的核酸適配體，再用N2吹干，獲得核酸適配體可見光電極。[0020]步驟(a)所述的以鈦鐵合金板基底陽(yáng)極氧化的方法制得可見光TiO2-Fe2O3NTs電極的具體步驟如下:
[0021]第一步:將鈦板和鐵?；旌?，在氬氣氣氛保護(hù)下，在高溫電弧熔融爐中熔融得到鈦鐵合金，所述的鈦鐵合金中鐵的質(zhì)量百分比為5?6% ;
[0022]第二步:對(duì)鈦鐵合金進(jìn)行切割，并打磨拋光，依次在蒸餾水和丙酮中超聲清洗，得到預(yù)處理過的鈦鐵合金板；
[0023]第三步:以預(yù)處理過的鈦鐵合金板為陽(yáng)極，采用二電極體系，電極間距1cm，以含有0.25mol/L NH4F的乙二醇溶液作為電解質(zhì)溶液，磁力攪拌下，恒電位+30?+50V陽(yáng)極化3?5h，用二次蒸餾水清洗干凈后氮?dú)庵辛栏桑?br> [0024]第四步:第三步處理后的鈦鐵合金板置于管式爐氧氣氣氛中進(jìn)行熱處理，以I?2V /min升溫速率由室溫升至400?500°C并恒溫2?4h，得到可見光TiO2-Fe2O3NTs電極。
[0025]步驟(c)所述的核酸適配體溶液為由PH7.4的TE緩沖液配制得到的I?3 μ M的核酸適配體溶液。
[0026]所述的核酸適配體可見光電極與標(biāo)準(zhǔn)溶液或?qū)嶋H樣品在37°C下組裝30min后檢測(cè)其光電流變化，每次組裝完后均用磷酸鹽緩沖液沖洗三次。
[0027]所述的待測(cè)物質(zhì)為雙酚A。
[0028]本發(fā)明制得的核酸適配體可見光電極具有良好的分子識(shí)別能力，避免了檢測(cè)過程中其他共存小分子的干擾，并且檢測(cè)方法具有良好的重現(xiàn)性和較高的靈敏度，采用核酸適配體可見光電極能檢測(cè)10—11 mol.L—1數(shù)量級(jí)的待測(cè)物質(zhì)。
[0029]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)及有益效果:
[0030](I)本發(fā)明采用核酸適配體對(duì)TiO2-Fe2O3NTs電極進(jìn)行修飾得到核酸適配體可見光電極，并將核酸適配體可見光電極首次用于可見光電化學(xué)檢測(cè)中。通過核酸適配體對(duì)待測(cè)物質(zhì)的選擇性富集作用，大大提高了電極的選擇性檢測(cè)能力以及靈敏度，使得核酸適配體可見光電極能夠在100倍于待測(cè)物質(zhì)濃度的干擾物質(zhì)中選擇性的識(shí)別出待測(cè)物質(zhì)，且對(duì)待測(cè)物質(zhì)的可見光電化學(xué)響應(yīng)造成的影響均小于1%。
[0031](2) TiO2-Fe2O3NTs電極具有良好的三維管狀結(jié)構(gòu)以及良好的生物兼容性可以保證生物分子核酸適配體在基底表面的穩(wěn)定負(fù)載，提高了在電極上的負(fù)載量；同時(shí)，通過原位摻雜獲得的TiO2-Fe2O3NTs電極獨(dú)特的可見光電響應(yīng)也使得生物分子核酸適配體在電極上保持良好的活性，提高了電極的化學(xué)穩(wěn)定性，光電化學(xué)信號(hào)穩(wěn)定，靈敏度高。
[0032](3)在檢測(cè)過程中，采用了光電結(jié)合的方法，保證了較低的施加偏壓，有利于避免生物分子核酸適配體的失活，利于保持電極的穩(wěn)定性。
[0033](4)本發(fā)明的可見光電化學(xué)檢測(cè)方法實(shí)現(xiàn)了電化學(xué)活性的待測(cè)物質(zhì)的檢測(cè)，采用的儀器廉價(jià)便攜，方法簡(jiǎn)單易行，并具有較高的靈敏度，檢測(cè)限達(dá)到10-nmol/L。適用于環(huán)境監(jiān)測(cè)中的在場(chǎng)分析。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0034]圖1為實(shí)施例1制備的TiO2-Fe2O3NTs電極及核酸適配體可見光電極在施加偏壓+0.6V，在波長(zhǎng)為430nm可見光間歇光照下的得到的i_t曲線；
[0035]圖2為實(shí)施例2中核酸適配體可見光電極檢測(cè)雙酚A過程中相對(duì)可見光電流隨雙酚A濃度的變化曲線圖；
[0036]圖3為實(shí)施例3中核酸適配體可見光電極可見光電檢測(cè)雙酚A以及干擾物質(zhì)的光電流的變化圖。
【具體實(shí)施方式】
[0037]下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0038]實(shí)施例1
[0039]制備TiO2-Fe2O3NTs電極的方法如下:(I)將Ti板(純度99.9% )和Fe粒(純度99.99% )以一定的比例混合，在氬氣氣氛保護(hù)下，在高溫電弧熔融爐中熔融得到T1-6Fe鈦鐵合金。利用線切割機(jī)將其切割成IOX IOX Imm大小的鈦鐵合金板。其中鈦鐵合金中鐵的質(zhì)量百分比為6%。(2)將步驟(I)中鈦鐵合金板用砂紙打磨拋光，在蒸餾水和丙酮中各超聲清洗15min。室溫下以預(yù)處理過的鈦鐵合金板為陽(yáng)極，采用二電極體系，電極間距1cm，以含有0.25mol/L NH4F的乙二醇溶液作為電解質(zhì)溶液，磁力攪拌下，恒電位+30V陽(yáng)極化5h，用二次蒸餾水清洗干凈后氮?dú)庵辛栏伞?3)將步驟(2)中的鈦鐵合金板置于管式爐氧氣氣氛中進(jìn)行熱處理，以1°C /min升溫速率由室溫升至500°C并恒溫2h，得到T1-Fe合金氧化物納米管，即為TiO2-Fe2O3NTs電極。
[0040]將上述方法制備得到的可見光TiO2-Fe2O3NTs電極用AB膠將電極封合，只留有7mmX7mm大小的電極面積。用75%的酒精對(duì)電極進(jìn)行滅菌消毒，將由TE緩沖液(PH7.4)配制得到的I PM的核酸適配體溶液20 μ L滴涂到TiO2-Fe2O3NTs電極表面，在4°C下隔夜組裝，然后用0.1mol -L-1的磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗電極，以除去物理吸附的核酸適配體。最后，用N2進(jìn)行吹干,獲得核酸適配體可見光電極(aptamer/Ti02_Fe203NTs)。電極在使用前需在4°C無菌環(huán)境中保存。本實(shí)施例中制備的Ti02-Fe203NTs電極及核酸適配體可見光電極在施加偏壓+0.6V，在波長(zhǎng)為430nm可見光間歇光照下的得到的i_t曲線如圖1所示。圖中，a表示核酸適配體可見光電極(aptamer/Ti02-Fe2O3NTs),b表示Ti02_Fe203NTs電極，c 表不 Ti02-Fe203NTs/Aptamer/BPA 電極。
[0041]實(shí)施例2
[0042]采用0.1M pH為7的PBS緩沖液，配制一系列不同濃度的雙酚A標(biāo)準(zhǔn)溶液。以0.1MPH為7的PBS緩沖液為電解液，以核酸適配體修飾的核酸適配體可見光電極為工作電極。首先，將含有待測(cè)分子雙酚A或者干擾物質(zhì)(2，4-D，啶蟲脒，毒死蜱或氧樂果)的溶液與核酸適配體可見光電極在37°C下組裝30min，以利于待測(cè)分子與電極表面的適配體進(jìn)行選擇性識(shí)別富集，用PBS緩沖液沖洗三次；然后將作用前后的電極以三電極體系連接，靜置，打開可見光源；選擇i_t曲線的方法，在施加偏壓(0.6V(Vs.SCE))的條件下測(cè)定光電流，并通過計(jì)算機(jī)記錄。通過光電流的大小對(duì)雙酚A進(jìn)行定量，根據(jù)雙酚A濃度與相應(yīng)的光電流的線性關(guān)系繪制工作曲線，如圖2所示，雙酚A的檢測(cè)限可達(dá)到10_nmol.L'
[0043]實(shí)施例3
[0044]首先，將核酸適配體可見光電極仔細(xì)沖洗后作為工作電極，以含有一定濃度雙酚A或100倍濃度于雙酚A的干擾物質(zhì)，如2，4-D，啶蟲脒，毒死蜱或氧樂果的溶液為待測(cè)物，用
0.1M pH7.4的PBS緩沖液調(diào)節(jié)其pH值。采用實(shí)施例2中設(shè)定的測(cè)試條件，測(cè)定溶液的可見光電流，并根據(jù)實(shí)施例2中繪制的工作曲線計(jì)算得到實(shí)際溶液中雙酚A的濃度。結(jié)果顯示，100倍于雙酚A濃度的其他小分子干擾物對(duì)雙酚A的光電流造成的影響很小，如圖3所示。體現(xiàn)了該核酸適配體可見光電極的良好的選擇性分析能力。
[0045]實(shí)施例4
[0046]采用核酸適配體修飾的核酸適配體可見光電極的光電化學(xué)分析方法，核酸適配體可見光電極為工作電極，Pt電極為輔助電極，飽和甘汞電極(SCE)為參比電極，以0.1molL-1的磷酸鹽緩沖液作為電解液；選取了生活污水、桶裝飲用水以及礦泉水瓶浸出液、保鮮膜浸出液等作為樣品進(jìn)行檢測(cè)。采用i_t曲線的方法，在可見光照射下，施加偏壓0.6V，測(cè)定光電流，并根據(jù)工作曲線計(jì)算實(shí)際樣品的濃度以及回收率。每次核酸適配體可見光電極與待測(cè)溶液在37°C下組裝30min后檢測(cè)其光電流變化，組裝完后均用PBS緩沖液沖洗三次。核酸適配體可見光電極對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行雙酚A檢測(cè)的回收率如表1所示。
[0047]表1
[0048]
【權(quán)利要求】
1.一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟: (1)配制一系列不同濃度的待測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液； (2)將步驟(I)配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液依次分別與核酸適配體可見光電極作用，然后以核酸適配體可見光電極為工作電極，鉬電極為輔助電極，飽和甘汞電極為參比電極，以0.1mol -L-1的磷酸鹽緩沖液作為電解液，在可見光照射下，施加偏壓0.4?0.6V，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的光電流，根據(jù)光電流與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的線性關(guān)系繪制工作曲線； (3)采用與步驟(2)相同的操作條件測(cè)定實(shí)際樣品的光電流，并根據(jù)工作曲線計(jì)算實(shí)際樣品的濃度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法，其特征在于，所述的核酸適配體可見光電極通過以下步驟制作得到: (a)以鈦鐵合金板基底陽(yáng)極氧化的方法制得可見光TiO2-Fe2O3NTs電極； (b)將可見光TiO2-Fe2O3NTs電極用AB膠封合，只留有7mmX7mm大小的電極面積； (c)用75%的酒精對(duì)電極進(jìn)行滅菌消毒，再將核酸適配體溶液滴涂到可見光TiO2-Fe2O3NTs電極表面，在4°C下隔夜組裝； (d)用0.1mol.L-1的磷酸鹽緩沖液沖洗電極，以除去物理吸附的核酸適配體，再用N2吹干，獲得核酸適配體可見光電極。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法，其特征在于，步驟(a)所述的以鈦鐵合金板基底陽(yáng)極氧化的方法制得可見光TiO2-Fe2O3NTs電極的具體步驟如下: 第一步:將鈦板和鐵?；旌?，在氬氣氣氛保護(hù)下，在高溫電弧熔融爐中熔融得到鈦鐵合金，所述的鈦鐵合金中鐵的質(zhì)量百分比為5?6% ; 第二步:對(duì)鈦鐵合金進(jìn)行切割，并打磨拋光，依次在蒸餾水和丙酮中超聲清洗，得到預(yù)處理過的鈦鐵合金板； 第三步:以預(yù)處理過的鈦鐵合金板為陽(yáng)極，采用二電極體系，電極間距1cm，以含有0.25mol/L NH4F的乙二醇溶液作為電解質(zhì)溶液，磁力攪拌下，恒電位+30?+50V陽(yáng)極化3?5h，用二次蒸餾水清洗干凈后氮?dú)庵辛栏桑? 第四步:第三步處理后的鈦鐵合金板置于管式爐氧氣氣氛中進(jìn)行熱處理，以I?2°C /min升溫速率由室溫升至400?500°C并恒溫2?4h，得到可見光TiO2-Fe2O3NTs電極。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法，其特征在于，步驟(c)所述的核酸適配體溶液為由PH7.4的TE緩沖液配制得到的I?3 μ M的核酸適配體溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法，其特征在于，所述的核酸適配體可見光電極與標(biāo)準(zhǔn)溶液或?qū)嶋H樣品在37°C下組裝30min后檢測(cè)其光電流變化，每次組裝完后均用磷酸鹽緩沖液沖洗三次。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用核酸適配體可見光電極檢測(cè)內(nèi)分泌干擾物的方法，其特征在于，所述的待測(cè)物質(zhì)為雙酚A。
【文檔編號(hào)】G01N27/26GK103940861SQ201310024159
【公開日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2013年1月22日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月22日
【發(fā)明者】曹同成, 張瑩瑩, 趙國(guó)華, 史慧杰 申請(qǐng)人:同濟(jì)大學(xué)