專利名稱：以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法
技術領域：
本發(fā)明涉及ー種保健食品中總皂苷的測定方法，尤其是涉及ー種以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法。
背景技術：
蜂膠是蜜蜂采集植物的樹脂，并混以自身分泌物而成的膠粘性物質。蜂膠可以補虛弱，化濁脂，止消渴；外用解毒消腫，收斂生肌。蜂膠已經被廣泛用作保健食品原料。蜂膠中組分復雜，不溶于水，提純后的蜂膠呈褐色塊狀，既不方便服用，也不利于吸收，因此加工成保健食品時往往需要加入輔料保證蜂膠能夠以細微粉末的狀態(tài)分散在產品中。以蜂膠為原料的保健食品中，可同時配有西洋參、人參等含皂苷類化合物的原料，這類保健食品往往將總黃酮與總皂苷確定為產品的功效成分。文獻報道的總皂苷測定方法有:香草醛比色法、薄層色譜法、GC法、HPLC法、LC 一 MS法，CE法等；如沈向紅，任一平，陳翊.HPLC法與香草醛比色法測定保健品中的人參皂甙.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2004, 14(6):681-683中就公開了香草醛比色法和HPLC法。保健食品評價與技術規(guī)范(2003年版)提供的保健食品中總皂苷的測定方法，是目前保健食品中總皂苷的經典測定方法，用此法測定含有蜂膠原料的保健食品時，由于受蜂膠、崩解劑、填充劑等輔助物料的保護，產品中總皂苷難以被有效提取，總皂苷含量測定結果往往與實際配方量不符，準確度差。現(xiàn)在也有其他的用于測定總皂苷含量的方法，如
公開日為2012年10月31日，公開號為CN102759514A的中國專利中，公開了ー種注射用益氣復脈制劑中人參總皂苷的含量的測定方法，該方法包括以下步驟:1)對照品的制備分別精密稱取人參總皂苷對照品，加甲醇溶解，制得溶液，2)供試品溶液的制備取注射用益氣復脈藥物粉末，精密稱定，用水溶解，過上樹脂柱，以甲醇-水沖洗后，以甲醇洗脫，洗脫液過濾，制得溶液，3)測定方法分別精密吸取供試品溶液和對照品溶液，紫外分光光度法測定樣品中人參總皂苷的含量。該方法不能測定以蜂膠為原料的保健食品中的總皂苷。綜上所述，目前還沒有一種提取方法簡單，回收率高，準確性好，簡便快速的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術中存在的上述不足，而提供一種提取方法簡單，回收率高，準確性好，簡便快速的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法。本發(fā)明解決上述問題所采用的技術方案是:該以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法，其特征在于:該測定方法包括標準曲線制作エ序、樣品處理工序、試液過柱エ序、顯色エ序和總皂苷計算エ序；
所述標準曲線制作エ序中，分別吸取Oml、10ml、20ml、40ml、60ml、80ml、IOOml和120ml已知濃度的人參皂苷Re標準液置于八個蒸發(fā)皿中，待蒸發(fā)皿中的人參皂苷Re標準液干燥后，先加入5ml摩爾濃度為0.1M的氫氧化鈉溶液,再加水20ml,搖勻后用鹽酸調節(jié)pH值為
6.5-7.0，從而得八份標準母液，將八份標準母液置于45-55°C的水浴中超聲20_40min破乳，冷卻到常溫，分別采用50ml的容量瓶用水定容到50ml，搖勻后過濾，棄去5ml初濾液，取1.0ml續(xù)濾液做為標準試液，從而得到八份標準試液；采用層析柱對每份標準試液進行過柱操作，先用25mL體積百分比為70%的こ醇洗柱，棄去洗脫液,再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL標準試液，過柱，用25mL的水洗柱，以洗去糖份等水溶性雜質，棄去洗脫液，用25mL體積百分比為70%的こ醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，放水浴中揮干，從而得到八個揮發(fā)后的蒸發(fā)皿；在已揮干的蒸發(fā)皿中準確加入0.2mL體積百分比為5%的香草醛冰こ酸溶液，轉動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶解，再加0.SmL高氯酸，混勻后移入5mL帶塞刻度離心管中，放在60°C以下的水浴中加熱lOmin，取出，冰浴冷卻后，準確加入冰こ酸
5.0mL，搖勻后，以Icm比色皿于560nm波長處與標準管一起進行比色測定，從而得到八個吸光度值；ー個吸光度值和ー個蒸發(fā)皿中含有的人參皂苷的質量相對應，采用吸光度值和人參皂苷的質量做曲線，得到標準曲線；
所述樣品處理工序中，取以蜂膠為原料的保健食品0.3g置于50ml容量瓶中，加入5ml摩爾濃度為0.1M的氫氧化鈉溶液來溶解保健食品,待保健食品溶解后,加水20ml，搖勻后用鹽酸調節(jié)PH值為6.5-7.0，在45-55°C的水浴中超聲20_40min破乳，冷卻到常溫，用水定容到50ml，搖勻后過濾，棄去5ml初濾液，取1.0ml續(xù)濾液做為待測試液；
所述試液過柱エ序中，采用層析柱對待測試液進行過柱操作，先用25mL體積百分比為70%的こ醇洗柱，棄去洗脫液,再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL待測試液，過柱，用25mL的水洗柱，以洗去糖份等水溶性雜質，棄去洗脫液,用25mL體積百分比為70%的こ醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，放水浴中揮干，得到待測試液揮干蒸發(fā)皿；所述顯色エ序中，在待測試液揮干蒸發(fā)皿中準確加入0.2mL體積百分比為5%的香草醛冰こ酸溶液，轉動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶解，再加0.SmL高氯酸，混勻后移入5mL帶塞刻度離心管中，放在60°C以下的水浴中加熱lOmin，取出，冰浴冷卻后，準確加入冰こ酸5.0mL，搖勻后，以Icm比色皿于560nm波長處與標準管一起進行比色測定，從而得到待測試液的吸光度值，該吸光度值和以蜂膠為原料的保健食品相對應；
所述總皂苷計算エ序中，將待測試液的吸光度值代入標準曲線中，得到待測試液中含有的人參皂苷的質量，從而得到以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的含量。本發(fā)明采用氫氧化鈉水溶液溶解以蜂膠為原料的保健食品，釋放被蜂膠、崩解劑和填充劑包埋的總皂苷成分，使之溶于水中，然后用鹽酸調節(jié)PH值至6.5-7.0，保證總皂苷在水中的穩(wěn)定性，并使蜂膠重新析出，排除了蜂膠的干擾，從而有效地提取了總皂苷。用本方法測定含有蜂膠、崩解劑、填充劑的樣品中的總皂苷，具有提取方法簡單，回收率高，準確性好，簡便快速的特點，可以用于以蜂膠為原料以總皂苷為功效成分的保健食品的質量控制，也可以用于一般保健食品中的總皂苷的測定。作為優(yōu)選，本發(fā)明在標準曲線制作エ序中和試液過柱エ序中，所用的層析柱的長20cm-25cm,內徑0.6cm_0.8cm,頂部接30ml的！)&液漏斗；層析柱內裝6cm高的Amberlite-XAD-2大孔樹脂,上加高Icm的中性氧化招。作為優(yōu)選，本發(fā)明在樣品處理工序中，使用氫氧化鈉溶液來溶解保健食品時，采用振搖分散的方式或者超聲輔助分散的方式進行溶解。作為優(yōu)選，本發(fā)明在樣品處理工序中，向已經溶解的保健食品中加入20ml水并搖勻后，用于調節(jié)PH值的鹽酸為體積百分比為10%的鹽酸。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述標準曲線制作エ序中，標準曲線的回歸方程為y=ax+b，其中，Y表示吸光度值，X表示人參皂甙的質量，a為正數(shù)，b為任意數(shù)。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述標準曲線制作エ序中，標準曲線的回歸方程為y=0.0036x-0.0043,表示吸光度值的y的單位為A,表示人參阜式的質量的x的單位為mg。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述回歸方程的相關系數(shù)R2=0.9937，說明在20mg-240mg范圍內呈現(xiàn)良好的線性關系。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述樣品處理工序中，以蜂膠為原料的保健食品是磨成粉末狀的。由此使得本發(fā)明能夠更快更有效的溶解保健食品。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述人參皂苷Re標準液的濃度為2.0mg/mL。本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，具有以下優(yōu)點和效果:采用氫氧化鈉水溶液溶解以蜂膠為原料的保健食品，釋放被蜂膠、崩解劑和填充劑包埋的總皂苷成分，使之溶于水中，然后用鹽酸調節(jié)PH值至6.5-7.0，保證總皂苷在水中的穩(wěn)定性，并使蜂膠重新析出，排除了蜂膠的干擾，從而有效地提取了總皂苷。用本方法測定含有蜂膠、崩解劑、填充劑的樣品中的總皂苷，具有提取方法簡單，回收率高，準確性好，簡便快速的特點，可以用于以蜂膠為原料以總皂苷為功效成分的保健食品的質量控制，也可以用于一般保健食品中的總皂苷的測定。本發(fā)明在提取試劑的選擇上做出了創(chuàng)新，皂苷結構中的酚羥基與香草醛結構中的醛基進行羥醛縮合反應生成紅色的縮合物，將甙元的酚羥基氧化為羧基，與醛縮合反應，糖類、黃酮類化合物因含有酚羥基而干擾測定。本發(fā)明曾采用甲醇提取總皂苷，因為蜂膠易溶于甲醇，所以用甲醇作為提取劑，可完全提取總皂苷，但是樣品在用甲醇提取總皂苷的同時，也提取了蜂膠，為了排除蜂膠的干擾需將甲醇吹干，再加水溶解總皂苷，由于蜂膠依然存在于甲醇提取物中，并牢牢將總皂苷包埋，所以用水難以溶出總皂苷，導致結果偏低。本發(fā)明也曾采用熱水回流法提取，雖然比甲醇法好ー些，回收率有所提高，但是依然偏低，且檢驗結果不穩(wěn)定，這可能是因為加熱可以増加崩解劑、填充劑的溶解度，但不能提高蜂膠在水中的溶解度，此外，結果不穩(wěn)定與樣品粗細、提取溫度、時間等因素有夫。分析蜂膠與總皂苷的性質，本發(fā)明采用氫氧化鈉水溶液提取總皂苷，蜂膠易溶于堿性水溶液，總皂苷得以從蜂膠中被釋放到堿性水溶液中，再調節(jié)PH值至酸性，蜂膠被沉淀，而總皂苷仍留在水中，用氫氧化鈉水溶液提取總皂苷，回收率可達到90.3%-109.7%。本發(fā)明在提取液濃度的選擇上做出了創(chuàng)新，總皂苷在堿性水溶液中不穩(wěn)定，最適pH值為6.03，這在1998年8月出版的《中國現(xiàn)代應用藥學雜志》第15卷增刊中由許文祥研究的人參液體制劑人參總皂甙PHm測定中有記載。樣品中的蜂膠含有大量酸性成分，提取劑氫氧化鈉水溶液首先與蜂膠中的酸性物質進行中和反應，從而溶解蜂膠，蜂膠的量決定了提取劑的用量。如果提取液濃度過高，會加速皂苷的水解，濃度過低，則蜂膠不被溶解，皂苷成分不能充分溶出。本發(fā)明在大量試驗的前提下，最終重點考察了摩爾濃度為0.1M、0.5M和IM這三種濃度，以及2mL、3mL和5mL這三種用量對樣品的溶解情況，發(fā)現(xiàn)稱樣量在0.3g吋，使用5ml摩爾濃度為0.1M的氫氧化鈉可很好地溶解樣品，調節(jié)pH值時鹽酸的用量最少。
本發(fā)明在提取pH值的選擇上做出了創(chuàng)新，樣品被氫氧化鈉溶液溶解后，需要調節(jié)PH值，保證總皂苷被充分提取而不被水解。本發(fā)明在大量試驗的前提下，最終重點研究了pH值為5、6、7吋，總皂苷的回收率，發(fā)現(xiàn)在pH值為7時的回收率最好，可能原因是由于在酸性條件下，蜂膠重新析出時包埋了部分皂苷所致。
具體實施例方式下面通過實施例對本發(fā)明作進ー步的詳細說明，以下實施例是對本發(fā)明的解釋而本發(fā)明并不局限于以下實施例。實施例。本實施例中以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法包括標準曲線制作エ序、樣品處理工序、試液過柱エ序、顯色エ序和總皂苷計算エ序。在標準曲線制作エ序中，分別吸取Oml、10ml、20ml、40ml、60ml、80ml、IOOml和120ml濃度為2.0mg/mL的人參皂苷Re標準液置于八個蒸發(fā)皿中，待蒸發(fā)皿中的人參皂苷Re標準液干燥后，先加入5ml摩爾濃度為0.1M的氫氧化鈉溶液，再加水20ml，搖勻后用鹽酸調節(jié)PH值為6.5-7.0，從而得八份標準母液，將八份標準母液置于50°C的水浴中超聲30min破乳，冷卻到常溫，分別采用50ml的容量瓶用水定容到50ml，搖勻后過濾，棄去5ml初濾液，取1.0ml續(xù)濾液做為標準試液，從而得到八份標準試液。采用層析柱對每份標準試液進行過柱操作，所用的層析柱的長20cm-25cm，內徑0.6cm-0.8cm,頂部接30ml的！)&液漏斗；層析柱內裝6cm高的Amberlite_XAD_2大孔樹脂，上加高Icm的中性氧化鋁。先用25mL體積百分比為70%的こ醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL標準試液，過柱，用25mL的水洗柱，以洗去糖份等水溶性雜質，棄去洗脫液，用25mL體積百分比為70%的こ醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，放水浴中揮干，從而得到八個揮發(fā)后的蒸發(fā)皿。在已揮干的蒸發(fā)皿中準確加入0.2mL體積百分比為5%的香草醛冰こ酸溶液，轉動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶解，再加0.SmL高氯酸，混勻后移入5mL帶塞刻度離心管中，放在60°C以下的水浴中加熱lOmin，取出，冰浴冷卻后，準確加入冰こ酸5.0mL，搖勻后，以Icm比色皿于560nm波長處與標準管一起進行比色測定，從而得到八個吸光度值。ー個吸光度值和ー個蒸發(fā)皿中含有的人參皂苷的質量相對應，采用吸光度值和人參皂苷的質量做曲線，得到標準曲線，采用EXCEL軟件，求得該標準曲線的回歸方程為y=0.0036x-0.0043，其中，y表示吸光度值，I的單位為A，X表示人參皂甙的質量，X的單位為mg，該回歸方程的相關系數(shù)R2=0.9937，說明在20mg-240mg范圍內呈現(xiàn)良好的線性關系。本發(fā)明中的標準曲線的回歸方程可以為y=ax+b，其中，y表示吸光度值，x表示人參皂甙的質量，a為正數(shù)，b為任意數(shù)。在樣品處理工序中，取以蜂膠為原料的保健食品0.3g置于50ml容量瓶中，加入5ml摩爾濃度為0.1M的氫氧化鈉溶液來溶解保健食品，待保健食品溶解后，加水20ml，搖勻后用鹽酸調節(jié)PH值為6.5-7.0，在50°C的水浴中超聲30min破乳，冷卻到常溫，用水定容到50ml，搖勻后過濾，棄去5ml初濾液，取1.0ml續(xù)濾液做為待測試液。本發(fā)明在使用氫氧化鈉溶液來溶解保健食品時，可以采用振搖分散的方式或者采用超聲輔助分散的方式進行溶解；用于調節(jié)PH值的鹽酸可以為體積百分比為10%的鹽酸；以蜂膠為原料的保健食品通常是磨成粉末狀的。
在試液過柱エ序中，采用層析柱對待測試液進行過柱操作，所用的層析柱的長20cm-25cm,內徑0.6cm_0.8cm,頂部接30ml的！)&液漏斗；層析柱內裝6cm高的Amberl ite-XAD-2大孔樹脂，上加高Icm的中性氧化鋁。先用25mL體積百分比為70%的こ醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL待測試液，過柱，用25mL的水洗柱，以洗去糖份等水溶性雜質，棄去洗脫液，用25mL體積百分比為70%的こ醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，放水浴中揮干，得到待測試液揮干蒸發(fā)皿。在顯色エ序中，在待測試液揮干蒸發(fā)皿中準確加入0.2mL體積百分比為5%的香草醛冰こ酸溶液，轉動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶解，再加0.SmL高氯酸，混勻后移入5mL帶塞刻度離心管中，放在60°C以下的水浴中加熱lOmin，取出，冰浴冷卻后，準確加入冰こ酸5.0mL,搖勻后，以1cm比色皿于560nm波長處與標準管一起進行比色測定，從而得到待測試液的吸光度值，該吸光度值和以蜂膠為原料的保健食品相對應。在總皂苷計算エ序中，將待測試液的吸光度值代入標準曲線的回歸方程中，得到待測試液中含有的人參皂苷的質量，從而得到以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的含量。本發(fā)明可以采用由北京普析通用儀器有限責任公司制造的TU-1810SPC紫外可見分光光度計來測定吸光度值，可以采用Sartorius BS224S分析天平來稱取樣品，可以采用PH精密試紙來測pH值。本發(fā)明中以蜂膠、西洋參提取物為主要原料生產的片劑是由杭州蜂之語蜂業(yè)股份有限公司提供的；所用的人參皂苷Re標準品是中國藥品生物制品檢定所的，批號是110754-200822，質量百分含量是88.8% ;所用的正丁醇、氫氧化鈉、鹽酸、甲醇、こ醇、冰こ酸、高氯酸均為分析純；中性氧化鋁是層析用的；水可以是雙重蒸餾水。下面對本發(fā)明中的測定方法的線性范圍、檢測限、回收率和精密度進行分析。線性關系:將濃度為2.0mg/mL的人參皂甙Re標準溶液0ml、10ml、20ml、40ml、60ml,80mlUOOml和120ml放在蒸發(fā)皿中，放在低于60°C的水浴中揮干，或熱風吹干(勿使過熱)。以y表示吸光度值(A)，X表示人參皂甙Re質量(mg)，用EXCEL軟件，求得方法的回歸方程為y=0.0036x-0.0043，相關系數(shù)R2=0.9937，說明在20mg_240mg的范圍內呈現(xiàn)良好的線性關系。
權利要求
1.ー種以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法，其特征在于:該測定方法包括標準曲線制作エ序、樣品處理工序、試液過柱エ序、顯色エ序和總皂苷計算エ序； 所述標準曲線制作エ序中，分別吸取Oml、10ml、20ml、40ml、60ml、80ml、IOOml和120ml已知濃度的人參皂苷Re標準液置于八個蒸發(fā)皿中，待蒸發(fā)皿中的人參皂苷Re標準液干燥后，先加入5ml摩爾濃度為0.1M的氫氧化鈉溶液,再加水20ml,搖勻后用鹽酸調節(jié)pH值為6.5-7.0，從而得八份標準母液，將八份標準母液置于45-55°C的水浴中超聲20_40min破乳，冷卻到常溫，分別采用50ml的容量瓶用水定容到50ml，搖勻后過濾，棄去5ml初濾液，取1.0ml續(xù)濾液做為標準試液，從而得到八份標準試液；采用層析柱對每份標準試液進行過柱操作，先用25mL體積百分比為70%的こ醇洗柱，棄去洗脫液,再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL標準試液，過柱，用25mL的水洗柱，以洗去糖份等水溶性雜質，棄去洗脫液，用25mL體積百分比為70%的こ醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，放水浴中揮干，從而得到八個揮發(fā)后的蒸發(fā)皿；在已揮干的蒸發(fā)皿中準確加入0.2mL體積百分比為5%的香草醛冰こ酸溶液，轉動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶解，再加0.SmL高氯酸，混勻后移入5mL帶塞刻度離心管中，放在60°C以下的水浴中加熱lOmin，取出，冰浴冷卻后，準確加入冰こ酸5.0mL，搖勻后，以Icm比色皿于560nm波長處與標準管一起進行比色測定，從而得到八個吸光度值；ー個吸光度值和ー個蒸發(fā)皿中含有的人參皂苷的質量相對應，采用吸光度值和人參皂苷的質量做曲線，得到標準曲線； 所述樣品處理工序中，取以蜂膠為原料的保健食品0.3g置于50ml容量瓶中，加入5ml摩爾濃度為0.1M的氫氧化鈉溶液來溶解保健食品,待保健食品溶解后,加水20ml，搖勻后用鹽酸調節(jié)PH值為6.5-7.0，在45-55°C的水浴中超聲20_40min破乳，冷卻到常溫，用水定容到50ml，搖勻后過濾，棄去5ml初濾液，取1.0ml續(xù)濾液做為待測試液； 所述試液過柱エ序中，采用層析柱對待測試液進行過柱操作，先用25mL體積百分比為70%的こ醇洗柱，棄去洗脫液,再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL待測試液，過柱，用25mL的水洗柱，以洗 去糖份等水溶性雜質,棄去洗脫液,用25mL體積百分比為70%的こ醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，放水浴中揮干，得到待測試液揮干蒸發(fā)皿；所述顯色エ序中，在待測試液揮干蒸發(fā)皿中準確加入0.2mL體積百分比為5%的香草醛冰こ酸溶液，轉動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶解，再加0.SmL高氯酸，混勻后移入5mL帶塞刻度離心管中，放在60°C以下的水浴中加熱lOmin，取出，冰浴冷卻后，準確加入冰こ酸5.0mL，搖勻后，以Icm比色皿于560nm波長處與標準管一起進行比色測定，從而得到待測試液的吸光度值，該吸光度值和以蜂膠為原料的保健食品相對應； 所述總皂苷計算エ序中，將待測試液的吸光度值代入標準曲線中，得到待測試液中含有的人參皂苷的質量，從而得到以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的含量。
2.根據權利要求1所述的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法，其特征在于:在標準曲線制作エ序中和試液過柱エ序中，所用的層析柱的長20cm-25cm，內徑0.6cm-0.8cm,頂部接30ml的！)&液漏斗；層析柱內裝6cm高的Amberlite_XAD_2大孔樹脂，上加高Icm的中性氧化鋁。
3.根據權利要求1所述的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法，其特征在干:在樣品處理工序中，使用氫氧化鈉溶液來溶解保健食品時，采用振搖分散的方式或者超聲輔助分散的方式進行溶解。
4.根據權利要求1所述的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法，其特征在于:在樣品處理工序中，向已經溶解的保健食品中加入20ml水并搖勻后，用于調節(jié)pH值的鹽酸為體積百分比為10%的鹽酸。
5.根據權利要求1所述的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法，其特征在于:所述標準曲線制作エ序中，標準曲線的回歸方程為y=ax+b，其中，y表示吸光度值，x表示人參阜式的質量，a為正數(shù)，b為任意數(shù)。
6.根據權利要求5所述的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法，其特征在于:所述標準曲線制作エ序中，標準曲線的回歸方程為y=0.0036x-0.0043，表示吸光度值的I的單位為A，表示人參皂甙的質量的X的單位為mg。
7.根據權利要求6所述的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法，其特征在于:所述回歸方程的相關系數(shù)R2=0.9937，說明在20mg-240mg范圍內呈現(xiàn)良好的線性關系。
8.根據權利要求1所述的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法，其特征在于:所述樣品處理工序中，以蜂膠為原料的保健食品是磨成粉末狀的。
9.根據權利要求1所述的以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法， 其特征在于:所述人參皂苷Re標準液的濃度為2.0mg/mL。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種保健食品中總皂苷的測定方法，尤其是涉及一種以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的測定方法。本發(fā)明包括標準曲線制作工序、樣品處理工序、試液過柱工序、顯色工序和總皂苷計算工序，標準曲線制作工序中，采用吸光度值和人參皂苷的質量做曲線，得到標準曲線，樣品處理工序中，取以蜂膠為原料的保健食品0.3g得到待測試液，試液過柱工序中，采用層析柱對待測試液進行過柱操作，得到待測試液揮干蒸發(fā)皿，顯色工序中，得到待測試液的吸光度值，總皂苷計算工序中，得到以蜂膠為原料的保健食品中總皂苷的含量。本發(fā)明提取方法簡單，回收率高，準確性好，簡便快速。
文檔編號G01N1/34GK103115887SQ20131003576
公開日2013年5月22日 申請日期2013年1月30日 優(yōu)先權日2013年1月30日
發(fā)明者周萍 申請人:杭州蜂之語蜂業(yè)股份有限公司