專利名稱：一種甘草及其制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及甘草藥材及其制劑的質(zhì)量控制方法，具體涉及:高效液相色譜法同時測定該藥材及其制劑中的甘草苷、異甘草苷、甘草素、異甘草素、甘草酸、甘草次酸六種主要活性成分的含量。
背景技術(shù)：
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甘草為豆科甘草屬植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch、脹果甘草Glycyrrhizainf lata Bat或光果甘草Glycyrrhiza glabra L的干燥根及根莖,是最常用的重要中草藥材之一。早在二千多年前，《神農(nóng)本草經(jīng)》就將甘草列為藥之上乘。我國中醫(yī)認為，甘草補脾益氣，滋咳潤肺，緩急解毒，調(diào)和百藥，因此有“十方九草”之說，并享有“中草藥之王”的美
嚳
口 ο甘草的化學組成極為復雜，國內(nèi)外的學者在不同的領(lǐng)域?qū)ζ溥M行了研究，目前為止已從甘草中分離出的化合物有甘草甜素、甘草次酸、甘草苷、異甘草苷、新甘草苷、新異甘草苷、甘草素、異甘草素以及甘草醇、異甘草醇、7-甲基香豆精、傘形花內(nèi)酯等100多種香豆素類、三萜類以及黃酮類等化合物，均具有廣泛的生理活性。目前對甘草及其制劑進行質(zhì)量控制的研究很多，同時也建立了很多的定量分析方法，如氣相-質(zhì)譜聯(lián)用，液相-質(zhì)譜聯(lián)用，高速逆流色譜法等。但是這些方法只是對甘草中的某一兩個成分進行質(zhì)量控制，無法體現(xiàn)甘草藥材及含甘草中成藥制劑的完整質(zhì)量，而且對儀器的儀器很高，同時在實際檢驗操作中發(fā)現(xiàn)，上述方法存在專屬性差、操作繁瑣、可控性差、含量測定結(jié)果穩(wěn)定性差等不足，影響標準的可推廣性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是制定新的甘草及其制劑的質(zhì)量控制方法，利用高效液相色譜法同時測定甘草苷、異甘草苷、甘草素、異甘草素、甘草酸、甘草次酸六種主要活性成分進行定量測定，經(jīng)方法學考察試驗，確認此方法簡便、結(jié)果準確，重現(xiàn)性好，彌補了現(xiàn)有質(zhì)量控制的不足，使甘草及其制劑的質(zhì)量控制更加完善和科學。本發(fā)明的甘草及其制劑高效液相色譜法質(zhì)量控制的測定方法包括如下步驟:
一種甘草及其制劑的質(zhì)量控制方法為:
(1)高效液相色譜分析:色譜條件色譜柱:AgilentHC-C18柱(4.6mmX 250mm, 5 μ m);流動相:乙腈:0.04%甲酸溶液；采用梯度洗脫方式:0min —4min —20min —25min —38min—50min — 60min,乙腈 20% — 20% — 38% — 55% — 90% — 90% — 20% ;流速:Iml.mirT1 ;柱溫:30°C ;檢測波長:250nm、365nm，理論板數(shù)按甘草酸計應不低于2000 ；
(2)供試品溶液的制備:將甘草或甘草制劑的供試品粉碎成20-40目，精密稱取甘草粉末0.15g或甘草制劑粉末0.25g，精密加入8ml50%乙醇浸泡30min，然后超聲提取30min，放置至室溫后濾過，濾液用50%乙醇定容至IOml,用微孔濾膜(0.45 μ m)濾過,取續(xù)濾液,作為供試品溶液；
(3)對照品溶液的制備:分別精密稱取甘草苷、甘草素、甘草酸、異甘草苷、異甘草素、甘草次酸六種對照品，加甲醇溶解并配成甘草苷1.728 mg.ml_ S甘草素2.736 mg.ml_ S甘草酸4.680 mg *ml S異甘草昔2.016 mg *ml \異甘草素CL 612 mg *ml \甘草次酸0.540mg.ml_1的儲備液；
(4)含量測定方法:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定六種成分的含量。本發(fā)明選擇了甘草及其制劑中的六種活性成分為測定指標，并進行以下方法學考察試驗:
1.線性范圍精密吸取對照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，加甲醇定容至lml。按上述色譜條件10 μ I進樣，以測得的峰面積X為橫坐標，樣品質(zhì)量y為縱坐標，計算回歸方程。結(jié)果表明，對照品峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。結(jié)果見表I。表I六種主要活性成分的回歸方程與線性范圍
權(quán)利要求
1.一種甘草及其制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于: (1)高效液相色譜分析:色譜條件色譜柱:AgilentHC-C18柱(4.6mmX 250mm, 5 μ m);流動相:乙腈:0.04%甲酸溶液；采用梯度洗脫方式:0min —4min —20min —25min —38min—50min — 60min,乙腈 20% — 20% — 38% — 55% — 90% — 90% — 20% ;流速:Iml.mirT1 ;柱溫:30°C ;檢測波長:250nm、365nm，理論板數(shù)按甘草酸計應不低于2000 ； (2)供試品溶液的制備:將甘草粉碎成20-40目，或者將甘草制劑的供試品研磨成細粉，精密稱取甘草粉末0.15g或甘草制劑粉末0.25g，精密加入8ml50%乙醇浸泡30min，然后超聲提取30min,放置至室溫后濾過,濾液用50%乙醇定容至IOml,用微孔濾膜(0.45 μ m)濾過,取續(xù)濾液,作為供試品溶液； (3)對照品溶液的制備:分別精密稱取甘草苷、甘草素、甘草酸、異甘草苷、異甘草素、甘草次酸六種對照品，加甲醇溶解并配成甘草苷1.728 mg.ml_ S甘草素2.736 mg.ml_ S甘草酸4.680 mg *ml S異甘草昔2.016 mg *ml \異甘草素CL 612 mg *ml \甘草次酸0.540mg.ml_1的儲備液； (4)含量測定方法:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定六種成分的含量。
全文摘要
本發(fā)明涉及甘草藥材及其制劑的質(zhì)量控制方法，具體涉及高效液相色譜法同時測定該藥材及其制劑中的甘草苷、異甘草苷、甘草素、異甘草素、甘草酸、甘草次酸六種主要活性成分的含量。制定新的甘草及其制劑的質(zhì)量控制方法，利用高效液相色譜法同時測定甘草苷、異甘草苷、甘草素、異甘草素、甘草酸、甘草次酸六種主要活性成分進行定量測定，經(jīng)方法學考察試驗，確認此方法簡便、結(jié)果準確，重現(xiàn)性好，彌補了現(xiàn)有質(zhì)量控制的不足，使甘草及其制劑的質(zhì)量控制更加完善和科學。
文檔編號G01N30/06GK103175910SQ20131003782
公開日2013年6月26日 申請日期2013年1月31日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月31日
發(fā)明者黃輝球, 劉強, 江潔 申請人:惠州市九惠制藥股份有限公司