總psa和游離psa二合一化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種總PSA和游離PSA二合一化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒的制備方法，該方法用一株抗PSA抗體包被成固相包被板，用兩種不同的酶來標(biāo)記PSA不同位點(diǎn)的抗體，再用不同酶對應(yīng)的不同底物來獲取各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)而實(shí)現(xiàn)在一次免疫反應(yīng)過程中同時(shí)檢測PSA和FPSA兩種物質(zhì)的濃度。采用此發(fā)明前的檢測總PSA和游離PSA是通過兩次實(shí)驗(yàn)分別進(jìn)行的，操作繁瑣，時(shí)間周期長。采用本發(fā)明后能將兩種檢測試劑二合一，通過一次實(shí)驗(yàn)獲得兩種項(xiàng)目的結(jié)果，縮短的實(shí)驗(yàn)時(shí)間，減少實(shí)驗(yàn)步驟。
【專利說明】總PSA和游離PSA 二合一化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種醫(yī)療設(shè)備及其制造方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前國內(nèi)外對于總前列腺特異性抗原(PSA)和游離前列腺特異性抗原(FPSA)的檢測往往是分別進(jìn)行的。PSA在血清中主要有兩種存在形式:一種是游離的PSA(FPSA)，約占血清PSA總濃度的10%~30%。另一種是與α?-抗糜蛋白酶(ACT)結(jié)合的PSA(PSA-ACT)，約占血清PSA總濃度的70%~90%。在采用化學(xué)發(fā)光免疫診斷方法檢測時(shí)往往采用夾心法，用一株抗體包被，另一株抗體標(biāo)記上示蹤物。在具體檢測PSA和游離PSA時(shí)，一般采用同一株抗體作為包被抗體，這株抗體既能夠跟PSA結(jié)合又能夠跟FPSA結(jié)合，當(dāng)需要檢測的是PSA時(shí)就用另一株抗體作夾心反應(yīng)，這時(shí)要求這一株抗體能夠與PSA-ACT中暴露在外的PSA位點(diǎn)結(jié)合。如果需要檢測FPSA時(shí)則相反，這時(shí)作為夾心的這株抗體必須不能跟PSA-ACT暴露在外的PSA位點(diǎn)結(jié)合而應(yīng)該與其內(nèi)包的PSA位點(diǎn)結(jié)合。在這種情況下，由于PSA-ACT的內(nèi)包位點(diǎn)的空間位阻，導(dǎo)致僅能跟體液中游離的PSA上的位點(diǎn)結(jié)合，這樣就達(dá)到了僅檢測FPSA的目的。
[0003]這就為本發(fā)明提供了一種可能性，即通過采用兩株針對不同反應(yīng)位點(diǎn)的抗體作為示蹤抗體，其中 一株是僅能夠與PSA-ACT的內(nèi)包位點(diǎn)結(jié)合，另一株僅能夠與PSA-ACT的外露位點(diǎn)結(jié)合，而這兩株抗體分別采用不同的示蹤劑，就可以區(qū)分出PSA與FPSA的量的多少了。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明提供了一種總PSA和游離PSA 二合一化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒的制備方法。本發(fā)明的方法用一株抗PSA抗體包被成固相包被板，用兩種不同的酶來標(biāo)記PSA不同位點(diǎn)的抗體，再用不同酶對應(yīng)的不同底物來獲取各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)而實(shí)現(xiàn)在一次免疫反應(yīng)過程中同時(shí)檢測PSA和FPSA兩種物質(zhì)的濃度。采用此發(fā)明前的檢測總PSA和游離PSA是通過兩次實(shí)驗(yàn)分別進(jìn)行的，操作繁瑣，時(shí)間周期長。采用本發(fā)明后能將兩種檢測試劑二合一，通過一次實(shí)驗(yàn)獲得兩種項(xiàng)目的結(jié)果，縮短的實(shí)驗(yàn)時(shí)間，減少實(shí)驗(yàn)步驟。
[0005]本發(fā)明的總PSA和游離PSA二合一化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒的制備方法包括如下步驟:
[0006]步驟1:取0.5~1.5mg抗PSA包被抗體用0.05Μ、ρΗ9.6的碳酸緩沖液稀釋成4~6 μ g/ml,在96孔化學(xué)發(fā)光板上每孔加100~120 μ I ；4 □靜置過夜,次日將板子拍桿，加入含有I %牛血清白蛋白的溶液150~250 μ 1，37°C封閉反應(yīng)0.5~1.5小時(shí)；將板子再次拍干，置于烘干間抽濕烘干后真空包裝；
[0007]優(yōu)選地，在步驟I中，取Img抗PSA包被抗體用0.05M、pH9.6的碳酸緩沖液稀釋成5 μ g/ml,在96孔化學(xué)發(fā)光板上每孔加ΙΙΟμ I ;4°C靜置過夜,次日將板子拍桿,加入含有1%牛血清白蛋白的溶液200μ 1，37°C封閉反應(yīng)I小時(shí)；將板子再次拍干，置于烘干間抽濕烘干后真空包裝；
[0008]步驟2:取0.5?1.5mg抗PSA單抗和0.5?1.5mg辣根過氧化物酶溶解于0.5?
1.5ml,0.1Μ、ρΗ8.0的磷酸緩沖液中，加入水溶性碳二亞胺0.05?0.15mg ;室溫?cái)嚢?.5?
1.5小時(shí)；取出反應(yīng)液對0.02M、pH7.4的磷酸緩沖液透析過夜，中間換液2?4次；
[0009]優(yōu)選地，在步驟2中，取Img抗PSA單抗和Img辣根過氧化物酶溶解于Iml、0.IMPH8.0的磷酸緩沖液中，加入水溶性碳二亞胺0.1mg0室溫?cái)嚢鐸小時(shí)；取出反應(yīng)液對0.02MPH7.4的磷酸緩沖液透析過夜，中間換液3次；
[0010]步驟3:取0.5?1.5mg抗PSA單抗和0.5?1.5mg堿性磷酸酶溶解于0.5?
1.5ml,0.1M、pH6.0的檸檬酸緩沖液中，加入4%戊二醛0.05?0.15ml，室溫?cái)嚢?.5?
1.5小時(shí)，加入0.05?0.15mg賴氨酸終止反應(yīng)，室溫繼續(xù)攪拌10?20分鐘，取出反應(yīng)液對0.02M、pH7.4的磷酸緩沖液透析過夜，中間換液2?4次；用含有0.2%牛血清白蛋白的
0.1Μ、ρΗ7.4的Tris-HCl緩沖液將步驟2和步驟3反應(yīng)液混合稀釋900?1100倍，10毫升分裝備用；
[0011]優(yōu)選地,在步驟3中，取Img抗PSA單抗和Img堿性磷酸酶溶解于1ml、0.1M pH6.0的檸檬酸緩沖液中，加入4%戊二醛0.1ml，室溫?cái)嚢鐸小時(shí)，加入0.1mg賴氨酸終止反應(yīng)，室溫繼續(xù)攪拌15分鐘，取出反應(yīng)液對0.02M pH7.4的磷酸緩沖液透析過夜，中間換液3次；用含有0.2 %牛血清白蛋白的0.1ΜρΗ7.4的Tris-HCl緩沖液將步驟2和步驟3反應(yīng)液混合稀釋1000倍，10毫升分裝備用；
[0012]步驟4:分別量取90?IlOml已滅活過的新生牛血清4?6份，分別往每份血清中添加總PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料和游離PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料，混合均勻后將配制的血清樣品用羅氏電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)分別標(biāo)定總PSA濃度值和游離PSA濃度值，分裝后作為試劑盒的系列校準(zhǔn)品；
[0013]優(yōu)選地,在步驟4中，分別量取IOOml已滅活過的新生牛血清5份；
[0014]步驟5:分別采用市售的金剛烷化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)和魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)作為發(fā)光底物；金剛烷系統(tǒng)化學(xué)發(fā)光底物每個(gè)試劑盒4?8毫升，魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)又分為A液、B液兩個(gè)組分,其中A液為魯米諾溶液,4?8毫升；B液為氧化劑溶液,4?8毫升;
[0015]優(yōu)選地，金剛烷系統(tǒng)化學(xué)發(fā)光底物每個(gè)試劑盒6毫升，魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)又分為A液、B液兩個(gè)組分,其中A液為魯米諾溶液,6毫升；B液為氧化劑溶液,6毫升；
[0016]步驟6:配制含有0.05% TWEEN20的0.0lM pH7.4的Tris-HCl緩沖液為洗滌液。
[0017]通過使用本發(fā)明，可以使得醫(yī)療檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的可以使用一個(gè)試劑盒同時(shí)檢測兩種指標(biāo)，操作時(shí)間縮短一半，操作步驟減少一半?；颊呖梢愿飓@得檢驗(yàn)結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0018]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下通過具體實(shí)施例對本發(fā)明的制備方法進(jìn)一步詳細(xì)說明。
[0019]實(shí)施例1:
[0020]取Img抗PSA包被抗體用0.05M pH9.6的碳酸緩沖液稀釋成5 μ g/ml，在96孔化學(xué)發(fā)光板上每孔加ΙΙΟμ I。4°C靜置過夜，次日將板子拍桿，加入含有1%牛血清白蛋白的溶液200μ 1，37°C封閉反應(yīng)I小時(shí)。將板子再次拍干，置于烘干間抽濕烘干后真空包裝。
[0021]取Img抗PSA(PSA-ACT內(nèi)包位點(diǎn))單抗和Img辣根過氧化物酶溶解于lml、0.1MPH8.0的磷酸緩沖液(P.B)中，加入水溶性碳二亞胺(EDC)0.1mgo室溫?cái)嚢鐸小時(shí)。取出反應(yīng)液對0.02M pH7.4的P.B透析過夜，中間換液3次。
[0022]取Img抗PSA (PSA-ACT外露位點(diǎn))單抗和Img堿性磷酸酶溶解于Iml、0.IM pH6.0的檸檬酸緩沖液中，加入4%戊二醛0.1ml，室溫?cái)嚢鐸小時(shí)，加入0.1mg賴氨酸終止反應(yīng)，室溫繼續(xù)攪拌15分鐘，取出反應(yīng)液對0.02M pH7.4的P.B透析過夜，中間換液3次。取出反應(yīng)液并與前一步制備的辣根酶標(biāo)記物反應(yīng)液混合并用含有0.2%牛血清白蛋白的0.1MPH7.4的Tris-HCl緩沖液將步驟2和步驟3反應(yīng)液混合稀釋1000倍，10毫升分裝后作為標(biāo)記物工作液備用。
[0023]分別量取IOOml已滅活過的新生牛血清5份，分別往每份血清中添加一定量的總PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料和游離PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料，混合均勻后將配制的血清樣品用羅氏電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)分別標(biāo)定總PSA濃度值和游離PSA濃度值，0.5毫升分裝后作為試劑盒的系列校準(zhǔn)品。
[0024]分別采用市售的金剛烷化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)和魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)作為發(fā)光底物。金剛烷系統(tǒng)化學(xué)發(fā)光底物每個(gè)試劑盒6毫升，魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)又分為A液、B液兩個(gè)組分，其中A液為魯米諾溶液,6毫升；B液為氧化劑溶液,6毫升。
[0025]配制含有0.05% TWEEN20的0.0lM pH7.4的Tris-HCl緩沖液為洗滌液。
[0026]使用時(shí)往96孔化學(xué)發(fā)光板中分別加入已經(jīng)標(biāo)定過總PSA和游離PSA濃度的系列校準(zhǔn)品，以及待測血清樣本各25微升；每孔加入混合標(biāo)記物工作液100微升，37攝氏度溫育I小時(shí)后取出。用洗滌液洗滌5次后，每孔加入50微升金剛烷化學(xué)發(fā)光底物，37攝氏度放置30分鐘后置于化學(xué)發(fā)光分析儀上檢測發(fā)光信號。
[0027]將總PSA系列校準(zhǔn)品濃度對其發(fā)光信號建立總PSA標(biāo)準(zhǔn)曲線，待測樣本的發(fā)光信號通過總PSA標(biāo)準(zhǔn)曲線反求出所對應(yīng)的濃度。
[0028]檢測完畢用洗滌液洗滌發(fā)光板5次，分別加入魯米諾化學(xué)發(fā)光底物A液50微升和B液50微升，I分鐘后置于化學(xué)發(fā)光分析儀上檢測發(fā)光信號。將游離PSA系列校準(zhǔn)品濃度對其發(fā)光信號建立游離PSA標(biāo)準(zhǔn)曲線，待測樣本的發(fā)光信號通過游離PSA標(biāo)準(zhǔn)曲線反求出所對應(yīng)的濃度。
[0029]實(shí)施例2:
[0030]本發(fā)明的總PSA和游離PSA二合一化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒的制備方法包括如下步驟:
[0031 ] 步驟1:取Img抗PSA包被抗體用0.05M pH9.6的碳酸緩沖液稀釋成5 μ g/ml，在96孔化學(xué)發(fā)光板上每孔加ΙΙΟμ I。4°C靜置過夜，次日將板子拍桿，加入含有1%牛血清白蛋白的溶液200μ 1，37°C封閉反應(yīng)I小時(shí)。將板子再次拍干，置于烘干間抽濕烘干后真空包裝。
[0032]步驟2:取Img抗PSA (PSA-ACT內(nèi)包位點(diǎn))單抗和Img辣根過氧化物酶溶解于1ml、
0.1M pH8.0的磷酸緩沖液(P.B)中，加入水溶性碳二亞胺(EDC)0.1mgo室溫?cái)嚢鐸小時(shí)。取出反應(yīng)液對0.02M pH7.4的P.B透析過夜，中間換液3次。
[0033]步驟3:取Img抗PSA (PSA-ACT外露位點(diǎn))單抗和Img堿性磷酸酶溶解于Iml、0.1MPH6.0的檸檬酸緩沖液中，加入4%戊二醛0.1ml，室溫?cái)嚢鐸小時(shí)，加入0.1mg賴氨酸終止反應(yīng)，室溫繼續(xù)攪拌15分鐘，取出反應(yīng)液對0.02MpH7.4的P.B透析過夜，中間換液3次。用含有0.2 %牛血清白蛋白的0.1ΜρΗ7.4的Tris-HCl緩沖液將步驟2和步驟3反應(yīng)液混合稀釋1000倍，10毫升分裝備用。
[0034]步驟4:分別量取IOOml已滅活過的新生牛血清5份，分別往每份血清中添加總PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料和游離PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料，混合均勻后將配制的血清樣品用羅氏電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)分別標(biāo)定總PSA濃度值和游離PSA濃度值，分裝后作為試劑盒的系列校準(zhǔn)品。
[0035]步驟5:分別采用市售的金剛烷化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)和魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)作為發(fā)光底物。金剛烷系統(tǒng)化學(xué)發(fā)光底物每個(gè)試劑盒6毫升，魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)又分為A液、B液兩個(gè)組分,其中A液為魯米諾溶液,6毫升；B液為氧化劑溶液,6毫升。
[0036]步驟6:配制含有0.05% TWEEN20的0.0lM pH7.4的Tris-HCl緩沖液為洗滌液。
[0037]本發(fā)明的特點(diǎn)是通過目前化學(xué)發(fā)光免疫診斷領(lǐng)域比較常用的兩種標(biāo)記物——堿性磷酸酶(AP)和辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記針對PSA不同位點(diǎn)的兩株抗體。通過一次免疫反應(yīng)，采用兩種酶分別對應(yīng)的底物進(jìn)行信號檢測，求的各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)而分別計(jì)算出所對應(yīng)的PSA和FPSA濃度來。通過這種辦法制備得試劑盒就成為二合一的試劑盒。
[0038]以上描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，但本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，在不脫離本發(fā)明設(shè)計(jì)思想的前提下，其各種變型或組合均納入本發(fā)明的權(quán)利要求的保護(hù)范圍中。
【權(quán)利要求】
1.一種總PSA和游離PSA 二合一化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟: 步驟1:取0.5~1.5mg抗PSA包被抗體用0.05M、pH9.6的碳酸緩沖液稀釋成4~6μg/ml,在96孔化學(xué)發(fā)光板上每孔加100~120 μ I ;4°C靜置過夜,次日將板子拍桿,加入含有1 %牛血清白蛋白的溶液150~250 μ 1，37°C封閉反應(yīng)0.5~1.5小時(shí)；將板子再次拍干，置于烘干間抽濕烘干后真空包裝； 步驟2:取0.5~1.5mg抗PSA單抗和0.5~1.5mg辣根過氧化物酶溶解于0.5~1.5ml,0.1Μ、ρΗ8.0的磷酸緩沖液中，加入水溶性碳二亞胺0.05~0.15mg ;室溫?cái)嚢?.5~1.5小時(shí)；取出反應(yīng)液對0.02M、pH7.4的磷酸緩沖液透析過夜，中間換液2~4次； 步驟3:取0.5~1.5mg抗PSA單抗和0.5~1.5mg堿性磷酸酶溶解于0.5~1.5ml、0.1Μ、ρΗ6.0的檸檬酸緩沖液中，加入4%戊二醛0.05~0.15ml，室溫?cái)嚢?.5~1.5小時(shí)，加入0.05~0.15mg賴氨酸終止反應(yīng)，室溫繼續(xù)攪拌10~20分鐘，取出反應(yīng)液對0.02M、PH7.4的磷酸緩沖液透析過夜，中間換液2~4次；用含有0.2%牛血清白蛋白的0.1M、PH7.4的Tris-HCl緩沖液將步驟2和步驟3反應(yīng)液混合稀釋900~1100倍，10毫升分裝備用; 步驟4:分別量取90~IlOml已滅活過的新生牛血清4~6份，分別往每份血清中添加總PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料和游離PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料，混合均勻后將配制的血清樣品用羅氏電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)分別標(biāo)定總PSA濃度值和游離PSA濃度值，分裝后作為試劑盒的系列校準(zhǔn)品； 步驟5:分別采用市售的金剛烷化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)和魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)作為發(fā)光底物；金剛烷系統(tǒng)化學(xué)發(fā)光底物每個(gè)試劑盒6毫升，魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)又分為A液、B液兩個(gè)組分，其中A液為魯米諾溶液，6毫升；B液為氧化劑溶液，6毫升； 步驟6:配制含有0.05% TWEEN20的0.01M ρΗ7.4的Tris-HCl緩沖液為洗滌液。
2.如權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征在于，在步驟I中，取Img抗PSA包被抗體用0.05Μ、ρΗ9.6的碳酸緩沖液稀釋成5 μ g/ml，在96孔化學(xué)發(fā)光板上每孔加IlOy I ;4°C靜置過夜，次日將板子拍桿，加入含有I %牛血清白蛋白的溶液200 μ 1，37°C封閉反應(yīng)I小時(shí)；將板子再次拍干，置于烘干間抽濕烘干后真空包裝。
3.如權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征在于，在步驟2中,取Img抗PSA單抗和Img辣根過氧化物酶溶解于Iml、0.1M pH8.0的磷酸緩沖液中，加入水溶性碳二亞胺0.1mg0室溫?cái)嚢鐸小時(shí)；取出反應(yīng)液對0.02M pH7.4的磷酸緩沖液透析過夜，中間換液3次。
4.如權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征在于，在步驟3中,取Img抗PSA單抗和Img堿性磷酸酶溶解于lml、0.1M pH6.0的檸檬酸緩沖液中，加入4%戊二醛0.1ml，室溫?cái)嚢鐸小時(shí)，加入0.1mg賴氨酸終止反應(yīng)，室溫繼續(xù)攪拌15分鐘，取出反應(yīng)液對0.02M pH7.4的磷酸緩沖液透析過夜，中間換液3次；用含有0.2%牛血清白蛋白的0.1M pH7.4的Tris-HCl緩沖液將步驟2和步驟3反應(yīng)液混合稀釋1000倍，10毫升分裝備用。
5.如權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征在于，在步驟4中，分別量取100mL已滅活過的新生牛血清5份。
6.如權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征在于，金剛烷系統(tǒng)化學(xué)發(fā)光底物每個(gè)試劑盒6毫升，魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)又分為A液、B液兩個(gè)組分，其中A液為魯米諾溶液，6毫升；B液為氧化劑溶液，6毫升。
7.—種總PSA和游離PSA 二合一化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟: 步驟1:取Img抗PSA包被抗體用0.05M pH9.6的碳酸緩沖液稀釋成5 μ g/ml，在96孔化學(xué)發(fā)光板上每孔加ΙΙΟμ I ;4°C靜置過夜，次日將板子拍桿，加入含有1%牛血清白蛋白的溶液200μ 1，37°C封閉反應(yīng)I小時(shí)。將板子再次拍干，置于烘干間抽濕烘干后真空包裝；步驟2:取Img抗PSA單抗和Img辣根過氧化物酶溶解于Iml、0.1M pH8.0的磷酸緩沖液中，加入水溶性碳二亞胺0.1mg ;室溫?cái)嚢鐸小時(shí)。取出反應(yīng)液對0.02M pH7.4的磷酸緩沖液透析過夜，中間換液3次； 步驟3:取Img抗PSA單抗和Img堿性磷酸酶溶解于Iml、0.1M pH6.0的檸檬酸緩沖液中，加入4%戊二醛0.1ml，室溫?cái)嚢鐸小時(shí)，加入0.1mg賴氨酸終止反應(yīng)，室溫繼續(xù)攪拌15分鐘，取出反應(yīng)液對0.02M pH7.4的P.B透析過夜，中間換液3次；用含有0.2%牛血清白蛋白的0.1M pH7.4的Tris-HCl緩沖液將步驟2和步驟3反應(yīng)液混合稀釋1000倍，10毫升分裝備用； 步驟4:分別量取100mL已滅 活過的新生牛血清5份，分別往每份血清中添加總PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料和游離PSA標(biāo)準(zhǔn)品原料，混合均勻后將配制的血清樣品用羅氏電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)分別標(biāo)定總PSA濃度值和游離PSA濃度值，分裝后作為試劑盒的系列校準(zhǔn)品； 步驟5:分別采用市售的金剛烷化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)和魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)作為發(fā)光底物；金剛烷系統(tǒng)化學(xué)發(fā)光底物每個(gè)試劑盒6毫升，魯米諾化學(xué)發(fā)光底物系統(tǒng)又分為A液、B液兩個(gè)組分，其中A液為魯米諾溶液，6毫升；B液為氧化劑溶液，6毫升； 步驟6:配制含有0.05% TWEEN20的0.01M ρΗ7.4的Tris-HCl緩沖液為洗滌液。
8.一種二合一化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒，其特征在于，根據(jù)權(quán)利要求1或7所述的方法制備。
【文檔編號】G01N33/53GK104007256SQ201310055076
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2013年2月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年2月21日
【發(fā)明者】林斯 申請人:林斯