專利名稱：大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于圈養(yǎng)動(dòng)物人工繁育的方法，特別是涉及一種大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法。
背景技術(shù)：
在圈養(yǎng)條件下，我們觀察到的大熊貓的妊娠期為85-185天。在過(guò)去幾十年的研究中，中外科學(xué)家圍繞大熊貓獨(dú)特的妊娠現(xiàn)象進(jìn)行了多方面的研究。懷孕大熊貓表現(xiàn)出的行為學(xué)和生理學(xué)現(xiàn)象包括食欲減退、做窩、外陰腫脹和顏色變化、乳腺增大和嗜睡等。但大熊貓還可能出現(xiàn)假孕的現(xiàn)象。假孕大熊貓也表現(xiàn)出的和真孕大熊貓類似的行為學(xué)和生理學(xué)現(xiàn)象。喻述蓉等(畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)-2003.34(5).-452-456)認(rèn)為真孕大熊貓和假孕大熊貓尿中孕酮所維持的時(shí)間和含量，發(fā)現(xiàn)兩者沒(méi)有差異。Nancy等等(Proceedings of aninternational conference San Diego, Califonrnia, USA, 0ctoberl5-18, 2000, 195-204)通過(guò)比較4只真孕大熊貓和4只假孕大熊貓的孕激素水平和變化趨式后認(rèn)為在妊娠的后期孕激素水平是有差異的。李學(xué)兵等(酶聯(lián)法測(cè)定尿中孕酮和進(jìn)行妊娠診斷.97成都二十一世紀(jì)環(huán)境保護(hù)與城市發(fā)展國(guó)際學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集.1997)認(rèn)為未產(chǎn)仔大熊貓?jiān)屑に卦谏仙缶S持時(shí)間較短，且激素水平波動(dòng)較大，波谷可接近基礎(chǔ)水平，而波峰則可能超過(guò)正常懷孕大熊貓?，F(xiàn)在可以通過(guò)超聲影像來(lái)確認(rèn)大熊貓是否懷孕，但必須要等到大熊貓妊娠的晚期才能看到胎兒。因此，到現(xiàn)在為此還沒(méi)有一種在早期可以有效的區(qū)分大熊貓是真孕還是假孕的方法。然而，大熊貓的內(nèi)分泌和行為變化在大致估計(jì)分娩時(shí)間還是有用的。大熊貓可能出現(xiàn)延遲著床現(xiàn)象。一旦孕激素的第二次上升啟動(dòng)就認(rèn)為胚泡在子宮壁上開始著床，胎兒的不斷發(fā)育刺激了孕激素的不斷產(chǎn)生。彭世媛等(動(dòng)物學(xué)雜志-1993.28(2).-25-28)研究認(rèn)為在妊娠早期與晚期孕酮升高，到了晚期最高，妊振中期停滯在低水平上波動(dòng)，分娩前孕酮濃度值迅速下降。曾國(guó)慶等(動(dòng)物學(xué)報(bào).1992年04期)通過(guò)研究在妊振期和非妊振期尿中孕酮和CG樣物質(zhì)含量的變化后發(fā)現(xiàn)在大熊貓胚胎著床前，孕酮和CG樣物質(zhì)含量較低；胚胎著床后，二種激素的含量顯著上升并達(dá)到高峰，同時(shí)也為大熊貓的妊振診斷和預(yù)測(cè)分挽提供一些參考數(shù)據(jù)。何廷美等(雌性大熊貓配種后尿液孕酮含量的變動(dòng).四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào).第20卷.第2期.2002年6月)的研究發(fā)現(xiàn)大熊貓妊娠后期I 2個(gè)月對(duì)其尿液孕酮含量進(jìn)行檢測(cè)，可能有助于判斷該大熊貓是否產(chǎn)仔。過(guò)去的研究多受限于所參與的大熊貓數(shù)量，還沒(méi)有對(duì)一個(gè)群體進(jìn)行多年、大量地跟蹤研究。盡管超聲波檢查可以作為大熊貓是否懷孕的一個(gè)確診手段，但只有在大熊貓產(chǎn)前約3周才能檢測(cè)到胚胎/胎兒，同時(shí)還需要提前對(duì)大熊貓進(jìn)行馴化，使得整個(gè)研究的難度增大。目前還沒(méi)有關(guān)于大熊貓產(chǎn)仔時(shí)間預(yù)測(cè)的報(bào)導(dǎo)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是一種如何利用雌性大熊貓雌激素和孕激素的變化規(guī)律、科學(xué)、合理推定配種后雌性大熊貓妊娠天數(shù)的大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明一種大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法，包括以下步驟:(I)春季大熊貓繁殖配種期間，依照專利申請(qǐng)?zhí)?01210191762.5所述，按時(shí)間要求對(duì)雌性大熊貓進(jìn)行尿樣收集，在尿樣上標(biāo)記后進(jìn)行冷凍或冷藏保存，然后對(duì)尿樣采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)雌二醇濃度值和孕酮濃度值；然后在以大熊貓排尿時(shí)間作為橫坐標(biāo)、以雌二醇濃度值和孕酮濃度值作為縱坐標(biāo)的平面坐標(biāo)上，分別標(biāo)出排尿時(shí)間及其對(duì)應(yīng)的雌二醇濃度值和孕酮濃度值所確定的兩組坐標(biāo)點(diǎn)，將兩組坐標(biāo)點(diǎn)分別依次連接起來(lái)，繪制出雌二醇濃度值變化曲線圖和孕酮濃度值變化曲線圖，找出雌二醇濃度值的真實(shí)峰值及其出現(xiàn)時(shí)刻；(2)配種后，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)繼續(xù)檢測(cè)配種雌性大熊貓的尿樣孕酮濃度值，以雌二醇濃度值的真實(shí)峰值的出現(xiàn)時(shí)刻為O天，在以上平面坐標(biāo)上繼續(xù)繪制出孕酮濃度值的變化曲線圖，找出孕酮濃度值的峰值及其出現(xiàn)時(shí)刻；所述孕酮濃度值的峰值為所有孕酮濃度值的最大值；(3)根據(jù)雌二醇濃度值的真實(shí)峰值時(shí)刻與孕酮濃度值的峰值時(shí)刻之間的所有檢測(cè)出的孕酮濃度值，參考孕酮濃度值變化曲線圖，找出在兩峰值時(shí)刻之間的孕酮濃度值第一次上升期的截止日；(4)計(jì)算出孕酮濃度值第一次上升期的截止日與雌二醇濃度值的真實(shí)峰值時(shí)刻的間隔天數(shù)X，根據(jù)間隔天數(shù)X和回歸方程y=0.921X+51.26，計(jì)算出懷孕雌性大熊貓理論產(chǎn)仔時(shí)間I ;(5)根據(jù)理論產(chǎn)仔時(shí)間I和大熊貓產(chǎn)仔時(shí)間的波動(dòng)范圍4.38天，得到大熊貓預(yù)產(chǎn)其月 Y=y±4.38 (天)。所述的一種大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法，其孕酮濃度值第一次上升期的截止日也是孕酮濃度值第二次上升期的開始日，它的判斷方法如下:①選取雌性大熊貓雌二醇濃度值的真實(shí)峰值時(shí)刻與孕酮峰值時(shí)刻之間的所有檢測(cè)出的孕酮值，計(jì)算出孕酮值的平均值A(chǔ)1和標(biāo)準(zhǔn)差B1，得出A1 + 2Bi = C1 ；②剔除所有高于C1的數(shù)據(jù)，在剩余孕酮值中，計(jì)算出孕酮值的平均值A(chǔ)2和標(biāo)準(zhǔn)差B2，得出 A2 + 2B2 = C2 ；③剔除所有高于C2的數(shù)據(jù)，然后按以上方法再進(jìn)行計(jì)算，直到剩下的數(shù)據(jù)中沒(méi)有高于Cn時(shí)為止，Cn = An + 2Bn，其中η代表自然數(shù)；④最接近Cn的孕酮值的出現(xiàn)時(shí)刻為孕酮值第一次上升期截止日。所述的一種大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法，其按時(shí)間要求對(duì)雌性大熊貓進(jìn)行尿樣收集的過(guò)程如下:(I)觀察雌性大熊貓外陰部，若外陰部出現(xiàn)紅腫后，則每天收集I份雌性大熊貓晨尿；(2)從雌二醇連續(xù)上升后的第4天開始，每天間隔8小時(shí)左右收集3份尿樣；(3)雌性大熊貓發(fā)情高峰行為前后，每天間隔5小時(shí)左右收集5份尿樣；(4) 一旦監(jiān)測(cè)到雌二醇濃度值有下降趨勢(shì)，將尿樣收集間隔時(shí)間縮短為3小時(shí)左右；(5)大熊貓配種后每周至少收三個(gè)尿樣，直至產(chǎn)仔。
所述的任何一種大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法，其每一次大熊貓尿樣收集包括以下步驟:( I)清潔并拖干獸舍地面；(2)將需收集尿樣的大熊貓放入獸舍，工作人員守候，一旦大熊貓排出小便，立即將大熊貓放到其它獸舍；(3)用清潔注射器采集地面新鮮尿樣，裝入冷凍管，做好標(biāo)記，然后立即放入冰箱冷凍或冷藏裝置。成都大熊貓繁育研究基地通過(guò)連續(xù)5年記錄29次大熊貓妊娠產(chǎn)仔記錄，結(jié)果見(jiàn)表I:表1.大熊貓妊娠期三個(gè)組成時(shí)期
權(quán)利要求
1.一種大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法，包括以下步驟: (1)春季大熊貓繁殖配種期間，按時(shí)間要求對(duì)雌性大熊貓進(jìn)行尿樣收集，在尿樣上標(biāo)記后進(jìn)行冷凍或冷藏保存，然后對(duì)尿樣采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)雌二醇濃度值和孕酮濃度值；然后在以大熊貓排尿時(shí)間作為橫坐標(biāo)、以雌二醇濃度值和孕酮濃度值作為縱坐標(biāo)的平面坐標(biāo)上，分別標(biāo)出排尿時(shí)間及其對(duì)應(yīng)的雌二醇濃度值和孕酮濃度值所確定的兩組坐標(biāo)點(diǎn)，將兩組坐標(biāo)點(diǎn)分別依次連接起來(lái)，繪制出雌二醇濃度值變化曲線圖和孕酮濃度值變化曲線圖，找出雌二醇濃度值的真實(shí)峰值及其出現(xiàn)時(shí)刻； (2)配種后，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)繼續(xù)檢測(cè)配種雌性大熊貓的尿樣孕酮濃度值，在以上平面坐標(biāo)上繼續(xù)繪制出孕酮濃度值變化曲線圖，找出孕酮濃度值的峰值及其出現(xiàn)時(shí)刻； (3)根據(jù)雌二醇濃度值的真實(shí)峰值時(shí)刻與孕酮濃度值的峰值時(shí)刻之間的所有檢測(cè)出的孕酮濃度值，找出在兩峰值時(shí)刻之間的孕酮濃度值第一次上升期的截止日； (4)計(jì)算出孕酮濃度值第一次上升期的截止日與雌二醇濃度值的真實(shí)峰值時(shí)刻的間隔天數(shù)X，根據(jù)間隔天數(shù)X和回歸方程y=0.921X+51.26，計(jì)算出懷孕雌性大熊貓理論產(chǎn)仔時(shí)間I ; (5)根據(jù)理論產(chǎn)仔時(shí)間y和大熊貓產(chǎn)仔時(shí)間的波動(dòng)范圍4.38天，得到大熊貓預(yù)產(chǎn)期Y=y±4.38。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法，其按時(shí)間要求對(duì)雌性大熊貓進(jìn)行尿樣收集的過(guò)程如下: (1)觀察雌性大熊貓外陰部，若外陰部出現(xiàn)紅腫后，則每天收集I份雌性大熊貓晨尿； (2)從雌二醇連續(xù)上升后的第4天開始，每天間隔8小時(shí)左右收集3份尿樣； (3)雌性大熊貓發(fā)情高峰行為前后，每天間隔5小時(shí)左右收集5份尿樣； (4)一旦監(jiān)測(cè)到雌二醇濃度值有下降趨勢(shì)，將尿樣收集間隔時(shí)間縮短為3小時(shí)左右； (5)大熊貓配種后每周至少收三個(gè)尿樣，直至產(chǎn)仔。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的任何一種大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法，其每一次大熊貓尿樣收集包括以下步驟: (1)清潔并拖干獸舍地面； (2)將需收集尿樣的大熊貓放入獸舍，工作人員守候，一旦大熊貓排出小便，立即將大熊貓放到其它獸舍； (3)用清潔注射器采集地面新鮮尿樣，裝入冷凍管，做好標(biāo)記，然后立即放入冰箱冷凍或冷藏裝置。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種大熊貓預(yù)產(chǎn)期的預(yù)測(cè)方法，通過(guò)對(duì)繁育期間雌性大熊貓尿樣的長(zhǎng)時(shí)間檢測(cè)，得到雌二醇濃度值的真實(shí)峰值時(shí)刻和孕酮濃度值第一次上升期的截止日，然后計(jì)算出雌二醇濃度值的真實(shí)峰值時(shí)刻和孕酮濃度值第一次上升期的截止日的間隔天數(shù)X，根據(jù)間隔天數(shù)X和回歸方程y=0.921X+51.26，計(jì)算出懷孕雌性大熊貓理論產(chǎn)仔時(shí)間y，理論產(chǎn)仔時(shí)間y與產(chǎn)仔時(shí)間的波動(dòng)范圍4.38天相加減得到大熊貓預(yù)產(chǎn)期Y=y±4.38天，其結(jié)果與實(shí)際大熊貓妊娠期非常接近，為大熊貓種群的保護(hù)工作提供了非常寶貴的時(shí)間支持。
文檔編號(hào)G01N33/74GK103207280SQ20131009280
公開日2013年7月17日 申請(qǐng)日期2013年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月21日
發(fā)明者羅娌, 侯蓉, 張志和, 黃河, 王成東, 黃祥明, 蘭景超 申請(qǐng)人:成都大熊貓繁育研究基地