專利名稱：扶正固本顆粒的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種癌癥患者放、化療合并用藥，特別是涉及該藥物的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
扶正固本顆粒為益氣養(yǎng)陰，涼血解毒類用藥。用于食管癌，胃癌氣陰兩虛兼熱毒證患者放、化療時(shí)合并用藥。其現(xiàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)。在該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中制定了以下內(nèi)容。I)取本品15g，研細(xì)，置錐形瓶中，加甲醇20ml，振搖30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5:3:1:1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。2)取本品10g，研細(xì)，加乙醚40ml，低溫回流I小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液。另取齊墩果酸對(duì)照品，對(duì)照品加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液15 μ 1、對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯(5:2:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，100°C烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。3)取本品15g，研細(xì)，加甲醇40ml，加熱回流I小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，再加鹽酸2ml，置水浴上加熱30分鐘后，冷卻，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次10mL，合并乙酸乙酯液，置水浴上濃縮至約1ml，作為供試品溶液。另取何首烏對(duì)照藥材0.4g，加甲醇10ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取大黃素對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含0.4mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1、對(duì)照藥材溶液5 μ 1、對(duì)照品溶液2 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15:2:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)。4)檢查:應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2010年版一部附錄I C)。5)含量測(cè)定:色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-冰醋酸(48:52:1)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為280nm。理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的黃芩苷對(duì)照品10mg，置IOOml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取5ml，置IOml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml含黃芩苷0.05mg)。供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流I小時(shí)，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各IOy 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每袋含黃芩苷(C21H18O11)不得少于50.0mg0
上述質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)存在著比較嚴(yán)重的缺陷:首先，該標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于主要藥物有效成分含量的定量測(cè)定數(shù)量較少；其次，50%以上的組成藥物未進(jìn)行化學(xué)鑒別。中藥制劑質(zhì)量穩(wěn)定、可控和具有生產(chǎn)可重復(fù)性是藥物具有藥理和臨床結(jié)果可重復(fù)性的前提保證，中藥質(zhì)量能否得到控制以及中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是否科學(xué)化，是影響中藥產(chǎn)業(yè)化的重要制約因素。質(zhì)量可控性是藥品評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)則是藥品質(zhì)量可控性的具體體現(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種上述扶正固本顆粒的質(zhì)量控制方法，以確保生產(chǎn)的藥品質(zhì)量穩(wěn)定可控。本發(fā)明提供的扶正固本顆粒的質(zhì)量控制方法適合于由以下原料藥制備而成的藥物:黃芩、女貞子、淫羊藿、何首烏、地黃、黃精、茜草、人參。所述質(zhì)量控制方法包括鑒別方法和含量測(cè)定方法。其中，所述鑒別方法包括如下鑒別:
1)取所述藥物15g，研細(xì)，加甲醇20ml，振搖30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯:丁酮:甲酸:水=5:3:1:1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
2)取所述藥物10g，研細(xì)，加乙醚40ml，低溫回流I小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取齊墩果酸對(duì)照品，加乙醇制成Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液15 μ 1、對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷:丙酮:乙酸乙酯=5:2:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
3)取所述藥物15g，研細(xì)，加甲醇40ml，加熱回流I小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，再加鹽酸2ml，置水浴上加熱30分鐘，冷卻，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取何首烏對(duì)照藥材0.4g，加甲醇10ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取大黃素對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含0.4mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1、對(duì)照藥材溶液5 μ 1、對(duì)照品溶液2 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯:乙酸乙酯:甲酸=15:2:1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)；
4)取所述藥物15g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，通過內(nèi)徑2cm、柱高12cm的DlOl型大孔吸附樹脂柱，用水IOOml洗脫，棄去水洗液，再用50%乙醇IOOml洗脫，棄去50%乙醇洗脫液，繼用乙醇IOOml洗脫，收集乙醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取淫羊藿對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液15 μ 1、對(duì)照藥材8 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷:甲醇:水=14:6:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以20%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同的綠色熒光斑點(diǎn)；
5)取所述藥物30g，研細(xì)，加甲醇40ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙醚振搖提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，揮干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取茜草對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取大葉茜草素對(duì)照品，加甲醇制成每ImL含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液20 μ 1、對(duì)照藥材5 μ 1、對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以60-90°C石油醚:丙酮=12:1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同的綠色熒光斑點(diǎn)。所述含量測(cè)定方法包括黃芩苷含量、淫羊藿苷含量和大黃素含量的測(cè)定。本發(fā)明具體以下述高效液相色譜法測(cè)定所述黃芩苷的含量:
1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇:水:冰醋酸=48:52:1為流動(dòng)相；檢測(cè)波長280nm ;理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算不低于2000 ；
2)對(duì)照品溶液的制備:取黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加50%甲醇制成每Iml含50μg的對(duì)照品溶液；
3)供試品溶液的制備:取所述藥物，研細(xì)，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，稱定重量，加熱回流I小時(shí)，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得；
4)分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本發(fā)明具體以下述高效液相色譜法測(cè)定所述淫羊藿苷的含量:
1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相Α，0.2%磷酸溶液為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長270nm ;理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算不低于1500 ；
權(quán)利要求
1.扶正固本顆粒的質(zhì)量控制方法，所述扶正固本顆粒是由以下原料藥制備而成的藥物:黃芩、女貞子、淫羊藿、何首烏、地黃、黃精、茜草、人參，所述質(zhì)量控制方法中的鑒別方法包括如下鑒別: 1)取所述藥物15g，研細(xì)，加甲醇20ml，振搖30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯:丁酮:甲酸:水=5:3:1:1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 2)取所述藥物10g，研細(xì)，加乙醚40ml，低溫回流I小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取齊墩果酸對(duì)照品，加乙醇制成Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液15 μ 1、對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷:丙酮:乙酸乙酯=5:2:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清 晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 3)取所述藥物15g，研細(xì)，加甲醇40ml，加熱回流I小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，再加鹽酸2ml，置水浴上加熱30分鐘，冷卻，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取何首烏對(duì)照藥材0.4g，加甲醇10ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取大黃素對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含0.4mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1、對(duì)照藥材溶液5 μ 1、對(duì)照品溶液2 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯:乙酸乙酯:甲酸=15:2:1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)； 其特征在于所述質(zhì)量控制方法中的鑒別方法還包括如下鑒別: 4)取所述藥物15g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，通過內(nèi)徑2cm、柱高12cm的DlOl型大孔吸附樹脂柱，用水IOOml洗脫，棄去水洗液，再用50%乙醇IOOml洗脫，棄去50%乙醇洗脫液，繼用乙醇IOOml洗脫，收集乙醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取淫羊藿對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液15 μ 1、對(duì)照藥材8 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷:甲醇:水=14:6:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以20%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同的綠色熒光斑點(diǎn)； 5)取所述藥物30g，研細(xì)，加甲醇40ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙醚振搖提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，揮干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取茜草對(duì)照藥材0.5g，加甲醇20ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取大葉茜草素對(duì)照品，加甲醇制成每ImL含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液20 μ 1、對(duì)照藥材5 μ 1、對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以60-90°C石油醚:丙酮=12:1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同的綠色熒光斑點(diǎn)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的扶正固本顆粒的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法中的含量測(cè)定方法包括黃芩苷含量、淫羊藿苷含量和大黃素含量的測(cè)定。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的扶正固本顆粒的質(zhì)量控制方法，其特征在于以下述高效液相色譜法測(cè)定所述黃芩苷的含量: 1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇:水:冰醋酸=48:52:1為流動(dòng)相；檢測(cè)波長280nm ;理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算不低于2000 ； 2)對(duì)照品溶液的制備:取黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加50%甲醇制成每Iml含50μg的對(duì)照品溶液； 3)供試品溶液的制備:取所述藥物，研細(xì)，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，稱定重量，加熱回流I小時(shí)，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得； 4)分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的扶正固本顆粒的質(zhì)量控制方法，其特征在于以下述高效液相色譜法測(cè)定所述淫羊藿苷的含量: 1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相Α，0.2%磷酸溶液為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長270nm ;理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算不低于1500 ；
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的扶正固本顆粒的質(zhì)量控制方法，其特征在于以下述高效液相色譜法測(cè)定所述大黃素的含量: 1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇:0.2%磷酸=84:16為流動(dòng)相；檢測(cè)波長437nm ;理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算不低于2000 ； 2)對(duì)照品溶液的制備:取大黃素對(duì)照品，精密稱定，加甲醇制成每Iml含2.5μ g的對(duì)照品溶液； 3)供試品溶液的制備:取所述藥物，研細(xì)，取15g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，濾過，取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘?jiān)?0%乙醇20ml使溶解，再加鹽酸2ml，搖勻，置80°C水浴加熱I小時(shí)，立即冷卻，用三氯甲烷振搖提取3次，每次15ml，分取三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)蛹状级ㄈ萦?ml量瓶中，搖勻，用0.45 μ m微孔濾膜濾過，取濾液，即得; 4)分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了扶正固本顆粒的質(zhì)量控制方法，分別以薄層色譜法鑒別藥物中的黃芩、女貞子、何首烏、淫羊藿和茜草，以液相色譜法測(cè)定藥物中的黃芩苷、淫羊藿苷和大黃素含量。本發(fā)明建立的質(zhì)量控制方法中，藥材鑒別方法成熟可行，專屬性強(qiáng)，陰性無干擾，含量測(cè)定方法操作容易，精密度高，重現(xiàn)性好，使用本發(fā)明的質(zhì)量控制方法能夠精確、穩(wěn)定地控制藥物的質(zhì)量，以適應(yīng)藥物的工業(yè)化穩(wěn)定生產(chǎn)。
文檔編號(hào)G01N30/02GK103197026SQ20131011067
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年4月1日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月1日
發(fā)明者王六貴, 呂建英 申請(qǐng)人:山西振東開元制藥有限公司