超敏c反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒及檢測方法
【專利摘要】一種超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒及其檢測方法，包括HS-CRP反應(yīng)板，HS-CRP檢測緩沖液，HS-CRP?ID芯片；所述的HS-CRP檢測緩沖液是指含熒光標(biāo)記的小鼠抗人HS-CRP的單克隆抗體和含熒光標(biāo)記的羊抗兔IgG；所述的HS-CRP反應(yīng)板包括吸水紙，硝酸纖維素膜，樣品墊，PVC底板，小鼠抗人CRP的單克隆抗體，兔IgG。其目的是提供一種特異性強，靈敏度高，獲得檢測結(jié)果的時間短，操作方式簡便，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒及其檢測方法。
【專利說明】超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒及檢測方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種測定血清的試劑盒及其測試方法，尤其是超敏C反應(yīng)蛋白 (HS-CRP)熒光免疫層析法定量測定試劑盒及其檢測方法。

【背景技術(shù)】
[0002] C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein, CRP)因其能和肺炎雙球菌的細胞壁的C多糖起 沉淀反應(yīng)而得名，是相對分子質(zhì)量為115-140KD的血清β球蛋白。CRP持續(xù)增高提示機體 存在慢性炎癥或自身免疫疾病，CRP在病毒感染時不會升高，其變化不受患者的個體差異、 機體狀態(tài)和治療藥物的影響。近年來，隨著檢測技術(shù)的進步，采用超敏感方法檢測到的CRP 被稱為超敏CRP。大量的文章研究顯示，它在冠心病、中風(fēng)、周圍血管栓塞等疾病診斷和預(yù)測 中發(fā)揮越來越重要的作用，甚至被認(rèn)為是心血管病危險評估的"金標(biāo)準(zhǔn)"。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種特異性強，靈敏度高，獲得檢測結(jié)果的時間短，操作方式 簡便，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒及其檢測方法。
[0004] 本發(fā)明的超敏C反應(yīng)蛋白（HS-CRP)熒光免疫層析法檢測試劑盒，包括HS-CRP反 應(yīng)板，HS-CRP檢測緩沖液，HS-CRP ID芯片；所述的HS-CRP檢測緩沖液是指含熒光標(biāo)記的 小鼠抗人HS-CRP的單克隆抗體和含熒光標(biāo)記的羊抗兔IgG ;所述的HS-CRP反應(yīng)板包括吸 水紙，硝酸纖維素膜，樣品墊，PVC底板，小鼠抗人CRP的單克隆抗體，兔IgG ;
[0005] 所述HS-CRP反應(yīng)板采用如下步驟制成：
[0006] (1)、取 3. 44gNa2HP04H20,100g 蔗糖，2. lg 吐溫 20 (TWEEN-20)，10gPVPK-30,全部加 入1L燒瓶中，再向加入1L燒瓶中800ml純化水，充分?jǐn)嚢杌靹颍?br> [0007] (2)、向加入1L燒瓶中加入鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)pH，控制pH在7. 40-7. 45范圍 內(nèi)，定容至l〇〇〇ml ;
[0008] (3)、取20ml步驟⑵得到的液體，加入到50ml燒杯中，再向50ml燒杯中加入4mg 小鼠抗人CRP抗體，編號AB2,使抗體的終濃度為0. 2mg/ml ;
[0009] (4)、取20ml步驟（2)得到的液體，加入到另一個50ml燒杯中，加入6mg兔IgG,使 兔IgG終濃度為0· 3mg/ml ;
[0010] (5)、取硝酸纖維素膜（NC膜），將其裁剪為寬為2. 5cm的長條，長條的一端設(shè)定為 A端，另一端設(shè)定為B端，將步驟（3)制得的液體裝入劃膜機，設(shè)定劃線量為1 μ 1/cm，在距 A端1. 4cm處劃線即為檢測線；將步驟⑷制得的液體裝入劃膜機，設(shè)定劃線量為1 μ 1/cm， 在距A端1. lcm處劃線即為質(zhì)控線；
[0011] (6)、將步驟（5)制備的硝酸纖維素膜（NC膜）在37度下干燥至少2小時，干燥環(huán) 境濕度恒定在20%以下；
[0012] (7)、將硝酸纖維素膜（NC膜）的非點樣面粘帖在PVC底板上，將樣品墊裁剪為2cm 寬的長條，粘帖于B端的PVC底板上，覆蓋硝酸纖維素膜（NC膜）B端2mm，將吸收墊裁剪為 1. 8cm寬的長條，粘帖于A端的PVC底板上，覆蓋硝酸纖維素膜（NC膜）A端約5mm，用滾刷 輕壓已粘帖好的檢測版；
[0013] (8)、用剪切機從A端到B端裁剪為3mm寬的檢測條，裝殼，并將殼與干燥劑一同放 入鋁箔袋，抽真空并封口，即得HS-CRP反應(yīng)板；
[0014] 所述HS-CRP檢測緩沖液采用如下步驟制成：
[0015] (1)、準(zhǔn)備lmg含突光標(biāo)記的小鼠抗人CRP的單克隆抗體，編號AB1，使用Sephadex G25層析柱用0. 2M NaHC03 pH9. 0溶液進行脫鹽處理，收集脫鹽液2. 5ml，將其濃縮為2ml， 終濃度為lmg/ml ;
[0016] (2)、用 0· 2M NaHC03PH9. 0 溶液配置 0· 5mg/ml 的 Alexa Fluor610 溶液，并將其轉(zhuǎn) 移到棕色玻璃瓶中；
[0017] (3)、按照以下公式計算需要加入的0. 5mg/ml的Alexa Fluor610的體積
[0018] 抗體量（mg) Χ0· 102 (ml/mg) = 0· 5mg/ml Alexa Fluor610 的體積，
[0019] 此處需要加入 0· 102ml Alexa Fluor610
[0020] (4)、在室溫下攪拌混勻16小時；
[0021] (5)、使用S印hadex G25層析柱用0· 2M NaHC03pH9. 0溶液對步驟（4)制備的液體 進行脫鹽處理，將收集液用〇. 2MM濾器過濾后收集于棕色玻璃瓶中，共2. 5ml，得到1號過濾 液；
[0022] (6)、準(zhǔn)備lmg含熒光標(biāo)記的羊抗兔IgG，編號AB2,使用S印hadex G25層析柱用 0. 2MNaHC03pH9. 0溶液進行脫鹽處理，收集脫鹽液2. 5ml，將其濃縮為2ml ;終濃度為lmg/ ml ；
[0023] (7)、用 0· 2M NaHC03 ΡΗ9· 0 溶液配置 0· 5mg/ml 的 Alexa Fluor610 溶液，并將其 轉(zhuǎn)移到棕色玻璃瓶中；
[0024] (8)、按照以下公式計算需要加入的0· 5mg/ml的Alexa Fluor610的體積
[0025] 抗體量（mg) Χ0· 102 (ml/mg) =0· 5mg/ml Alexa Fluor610 的體積，
[0026] 此處需要加入 0· 102ml Alexa Fluor610
[0027] (9)、在室溫下攪拌混勻16小時；
[0028] (10)、使用S印hadex G25層析柱用0· 2M NaHC03 ρΗ9· 0溶液對步驟（9)制備的液 體進行脫鹽處理，將收集液用〇. 2ΜΜ濾器過濾后收集于棕色玻璃瓶中，共2. 5ml，得到二號 過濾液；
[0029] (11)、配置lOOmlO. 01M的ρΗ7· 2的PBS，然后向PBS中添加 2g的BSA，向PBS中添 加〇. 3g的吐溫20 (TWEEN-20)，向PBS中添加0. 04g的casein，得到制備液；
[0030] (12)、將步驟（5)所得的液體按照1份一號過濾液：1500份制備液的比例添加到 步驟（11)制備的液體中，將步驟（10)所得的液體按照1份二號過濾液：500份制備液的比 例添加到步驟（11)制備的液體中，即得HS-CRP檢測緩沖液。
[0031] 所述的HS-CRP ID芯片采用以下步驟制成：
[0032] 將HS-CRP標(biāo)準(zhǔn)曲線，質(zhì)控及批號信息用讀寫器通過讀寫軟件寫入外購的ID芯片， 即得HS-CRP ID芯片。
[0033] 本發(fā)明的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒，其中所述HS-CRP ID芯片 中所存儲的標(biāo)準(zhǔn)曲線中各標(biāo)準(zhǔn)點的濃度分別為〇、1. 〇、2. 0、4. 0、8. 0、10. 0μ g/ml。
[0034] 本發(fā)明的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒，其中所述室溫的溫度為 20°C -24°C。
[0035] 本發(fā)明的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒的檢測方法，包括如下步 驟：
[0036] 1)、將10 μ 1的樣本加入500 μ 1的所述檢測緩沖液中，充分混勻；
[0037] 2)、取60 μ 1混合液，加入到HS-CRP反應(yīng)板的測試區(qū)，反應(yīng)3分鐘；
[0038] 3)、將HS-CRP反應(yīng)板放入熒光檢測儀中，插入ID卡，儀器自動測量并出結(jié)果報告。
[0039] 本發(fā)明的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒及其檢測方法，包括HS-CRP 反應(yīng)板，HS-CRP檢測緩沖液，HS-CRP ID芯片；所述的HS-CRP檢測緩沖液是指含熒光標(biāo)記的 小鼠抗人HS-CRP的單克隆抗體和含熒光標(biāo)記的羊抗兔IgG ;所述的HS-CRP反應(yīng)板包括吸 水紙，硝酸纖維素膜，樣品墊，PVC底板，小鼠抗人CRP的單克隆抗體，兔IgG ;通過上千例的 大量實驗表明，本發(fā)明的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒及其檢測方法，具有 特異性強，靈敏度高，獲得檢測結(jié)果的時間短，操作方式簡便，檢測結(jié)果極其準(zhǔn)確可靠（實 驗中的準(zhǔn)確率高達100% )的特點，具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。
[0040] 下面對本發(fā)明的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒及其檢測方法作進 一步詳細說明。

【具體實施方式】
[0041] 本發(fā)明的超敏C反應(yīng)蛋白（HS-CRP)熒光免疫層析法檢測試劑盒，包括HS-CRP反 應(yīng)板，HS-CRP檢測緩沖液，HS-CRP ID芯片；所述的HS-CRP檢測緩沖液是指含熒光標(biāo)記的 小鼠抗人HS-CRP的單克隆抗體和含熒光標(biāo)記的羊抗兔IgG ;所述的HS-CRP反應(yīng)板包括吸 水紙，硝酸纖維素膜，樣品墊，PVC底板，小鼠抗人CRP的單克隆抗體，兔IgG ;
[0042] 所述HS-CRP反應(yīng)板采用如下步驟制成：
[0043] (1)、取 3. 44gNa2HP04H20,100g 蔗糖，2. lg 吐溫 20 (TWEEN-20)，10gPVPK-30,全部加 入1L燒瓶中，再向加入1L燒瓶中800ml純化水，充分?jǐn)嚢杌靹颍?br> [0044] (2)、向加入1L燒瓶中加入鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)pH，控制pH在7. 40-7. 45范圍 內(nèi)，定容至l〇〇〇ml ;
[0045] (3)、取20ml步驟⑵得到的液體，加入到50ml燒杯中，再向50ml燒杯中加入4mg 小鼠抗人CRP抗體，編號AB2,使抗體的終濃度為0. 2mg/ml ;
[0046] (4)、取20ml步驟（2)得到的液體，加入到另一個50ml燒杯中，加入6mg兔IgG,使 兔IgG終濃度為0· 3mg/ml ;
[0047] (5)、取硝酸纖維素膜（NC膜），將其裁剪為寬為2. 5cm的長條，長條的一端設(shè)定為 A端，另一端設(shè)定為B端，將步驟（3)制得的液體裝入劃膜機，設(shè)定劃線量為1 μ 1/cm，在距 A端1. 4cm處劃線即為檢測線；將步驟（4)制得的液體裝入劃膜機，設(shè)定劃線量為1 μ 1/cm， 在距A端1. lcm處劃線即為質(zhì)控線；
[0048] (6)、將步驟（5)制備的硝酸纖維素膜（NC膜）在37度下干燥至少2小時，干燥環(huán) 境濕度恒定在20%以下；
[0049] (7)、將硝酸纖維素膜（NC膜）的非點樣面粘帖在PVC底板上，將樣品墊裁剪為2cm 寬的長條，粘帖于B端的PVC底板上，覆蓋硝酸纖維素膜（NC膜）B端2mm，將吸收墊裁剪為 1. 8cm寬的長條，粘帖于A端的PVC底板上，覆蓋硝酸纖維素膜（NC膜）A端約5mm，用滾刷 輕壓已粘帖好的檢測版；
[0050] (8)、用剪切機從A端到B端裁剪為3mm寬的檢測條，裝殼，并將殼與干燥劑一同放 入鋁箔袋，抽真空并封口，即得HS-CRP反應(yīng)板；
[0051] 所述HS-CRP檢測緩沖液采用如下步驟制成：
[0052] (1)、準(zhǔn)備lmg含突光標(biāo)記的小鼠抗人CRP的單克隆抗體，編號AB1，使用Sephadex G25層析柱用0. 2M NaHC03pH9. 0溶液進行脫鹽處理，收集脫鹽液2. 5ml，將其濃縮為2ml，終 濃度為lmg/ml ;
[0053] (2)、用 0· 2M NaHC03PH9. 0 溶液配置 0· 5mg/ml 的 Alexa Fluor610 溶液，并將其轉(zhuǎn) 移到棕色玻璃瓶中；
[0054] (3)、按照以下公式計算需要加入的0. 5mg/ml的Alexa Fluor610的體積
[0055] 抗體量（mg) Χ0· 102 (ml/mg) = 0· 5mg/ml Alexa Fluor610 的體積，
[0056] 此處需要加入 0· 102ml Alexa Fluor610
[0057] (4)、在室溫下攪拌混勻16小時；
[0058] (5)、使用S印hadex G25層析柱用0· 2M NaHC03 ρΗ9· 0溶液對步驟（4)制備的液 體進行脫鹽處理，將收集液用〇. 2ΜΜ濾器過濾后收集于棕色玻璃瓶中，共2. 5ml，得到1號過 濾液；
[0059] (6)、準(zhǔn)備lmg含突光標(biāo)記的羊抗兔IgG，編號AB2,使用Sephadex G25層析柱用 0. 2MNaHC03pH9. 0溶液進行脫鹽處理，收集脫鹽液2. 5ml，將其濃縮為2ml ;終濃度為lmg/ ml ；
[0060] (7)、用 0· 2M NaHC03PH9. 0 溶液配置 0· 5mg/ml 的 Alexa Fluor610 溶液，并將其轉(zhuǎn) 移到棕色玻璃瓶中；
[0061] (8)、按照以下公式計算需要加入的0. 5mg/ml的Alexa Fluor610的體積
[0062] 抗體量（mg) Χ0· 102 (ml/mg) =0· 5mg/ml Alexa Fluor610 的體積，
[0063] 此處需要加入 0· 102ml Alexa Fluor610
[0064] (9)、在室溫下攪拌混勻16小時；
[0065] (10)、使用S印hadex G25層析柱用0· 2M NaHC03 ρΗ9· 0溶液對步驟（9)制備的液 體進行脫鹽處理，將收集液用〇. 2ΜΜ濾器過濾后收集于棕色玻璃瓶中，共2. 5ml，得到二號 過濾液；
[0066] (11)、配置lOOmlO. 01M的ρΗ7· 2的PBS，然后向PBS中添加2g的BSA，向PBS中添 加〇. 3g的吐溫20 (TWEEN-20)，向PBS中添加0. 04g的casein，得到制備液；
[0067] (12)、將步驟（5)所得的液體按照1份一號過濾液：1500份制備液的比例添加到 步驟（11)制備的液體中，將步驟（10)所得的液體按照1份二號過濾液：500份制備液的比 例添加到步驟（11)制備的液體中，即得HS-CRP檢測緩沖液。
[0068] 所述的HS-CRP ID芯片采用以下步驟制成：
[0069] 將HS-CRP標(biāo)準(zhǔn)曲線，質(zhì)控及批號信息用讀寫器通過讀寫軟件寫入外購的ID芯片， 即得HS-CRP ID芯片。
[0070] 所述HS-CRP ID芯片中所存儲的標(biāo)準(zhǔn)曲線中各標(biāo)準(zhǔn)點的濃度分別為0、1. 0、2. 0、 4· 0、8· 0、10. 0 μ g/ml。
【權(quán)利要求】
1.超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒，其特征在于：包括HS-CRP反應(yīng)板， HS-CRP檢測緩沖液，HS-CRP ID芯片；所述的HS-CRP檢測緩沖液是指含熒光標(biāo)記的小鼠抗 人HS-CRP的單克隆抗體和含熒光標(biāo)記的羊抗兔IgG ;所述的HS-CRP反應(yīng)板包括吸水紙，硝 酸纖維素膜，樣品墊，PVC底板，小鼠抗人CRP的單克隆抗體，兔IgG ; 所述HS-CRP反應(yīng)板采用如下步驟制成： (1) 、取 3. 44gNa2HP04H20,100g 蔗糖，2. lg 吐溫 20 (TWEEN-20)，10gPVPK-30,全部加入 1L 燒瓶中，再向加入1L燒瓶中800ml純化水，充分?jǐn)嚢杌靹颍? (2) 、向加入1L燒瓶中加入鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)pH，控制pH在7. 40-7. 45范圍內(nèi)，定 容至 1000ml ; (3) 、取20ml步驟⑵得到的液體，加入到50ml燒杯中，再向50ml燒杯中加入4mg小 鼠抗人CRP抗體，編號AB2,使抗體的終濃度為0. 2mg/ml ; (4) 、取20ml步驟⑵得到的液體，加入到另一個50ml燒杯中，加入6mg兔IgG，使兔 IgG終濃度為0· 3mg/ml ; (5) 、取硝酸纖維素膜（NC膜），將其裁剪為寬為2. 5cm的長條，長條的一端設(shè)定為A端， 另一端設(shè)定為B端，將步驟（3)制得的液體裝入劃膜機，設(shè)定劃線量為1 μ 1/cm，在距A端 1. 4cm處劃線即為檢測線；將步驟⑷制得的液體裝入劃膜機，設(shè)定劃線量為1 μ 1/cm，在距 A端1. lcm處劃線即為質(zhì)控線； (6) 、將步驟（5)制備的硝酸纖維素膜（NC膜）在37度下干燥至少2小時，干燥環(huán)境濕 度恒定在20%以下； (7) 、將硝酸纖維素膜（NC膜）的非點樣面粘帖在PVC底板上，將樣品墊裁剪為2cm寬的 長條，粘帖于B端的PVC底板上，覆蓋硝酸纖維素膜（NC膜）B端2mm，將吸收墊裁剪為1. 8cm 寬的長條，粘帖于A端的PVC底板上，覆蓋硝酸纖維素膜（NC膜）A端約5mm，用滾刷輕壓已 粘帖好的檢測版； (8) 、用剪切機從A端到B端裁剪為3mm寬的檢測條，裝殼，并將殼與干燥劑一同放入鋁 箔袋，抽真空并封口，即得HS-CRP反應(yīng)板； 所述HS-CRP檢測緩沖液采用如下步驟制成： (1) 、準(zhǔn)備lmg含熒光標(biāo)記的小鼠抗人CRP的單克隆抗體，編號AB1，使用S印hadex G25 層析柱用〇. 2M NaHC03 pH9. 0溶液進行脫鹽處理，收集脫鹽液2. 5ml，將其濃縮為2ml，終濃 度為 lmg/ml ; (2) 、用 0. 2M NaHC03 PH9. 0 溶液配置 0. 5mg/ml 的 Alexa Fluor610 溶液，并將其轉(zhuǎn)移 到棕色玻璃瓶中； (3) 、按照以下公式計算需要加入的0. 5mg/ml的Alexa Fluor610的體積 抗體量（mg)XO. 102(ml/mg) = 0· 5mg/ml Alexa Fluor610 的體積， 此處需要加入 〇· 102ml Alexa Fluor610 (4) 、在室溫下攪拌混勻16小時； (5) 、使用S印hadex G25層析柱用0. 2M NaHC03pH9. 0溶液對步驟（4)制備的液體進行 脫鹽處理，將收集液用0. 2MM濾器過濾后收集于棕色玻璃瓶中，共2. 5ml，得到1號過濾液； (6) 、準(zhǔn)備lmg含熒光標(biāo)記的羊抗兔IgG，編號AB2,使用S印hadex G25層析柱用 0. 2MNaHC03pH9. 0溶液進行脫鹽處理，收集脫鹽液2. 5ml，將其濃縮為2ml ;終濃度為lmg/ ml ： (7) 、用(λ 2M NaHC03PH9. 0溶液配置(λ 5mg/ml的Alexa Fluor610溶液，并將其轉(zhuǎn)移到 棕色玻璃瓶中； (8) 、按照以下公式計算需要加入的0. 5mg/ml的Alexa Fluor610的體積 抗體量（mg)XO. 102(ml/mg) = 0· 5mg/ml Alexa Fluor610 的體積， 此處需要加入 〇· 102ml Alexa Fluor610 (9) 、在室溫下攪拌混勻16小時； (10) 、使用S印hadex G25層析柱用0. 2M NaHC03pH9. 0溶液對步驟（9)制備的液體進 行脫鹽處理，將收集液用0. 2MM濾器過濾后收集于棕色玻璃瓶中，共2. 5ml，得到二號過濾 液； (11) 、配置lOOmlO. 01M的ρΗ7· 2的PBS，然后向PBS中添加2g的BSA，向PBS中添加 0. 3g的吐溫20 (TWEEN-20)，向PBS中添加0. 04g的casein，得到制備液； (12) 、將步驟（5)所得的液體按照1份一號過濾液：1500份制備液的比例添加到步驟 (11)制備的液體中，將步驟（10)所得的液體按照1份二號過濾液：500份制備液的比例添 加到步驟（11)制備的液體中，即得HS-CRP檢測緩沖液。 所述的HS-CRPID芯片采用以下步驟制成： 將HS-CRP標(biāo)準(zhǔn)曲線，質(zhì)控及批號信息用讀寫器通過讀寫軟件寫入外購的ID芯片，即得 HS-CRP ID 芯片。
2. 按照權(quán)利要求1所述的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒，其特征在于： 所述HS-CRP ID芯片中所存儲的標(biāo)準(zhǔn)曲線中各標(biāo)準(zhǔn)點的濃度分別為0、1. 0、2. 0、4. 0、8. 0、 10.0 μ g/ml〇
3. 按照權(quán)利要求2所述的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒，其特征在于： 所述室溫的溫度為202-24°C。
4. 如權(quán)利要求1或2或3所述的超敏C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析法檢測試劑盒的檢測方 法，其特征在于：包括如下步驟： 1) 、將10 μ 1的樣本加入500 μ 1的所述檢測緩沖液中，充分混勻； 2) 、取60 μ 1混合液，加入到HS-CRP反應(yīng)板的測試區(qū)，反應(yīng)3分鐘； 3) 、將HS-CRP反應(yīng)板放入熒光檢測儀中，插入ID卡，儀器自動測量并出結(jié)果報告。
【文檔編號】G01N33/558GK104122397SQ201310151166
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2013年4月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年4月27日
【發(fā)明者】鄢盛愷 申請人:北京豪邁生物工程有限公司