中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測定方法，該方法采用高效液相色譜法，使用一個色譜條件同時對含有巖白菜和甘草的中藥組合物安兒寧制劑中的巖白菜及甘草進行了含量測定，便于質(zhì)量控制，操作簡便，分析數(shù)據(jù)準確。既節(jié)省了分析人員的分析時間，提高了工作效率，同時提高了制劑的安全性、有效性及可控性。
【專利說明】中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測定方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥復方制劑的含量測定方法，特別涉及一種安兒寧制劑中巖白 菜、甘草含量測定方法，屬于醫(yī)藥【技術領域】。

【背景技術】
[0002] 安兒寧顆粒為金訶藏藥股份有限公司獨家產(chǎn)品，標準編號：WS-10640 (ZD-0640)-2002-2012Z。安兒寧顆粒是由如下重量配比的藥材制成的：天竺黃66. 7g、紅花 53. 3g、人工牛黃5. 3g、巖白菜53. 3g、甘草53. 3g、高山辣根菜53. 3g、短管兔耳草66. 7g、檀 香66. 7g、唐古特烏頭66. 7g。具有清熱祛風，化痰止咳等作用。用于小兒風熱感冒，咳嗽有 痰，發(fā)熱咽痛，上呼吸道感染見上述癥候者。由于其良好的療效，現(xiàn)已廣泛應用于臨床。
[0003] 藥物原有的質(zhì)量控制僅僅控制人工牛黃的質(zhì)量，方法極其簡單粗糙，根本不能全 面準確的反映該復方制劑的生產(chǎn)過程和控制藥品的質(zhì)量。甘草和巖白菜均具有很好的鎮(zhèn) 咳、化痰作用，為方中主藥。甘草和巖白菜均為提取后入藥，通過含量測定以檢測其方中質(zhì) 量，可更好的控制提取工藝，進而保證產(chǎn)品質(zhì)量的安全、有效、質(zhì)量可控。
[0004] 分別控制甘草和巖白菜的質(zhì)量，需進行使用兩種方法進行測定，經(jīng)過檢索，目前沒 有發(fā)現(xiàn)同時測定巖白菜及甘草含量的文獻和專利發(fā)明。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供一種安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測定方法。
[0006] 發(fā)明概述
[0007] 本發(fā)明使用一個色譜條件同時對安兒寧制劑中巖白菜、甘草進行了質(zhì)量控制，操 作簡便，分析數(shù)據(jù)準確。既節(jié)省了分析人員的分析時間，提高了工作效率，同時又提高了制 劑的安全性、有效性及可控性。
[0008] 本發(fā)明的技術方案如下：
[0009] -種安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測定方法，步驟如下：
[0010] 照高效液相色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；
[0011] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 乙腈為流動相A，以體積份數(shù)比0. 0 5 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式： Omin - 20min - 30min - 60min，乙臆：7% - 7% - 36% - 36% ;體積份數(shù)比 0· 05% 憐酸溶 液：93% - 93% - 64% - 64%，檢測波長為245nm-275nm ;理論板數(shù)按甘草酸峰計算應不低于 3000 ；
[0012] 對照品溶液的制備：取巖白菜素對照品、甘草酸銨對照品，加甲醇制成每1ml含巖 白菜素、甘草酸銨各50 μ g的溶液，即得；
[0013] 供試品溶液的制備：將固體安兒寧制劑研細后，取粉末4g，精密稱定，置具塞的錐 形瓶中，加入甲醇25ml，密塞，超聲處理30-40min，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾 過，取續(xù)濾液，即得；
[0014] 測定法：分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即 得。
[0015] 所述的安兒寧制劑是指含有巖白菜和甘草為主藥，同時含有天竺黃、紅花、人工牛 黃、高山辣根菜、短管兔耳草、檀香、唐古特烏頭的多種或全部，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料 制備成臨床可接受的任何一種劑型，包括膠囊劑、丸劑、微丸、滴丸、片劑、膠囊、顆粒、飲片 或分散片。
[0016] 所述的梯度洗脫方式為梯度性地改變洗脫液的組分（成分、離子強度等）或pH，以 期將層析柱上不同的組分合理的時間內(nèi)洗脫出來的方法。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，一種原料藥組成為天竺黃66. 7g、紅花53. 3g、人工牛黃5. 3g、 巖白菜53. 3g、甘草53. 3g、高山辣根菜53. 3g、短管兔耳草66. 7g、檀香66. 7g、唐古特烏頭 66. 7g的中藥組合物安兒寧顆粒中巖白菜、甘草含量測定方法，步驟如下：
[0018] 照高效液相色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；
[0019] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 乙腈為流動相A，以體積份數(shù)比0. 0 5 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式： Omin - 20min - 30min - 60min，乙臆：7% - 7% - 36% - 36% ;體積份數(shù)比 0· 05% 憐酸溶 液：93% - 93% - 64% - 64%，檢測波長為250nm ;理論板數(shù)按甘草酸峰計算應不低于3000 ;
[0020] 對照品溶液的制備：取巖白菜素對照品、甘草酸銨對照品，加甲醇制成每1ml含巖 白菜素、甘草酸銨各50 μ g的溶液，即得；
[0021] 供試品溶液的制備：將安兒寧顆粒研細后，取粉末4g，精密稱定，置具塞的錐形瓶 中，加入甲醇25ml，密塞，超聲處理30min，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù) 濾液，即得；
[0022] 測定法：分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即 得；
[0023] 安兒寧顆粒中巖白菜的含量以巖白菜素苷計，不得少于0. 7mg/g ;甘草含量以甘 草酸計，不得少于〇. 3mg/g。
[0024] 本發(fā)明使用一個色譜條件同時對含有巖白菜和甘草的安兒寧制劑進行質(zhì)量控制， 操作簡便，分析數(shù)據(jù)準確。既節(jié)省了分析人員的分析時間，提高了工作效率，同時提高了制 劑的安全性、有效性及可控性。例如安兒寧顆粒原質(zhì)量標準項下只有人工牛黃的含量測定 方法，不能有效的檢測其他主要成分巖白菜、甘草的含量。本發(fā)明對現(xiàn)有的安兒寧顆粒質(zhì)量 標準進行了相應提高，使用一個色譜條件同時對巖白菜及甘草進行了含量測定，提高了工 作效率，同時提高了制劑的安全性、有效性及可控性，從而確保了其臨床療效和廣大患者的 身體健康。
[0025] 下述實驗例和實施例用于進一步說明但不限于本發(fā)明。
[0026] 實驗例1含量測定實驗
[0027] 1.儀器、試藥和供試樣品
[0028] 儀器：日立L-2100泵，日立L-2400紫外檢測器，島津AUW-220D型電子天平。
[0029] 對照品：巖白采素對照品（中國藥品生物制品鑒定所）批號：111532-200202,甘早 酸銨對照品（中國生物制品鑒定所）批號：110731-200615。
[0030] 樣品：安兒寧顆粒（金訶藏藥股份有限公司提供)，批號：20121110,20121114， 20121119。
[0031] 2.檢測波長的選擇
[0032] 巖白菜素在275nm處有最大吸收峰；甘草酸銨在250nm處有最大吸收峰。制劑中 巖白菜素含量較甘草酸含量高一倍，故選擇巖白菜素最大吸收峰250nm為檢測波長。
[0033] 3.流動相選擇
[0034] 巖白菜素與甘草酸極性相差較大，采用等度洗脫很難對兩種成分進行同時測定， 故選擇梯度洗脫進行色譜分離。
[0035] 使用甲醇-水體系進行色譜分離時發(fā)現(xiàn)，在250nm下甲醇-水體系易形成較大的 梯度峰，同時峰性較差，影響測定。
[0036] 考慮色譜柱的耐受性，以及樣品的穩(wěn)定性使用乙腈-0. 05%磷酸體系進行梯度洗 脫時，以上問題得到解決。
[0037] 4、梯度洗脫時間的選擇
[0038] 通過大量實驗發(fā)現(xiàn)按以下時間進行洗脫時，巖白菜與甘草酸均能達到很好的檢測 要求。流動相A為乙腈，流動相B為0.05%磷酸。見表1和附圖1、附圖2。
[0039] 表1梯度洗脫表
[0040]

【權利要求】
1. 一種中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測定方法，包括米用2010年版《中 國藥典》一部附錄VI D高效液相色譜法進行測定；其特征在于步驟如下： 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙 腈為流動相A，以體積份數(shù)比0. 05%磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式： Omin - 20min - 30min - 60min，乙臆：7% - 7% - 36% - 36% ;體積份數(shù)比 0· 05% 憐酸溶 液：93% - 93% - 64% - 64%，檢測波長為250nm ;理論板數(shù)按甘草酸峰計算應不低于3000 ; 對照品溶液的制備：取巖白菜素對照品、甘草酸銨對照品，加甲醇制成每lml含巖白菜 素、甘草酸銨各50 μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備：將安兒寧制劑研細后，取粉末4g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中， 加入甲醇25ml，密塞，超聲處理30min，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾 液，即得； 測定法：分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
2. 權利要求1所述的一種中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測定方法，其特 征在于，所述的中藥組合物安兒寧制劑指含有巖白菜和甘草為主藥，同時含有天竺黃、紅 花、人工牛黃、高山辣根菜、短管兔耳草、檀香或唐古特烏頭中的多種或全部，按常規(guī)工藝， 加入常規(guī)輔料制備成臨床可接受的任何一種劑型，包括膠囊劑、丸劑、微丸、滴丸、片劑、膠 囊、顆粒、飲片或分散片。
3. 權利要求1所述的一種中藥組合物安兒寧制劑中巖白菜、甘草含量測定方法，其特 征在于，一種原料藥組成為天竺黃66. 7g、紅花53. 3g、人工牛黃5. 3g、巖白菜53. 3g、甘草 53. 3g、高山辣根菜53. 3g、短管兔耳草66. 7g、檀香66. 7g、唐古特烏頭66. 7g的中藥組合物 安兒寧顆粒中巖白菜、甘草含量測定方法，包括采用2010年版《中國藥典》一部附錄VI D高 效液相色譜法進行測定；步驟如下： 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙 腈為流動相A，以體積份數(shù)比0. 05%磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式： Omin - 20min - 30min - 60min，乙臆：7% - 7% - 36% - 36% ;體積份數(shù)比 0· 05% 憐酸溶 液：93% - 93% - 64% - 64%，檢測波長為250nm ;理論板數(shù)按甘草酸峰計算應不低于3000 ; 對照品溶液的制備：取巖白菜素對照品、甘草酸銨對照品，加甲醇制成每lml含巖白菜 素、甘草酸銨各50 μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備：將安兒寧顆粒研細后，取粉末4g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中， 加入甲醇25ml，密塞，超聲處理30min，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾 液，即得； 測定法：分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 安兒寧顆粒中巖白菜的含量以巖白菜素苷計，不得少于0. 7mg/g ;甘草含量以甘草酸 計，不得少于〇. 3mg/g。
【文檔編號】G01N30/02GK104122340SQ201310153344
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2013年4月27日 優(yōu)先權日:2013年4月27日
【發(fā)明者】孫緒丁, 趙延霞, 任松鵬, 李懷平, 馬宏偉 申請人:山東阿如拉藥物研究開發(fā)有限公司