一種疏枝刺柳珊瑚激光拉曼光譜的建立方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種疏枝刺柳珊瑚激光拉曼光譜的建立方法。一種疏枝刺柳珊瑚激光拉曼光譜的建立方法,包括如下步驟:(a)試樣的制備:取疏枝刺柳珊瑚樣品切成條塊狀顆粒后,裝入樣品瓶進(jìn)行速凍。已速凍樣品經(jīng)過真空冷凍干燥機(jī)后,再碾磨成粉末,然后用篩網(wǎng)過濾,得到粉末狀疏枝刺柳珊瑚樣品;(b)采用聚焦的激光束將含有微粒狀疏枝刺柳珊瑚的緩沖液囚禁在焦點,同時用來激發(fā)被囚禁疏枝刺柳珊瑚的拉曼散射,獲得測試樣品的拉曼光譜圖;本發(fā)明與現(xiàn)有的疏枝刺柳珊瑚分析鑒定技術(shù)相比,該鑒定方法屬純粹的光學(xué)方法,需要樣品量少,測試時間短,測試結(jié)果準(zhǔn)確,測試過程對樣品無損,不產(chǎn)生化學(xué)污染物,所建立的激光拉曼圖譜能快速有效地鑒定疏枝刺柳珊瑚樣品,為其深入研究提供有效的定性鑒定標(biāo)準(zhǔn)。
【專利說明】一種疏枝刺柳珊瑚激光拉曼光譜的建立方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于柳珊瑚鑒定領(lǐng)域,具體地說設(shè)計到一種利用激光拉曼光譜對疏枝刺柳珊瑚進(jìn)行定性鑒別的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]拉曼光譜法是通過用激發(fā)光照射目標(biāo)物,收集其內(nèi)部分子對激發(fā)光的散射光譜進(jìn)行分析,可以獲得分子振動、轉(zhuǎn)動方面信息,并應(yīng)用于判斷目標(biāo)物內(nèi)分子結(jié)構(gòu)及含量的一種方法。光鑷是利用高匯聚的激光束囚禁目標(biāo)物,以達(dá)到在溶液中將其固定的效果。結(jié)合光鑷技術(shù)的激光鑷子拉曼光譜稱為激光鑷子拉曼光譜(LTRS),其使目標(biāo)物更接近其自然生理狀況,降低了目標(biāo)物運動時產(chǎn)生的不確定性,減少了雜光的干擾,提高了信噪比。近年來,拉曼光譜技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于生物領(lǐng)域,如疾病判斷,微生物鑒定,細(xì)胞成像等多個方面。
[0003]柳珊瑚(Gorgonian)屬于腔腸動物門珊瑚蟲綱八放珊瑚亞綱軟珊瑚目,是硬軸珊瑚、全軸珊瑚和鈣軸珊瑚等三種亞目的統(tǒng)稱。柳珊瑚個體由中軸支撐,外形多以扇形、分枝形、鞭形等為主,全世界約有1200種。柳珊瑚的研究涉及到分類學(xué)、化學(xué)、生態(tài)學(xué)等多個方面。然而,柳珊瑚的拉曼 光譜特征一直未見文獻(xiàn)報道。本發(fā)明采用激光拉曼光譜方法對疏枝刺柳珊瑚進(jìn)行定性檢測,方法簡便,分析速度快。目前,尚未發(fā)現(xiàn)柳珊瑚相關(guān)的激光拉曼研究報導(dǎo)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明目的在于提供一種操作簡便,可迅速定性鑒定疏枝刺柳珊瑚的激光拉曼檢測方法。本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0005](I)試樣制備:疏枝刺柳珊瑚樣品切成條塊狀顆粒后,裝入樣品瓶進(jìn)行速凍,終點溫度約-10-100 °c。轉(zhuǎn)移已速凍樣品到真空冷凍干燥機(jī)的干燥室中,真空度為
0.01-0.1MPa,干燥時間為12-48h。干燥好的疏枝刺柳珊瑚樣品用瑪瑙研缽碾磨成粉末后,再用100-400目濾網(wǎng)過濾,得到粉末狀疏枝刺柳珊瑚樣品。
[0006](2)光譜條件:儀器激光功率lO-lOOmW,掃描時間5_20s。將一束波長為500-1500nm激光經(jīng)過濾波后導(dǎo)入一臺倒置生物顯微鏡。激光束經(jīng)油浸物鏡(孔徑為
1.00-3.00,放大倍數(shù)為50-300倍)聚焦后在焦點附近形成了一個單光束光勢阱。樣品池由下底密封了 20-200 μ m的石英蓋玻片和上邊密封了蓋玻片的玻璃板構(gòu)成,玻璃板中心有一個直徑為1-1Omm的孔。
[0007](3)光譜測定:含有疏枝刺柳珊瑚樣品微粒的緩沖液里放置在玻璃板中心孔中,被聚焦的激光束產(chǎn)生的輻射壓力囚禁在焦點附近,同時這束激光也用來激發(fā)被囚禁疏枝刺柳珊瑚樣品的拉曼散射。在測定疏枝刺柳珊瑚樣品前用懸浮在水中的直徑約1-10 μ m的聚苯乙烯球狀顆粒進(jìn)行校正。
[0008](4)特征光譜:將實際掃描結(jié)果與理論計算結(jié)果對比,校對,指認(rèn)激光拉曼圖譜中各個光譜峰的振動原理,確定疏枝刺柳珊瑚的主要特征峰范圍為1000-1050cm-1、1100-1200cm_\l450-1550cm_1o
[0009]本發(fā)明的優(yōu)點:采用本發(fā)明激光拉曼光譜對疏枝刺柳珊瑚進(jìn)行定性檢測,操作簡便,可快速準(zhǔn)確定性分析,可用于大規(guī)模樣品的快速檢測。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0010]圖1疏枝刺柳珊瑚的激光拉曼光譜。
【具體實施方式】
[0011]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明,但本發(fā)明并不僅僅局限于下述實施。
[0012]疏枝刺柳珊瑚樣品0.1Og切成條塊狀顆粒后,裝入樣品瓶進(jìn)行速凍,終點溫度約-80°c。轉(zhuǎn)移已速凍樣品到真空冷凍干燥機(jī)的干燥室中,真空度為0.08MPa,干燥時間為36h。干燥好的柳珊瑚樣品用瑪瑙研缽碾磨成粉末后,再用100目濾網(wǎng)過濾,得到疏枝刺柳珊瑚粉末狀樣品。 [0013]將一束波長為780nm激光經(jīng)過濾波后導(dǎo)入一臺尼康倒置生物顯微鏡(TE2000U,Nikon)。激光束經(jīng)油浸物鏡(孔徑為1.30,放大倍數(shù)為100倍)聚焦后在焦點附近形成了一個單光束光勢講。樣品池由下底密封了 100 μ m的石英蓋玻片和上邊密封了 I號蓋玻片的玻璃板構(gòu)成,玻璃板中心有一個直徑為6mm的孔。含有疏枝刺柳珊瑚樣品微粒的緩沖液里放置在玻璃板中心孔中,被聚焦的激光束產(chǎn)生的輻射壓力囚禁在焦點附近,同時這束激光也用來激發(fā)被囚禁疏枝刺柳珊瑚樣品的拉曼散射。在測定疏枝刺柳珊瑚樣品前用懸浮在水中的直徑約2 μ m的聚苯乙烯球狀顆粒進(jìn)行校正。
[0014]疏枝刺柳珊瑚樣品的激光拉曼光譜在1006、llll、1501cm-l譜帶峰突出。其中,1006cm^峰代表-CH3水平搖擺振動模式,llllcnT1峰代表C-C伸縮振動模式,150Icm^1峰代表C = C伸縮振動模式。
[0015]以上較佳實施例僅用于說明本發(fā)明的內(nèi)容,除此之外,本發(fā)明還有其他實施方式,但凡本領(lǐng)域技術(shù)人員因本發(fā)明所涉及之技術(shù)啟示,而采用等同替換或等效變形方式形成的技術(shù)方案均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種疏枝刺柳珊瑚激光拉曼圖譜的建立方法,其特征在于采用激光拉曼光譜法,具體包括如下步驟: (a)試樣制備:疏枝刺柳珊瑚樣品切成條塊狀顆粒后,裝入樣品瓶進(jìn)行速凍,終點溫度約-10-100°C。轉(zhuǎn)移已速凍樣品到真空冷凍干燥機(jī)的干燥室中,真空度為0.01-0.1MPa,干燥時間為12-48h。干燥好的疏枝刺柳珊瑚樣品用瑪瑙研缽碾磨成粉末后,再用100-400目濾網(wǎng)過濾,得到粉末狀疏枝刺柳珊瑚樣品。 (b)光譜條件:將一束波長為500-1500nm激光經(jīng)過濾波后導(dǎo)入一臺倒置生物顯微鏡。激光束經(jīng)油浸物鏡(孔徑為1.00-3.00,放大倍數(shù)為50-300倍)聚焦后在焦點附近形成了一個單光束光勢阱。樣品池由下底密封了 20-200 μ m的石英蓋玻片和上邊密封了蓋玻片的玻璃板構(gòu)成,玻璃板中心有一個直徑為1-1Omm的孔。 (c)光譜測定:含有疏枝刺柳珊瑚樣品微粒的緩沖液里放置在玻璃板中心孔中,被聚焦的激光束產(chǎn)生的輻射壓力囚禁在焦點附近,同時這束激光也用來激發(fā)被囚禁疏枝刺柳珊瑚樣品的拉曼散射。在測定疏枝刺柳珊瑚樣品前用懸浮在水中的直徑約1-10 μ m的聚苯乙烯球狀顆粒進(jìn)行校正。 (d)特征光譜:將實際掃描結(jié)果與理論計算結(jié)果對比,校對,指認(rèn)激光拉曼圖譜中各個光譜峰的振動原理,確定疏枝刺柳珊瑚的主要特征峰范圍為1000-1050οCM-1、1100-1200cm_\l450-1550cm_1o
【文檔編號】G01N1/42GK104020149SQ201310224796
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2013年6月7日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月7日
【發(fā)明者】高程海, 何碧娟, 陳波, 張榮燦, 柯珂, 雷富, 王一兵 申請人:廣西科學(xué)院