一種梨果實(shí)石細(xì)胞木質(zhì)素組織分布的檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種梨果實(shí)石細(xì)胞木質(zhì)素組織分布檢測(cè)方法，先用鹽酸浸泡處理梨果實(shí)切片，S-木質(zhì)素組織分布的檢測(cè)用1％-2%的KMnO4溶液染色，染色后氨水封片；G/S-木質(zhì)素組織分布的檢測(cè)用％間苯三酚溶液染色，染色后鹽酸封片；本發(fā)明先用鹽酸浸泡處理梨果實(shí)切片，使梨果實(shí)切片的石細(xì)胞通透性增加，有利于染色劑對(duì)木質(zhì)素單體著色。由于梨石細(xì)胞中G,S型木質(zhì)素相互交聯(lián)沉積在石細(xì)胞壁纖維素上，不易被區(qū)別開來，但是先用鹽酸處理后，增加了梨果實(shí)切片石細(xì)胞的通透性，從而使木質(zhì)素單體更容易著色，利用不同的染色技術(shù)能夠很好的區(qū)別開總木質(zhì)素與S-木質(zhì)素單體的分布狀況。
【專利說明】一種梨果實(shí)石細(xì)胞木質(zhì)素組織分布的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及木質(zhì)素檢測(cè)方法，尤其是一種通過對(duì)不同類型木質(zhì)素單體染色，分析梨果實(shí)石細(xì)胞木質(zhì)素不同單體分布的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]木質(zhì)素一般分為紫丁香基木質(zhì)素(S-木質(zhì)素)、愈創(chuàng)木基木質(zhì)素(G-木質(zhì)素)和對(duì)輕基苯基木質(zhì)素(H-木質(zhì)素)。一般裸子植物為G-木質(zhì)素；被子植物為GS-木質(zhì)素；禾本植物為GSH-木質(zhì)素。而梨屬于被子植物。木質(zhì)素在梨果實(shí)薄壁細(xì)胞的細(xì)胞壁上沉積引起細(xì)胞壁發(fā)生次生加厚形成石細(xì)胞。梨果實(shí)果肉中石細(xì)胞木質(zhì)素的分布以及不同木質(zhì)素單體的分布都對(duì)梨果實(shí)品質(zhì)產(chǎn)生影響。因此，需要有一種準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、快速的方法來檢測(cè)梨果實(shí)果肉中的木質(zhì)素及不同木質(zhì)素單體的分布。
[0003]目前梨果實(shí)果肉石細(xì)胞木質(zhì)素分布的分析方法主要是采用吳少華等方法切片觀察，該方法很難從整體上觀察梨果實(shí)果肉中石細(xì)胞木質(zhì)素整體的分布，由于梨果實(shí)中不同類型木質(zhì)素相互交聯(lián)在一起，也不能將梨果實(shí)石細(xì)胞中不同類型的木質(zhì)素單體區(qū)分開來。本發(fā)明通過分析梨果實(shí)石細(xì)胞木質(zhì)素的特性和其在梨果實(shí)中分布的特性，以及不同木質(zhì)素單體結(jié)構(gòu)的差異性，選擇了一種可以快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)梨果肉中石細(xì)胞木質(zhì)素的分布，同時(shí)可以很好的區(qū)分開來不同類型木質(zhì)素在果實(shí)中分布的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明為了避免現(xiàn)有技術(shù)存在的不足之處，提供一種梨果實(shí)石細(xì)胞木質(zhì)素組織分布及不同類型木質(zhì)素單體組織分布的檢測(cè)方法，通過分析梨果實(shí)中的木質(zhì)素的分布以及不同類型木質(zhì)素單體分布的差別，來輔助篩選石細(xì)胞、木質(zhì)素含量低的高品質(zhì)酥梨品種。
[0005]本發(fā)明解決技術(shù)問題采用如下方案:
[0006]一種梨果實(shí)石細(xì)胞木質(zhì)素組織分布檢測(cè)方法，其特征在于，按如下步驟進(jìn)行:
[0007](I) S-木質(zhì)素組織分布的檢測(cè):將待測(cè)梨果實(shí)切片在2mol/L_2.5mol/L的鹽酸中浸泡5min，蒸餾水沖洗3次，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)I % -2%的KMnO4溶液染色3min_5min，染色后用2mol/L-2.5mol/L HCl里浸泡lmin，蒸餾水清洗3次，蒸餾水清洗后用體積濃度25%氨水封片；
[0008](2)G/S-木質(zhì)素組織分布的檢測(cè):將待測(cè)梨果實(shí)切片在2mol/L_2.5mol/L的鹽酸中浸泡5min-7min,然后用體積分?jǐn)?shù)2%間苯三酹溶液染色3min-5min,然后用6.5mol/L-7.5mol/LHCl 封片。
[0009]所述切片是指果實(shí)的橫切片，即橫切方向與果實(shí)上下方向相垂直。
[0010]與已有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果體現(xiàn)在:
[0011]本發(fā)明通過染色法檢測(cè)梨果實(shí)中石細(xì)胞木質(zhì)素分布，通過木質(zhì)素的分布來輔助篩選石細(xì)胞含量少的聞品質(zhì)醉梨品種。
[0012]本發(fā)明先用鹽酸浸泡處理梨果實(shí)切片，使梨果實(shí)切片的石細(xì)胞通透性增加，有利于染色劑對(duì)木質(zhì)素單體著色。從而解決了以前梨石細(xì)胞不易著色的問題。由于梨石細(xì)胞中G，S型木質(zhì)素相互交聯(lián)沉積在石細(xì)胞壁纖維素上，不易被區(qū)別開來，但是先用鹽酸處理后，增加了梨果實(shí)切片石細(xì)胞的通透性，從而使木質(zhì)素單體更容易著色，利用不同的染色技術(shù)能夠很好的區(qū)別開總木質(zhì)素與S-木質(zhì)素單體的分布狀況。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0013]圖1是實(shí)施例1按本發(fā)明方法獲得的總木質(zhì)素染色效果及木質(zhì)素分布圖。
[0014]圖2是實(shí)施例1對(duì)照試驗(yàn)方法獲得總木質(zhì)素染色效果及木質(zhì)素分布圖。
[0015]圖3是實(shí)施例2按本發(fā)明方法獲得的S木質(zhì)素染色效果及木質(zhì)素分布圖。
[0016]以下結(jié)合附圖通過【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案做進(jìn)一步解釋說明。
【具體實(shí)施方式】
[0017]以下實(shí)施例中所使用的試劑有:2.2mol/L和7mol/L鹽酸，1.5%KMn04溶液，25%氨水，2%間苯三酚溶液(無水乙醇配制)。
[0018]實(shí)施例1G/S-木質(zhì)素(總木質(zhì)素)組織分布的檢測(cè)
[0019](I)將待測(cè)梨果實(shí)切片在2-2.5mol/L的鹽酸中浸泡5_7min，然后用體積分?jǐn)?shù)2%間苯三酚溶液染色3-5min，然后用6.5-7.5mol/L HCl封片，染色后結(jié)果如圖1所示。
[0020](2)對(duì)照方法:梨果實(shí)切片先用2%間苯三酚(無水乙醇配制)溶液染色3.5min，然后在6.5-7.5mol/L HCl封片，染色結(jié)果如圖2所示。
[0021 ] 實(shí)施例2S-木質(zhì)素組織分布的檢測(cè)
[0022](I)將待測(cè)梨果實(shí)切片在2-2.5mol/L的鹽酸中浸泡5min，蒸餾水沖洗3次，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)1-2%的KMnO4溶液染色3-5min，2-2.5mol/L HCl里浸泡lmin，蒸餾水清洗3次，蒸餾水清洗后用體積濃度25%氨水封片，染色結(jié)果如圖3所示。
【權(quán)利要求】
1.一種梨果實(shí)石細(xì)胞木質(zhì)素組織分布的檢測(cè)方法，其特征在于，按如下步驟進(jìn)行: (1)S-木質(zhì)素組織分布的檢測(cè):將待測(cè)梨果實(shí)切片在2mol/L-2.5mol/L的鹽酸中浸泡5min,蒸餾水沖洗3次，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)I % _2%的KMnO4溶液染色3min_5min，染色后用2mol/L-2.5mol/L HCl里浸泡lmin，蒸餾水清洗3次，蒸餾水清洗后用體積濃度25%氨水封片; (2)G/S-木質(zhì)素組織分布的檢測(cè):將待測(cè)梨果實(shí)切片在2mol/L-2.5mol/L的鹽酸中浸泡5min-7min,然后用體積分?jǐn)?shù)2%間苯三酹溶液染色3min-5min,然后用6.5mol/L-7.5mol/LHCl 封片。
【文檔編號(hào)】G01N1/30GK103439159SQ201310370103
【公開日】2013年12月11日 申請(qǐng)日期:2013年8月22日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月22日
【發(fā)明者】蔡永萍, 鄒鶴偉, 閆沖沖, 張楠, 金青, 尹梅 申請(qǐng)人:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)