一種測定塞來昔布中三氟乙酸殘留量的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測定塞來昔布中三氟乙酸殘留量的方法，該方法采用氣相色譜法，選用毛細管柱，ECD為檢測器，以硫酸-甲醇，硫酸二甲酯，碘甲烷為甲酯化試劑，將三氟乙酸通過甲酯化生成合適頂空進樣的三氟乙酸甲酯，與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的方法可以用于塞來昔布中三氟乙酸的含量的測定。
【專利說明】一種測定塞來昔布中三氟乙酸殘留量的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物分析技術，更為具體的說，涉及一種氣相色譜法測定塞來昔布中
三氟乙酸含量的方法。
【背景技術】
[0002]三氟乙酸是一種極強酸性有機酸，同時具有很多無機物及有機物的能力，使之具有優(yōu)異的反應性能，從而在醫(yī)藥，農藥，燃料，氨基酸保護，有機合成，材料處理等領域得到廣泛的應用。作為含氟醫(yī)藥、農藥和染料的中間體由于三氟甲基基團在含氟醫(yī)藥、農藥、染料中表現(xiàn)出優(yōu)異活性，三氟乙酸作為引入三氟甲基基團的主要原料。
[0003]塞來昔布是一種新一代的NSAID，具有獨特的作用機制即特異性地抑制C0X-2。達到抗炎、鎮(zhèn)痛及退熱作用。由于在塞來昔布制備過程中會存在三氟乙酸的殘留。
[0004]根據(jù)《中國藥典》規(guī)定，三氟乙酸劃為，尚無足夠毒理學資料的第四類溶劑，應根據(jù)生產工藝的特點，制定相應的限度，使其符合產品規(guī)范、藥品生產質量管理規(guī)范(GMP)或其他基本的質量要求。
[0005]現(xiàn)有檢測三氟乙酸的方法:
I)將藥物進行氧瓶燃燒破壞后，用茜素氟藍比色法測定氟，再換算成三氟乙酸含量的方法。
[0006]2)離子色譜法，原理是利用三氟乙酸不同于其他陰離子的電導率，使用電導池檢測器對三氟乙酸進行定量定性分析。
[0007]與現(xiàn)有方法相比較，本方法可以避免使用方法1，造成分子結構中氟元素對檢測結果的干擾，還可以達到較方法2更高的檢測靈敏度。

【發(fā)明內容】

[0008]發(fā)明的目的是提供一種用氣相色譜法分析測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，可用于塞來昔布產品的質量控制。
[0009]本發(fā)明提供一種用氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，采用毛細管柱，以ECD為檢測器，硫酸-甲醇或硫酸二甲酯-甲醇、碘甲烷-甲醇為溶劑。
[0010]本發(fā)明提供一種用氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，其中溶劑硫酸-甲醇的體積比例為的濃度為廣12:99?88，硫酸二甲酯-甲醇的體積比例為的濃度為0.5-6:99.5?94，碘甲烷-甲醇的體積比例為的濃度為0.5-6:99.5?94。
[0011]本發(fā)明提供一種用氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，其中溶劑硫酸-甲醇的體積比例為的濃度為10:90，硫酸二甲酯-甲醇的體積比例為的濃度為5: 95，碘甲烷-甲醇的體積比例為的濃度為5: 95。
[0012]本發(fā)明提供一種用氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，其中所述酯化的溫度為60-85°C。
[0013]本發(fā)明提供一種用氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，其中頂空進樣進樣頂空瓶的溫度為45飛5°C。
[0014]本發(fā)明提供一種用氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，包括如下步驟:
I)取供試樣品適量至頂空進樣瓶中，加硫酸-甲醇或硫酸二甲酯-甲醇、碘甲烷-甲醇溶液溶解制成每Irnl含供試品IOmg的樣品溶液。
[0015]2)將壓蓋后的頂空瓶置6(T85°C水浴加熱60分鐘衍生，優(yōu)選水浴80°C。
[0016]3)設置柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣口溫度為140°C ;檢測器為E⑶；檢測器溫度為25(T350°C，最佳溫度為350°C ；色譜柱為DB-624毛細管柱。
[0017]4)頂空進樣時，頂空瓶的溫度為45-55 °C，最佳溫度為55°C。
[0018]5)抽取頂空瓶上部氣體0. 1.0ml，優(yōu)選為0.1ml，注入氣相色譜儀完成被測樣品
三氟乙酸含量的測定。
[0019]這里硫酸-甲醇的體積比為f 12:99-88，優(yōu)選10:90，硫酸二甲酯-甲醇的體積比為0.5-6:99.5-96，優(yōu)選5:95，碘甲烷-甲醇的體積比為0.5-6:99.5-96，優(yōu)選5:95。
[0020]本發(fā)明提供一種用氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，包括如下步驟:
O取供試樣品適量至頂空進樣瓶中，加硫酸-甲醇溶液溶解制成每Irnl含供試品IOmg的樣品溶液。
[0021]2)將壓蓋后的頂空瓶置80°C水浴加熱60分鐘衍生。
[0022]3)設置柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣口溫度為140°C;檢測器為E⑶；檢測器溫度為350°C，色譜柱為DB-624毛
細管柱。
[0023]4)頂空進樣時，頂空瓶的溫度為55°C。
[0024]5)抽取頂空瓶上部氣體0.1ml，注入氣相色譜儀完成被測樣品三氟乙酸含量的測定。
[0025]這里硫酸甲醇的體積比為10:90,硫酸二甲酯-甲醇的體積比為5:95,碘甲烷-甲醇的體積比為5:95。
[0026]張莉公開了將藥物進行氧瓶燃燒破壞后，用茜素氟藍比色法測定氟，再換算成三氟乙酸含量的方法。(《華西藥學雜志》2001，16 (6):427-428)該方法將樣品用氧瓶燃燒進行破壞，使三氟乙酸中的氟成為無機氟離子，用茜素氟藍比色法測定氟，再換算成三氟乙酸的量，然而該方法使用有局限性。因為該方法要對樣品進行氧瓶燃燒破壞，只適用于藥物分子結構中不含氟元素的有機化合物，如果被測化合物分子中含有氟元素則無法對其進行檢測。本發(fā)明提供的檢測方法，提高了測定的專屬性，避免了分子結構中含有的氟元素對試驗結果的干擾。
[0027]【專利附圖】

【附圖說明】:
`圖1為硫酸-甲醇的氣相色譜圖；
圖2為三氟乙酸經過衍生的氣相色譜圖；
圖3為三氟乙酸甲酯的氣相色譜圖；
圖4為樣品I的氣相色譜圖；圖5為樣品2的氣相色譜圖。
[0028]以下通過實施例形式再對本發(fā)明的內容作進一步詳細說明，但不應就此理解為本發(fā)明上述主題范圍內僅限于以下實施例。在不脫離本發(fā)明上述技術前提下，根據(jù)本領域普通技術知識和慣用手段做出的相應替換或變更的修改，均包括在本發(fā)明的范圍內。
[0029]實施例1儀器與條件
Clarus500GC型氣相色譜儀配ECD檢測器，Turbomatrix40型頂空進樣器，DB-624石
英毛細管柱色譜柱。
[0030]色譜條件:柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣溫度:1400C ;檢測器=ECD ;檢測器溫度:350°C ;載氣=N20
[0031]頂空條件:加熱爐溫度:55 0C ,進樣量0.1ml0
[0032]試驗步驟
精密加入10%硫酸-甲醇溶液2ml置頂空瓶中，密封，作為供試品溶液。
[0033]將壓蓋后的頂空瓶置80°C水浴加熱60分鐘衍生，放置室溫。
[0034]取供試品照上述條件進行氣相分析，記錄色譜圖，結果見圖1 (在三氟乙酸甲酯的出峰位置上沒有色譜峰)。
[0035]實施例2儀器與條件
Clarus500GC型氣相色譜儀配ECD檢測器，Turbomatrix40型頂空進樣器，DB-624石
英毛細管柱色譜柱。
[0036]色譜條件:柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣溫度:1400C ;檢測器=ECD ;檢測器溫度:350°C ;載氣=N20
[0037]頂空條件:加熱爐溫度:55 0C ,進樣量0.1ml。
[0038]試驗步驟
精密加入含有三氟乙酸4.0ug/ml的10%硫酸-甲醇溶液2ml置頂空瓶中使之溶解，密封，作為供試品溶液。
[0039]將壓蓋后的頂空瓶置80°C水浴加熱60分鐘衍生，放置室溫。
[0040]取供試品照上述條件進行氣相分析，記錄色譜圖，結果見圖2 (圖2中保留時間為
6.1Smin的色譜峰為三氟乙酸經過衍生，生成的三氟乙酸甲酯的色譜峰)。
[0041]實施例3儀器與條件
Clarus500GC型氣相色譜儀配ECD檢測器，Turbomatrix40型頂空進樣器，DB-624石
英毛細管柱色譜柱。
[0042]色譜條件:柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣溫度:1400C ;檢測器=ECD ;檢測器溫度:350°C ;載氣=N20
[0043]頂空條件:加熱爐溫度:55 0C ,進樣量0.1ml0
[0044]試驗步驟
精密加入含有三氟乙酸甲酯lug/ml的甲醇溶液2ml，置頂空瓶中使之溶解，密封，作為供試品溶液。[0045]取供試品照上述條件進行氣相分析，記錄色譜圖，結果見圖3 (圖3中保留時間為
6.2Imin的色譜峰為三氟乙酸甲酯的色譜峰)。
[0046]實施例4儀器與條件
Clarus500GC型氣相色譜儀配ECD檢測器，Turbomatrix40型頂空進樣器，DB-624石
英毛細管柱色譜柱。
[0047]色譜條件:柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣溫度:1400C ;檢測器=ECD ;檢測器溫度:350°C ;載氣=N20
[0048]頂空條件:加熱爐溫度:55 0C ,進樣量0.1ml。
[0049]試驗步驟
取供試品塞來昔布20mg，精密稱定，精密加入10%硫酸-甲醇溶液2ml置頂空瓶中使之溶解，密封，作為供試品溶液。
[0050]將壓蓋后的頂空瓶置80°C水浴加熱60分鐘衍生，放置室溫。
[0051]取供試品照上述條件進行氣相分析，記錄色譜圖，結果見圖4 (在三氟乙酸甲酯的出峰位置上未檢出三氟乙酸衍生后生成的三氟乙酸甲酯)。
[0052]實施例5儀器與條件
Clarus500GC型氣相色譜儀配ECD檢測器，Turbomatrix40型頂空進樣器，DB-624石
英毛細管柱色譜柱。
[0053]色譜條件:柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣溫度:1400C ;檢測器=ECD ;檢測器溫度:350°C ;載氣=N20
[0054]頂空條件:加熱爐溫度:55 0C ,進樣量0.1ml0
[0055]試驗步驟
取供試品塞來昔布19.8mg，精密稱定，精密加入10%硫酸-甲醇溶液2ml置頂空瓶中使之溶解，密封，作為供試品溶液。
[0056]將壓蓋后的頂空瓶置80°C水浴加熱60分鐘衍生，放置室溫。
[0057]取供試品照上述條件進行氣相分析，記錄色譜圖，結果見圖5 (在三氟乙酸甲酯的出峰位置上未檢出三氟乙酸衍生后生成的三氟乙酸甲酯)。
[0058]實施例6儀器與條件
Clarus500GC型氣相色譜儀配ECD檢測器，Turbomatrix40型頂空進樣器，DB-624石
英毛細管柱色譜柱。
[0059]色譜條件:柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣溫度:1400C ;檢測器=ECD ;檢測器溫度:350°C ;載氣=N20
[0060]頂空條件:加熱爐溫度:55 V，進樣量0.1mlo
[0061]試驗步驟
取供試品塞來昔布20.7mg，精密稱定，精密加入5%硫酸二甲酯-甲醇溶液2ml置頂空瓶中使之溶解，密封，作為供試品溶液。
[0062]將壓蓋后的頂空瓶置80°C水浴加熱60分鐘衍生，放置室溫。[0063]取供試品照上述條件進行氣相分析，記錄色譜圖，結果未檢出三氟乙酸衍生后生成的三氟乙酸甲酯。
[0064]實施例7儀器與條件
Clarus500GC型氣相色譜儀配ECD檢測器，Turbomatrix40型頂空進樣器，DB-624石
英毛細管柱色譜柱。
[0065]色譜條件:柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣溫度:1400C ;檢測器=ECD ;檢測器溫度:350°C ;載氣=N20
[0066]頂空條件:加熱爐溫度:55 V，進樣量0.1mlo
[0067]試驗步驟
取供試品塞來昔布20.2mg，精密稱定，精密加入5%碘甲烷-甲醇溶液2ml置頂空瓶中使之溶解，密封，作為供試品溶液。
[0068]將壓蓋后的頂空瓶置80°C水浴加熱60分鐘衍生，放置室溫。
[0069]取供試品照上述條件進行氣相分析，記錄色譜圖，結果未檢出三氟乙酸衍生后生成的三氟乙酸甲酯。
【權利要求】
1.一種氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，其特征在于以DB-624毛細管柱，以ECD為檢測器，硫酸-甲醇，硫酸二甲酯，碘甲烷為甲酯化試劑，樣品經過保溫酯化，頂空進樣。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中溶劑硫酸-甲醇溶液中，硫酸與甲醇的體積比例為的濃度為12:99-88，硫酸二甲酯-甲醇0.5-6:99.5-94，碘甲烷-甲醇0.5-6:99.5-94。
3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其中，硫酸與甲醇的比例為10:90，硫酸二甲酯-甲醇5: 95，碘甲烷-甲醇5: 95。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，樣品經過保溫酯化，酯化的溫度為6(T85°C。
5.根據(jù)權利要求4所述的方法，其中，酯化的溫度為80°C。
6.根據(jù)權利要求1所述的方法，酯化后的樣品頂空進樣，進樣頂空瓶的溫度為45 -55。。。
7.根據(jù)權利要求6所述的方法，其中，進樣的頂空瓶的溫度為50°C。
8.一種氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，包括如下步驟:(1)取供試樣品適量至頂空進樣瓶中，加硫酸-甲醇或硫酸二甲酯-甲醇、碘甲烷-甲醇溶液溶解制成每Iml含供試品IOmg的樣品溶液；(2)將壓蓋后的頂空瓶置6(T85°C水浴加熱60分鐘衍生，優(yōu)選水浴80°C；(3)設置柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣口溫度為140°C ;檢測器為E⑶；檢測器溫度為25(T350°C，最佳溫度為350°C ;色譜柱為DB-624毛細管柱；(4)頂空進樣時，頂空瓶的溫度為45飛5°C，最佳溫度為55°C ；(5)抽取頂空瓶上部氣體0.1.0ml，優(yōu)選為0.1ml，注入氣相色譜儀完成被測樣品三氟乙酸含量的測定。
9.一種氣相色譜法測定塞來昔布中三氟乙酸含量的方法，包括如下步驟:(1)取供試樣品適量至頂空進樣瓶中，加硫酸-甲醇或硫酸二甲酯-甲醇、碘甲烷-甲醇溶液溶解制成每Iml含供試品IOmg的樣品溶液；(2)將壓蓋后的頂空瓶置80°C水浴加熱60分鐘衍生；(3)設置柱溫初始為60°C，保持10分鐘，再以每分鐘升溫40°C的速率升至235°C，保持5分鐘；進樣口溫度為140°C ;檢測器為E⑶；檢測器溫度為350°C ;色譜柱為DB-624毛細管柱；(4)頂空進樣時，頂空瓶的溫度為55V ；(5)抽取頂空瓶上部氣體0.1ml注入氣相色譜儀完成被測樣品三氟乙酸含量的測定。
【文檔編號】G01N30/02GK103439427SQ201310384149
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2013年8月30日 優(yōu)先權日:2013年8月30日
【發(fā)明者】王崇益, 陳文靜, 雋海龍 申請人:江蘇正大清江制藥有限公司