一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法。它是按照先用乙醚溶解藥膏，再加水溶解、萃取其中的Rg1、Rb1和R1，靜置，分液，水液用乙醚洗滌后，干濾紙濾過(guò)，濾液用高效液相色譜進(jìn)行測(cè)定的。該測(cè)定方法準(zhǔn)確度和精密度較高，操作簡(jiǎn)便，專屬行強(qiáng)，耐用，可用于麝香活血化瘀膏的質(zhì)量控制。
【專利說(shuō)明】一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定，尤其涉及一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]麝香活血化瘀膏是一種中西藥結(jié)合的復(fù)方橡膠膏制劑，具有明顯的活血化瘀、消炎止痛的功能，主要用于治療關(guān)節(jié)扭傷，軟組織挫傷，急性腰扭傷，腰肌勞損，肩周炎及未潰凍瘡和結(jié)節(jié)性紅斑等疾病。該橡膠膏制劑中含有十一味藥物，其中三七藥材量占45%以上。三七為五加科人參屬植物，具有止血、止痛、散瘀、消腫等功效，在麝香活血化瘀膏中起著重要作用。皂苷類成分是三七主要的生理活性成分，也是衡量三七藥材質(zhì)量的主要指標(biāo)，在《中國(guó)藥典》2010版收載的三七藥材標(biāo)準(zhǔn)中，三七的含量就是以人參皂苷Rg1 (C42H72O14)、人參皂苷Rbi (C54H92O23)及三七皂苷R1 (C47H8tlO18)的總量計(jì)算的。因此，對(duì)麝香活血化瘀膏中三七的皂苷類成分進(jìn)行準(zhǔn)確的含量測(cè)定十分重要。但現(xiàn)有技術(shù)中，關(guān)于麝香活血化瘀膏以及其他橡膠膏制劑中三七含量的測(cè)定方法目前沒(méi)有報(bào)道。
[0003]在《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第八冊(cè)一九九三年版中，麝香活血化瘀膏中三七只用薄層色譜法進(jìn)行了定性測(cè)定，而未作含量測(cè)定，不利于對(duì)麝香活血化瘀膏的質(zhì)量控制?，F(xiàn)有其他文獻(xiàn)資料中，均是關(guān)于其他中藥制劑中三七含量的測(cè)定及三七藥材中三七含量的測(cè)定，其方法也大多是用甲醇或一定濃度的甲醇溶液、乙醇或一定濃度的乙醇溶液作溶劑，以加熱回流或超聲的方式提取，再用液相色譜進(jìn)行檢測(cè)；也有先在索氏提取器中用脂溶性溶劑脫脂，再用醇浸提，旋蒸濃縮，后用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定。關(guān)于三七藥材中的三七含量，是采用甲醇浸泡一夜后回流提取RgpRb1及R1，再用高效液相色譜法測(cè)定。但是因橡膠膏劑與其他制劑不同，它含有大量的橡膠基質(zhì)，該橡膠基質(zhì)由橡膠、氧化鋅、松香、羊毛脂、凡士林、液體石蠟等物質(zhì)組成，用以上方式提取困難。通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)證明，用以上提取方法都不能將麝香活血化瘀膏中三七所含的Rgl、Rb1及R1有效提取出來(lái)。`

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法，該測(cè)定方法準(zhǔn)確度和精密度較高，操作簡(jiǎn)便，專屬性強(qiáng)，耐用，可用于麝香活血化瘀膏的質(zhì)量控制。
[0005]本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的:
[0006]一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法，其特征在于，它是按照以下步驟進(jìn)行測(cè)定的:
[0007]( I)供試品溶液的制備
[0008]取麝香活血化瘀膏數(shù)片，除去蓋襯、剪碎、混勻，精密稱取其中的4~IOg (相當(dāng)于2~5片的質(zhì)量)作為供試品，加入脂溶性有機(jī)溶劑浸泡，充分振搖使藥膏溶解，精密加入一定量水，充分振搖，靜置分液，取水液，用該脂溶性有機(jī)溶劑洗滌數(shù)次，靜置，棄去有機(jī)溶劑，水液用干燥濾紙濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；
[0009]( 2 )對(duì)照品溶液的制備
[0010]精密稱取人參皂苷Rg1對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品及三七皂苷R1對(duì)照品適量，加水制成每 Iml 分別含 Rg^l.33 ~211.3 μ g、Rb1I 08 ~181.6 μ g、^4.224 ~63.36 μ g 的混合溶液，即得對(duì)照品溶液；
[0011](3)采用高效液相色譜法測(cè)定
[0012]用具有紫外檢測(cè)器的高效液相色譜儀，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈與水的混合液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ;分別精密吸取所述對(duì)照品溶液與所述供試品溶液各20μ 1，注入液相色譜儀，進(jìn)行測(cè)定，最后計(jì)算出供試品中三七含量(以RgpRb1和R1總量計(jì))。
[0013]上述以乙腈與水的混合液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，是以乙腈為流動(dòng)相Α，以水為流動(dòng)相B，按下述體積比進(jìn)行梯度洗脫:0~25分鐘，流動(dòng)相A為19%，流動(dòng)相B為81%，25~45分鐘，流動(dòng)相A為26%，流動(dòng)相B為74%，45~75分鐘，流動(dòng)相A為38%，流動(dòng)相B為62%。該流動(dòng)相的洗脫比例能使三七中的Rgl、Rb1及R1與其相鄰雜質(zhì)達(dá)基線分離，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)各組分含量的準(zhǔn)確測(cè)定。
[0014]上述浸泡時(shí)間為10分鐘。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果可知:浸泡時(shí)間低于10分鐘，提出的三七含量很少；浸泡10分鐘和20分鐘測(cè)得的含量，無(wú)顯著性差異，故將浸泡時(shí)間確定為10分鐘。
[0015]更為詳細(xì)地說(shuō)，本發(fā)明公開(kāi)的麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法，其特征在于，它具體是按照以下步驟`進(jìn)行測(cè)定的:
[0016]( I)供試品溶液的制備
[0017]精密稱取規(guī)格為每片50cm2~150cm2的麝香活血化瘀膏數(shù)片，除去蓋襯、剪碎、混勻，精密稱取相當(dāng)于其中3片的重量，加入乙醚50ml，浸泡至少10分鐘，充分振搖使藥膏溶解，精密加入水50ml，充分振搖，靜置，分取水液，用乙醚洗滌2次，每次15ml，棄去乙醚，水液用干燥濾紙濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；
[0018](2)對(duì)照品溶液的制備
[0019]精密稱取人參皂苷Rg1對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品及三七皂苷R1對(duì)照品適量，加水制成每Iml含Rgl85 μ g、RM5 μ g、R^O μ g的混合溶液，即得對(duì)照品溶液；
[0020]( 3)采用高效液相色譜法測(cè)定
[0021]采用具有紫外檢測(cè)器的高效液相色譜儀，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按下述體積比進(jìn)行梯度洗脫:0~25分鐘，流動(dòng)相A為19%,流動(dòng)相B為81%，25~45分鐘，流動(dòng)相A為26%，流動(dòng)相B為74%，45~75分鐘，流動(dòng)相A為38%，流動(dòng)相B為62% ;檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ;柱溫為室溫；流速為1.0mL/min ;進(jìn)樣量為20 μ 1:按照設(shè)置的所述色譜檢測(cè)條件，分別精密吸取所述對(duì)照品溶液與所述供試品溶液，注入液相色譜儀，進(jìn)行測(cè)定；
[0022]4)結(jié)果計(jì)算
[0023]計(jì)算供試品中三七的含量，其中:
[0024]供試品中含有的Rg1的含量(mg):
[0025]
【權(quán)利要求】
1.ー種麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法，其特征在干，它是按照以下步驟進(jìn)行測(cè)定的: (1)供試品溶液的制備 取麝香活血化瘀膏數(shù)片，除去蓋襯、剪碎、混勻，精密稱取其中的4~IOg作為供試品，加入脂溶性有機(jī)溶劑浸泡，充分振搖使藥膏溶解，精密加入一定量水，充分振搖，靜置分液，取水液，用該脂溶性有機(jī)溶劑洗滌數(shù)次，靜置，棄去有機(jī)溶剤，水液用干燥濾紙濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液； (2)對(duì)照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rg1對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品及三七皂苷R1對(duì)照品適量，加水制成每 Iml 分別含 Rgl21.33 ~211.3 ii g、Rb1I 08 ~181.6 u g, R^.224 ~63.36 u g 的混合溶液，即得對(duì)照品溶液； (3)采用高效液相色譜法測(cè)定 用具有紫外檢測(cè)器的高效液相色譜儀，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以こ腈與水的混合液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ;分別精密吸取所述對(duì)照品溶液與所述供試品溶液各20 yl，注入液相色譜儀，進(jìn)行測(cè)定，最后計(jì)算出供試品中三七含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法，其特征在于:所述以こ腈與水的混合液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，是以こ腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按下述體積比進(jìn)行梯度洗脫:0~25分鐘，流動(dòng)相A為19%，流動(dòng)相B為81%，25~45分鐘，流動(dòng)相A為26%，流動(dòng)相B為74%，45~75分鐘，流動(dòng)相A為38%，流動(dòng)相B為62%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法，其特征在于:所述浸泡時(shí)間為10分鐘。`
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的麝香活血化瘀膏中三七含量的測(cè)定方法，其特征在于，它具體是按照以下步驟進(jìn)行測(cè)定的: (1)供試品溶液的制備 精密稱取規(guī)格為每片50cm2~150cm2的麝香活血化瘀膏數(shù)片，除去蓋襯、剪碎、混勻，精密稱取相當(dāng)于其中3片的重量，加入こ醚50ml，浸泡至少10分鐘，充分振搖使藥膏溶解，精密加入水50ml,充分振搖,靜置,分取水液,用こ醚洗漆2次,每次15ml,棄去こ醚,水液用干燥濾紙濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液； (2)對(duì)照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rg1對(duì)照品、人參皂苷Rb1對(duì)照品及三七皂苷R1對(duì)照品適量，加水制成每Iml含Rgl85 u g、Rbi45 u g、R^O u g的混合溶液，即得對(duì)照品溶液； (3)采用高效液相色譜法測(cè)定 采用具有紫外檢測(cè)器的高效液相色譜儀，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以こ腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按下述體積比進(jìn)行梯度洗脫:0~25分鐘，流動(dòng)相A為19%，流動(dòng)相B為81%，25~45分鐘，流動(dòng)相A為26%，流動(dòng)相B為74%，45~75分鐘，流動(dòng)相A為38%，流動(dòng)相B為62% ;檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ;柱溫為室溫；流速為1.0mL/min ;進(jìn)樣量為20 y L ;按照設(shè)置的所述色譜檢測(cè)條件，分別精密吸取所述對(duì)照品溶液與所述供試品溶液，注入液相色譜儀，進(jìn)行測(cè)定； 4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算計(jì)算供試品中三七的含量，其中:供試品中含有的Rg1的含量(mg):



【文檔編號(hào)】G01N30/02GK103499649SQ201310436910
【公開(kāi)日】2014年1月8日 申請(qǐng)日期:2013年9月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月23日
【發(fā)明者】羅延谷, 胡欣, 李文艷, 羅財(cái)勇, 何詠梅, 朱麗利 申請(qǐng)人:重慶紫光化工股份有限公司