一種快速鑒別桑白皮、蜜桑白皮的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種快速鑒別桑白皮、蜜桑白皮的方法，本發(fā)明對選用自制醋酸鈉-CMCNa為黏合劑的硅膠G薄層板，苯胺-二苯胺-磷酸顯色，以冰醋酸:氯仿:無水乙醇(3:7:2)為展開劑展開，對桑白皮、蜜桑白皮進(jìn)行TLC鑒別。本發(fā)明可以容易的把桑白皮和蜜桑白皮鑒別區(qū)分開來。
【專利說明】一種快速鑒別桑白皮、蜜桑白皮的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種中藥飲片的鑒別方法，具體涉及中藥飲片桑白皮蜜炙前后采用薄層色譜(TLC)法快速鑒別的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，對桑白皮的薄層鑒別研究很少，2010版《中國藥典》一部收載的桑白皮項(xiàng)下鑒別項(xiàng)中，使用了薄層色譜法對桑白皮進(jìn)行鑒別，但方法比較簡單，也不能快速的鑒別桑白皮、蜜桑白皮的差異。目前，對桑白皮、蜜炙桑白皮的鑒別方法的研究尚未見有文獻(xiàn)報(bào)道，對桑白皮TLC相關(guān)文獻(xiàn)也寥寥幾篇。吳素香等對桑白皮與混淆品種根皮的乙醇提取物，進(jìn)行展開，研究了桑白皮具有專屬性的薄層色譜鑒別法。周宏兵等人在對止咳枇杷沖劑各味藥材的研究中研究和比較了桑白皮中特征化學(xué)成分的提取和薄層色譜鑒別的條件。而其余都集中在桑白皮與其偽品的鑒別研究上，李振國等對桑白皮及其偽品刺桑白皮、偽品構(gòu)樹皮進(jìn)行了研究而張敏娟等對桑白皮及偽品構(gòu)樹柘樹進(jìn)行了鑒別研究。市場上桑白皮、蜜桑白皮主流飲片品種混亂，炮制程度不統(tǒng)一，外觀差異大，且內(nèi)在質(zhì)量參差不齊，直接影響到臨床療效的穩(wěn)定性。這就迫切需要建立簡便、快速的桑白皮、蜜桑白皮鑒別方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種快速鑒別桑白皮、蜜炙桑白皮的方法。本發(fā)明采用TLC技術(shù)對桑白皮、蜜桑白皮進(jìn)行薄層分析，根據(jù)圖譜的不同快速鑒別出桑白皮和蜜桑白皮。
[0004]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
一種快速鑒別桑白皮、蜜桑白皮的方法，方法如下:用定量毛細(xì)管分別準(zhǔn)確量取各點(diǎn)樣液，在硅膠板距底邊1.0cm水平線上等距離點(diǎn)樣，用電吹風(fēng)吹干，待點(diǎn)樣液干透后，進(jìn)行展開劑的上行展開；展開劑至前沿時取出，置烘箱內(nèi)85°C干燥IOmin ;噴顯色劑，再于85°C下烘烤IOmin顯色；
所述的供試品樣液的制備方法如下:分別稱取供試品生桑白皮、蜜炙桑白皮各10g，置于蒸餾燒瓶中，加入70%乙醇100ml，稱重，控溫80°C水浴浸提0.5h，冷卻，補(bǔ)足失重，過濾，取續(xù)濾液，備用；
所述的硅膠板的制備方法如下:取硅膠G 25g, CMC-Na 75mL ;另取NaAc0.lg，精密稱定,少量水溶解,與硅膠一起攪拌均勻，自動鋪板器鋪4mm厚硅膠G板，晾干，待用；
所述的顯色劑配制的配制方法如下:稱取Ig二苯胺，加2mL苯胺、10mL85%磷酸混合溶解后，加丙酮稀釋至IOOmL,超聲使其全部溶解。
[0005]所述的展開劑為體積比為3:7:2的冰醋酸:氯仿:無水乙醇。
[0006]判斷方法:蜜桑白皮的磚紅色斑點(diǎn)和藍(lán)色斑點(diǎn)的大小比桑白皮的大，斑點(diǎn)顏色蜜桑白皮明顯比桑白皮深。
[0007]本發(fā)明方法可以快速的把桑白皮和蜜桑白皮鑒別區(qū)分開來?！緦＠綀D】

【附圖說明】
[0008]圖1為鑒別桑白皮、蜜桑白皮的薄層色譜圖。圖中序號所指樣品如下:，1.葡萄糖；2.中蜜(煉制的蜂蜜)；3、4.蜜桑白皮；5、6桑白皮；7.蜜桑白皮(蜜炙過度)；
【具體實(shí)施方式】
[0009]下面結(jié)合具體的鑒別實(shí)驗(yàn)對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0010]I實(shí)驗(yàn)儀器、試劑與材料
B3200S2T超聲儀；瑞士MEITLER XS205 DU I /10萬電子天平；ZF-20D暗箱式紫外分析儀；電熱恒溫水浴鍋；DHG-9146A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱。DR2-4DAS電阻爐溫度控制器；100X200mmGF254薄層硅膠板；電吹風(fēng)機(jī)；若干錐形瓶；藥匙；玻璃棒；分液漏斗；漏斗；布氏漏斗；抽濾瓶；濾紙；量筒；移液管；容量瓶；膠頭滴管；坩堝；鐵架臺；天平；吸耳球；燒杯；蒸餾燒瓶。
[0011 ] 95%乙醇；冰醋酸；無水乙醇；36%乙酸；苯胺；二苯胺；丙酮；磷酸；娃膠G,CMC-Na:75mL, NaAc。
[0012]桑白皮、蜜桑白皮藥材。
[0013]2 TLC鑒別快速鑒別
2.1供試品溶液的制備
分別稱取供試品(生桑白皮、蜜炙桑白皮)各10g，置于蒸餾燒瓶中，加入70%乙醇IOOml,稱重,控溫80°C水浴浸提0.5h,冷卻,補(bǔ)足失重,過濾,取續(xù)濾液，備用。
[0014]2.2硅膠板的制備
取硅膠G 25g, CMC-Na 75mL ;另取NaAc0.lg，精密稱定，少量水溶解，與硅膠一起攪拌均勻，自動鋪板器鋪4_厚硅膠G板，晾干,待用。
[0015]2.3顯色劑配制(苯胺-二苯胺-磷酸顯色劑)
稱取Ig 二苯胺，加2mL苯胺、10mL85% (體積分?jǐn)?shù))磷酸混合溶解后，加丙酮稀釋至IOOmL,超聲使其全部溶解。(冰箱內(nèi)儲存可在幾周內(nèi)使用)
2.4展開條件
冰醋酸:氯仿:無水乙醇(3:7:2)的條件下展開，各樣品的成分分離效果較好，且其比移值合適。
[0016]2.5實(shí)驗(yàn)操作及結(jié)果
用定量毛細(xì)管分別準(zhǔn)確量取適宜量的各點(diǎn)樣液，在硅膠板距底邊1.0cm水平線上等距離點(diǎn)樣，用電吹風(fēng)吹干，待點(diǎn)樣液干透后，進(jìn)行展開劑的上行展開。展開劑至前沿時取出，置烘箱內(nèi)85°C干燥lOmin。噴顯色劑，再于85°C下烘烤IOmin顯色。
[0017]3 結(jié)論
具體薄層色譜圖如圖1所示，該方法以煉制好的蜂蜜(中蜜)(樣品2)、葡萄糖(樣品I)為對照，選用自制醋酸鈉-CMCNa為黏合劑的硅膠G薄層板，苯胺-二苯胺-磷酸顯色，以冰醋酸:氯仿:無水乙醇(3:7:2)為展開劑展開，對桑白皮、蜜桑白皮進(jìn)行TLC鑒別。結(jié)果顯示，樣品3、4 (蜜桑白皮)與5、6 (桑白皮)比較，磚紅色(Rf值為0.28)和藍(lán)色斑點(diǎn)(Rf值為0.2)的大小，蜜桑白皮〉桑白皮，斑點(diǎn)顏色蜜桑白皮明顯比桑白皮深。樣品3、4為蜜炙適中的蜜桑白皮，而樣品7為蜜炙過度的蜜桑白皮，兩者相比，樣品7圖譜中多出一顏色稍淺的磚紅色斑點(diǎn)(Rf值為0.42)。
[0018]此方法能夠簡單、快速的鑒別桑白皮和蜜桑白皮，說明在蜜炙過程中其成分產(chǎn)生了化學(xué)變化，成分的種類和含量都有改變。此方法不但能夠反應(yīng)出桑白皮與蜜桑白皮的差異，還能反映出不同蜜炙程度的蜜桑白皮之間的差異。
【權(quán)利要求】
1.一種快速鑒別桑白皮、蜜桑白皮的方法，方法如下:用定量毛細(xì)管分別準(zhǔn)確量取各點(diǎn)樣液，在硅膠板距底邊1.0cm水平線上等距離點(diǎn)樣，用電吹風(fēng)吹干，待點(diǎn)樣液干透后，進(jìn)行展開劑的上行展開；展開劑至前沿時取出，置烘箱內(nèi)85°C干燥IOmin ;噴顯色劑，再于85°C下烘烤IOmin顯色； 所述的供試品樣液的制備方法如下:分別稱取供試品生桑白皮、蜜炙桑白皮各10g，置于蒸餾燒瓶中，加入70%乙醇100ml，稱重，控溫80°C水浴浸提0.5h，冷卻，補(bǔ)足失重，過濾，取續(xù)濾液，備用； 所述的硅膠板的制備方法如下:取硅膠G 25g, CMC-Na 75mL ;另取NaAc0.lg，精密稱定,少量水溶解,與硅膠一起攪拌均勻，自動鋪板器鋪4mm厚硅膠G板，晾干，待用； 所述的顯色劑配制的配制方法如下:稱取Ig二苯胺，加2mL苯胺、10mL85%磷酸混合溶解后，加丙酮稀釋至IOOmL，超聲使其全部溶解； 所述的展開劑為體積比為3:7:2的冰醋酸:氯仿:無水乙醇。
【文檔編號】G01N30/90GK103487547SQ201310446646
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月27日
【發(fā)明者】李群, 張會敏 申請人:山東省中醫(yī)藥研究院