一種四味姜黃湯散的檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種四味姜黃湯散的檢測(cè)方法，所述的檢測(cè)方法是采用高效液相色譜法一次性對(duì)四味姜黃湯散中的余甘子、姜黃、小檗皮的含量進(jìn)行檢測(cè)，操作簡(jiǎn)便，分析數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，提高了工作效率，提升了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，可有效對(duì)四味姜黃湯散進(jìn)行檢測(cè)。
【專利說明】一種四味姜黃湯散的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方制劑的檢測(cè)方法，特別涉及一種四味姜黃湯散的檢測(cè)方法，屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]四味姜黃湯散收載于中國(guó)藏藥部頒標(biāo)準(zhǔn)中，標(biāo)準(zhǔn)編號(hào):WS3-BC-0304-95，由如下重量配比的藥材制成的:姜黃15g、小檗皮12.5g、余甘子25g、蒺藜25g，具有清熱，利尿的作用，用于尿道炎，尿頻，尿急有很好的療效，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于臨床。
[0003]四味姜黃湯散標(biāo)準(zhǔn)中的檢測(cè)方法非常簡(jiǎn)單粗糙，沒有鑒別和含量測(cè)定方法；文獻(xiàn)《藏成藥四味姜黃湯散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究》(中成藥，2008年3期)采用薄層色譜法鑒別姜黃、小檗皮、余甘子、蒺藜；采用高效液相色譜法測(cè)定制劑中姜黃素含量，色譜條件為:C18柱，流動(dòng)相為乙腈-4%冰醋酸(48:52)，檢測(cè)波長(zhǎng)430nm。
[0004]按照現(xiàn)有技術(shù)對(duì)四味姜黃湯散進(jìn)行檢測(cè)，需要分別鑒別以上各味藥材，操作十分繁瑣，且僅對(duì)姜黃素進(jìn)行定量檢測(cè)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種四味姜黃湯散的檢測(cè)方法。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0007]—種四味姜黃湯散的檢測(cè)方法，所述的檢測(cè)方法是采用高效液相色譜法一次性對(duì)四味姜黃湯散中的余甘子、姜黃、小檗皮的含量進(jìn)行檢測(cè)，其方法如下:
[0008]A)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0、體積份數(shù)比0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式:0min — IOmin — 35min — 60min,流動(dòng)相 A:2% — 2% — 50% — 50% ;流動(dòng)相 B:98% — 98% — 50% — 50% ;檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm ;理論板數(shù)按姜黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；
[0009]B)對(duì)照品溶液的制備:取沒食子酸對(duì)照品、姜黃素對(duì)照品、鹽酸小檗堿，精密稱定，加甲醇制成每Iml含沒食子酸0.lmg、姜黃素50 u g、鹽酸小檗堿0.3mg的溶液，即得；
[0010]C)供試品溶液的制備:將四味姜黃湯散研細(xì)后，取粉末lg，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70:30:1甲醇-水-鹽酸溶液25ml，稱定重量，密塞，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用體積百分比70:30:1甲醇-水-鹽酸溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
[0011]D)測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各lOiil，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；
[0012]本說明書中所述的重量份與體積份的單位對(duì)應(yīng)關(guān)系為g/ml或kg/1。
[0013]本發(fā)明使用高效液相色譜法一次性對(duì)四味姜黃湯散中的余甘子、姜黃、小檗皮進(jìn)行了含量檢測(cè)，操作簡(jiǎn)便，分析數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，提高了工作效率，提升了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，可有效對(duì)四味姜黃湯散進(jìn)行檢測(cè)?！緦＠綀D】

【附圖說明】
[0014]圖1是沒食子酸、姜黃素及鹽酸小檗堿混合對(duì)照品高效液相色譜圖；
[0015]圖2是沒食子酸線性關(guān)系圖；
[0016]圖3是姜黃素線性關(guān)系圖；
[0017]圖4是鹽酸小檗堿線性關(guān)系圖。
【具體實(shí)施方式】
[0018]下面結(jié)合實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的方案和效果，但不限于所述的實(shí)驗(yàn)和實(shí)施例。
[0019]實(shí)驗(yàn)例1、含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)
[0020]1.儀器、試藥和供試樣品
[0021]儀器:高效液相色譜儀:島津-20AT泵，島津STO-20A紫外檢測(cè)器，CT0-10AS vp柱溫箱；電子天平:島津AUW220D型。
[0022]對(duì)照品:沒食子Ife對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)批號(hào):
[0023]110831-200803，姜黃素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)批號(hào):
[0024]110823-201004，鹽酸小檗堿對(duì)照品，批號(hào):MUST_11122005。
[0025]樣品:四味姜黃湯散(山東阿如拉藥物研究開發(fā)有限責(zé)任公司自制)，批號(hào):20131101,20131102,20131103。
[0026]2.檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇
[0027]姜黃素、沒食子酸及鹽酸小檗堿最大吸收差別較遠(yuǎn)，不易選擇統(tǒng)一的波長(zhǎng)，綜合考慮，以通用檢測(cè)波長(zhǎng)254nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以上三種對(duì)照品均有很好的吸收。
[0028]3.流動(dòng)相選擇
[0029]沒食子酸與姜黃素、鹽酸小檗堿極性相差較大，采用等度洗脫很難對(duì)兩種成分進(jìn)行同時(shí)測(cè)定，故選擇梯度洗脫進(jìn)行色譜分離。
[0030]使用甲醇-水體系進(jìn)行色譜分離時(shí)發(fā)現(xiàn)，在254nm下甲醇-水體系易形成較大的梯度峰，影響測(cè)定。單純使用乙腈-水體系，各色譜峰峰形較差，實(shí)驗(yàn)表明，在一定的酸體系下，峰形得到改善，同時(shí)為了保證體系的穩(wěn)定性，加入一定的鹽。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，選擇加入磷酸二氫鈉后，流動(dòng)性體系穩(wěn)定，同時(shí)對(duì)照峰形趨于完美，分離度也得到了顯著的提高。
[0031]故確定流動(dòng)相A為乙腈，B為體積百分比0.05mol/L磷酸二氫鈉(磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0)溶液。
[0032]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，使用下述梯度，所得結(jié)果較為理想。
[0033]表1梯度洗脫表
【權(quán)利要求】
1.一種四味姜黃湯散的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的檢測(cè)方法是采用高效液相色譜法一次性對(duì)四味姜黃湯散中的余甘子、姜黃、小檗皮的含量進(jìn)行檢測(cè)，其測(cè)定方法如下: a.色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A ;以體積份數(shù)比0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液為流動(dòng)相B，磷酸調(diào)節(jié)PH值至3.0 ;采用梯度洗脫方式:0min — IOmin — 35min — 60min ；乙臆:2% — 2%— 50% — 50% ;體積份數(shù)比 0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液:98% — 98% — 50% — 50% ;檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm ;理論板數(shù)按姜黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ； b.對(duì)照品溶液的制備:取沒食子酸對(duì)照品、姜黃素對(duì)照品、鹽酸小檗堿適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含沒食子酸0.lmg、姜黃素50 ii g、鹽酸小檗堿0.3mg的溶液，即得； c.供試品溶液的制備:將四味姜黃湯散研細(xì)后，取粉末lg，精密稱定置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70:30:1甲醇-水-鹽酸溶液25ml，稱定重量，密塞，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用體積百分比70:30:1甲醇-水-鹽酸溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得； d.測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10iil，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得； 所述的四味姜黃湯散由如下重量配比的原料藥制成:姜黃15份、小檗皮12.5份、余甘子25份、蒺藜25份。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK103592393SQ201310608122
【公開日】2014年2月19日 申請(qǐng)日期:2013年11月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月25日
【發(fā)明者】王彥厚, 賈雷, 王嘉南, 孫緒丁 申請(qǐng)人:淄博市食品藥品檢驗(yàn)所