木瓜飲片的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開的木瓜飲片檢測方法木瓜飲片檢測方法，其測量時的色譜條件為色譜柱：C18柱;流動相為甲醇-0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液（90：10）；流速1.0mL/min；檢測波長210nm；柱溫；室溫；進(jìn)樣量20μL。本發(fā)明可以保證檢測木瓜飲片的分離度與重復(fù)性，對數(shù)據(jù)分析和產(chǎn)品的研究有很大幫助，減小測量帶來誤差，特別適合實(shí)驗(yàn)室對其進(jìn)行的檢測工作。
【專利說明】木瓜飲片的檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本發(fā)明涉及中藥飲片的檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及木瓜飲片的檢測方法。
【背景技術(shù)】:
[0002]野木瓜[Chaenomeles cathayensis (Hemsl.) Schneid]是一種比較珍貴，藥食一
體的天然植物，盛產(chǎn)于“中國野木瓜之鄉(xiāng)”-貴州省正安縣。野木瓜中所含齊墩果酸
(oleanolic)、熊果酸(ursolic)等五環(huán)三職阜苷是其主要的生理活性物質(zhì)。
[0003]近年來研究表明:齊墩果酸、熊果酸不僅具有消炎抑菌、降低轉(zhuǎn)氨酶、促進(jìn)肝細(xì)胞再生、防止肝硬化等功效，還具有一定的抗癌活性，且以熊果酸尤為突出，故而對野木瓜中齊墩果酸及熊果酸展開研究，具有非常重要的科學(xué)意義。
[0004]目前在采用測定三萜皂苷所常用的比色法、分光光度法及薄層掃描法對木瓜飲片中的齊墩果酸與熊果酸進(jìn)行定量時，由于兩者幾乎是共生共存于天然產(chǎn)物當(dāng)中，并且是一對差向異構(gòu)體，結(jié)構(gòu)相似，極性差別小，因而很容易產(chǎn)生誤差，造成定量困難。

【發(fā)明內(nèi)容】
:
[0005]本發(fā)明所解決的技術(shù)問題在于針對現(xiàn)有采用測定三萜皂苷所常用的比色法、分光光度法及薄層掃描法對木瓜飲片中的齊墩果酸與熊果酸進(jìn)行定量時所存在的不足之處而提供一種木瓜飲片的檢測方法，該檢測方法完善了藥典木瓜飲片含量檢測方法中的條件，保證了含量測定的準(zhǔn)確性，同時，確保了所要求的分離度，以便檢驗(yàn)工作有效開展。
[0006]本發(fā)明擬從它們結(jié)構(gòu)當(dāng)中孤立的雙鍵，會在低波長處產(chǎn)生紫外吸收的特點(diǎn)著手，建立起同時測定木瓜中齊墩果酸、熊果酸的HPLC法，優(yōu)化了藥典中木瓜飲片含量檢測的色譜條件。
[0007]本發(fā)明所解決的技術(shù)問題可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn):
[0008]木瓜飲片檢測方法，其測量時的色譜條件為色譜柱:C18柱；流動相為甲醇-0.lmol/L磷酸二氫鉀溶液(90:10);流速1.0mL/min ;檢測波長21Onm ;柱溫；室溫；進(jìn)樣量20 u L0
[0009]由于采用了如上的方法，可以保證檢測木瓜飲片的分離度與重復(fù)性，對數(shù)據(jù)分析和產(chǎn)品的研究有很大幫助，減小測量帶來誤差，特別適合實(shí)驗(yàn)室對其進(jìn)行的檢測工作。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0010]圖1為齊墩果酸與熊果酸的氣相色譜圖。
[0011]圖2為齊墩果酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0012]圖3為熊果酸的的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013]本發(fā)明擬從它們結(jié)構(gòu)當(dāng)中孤立的雙鍵，會在低波長處產(chǎn)生紫外吸收的特點(diǎn)著手，建立起同時測定木瓜中齊墩果酸、熊果酸的HPLC法，優(yōu)化了藥典中木瓜飲片含量檢測的色譜條件。
[0014]本發(fā)明的木瓜飲片的檢測方法，其測量時色譜條件為色譜柱為:C18柱；流動相為甲醇-0.lmol/L磷酸二氫鉀溶液(90: 10);流速1.0mL/min ;檢測波長210nm ;柱溫:室溫；進(jìn)樣量20 μ L。
[0015]以下通過具體實(shí)施例來予以驗(yàn)證:
[0016]1.主要儀器
[0017]AilengllOO高效液相色譜儀:包括高壓輸液泵，紫外可見光檢測器，柱溫箱；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；梅特勒分析天平；超純水制備儀；超聲波清洗器等。
[0018]2.原料與試劑
[0019]木瓜飲片，由上海華宇藥業(yè)有限公司提供1010008-13041101;齊墩果酸、熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品(純度大于98%，中國藥品生物制品檢定所提供)；甲醇(色譜純默克提供)，其它試劑均為國產(chǎn)分析純。
[0020]3.方法
[0021]3.1.色譜條件
[0022]C18柱；流動相為甲醇-0.lmol/L磷酸二氫鉀溶液(90: 10);流速1.0mL/min ;檢測波長210nm ;柱溫:室溫；進(jìn)樣量20 μ L。
[0023]3.2.齊墩果酸與熊果酸特征峰分離度測定在HPLC法中，分離度R大于或等于
1.5，是準(zhǔn)確定量的前提。
[0024]3.3.齊壤果酸標(biāo)品溶液制備
[0025]精密稱取減壓干燥至恒重的齊墩果酸標(biāo)品4.0Omg,至IOmL容量瓶，加甲醇溶解稀釋至刻度，得濃度為0.40mg/mL的對照品溶液。再分別精密吸取該液0.50、1.00、1.50、
2.00,2.50mL,于IOmL容量瓶中，加甲醇定容，得濃度梯度為0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg/mL的齊墩果酸標(biāo)品溶液。
[0026]3.4.熊果酸標(biāo)品溶液制備
[0027]精密稱取減壓干燥至恒重的熊果酸標(biāo)品12.0Omg,至IOmL容量瓶，加甲醇溶解稀釋至刻度，得濃度為1.20mg/mL的對照品溶液。再分別精密吸取該液0.50、1.00、1.50、
2.00、2.50mL，于IOmL容量瓶中，加甲醇定容，得濃度梯度為0.06、0.12、0.18、0.24、
0.30mg/mL的熊果酸標(biāo)品溶液。
[0028]3.5.樣品溶液的制備
[0029]取木瓜飲片約0.5g，精密稱定分別置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHz)20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用濾膜(0.45 μ m)濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。
[0030]4.結(jié)果與分析
[0031]4.1.分離度測定結(jié)果
[0032]將3.3中濃度為0.40mg/mL的齊墩果酸對照品溶液與3.4中濃度為0.20mg/mL的熊果酸對照品溶液混合，以3.1色譜條件測定，得此混合溶液中齊墩果酸保留時間t=14.888min,對稱因子=0.99 ;熊果酸保留時間t=15.391min,對稱因子=1.01。經(jīng)計(jì)算,分離度R=1.82，該值大于1.5 (參見圖1)，說明:在本色譜條件下，齊墩果酸與熊果酸分離效果良好，能夠進(jìn)行準(zhǔn)確定量。
[0033]4.2.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
[0034]分別準(zhǔn)確吸取3.3及3.4中，不同濃度梯度的齊墩果酸、熊果酸標(biāo)品溶液各20 μ L，進(jìn)樣檢測，以峰面積為橫坐標(biāo)，標(biāo)品濃度為縱坐標(biāo)作齊墩果酸、熊果酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，齊墩果酸回歸方程y=3.81424X 10_8x - 0.00240239,相關(guān)系數(shù)r=0.9994，熊果酸回歸方程y=3.99319X 10-8χ-0.00057，相關(guān)系數(shù)r=0.9988，說明:齊墩果酸標(biāo)品溶液濃在0.02~
0.10mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(參見圖2)，熊果酸對照品溶液濃度在0.06~0.30mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(參見圖3)。
[0035]4.3.樣品含量測定
[0036]按照3.5的樣品溶液配制方法配制平行樣品1、樣品2，并分別對其采用3.1中色譜條件進(jìn)行檢測，并根據(jù)所得樣品溶液濃度，計(jì)算樣品含量，結(jié)果見表1。
[0037]表1
[0038]
【權(quán)利要求】
1.木瓜飲片檢測方法，其特征在于，測量時的色譜條件:色譜柱為C18柱；流動相為甲醇-0.lmol/L磷酸二氫鉀溶液(90:10);流速1.0mL/min ;檢測波長21Onm ;柱溫:室溫；進(jìn)樣量20 u L0
【文檔編號】G01N30/02GK103645257SQ201310680281
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年12月10日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月10日
【發(fā)明者】李彤, 王瓊, 薛亮, 蔡京 申請人:上海景峰制藥股份有限公司