一種木香乙酸乙酯提取物的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及木香乙酸乙酯提取物的檢測方法，具體涉及一種聯(lián)用UPLC和Q-TOF-MS來檢測木香乙酸乙酯提取物具體成分的方法，色譜條件為：二元梯度洗脫，A相為水溶液，B相為乙腈，流速0.3mL/min；進(jìn)樣量4μL；質(zhì)譜條件為：采用電噴霧電離源，TOF離子飛行方式采用正離子模式檢測，該檢測方法為木香的乙酸乙酯提取物質(zhì)量評價(jià)提供了一種手段，有利于進(jìn)一步制定木香的乙酸乙酯提取物的質(zhì)量監(jiān)控。
【專利說明】一種木香乙酸乙酯提取物的檢測方法
[【技術(shù)領(lǐng)域】]
[0001]本發(fā)明涉及木香乙酸乙酯提取物的檢測方法，具體涉及一種聯(lián)用UPLC和Q-TOF-MS來檢測木香乙酸乙酯提取物具體成分的方法。
[【背景技術(shù)】]
[0002]木香，中藥名。為菊科植物木香Aucklandia lappa Decne.的干燥根。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》列為上品，味辛苦，性溫，具有行氣止痛，健脾消食的功效，臨床上用于胸脘脹痛、瀉痢后重，食積不消，不思飲食等癥，煨制后澀腸止瀉，用于泄瀉腹痛，為治療腹痛、瀉痢的常用藥?！睹t(yī)別錄》稱之為蜜香、青木香。李時(shí)珍謂:“昔人謂之青木香，后人因呼馬兜鈴根為青木香，乃呼此為南木香，廣木香以別之?！痹谂浞竭^程中，醫(yī)生處方中常見有云木香，川木香，土木香，青木香，紅木香及越西木香等帶有“木香”之名出現(xiàn)，容易不致混淆。
[0003]木香的鑒別方法有性狀鑒別、顯微鑒別，具體為:
[0004]性狀鑒別為:略呈圓柱形，枯骨形為縱剖片，長約5?15cm,直徑0.5?6cm,
表面黃褐色，栓皮多除去，有顯著縱溝及側(cè)根痕，有時(shí)可見不規(guī)則菱形網(wǎng)紋。質(zhì)堅(jiān)實(shí)，體重，不易折段。斷面略平坦，黃白色至棕黃色，有一棕色環(huán)及放射性紋理，并可見散在的褐色油點(diǎn)。氣強(qiáng)烈芳香，味苦。
[0005]顯微鑒別為:1.橫切面:木栓層為多列木栓細(xì)胞；韌皮部寬廣，射線明顯，成環(huán)狀；木質(zhì)部木質(zhì)部導(dǎo)管單行徑向排列，木纖維存于近形成層處及中心的導(dǎo)管旁，初生木質(zhì)部多為四圓形；油室散在于薄壁細(xì)胞中，呈圓形或橢圓形，常貯有黃色油滴；薄壁細(xì)胞含有菊糖。2.粉末:菊糖極多；木纖維多成束長菱形，直徑16?24Lm,紋孔口橫裂孔狀，十字狀或人字狀；導(dǎo)管主為網(wǎng)紋導(dǎo)管，也有具緣紋導(dǎo)管，直徑30?90Lm;油室可見油室碎片，內(nèi)含黃色或棕色分泌物；
[0006]木栓細(xì)胞淡黃棕色。表面觀類多角形，大小不一，垂周壁微波狀彎曲。
[0007]而關(guān)于木香提取物及有效成分的檢測也很少有報(bào)道，例如:
[0008]國內(nèi)申請201210425189X公開了一種木香的乙酸乙酯提取物，其制備方法為:木香用石油醚浸泡18_36h，滲濾提取至3-8倍藥材量，回收殘?jiān)瑩]干殘?jiān)械氖兔?，?0%-90%乙醇提取，提取液濃縮得乙醇濃縮液，用乙酸乙酯萃取，倒出上層，即得乙酸乙酯提取物。但是沒有提及該產(chǎn)品的檢測或鑒別方法。
[0009]UPLC/Q-T0F-MS分析方法是超高效液相色譜-四極桿聯(lián)合飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜分析方法，通過高效液相的聯(lián)用，可以方便得到每個(gè)樣品的主要結(jié)構(gòu)信息，并針對每個(gè)組分進(jìn)行準(zhǔn)確的定性分析。四級桿質(zhì)譜是在交變電場的作用下沒事某些符合要求的離子通過四級桿到達(dá)檢測器，飛行時(shí)間質(zhì)譜(TOF)是應(yīng)用不同的m/z離子的飛行速度不同，離子飛行通過相同的路徑到達(dá)檢測器的時(shí)間不同而獲得質(zhì)量分離。四級桿串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜不僅用于一級質(zhì)譜的分析而且可以實(shí)現(xiàn)二級質(zhì)譜分析，一級質(zhì)譜可得出化合物的分子量信息，二級質(zhì)譜則可以得到化合物的碎片離子等結(jié)構(gòu)信息。[0010]目前，UPLC/Q-T0F-MS可以廣泛運(yùn)用中藥化學(xué)成分的快速鑒定定性分析，它可以使樣品的分離和定性及定量成為一個(gè)連續(xù)的過程，費(fèi)時(shí)費(fèi)力而且對環(huán)境不好，UPLC/Q-T0F-MS的快速分析鑒別，能夠在短時(shí)有效成分分離的基礎(chǔ)上，獲得大量的化合物結(jié)構(gòu)信息，在中藥化學(xué)成分分析中發(fā)揮了重要的作用。
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【發(fā)明內(nèi)容】
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[0011]為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了能夠檢測類似國內(nèi)申請201210425189X的木香乙酸乙酯提取物的方法，并通過聯(lián)用UPLC和Q-TOF-MS來實(shí)現(xiàn)。
[0012]為實(shí)現(xiàn)上述目的，設(shè)計(jì)一種木香乙酸乙酯提取物的檢測方法，聯(lián)用UPLC和Q-TOF-MS進(jìn)行分析檢測，所述的方法由以下步驟組成:
[0013]a.所述的 UPLC 分析的條件為:采用 Waters ACQUITY UPLC? BEHC18Column (50mmX 2.lmm.1d., 1.7 μ m)柱進(jìn)行二元梯度洗脫,A相為水溶液,B相為乙腈,流速0.3mL/min ;進(jìn)樣量3~4 μ L ;
[0014]b.所述的Q-TOF-MS分析的條件為:采用電噴霧電離源、TOF離子飛行和正離子模式檢測，四級桿質(zhì)量掃描范圍為50~1200m/z，一次掃描時(shí)間為0.1s，離子源溫度120°C，去溶劑溫度300°C，錐孔氣體流速為50L/h，脫溶劑氮?dú)饬魉?00L/h，正離子電離模式，毛細(xì)管電尚電壓3kV,維孔電壓40V,碰撞氣體壓力為2.5 X 10 3Mbar,電子倍增器電壓650V。
[0015]所述的梯度洗脫的具體優(yōu)化步驟如下:
【權(quán)利要求】
1.一種木香乙酸乙酯提取物的檢測方法，聯(lián)用UPLC和Q-TOF-MS進(jìn)行分析檢測，其特征在于所述的方法由以下步驟組成: a.所述的UPLC分析的條件為:采用WatersACQUITY UPLC? BEHC18Column (50mmX 2.lmm.1d., 1.7 μ m)柱進(jìn)行二元梯度洗脫,A相為水溶液,B相為乙腈,流速0.3mL/min ;進(jìn)樣量3~4 μ L ; b.所述的Q-TOF-MS分析的條件為:采用電噴霧電離源、TOF離子飛行和正離子模式檢測，四級桿質(zhì)量掃描范圍為50~1200m/z，一次掃描時(shí)間為0.1s，離子源溫度120°C，去溶劑溫度300°C，錐孔氣體流速為50L/h，脫溶劑氮?dú)饬魉?00L/h，正離子電離模式，毛細(xì)管電離電壓3kV，錐孔電壓40V，碰撞氣體壓力為2.5 X KT3Mbar,電子倍增器電壓650V。
2.如權(quán)利要求1所述的木香乙酸乙酯提取物的檢測方法，其特征在于所述的梯度洗脫的具體步驟如下:
3.如權(quán)利要求1所述的木香乙酸乙酯提取物的檢測方法，其特征在于所述的進(jìn)樣量為.4 μ L.
【文檔編號】G01N30/02GK103645258SQ201310680849
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年12月12日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月10日
【發(fā)明者】陳士林, 黃林芳, 王冬梅, 劉艾林, 徐宏喜, 卞兆祥, 楊大堅(jiān), 陳新滋 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所, 香港浸會(huì)大學(xué)