用于診斷骨關(guān)節(jié)炎的方法
【專(zhuān)利摘要】用于管理人或其他哺乳動(dòng)物對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎的方法，其包括測(cè)量對(duì)象組織樣品中的某些細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子，所述細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子包括一種或更多種血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)、血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)和表皮生長(zhǎng)因子(EGF)。組織樣品可以是全血、血液級(jí)分、尿、唾液和滑液。所述方法包括診斷骨關(guān)節(jié)炎，以及用于例如在已經(jīng)用放射造影或其他方法診斷為患有骨關(guān)節(jié)炎的對(duì)象中評(píng)估骨關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度的方法。所述方法還可包括將測(cè)量的細(xì)胞因子水平與參考水平相比較。管理骨關(guān)節(jié)炎的臨床進(jìn)展的方法包括基于所測(cè)量的細(xì)胞因子水平與參考水平之間的差異開(kāi)始臨床行為。
【專(zhuān)利說(shuō)明】用于診斷骨關(guān)節(jié)炎的方法

【背景技術(shù)】
[0001] 骨關(guān)節(jié)炎是一種主要與關(guān)節(jié)疼痛有關(guān)的潛在地致虛弱的疾病。其特征還在于關(guān)節(jié) 壓痛、腫脹僵硬、肌無(wú)力及喪失靈活性。不同于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎不是全身性疾??； 相反，骨關(guān)節(jié)炎的癥狀通常位于于受影響的關(guān)節(jié)。關(guān)節(jié)中嚴(yán)重的軟骨損耗可導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形， 這可引起關(guān)節(jié)不穩(wěn)定。
[0002] 目前不存在緩解或阻止其進(jìn)展的常見(jiàn)治療選擇。盡管已經(jīng)在很大程度上進(jìn)行了研 宄，但是對(duì)于是什么引發(fā)骨關(guān)節(jié)炎仍然沒(méi)有明確的答案，并且諸如衰老、關(guān)節(jié)過(guò)度使用、月巴 胖和遺傳等因素均可在該疾病的發(fā)生中發(fā)揮作用。此外，尚未確定，骨關(guān)節(jié)炎是單一的疾病 還是有密切相關(guān)之通路的數(shù)種疾病的組合。
[0003] 骨關(guān)節(jié)炎目前通過(guò)X-放射造影法來(lái)診斷，例如通過(guò)觀察關(guān)節(jié)間隙狹窄。不幸地 是，直到患者已經(jīng)開(kāi)始導(dǎo)致關(guān)節(jié)間隙狹窄的軟骨內(nèi)容物損耗之后才能進(jìn)行該診斷。已知許 多炎性細(xì)胞因子例如白介素1β (IL-Ιβ)和腫瘤壞死因子-a (TNF-α)在骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)展 中發(fā)揮關(guān)鍵作用。然而，在人和動(dòng)物血液中有無(wú)數(shù)的生長(zhǎng)因子。那些生長(zhǎng)因子的濃度是可 根據(jù)許多因素波動(dòng)。因此，使用任何這些因素的測(cè)量作為診斷任何給定的臨床對(duì)象中之骨 關(guān)節(jié)炎存在的基礎(chǔ)格外困難。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本技術(shù)提供了用于管理人或其他哺乳動(dòng)物對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎的方法。所述方法包 括測(cè)量對(duì)象之組織樣品中的某些細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子，所述細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子包括以下 的一種或更多種：血小板衍生生長(zhǎng)因子AB (PDGF-AB)、血小板衍生生長(zhǎng)因子BB (PDGF-BB)和 表皮生長(zhǎng)因子（EGF)。組織樣品可選自：全血、血液級(jí)分（blood fraction)、尿、唾液、滑液 及其組合。這樣的方法包括用于診斷骨關(guān)節(jié)炎的那些方法，以及用于（例如在已經(jīng)用放射 造影或其他方法診斷為患有骨關(guān)節(jié)炎的對(duì)象中）評(píng)估骨關(guān)節(jié)炎之嚴(yán)重程度的方法。
[0005] 在一些實(shí)施方案中，方法還可包括將細(xì)胞因子的濃度與細(xì)胞因子參考水平相比 較。細(xì)胞因子參考水平可以是哺乳動(dòng)物對(duì)象的群體（例如沒(méi)有骨關(guān)節(jié)炎的對(duì)象群體）中的 細(xì)胞因子之組織樣品濃度的平均值或中位數(shù)（median value)。參考水平可以是在測(cè)量時(shí)間 之前的時(shí)間從對(duì)象中獲得的組織樣品中的細(xì)胞因子的濃度。
[0006] 在一些實(shí)施方案中，方法包括：
[0007] (a)測(cè)量從對(duì)象中獲得的第一血液樣品中的細(xì)胞因子水平；
[0008] (b)測(cè)量從所述對(duì)象中獲得的第二血液樣品中的細(xì)胞因子水平；
[0009] 以及
[0010] (C)將第一樣品中的細(xì)胞因子水平與第二樣品中的細(xì)胞因子水平相比較以確定細(xì) 胞因子水平變化；其中
[0011] (d)所述細(xì)胞因子選自血小板衍生生長(zhǎng)因子AB (PDGF-AB)、血小板衍生生長(zhǎng)因子 BB(TOGF-BB)、表皮生長(zhǎng)因子（EGF)及其組合。
[0012] 這樣的方法還可包括：
[0013] (i)在測(cè)量所述第一樣品中的細(xì)胞因子水平時(shí)進(jìn)行所述對(duì)象之關(guān)節(jié)的第一次放射 造影或者其他非基于I 3DGF或基于EGF的診斷評(píng)估；
[0014] (ii)在測(cè)量所述第二樣品中的細(xì)胞因子水平時(shí)進(jìn)行所述對(duì)象之關(guān)節(jié)的第二次放 射造影或者其他非基于I 3DGF或基于EGF的診斷評(píng)估；
[0015] (iii)將第一次評(píng)估與第二次評(píng)估相比較以確定放射造影變化；以及
[0016] (iv)使所述放射造影變化與所述細(xì)胞因子水平變化相關(guān)聯(lián)。
[0017] 本技術(shù)還提供了管理哺乳動(dòng)物對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎的臨床進(jìn)展的方法，其包括：
[0018] (a)測(cè)量在所述對(duì)象之血液中的細(xì)胞因子的濃度，所述細(xì)胞因子選自血小板衍生 生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)、血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)、表皮生長(zhǎng)因子（EGF)及其組合。
[0019] (b)將所述細(xì)胞因子的濃度與細(xì)胞因子參考水平相比較以確定細(xì)胞因子水平偏離 (variance);以及
[0020] (c)基于所述細(xì)胞因子水平偏離開(kāi)始臨床行為（clinical action)。
[0021 ] 所述臨床行為可選自開(kāi)始施用治療方案、修改治療方案的時(shí)間、修改治療方案的 水平、終止治療方案及其組合。所述治療方案可包括施用抗炎組合物，所述組合物包含白介 素-1受體拮抗劑（IL-Ira)和可溶性腫瘤壞死因子受體1。

【具體實(shí)施方式】
[0022] 以下技術(shù)描述僅為對(duì)一種或更多種本發(fā)明的主題、生產(chǎn)和使用的本質(zhì)進(jìn)行的示 例，并非旨在限制本申請(qǐng)或可要求本申請(qǐng)（或其授權(quán)專(zhuān)利）優(yōu)先權(quán)的所提交的這樣的其他 申請(qǐng)中所要求保護(hù)的任何具體發(fā)明的范圍、應(yīng)用或用途。在本詳細(xì)說(shuō)明書(shū)的末尾提供了旨 在幫助理解本技術(shù)的術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)的非限制性討論。
[0023] 評(píng)估方法
[0024] 本技術(shù)提供了用于評(píng)估哺乳動(dòng)物對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎的方法。這樣的方法包括在人 和其他哺乳動(dòng)物對(duì)象中診斷骨關(guān)節(jié)炎、評(píng)估發(fā)展骨關(guān)節(jié)炎的易感性、以及監(jiān)測(cè)骨關(guān)節(jié)炎之 進(jìn)展的方法。其他哺乳動(dòng)物對(duì)象包括伴侶動(dòng)物、役用動(dòng)物，或運(yùn)動(dòng)動(dòng)物，例如狗、貓和馬。
[0025] 傳統(tǒng)的骨關(guān)節(jié)炎的放射造影指示是不靈敏的并且只有在疾病明顯進(jìn)展之后才可 揭示骨關(guān)節(jié)炎的存在。使用本領(lǐng)域的這樣的方法來(lái)進(jìn)行骨關(guān)節(jié)炎的初期診斷是有問(wèn)題的， 因?yàn)楹茈y定義和觀察對(duì)象中的放射造影變化。本技術(shù)的方法使得可在發(fā)展和晚期階段診斷 骨關(guān)節(jié)炎。血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)的濃度，特別地，與骨關(guān)節(jié)炎患者中的骨關(guān)節(jié) 炎指示相關(guān)，所述指示包括關(guān)節(jié)間隙狹窄、骨贅的存在、軟骨下硬化和軟骨下囊腫。下表示 出了代表具有〇、1、2或3種骨關(guān)節(jié)炎指示之對(duì)象中的TOGF-AB、PDGF-BB和EGF的示例性平 均濃度。
[0026]

【權(quán)利要求】
1. 用于評(píng)估哺乳動(dòng)物對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎的方法，其包括測(cè)量所述對(duì)象的組織樣品中 選自下組之細(xì)胞因子的濃度；血小板衍生生長(zhǎng)因子AB (PDGF-AB)、血小板衍生生長(zhǎng)因子 BB(PDGF-BB)和表皮生長(zhǎng)因子巧GF)及其組合。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述細(xì)胞因子包括PDGF-AB。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的方法，其中所述細(xì)胞因子包括PDGF-BB。
4. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述細(xì)胞因子包括EGF。
5. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述細(xì)胞因子包括多種選自所述組的 細(xì)胞因子。
6. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述組織樣品選自全血、血液級(jí)分、 尿、唾液、滑液及其組合。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述組織樣品是全血或全血級(jí)分。
8. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括將所述細(xì)胞因子濃度與細(xì)胞因子 參考水平相比較。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述細(xì)胞因子參考水平為在哺乳動(dòng)物對(duì)象的群體 中所述細(xì)胞因子之組織樣品濃度的平均值或中位數(shù)。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物對(duì)象的群體是沒(méi)有骨關(guān)節(jié)炎之對(duì) 象的群體。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述組織樣品是全血或血液級(jí)分，并且所述細(xì) 胞因子參考水平包括全血濃度為約6ng/ml至約17ng/ml的PDGF-AB。
12. 根據(jù)權(quán)利要求10或權(quán)利要求11所述的方法，其中所述組織樣品是全血或血液級(jí) 分，并且所述細(xì)胞因子參考水平包括全血濃度為約1. 9ng/ml至約化g/ml的PDGF-BB。
13. 根據(jù)權(quán)利要求10至12中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述組織樣品是全血或血液級(jí) 分，并且所述細(xì)胞因子參考水平包括全血濃度為約llOng/ml至約420ng/ml的EGF。
14. 根據(jù)權(quán)利要求8至13中任一項(xiàng)所述的方法，其中將所述細(xì)胞因子參考水平中的細(xì) 胞因子的濃度與放射造影指示相關(guān)聯(lián)。
15. 根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述放射造影指示選自關(guān)節(jié)間隙狹窄、骨寶的 存在、軟骨下硬化、軟骨下囊腫及其組合。
16. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述細(xì)胞因子參考水平是在測(cè)量時(shí)間之前的時(shí) 間從所述對(duì)象中獲得的組織樣品中的所述細(xì)胞因子的濃度。
17. 根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其用于監(jiān)測(cè)所述對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎的進(jìn)展，其中所 述時(shí)間為至少約4周，或至少約3個(gè)月，或至少約6個(gè)月，或至少約一年之前。
18. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其用于診斷所述對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎。
19. 根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中所述對(duì)象具有選自W下的骨關(guān)節(jié)炎癥狀；關(guān)節(jié) 疼痛、關(guān)節(jié)僵直、關(guān)節(jié)損傷、放射造影異常及其組合。
20. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其用于評(píng)估所述對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎的嚴(yán) 重程度。
21. 根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述對(duì)象先前已經(jīng)診斷為患有骨關(guān)節(jié)炎。
22. 根據(jù)權(quán)利要求1、權(quán)利要求18或權(quán)利要求20所述的方法，其還包括將所述對(duì)象之 組織樣品中的細(xì)胞因子濃度與細(xì)胞因子參考水平相比較，并且基于所述比較的結(jié)果確定嚴(yán) 重程度指數(shù)值。
23. 根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述細(xì)胞因子參考水平是在測(cè)量時(shí)間之前的時(shí) 間從所述對(duì)象中獲得之組織樣品中的所述細(xì)胞因子的濃度。
24. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其還包括在所述對(duì)象中進(jìn)行關(guān)節(jié)的放射造影測(cè)量。
25. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述對(duì)象表現(xiàn)出骨關(guān)節(jié)炎癥狀。
26. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定巧LISA)來(lái) 測(cè)定所述濃度。
27. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述對(duì)象是人。
28. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述對(duì)象是伴侶動(dòng)物、役用動(dòng)物或運(yùn) 動(dòng)動(dòng)物。
29. 評(píng)估哺乳動(dòng)物對(duì)象中骨關(guān)節(jié)炎的方法，其包括： (a)測(cè)量從所述對(duì)象中獲得的第一血液樣品中的細(xì)胞因子水平； 化）測(cè)量從所述對(duì)象中獲得的第二血液樣品中的細(xì)胞因子水平擬及 (C)將所述第一樣品中的細(xì)胞因子水平與所述第二樣品中的細(xì)胞因子水平相比較W確 定細(xì)胞因子水平變化；其中 (d)所述細(xì)胞因子選自血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)、血小板衍生生長(zhǎng)因子 BB(PDGF-BB)和表皮生長(zhǎng)因子巧GF)及其組合。
30. 根據(jù)權(quán)利要求29所述的方法，其用于監(jiān)測(cè)哺乳動(dòng)物對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎的進(jìn)展，所 述方法還包括： (i) 在測(cè)量所述第一樣品中的細(xì)胞因子水平時(shí)進(jìn)行所述對(duì)象之關(guān)節(jié)的第一次放射造影 評(píng)估； (ii) 在測(cè)量所述第二樣品中的細(xì)胞因子水平時(shí)進(jìn)行所述對(duì)象之關(guān)節(jié)的第二次放射造 影評(píng)估； (iii) 將所述第一次放射造影評(píng)估與所述第二次放射造影評(píng)估相比較W確定放射造影 變化；化及 (iv) 將所述放射造影變化與所述細(xì)胞因子水平變化相關(guān)聯(lián)。
31. 根據(jù)權(quán)利要求29或權(quán)利要求30所述的方法，其中所述第二血液樣品是在獲得所述 第一血液樣品之后至少4周獲得的。
32. 管理哺乳動(dòng)物對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎之臨床進(jìn)展的方法，其包括： (a)測(cè)量所述對(duì)象之血液中的細(xì)胞因子濃度，所述細(xì)胞因子選自血小板衍生生長(zhǎng)因子 AB(PDGF-AB)、血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)、表皮生長(zhǎng)因子巧GF)及其組合； 化）將所述細(xì)胞因子的濃度與細(xì)胞因子參考水平相比較W確定細(xì)胞因子水平偏離；W 及 (C)基于所述細(xì)胞因子水平偏離開(kāi)始臨床行為。
33. 根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其中所述臨床行為選自；開(kāi)始施用治療方案、修改治 療方案的時(shí)間、修改治療方案的水平、終止治療方案及其組合。
34. 根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，其中所述治療方案包括施用抗炎組合物，所述抗炎 組合物包含白介素-1受體括抗劑（比-Ira)和可溶性腫瘤壞死因子受體I。
35. 根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述抗炎組合物包含： i) 濃度為至少約l〇,〇〇〇pg/ml的白介素-1受體括抗劑（比-Ira); ii) 濃度為至少約l，200pg/ml的可溶性腫瘤壞死因子受體l(sTNF-Rl) 及 iii) 選自 W下的蛋白質(zhì)；sTNF-RII、IGF-I、EGF、HGF、PDGF-AB、PDGF-BB、VEGF、TGF-e 1 和S比-1RII及其混合物，其中所述組合物中所述蛋白質(zhì)的濃度高于正常血液中所述蛋白 質(zhì)的濃度。
36. 根據(jù)權(quán)利要求32至35中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物對(duì)象是人。
37. 根據(jù)權(quán)利要求32至35中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物對(duì)象是伴侶動(dòng)物、 役用動(dòng)物或運(yùn)動(dòng)動(dòng)物。
38. 根據(jù)權(quán)利要求32至37中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述細(xì)胞因子參考水平是在測(cè)量 時(shí)間之前的時(shí)間從所述對(duì)象中獲得之血液中的所述細(xì)胞因子的濃度。
39. 根據(jù)權(quán)利要求38所述的方法，其用于監(jiān)測(cè)所述對(duì)象中的骨關(guān)節(jié)炎的進(jìn)展，其中所 述時(shí)間為至少約4周，或至少約3個(gè)月，或至少約6個(gè)月，或至少約一年之前。
40. 根據(jù)權(quán)利要求32至39中任一項(xiàng)所述的方法，其中嚴(yán)重程度指數(shù)值是基于所述比較 的結(jié)果確定的。
41. 根據(jù)權(quán)利要求32至37中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述細(xì)胞因子參考水平為所述哺 乳動(dòng)物對(duì)象的群體中的所述細(xì)胞因子之血液濃度的平均值或中位數(shù)。
42. 根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物對(duì)象的群體是沒(méi)有骨關(guān)節(jié)炎之對(duì) 象的群體。
43. 根據(jù)權(quán)利要求42所述的方法，其中所述細(xì)胞因子參考水平包括全血濃度為約6ng/ ml 至約 17ng/ml 的 PDGF-AB。
44. 根據(jù)權(quán)利要求42或權(quán)利要求43所述的方法，其中所述細(xì)胞因子參考水平包括全血 濃度為約化g/ml至約化g/ml的PDGF-BB。
45. 根據(jù)權(quán)利要求42至44中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述細(xì)胞因子參考水平包括全血 濃度為約llOpg/ml至約420pg/ml的EGF。
46. 根據(jù)權(quán)利要求41至45中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述對(duì)象先前已診斷為患有骨關(guān) 節(jié)炎。
47. 根據(jù)權(quán)利要求46所述的方法，其中所述對(duì)象具有選自W下的骨關(guān)節(jié)炎癥狀；關(guān)節(jié) 疼痛、關(guān)節(jié)僵直、關(guān)節(jié)損傷、放射造影異常及其組合。
【文檔編號(hào)】G01N33/68GK104471406SQ201380037434
【公開(kāi)日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2013年6月4日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月4日
【發(fā)明者】克麗斯塔·歐肖內(nèi)西 申請(qǐng)人:拜歐米特生物制劑有限責(zé)任公司