從地榆中分離三種鞣質(zhì)單體組分的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了從地榆中分離三種鞣質(zhì)單體組分的方法，所述的三種單體組分分別是沒(méi)食子酸、3,3′,4′-O-三甲基逆沒(méi)食子酸-4-O-β-D-木糖苷、3,3’,4’-O-三甲基逆沒(méi)食子酸。本發(fā)明利用制備型高效液相色譜法分離制備的鞣質(zhì)單體組分，純度均在98%以上，且分離效率高、分離速度快，具有很好的產(chǎn)業(yè)前景，可以將所得組分作為鞣質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品，并廣泛用于藥劑、藥物分析和藥理學(xué)等研究領(lǐng)域。
【專(zhuān)利說(shuō)明】從地榆中分離三種鞣質(zhì)單體組分的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及從地榆中分離三種鞣質(zhì)單體組分的方法，主要涉及沒(méi)食子酸、3，3^ ,4! -O-三甲基逆沒(méi)食子酸-4-0-β-D-木糖苷和3，3’，4’-O-三甲基逆沒(méi)食子酸的高效液相色譜分離方法。
【背景技術(shù)】
[0002]鞣質(zhì)又稱(chēng)單寧，是存在于植物體內(nèi)的一類(lèi)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的多元酚類(lèi)化合物。它的藥理活性除常見(jiàn)的收斂、抗菌消炎、止血、驅(qū)蟲(chóng)、止瀉、抗多種病原蟲(chóng)感染性疾病外，還表現(xiàn)在人們非常關(guān)注的抗腫瘤、抗人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)、抗突變、抗脂質(zhì)過(guò)氧化，抗衰老、心血管病、改善肝腎功能、預(yù)防應(yīng)激性胃腸損傷、抗白內(nèi)障、對(duì)重金屬鹽和生物堿中毒有解毒作用等方面有獨(dú)到功效。
[0003]根據(jù)鞣質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為可水解鞣質(zhì)、縮合鞣質(zhì)和復(fù)合鞣質(zhì)三大類(lèi)。其中可水解鞣質(zhì)是一類(lèi)由酚酸及其衍生物與葡萄糖或多元醇通過(guò)甙鍵或酯鍵而形成的化合物。依水解后所得酚酸類(lèi)的不同，又可分為沒(méi)食子酸鞣質(zhì)和逆沒(méi)食子酸鞣質(zhì)兩類(lèi)，其中沒(méi)食子酸與3，3’，4’ -O-三甲基逆沒(méi)食子酸分別為沒(méi)食子酸鞣質(zhì)和逆沒(méi)食子酸鞣質(zhì)水解產(chǎn)生的兩類(lèi)酚酸及其衍生物，3，3'，4' -O-三甲基逆沒(méi)食子酸-4-0-β-D-木糖苷為逆沒(méi)食子酸鞣質(zhì)，這三種單體組分的結(jié)構(gòu)式分別為:
[0004]
【權(quán)利要求】
1.從地榆中分離三種鞣質(zhì)單體組分的方法，所述的三種單體組分分別是沒(méi)食子酸、3，3'，4' -O-三甲基逆沒(méi)食子酸-4-0-β-D-木糖苷、3，3’，4’-O-三甲基逆沒(méi)食子酸，其特征在于:它包括如下操作步驟: (O取地榆提取物，制備供試品溶液，所述地榆提取物為地榆總鞣質(zhì)或地榆的70~95%v/v甲醇提取物； (2)將供試品溶液注入制備型高效液相色譜儀中，以甲醇-酸水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，在線(xiàn)監(jiān)測(cè)，分別收集所述三種組分的洗脫液，將各洗脫液減壓濃縮、干燥后，得3，3'，4' -O-三甲基逆沒(méi)食子酸-4-0-13-D-木糖苷、3，3’，4’ -O-三甲基逆沒(méi)食子酸兩個(gè)純化樣品以及沒(méi)食子酸粗制品； (3)取步驟(2)制備的沒(méi)食子酸粗制品，注入制備型高效液相色譜儀中，以甲醇-酸水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，在線(xiàn)監(jiān)測(cè)，收集沒(méi)食子酸組分的洗脫液，減壓濃縮、干燥，即得沒(méi)食子酸純化樣品； 其中，步驟(2)采用的色譜條件如下:制備型色譜柱固定相為十八烷基鍵合硅膠；流動(dòng)相為甲醇-酸水溶液系統(tǒng)，所述甲醇-酸水溶液系統(tǒng)為:以體積百分比計(jì)，甲醇體積濃度為20%~100%的甲醇-酸水溶液的梯度洗脫液； 步驟(3)采用的色譜條件如下:制備型色譜柱固定相為十八烷基鍵合硅膠；流動(dòng)相為甲醇-酸水溶液系統(tǒng)，所述甲醇-酸水溶液系統(tǒng)為:以體積百分比計(jì)，甲醇體積濃度為5%~100%的甲醇-酸水溶液的梯度洗脫液； 步驟(2)、(3)中，檢測(cè)波長(zhǎng)為210_、254_或/和280nm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(1)中所述地榆提取物為地榆的80%v/v甲醇提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(2)中，所述甲醇-酸水溶液系統(tǒng)的梯度洗脫條件如下:
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的方法，其特征在于:所述酸水溶液的pH值為2.0~4.0。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于:所述酸水溶液的pH值為3.0±0.2。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、3~5任意一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述酸為鹽酸、磷酸、硫酸、甲酸或醋酸。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述十八烷基鍵合硅膠的粒徑為5um。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(2)、(3)中，流動(dòng)相流速10.0ml/min0
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(2)、(3)中，色譜柱柱溫為25±5°C。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(1)中所述供試品溶液的濃度在50mg/ml以下；步驟(2)、(3)中，進(jìn)樣量在1.0ml以下。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK103913522SQ201410003957
【公開(kāi)日】2014年7月9日 申請(qǐng)日期:2014年1月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月6日
【發(fā)明者】鄒文俊, 高小平, 吳建明, 李小芳, 代燕平 申請(qǐng)人:成都中醫(yī)藥大學(xué)