抗菌紡織品的安全性測試方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種抗菌紡織品的安全性測試方法，通過用瓊脂平皿擴散法對試樣抗菌性能進行定性試驗，采用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀測定樣品的金屬溶出量，同時利用EPI-MODEL人體皮膚模型，進行織物萃取液的皮膚刺激性試驗，建立抗菌紡織品安全評價方法，可適用于無機抗菌整理劑整理后的服裝、纖維填料、紗線、服裝材料和家庭裝飾產(chǎn)品等各類紡織品。
【專利說明】抗菌紡織品的安全性測試方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于產(chǎn)品安全與檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種抗菌紡織品的安全性測試方法。
【背景技術(shù)】
[0002]紡織品的抗菌整理賦予了紡織品抑制細(xì)菌在其上面生長、繁殖或使細(xì)菌失活的功能，可以保護紡織品不被霉菌等降解，并防止微生物傳播，還可阻止細(xì)菌在織物上不斷繁殖而產(chǎn)生臭氣，提高了紡織品的品質(zhì)和消費者的生活質(zhì)量。抗菌紡織品因與人們追求健康的理念完全吻合，已成為國內(nèi)外研究和開發(fā)的熱點。
[0003]抗菌紡織品是現(xiàn)代技術(shù)的發(fā)展與紡織品加工技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物?？咕椢镏饕獞?yīng)用于襪子、內(nèi)衣褲、毛巾、包裝品和特殊用品，他們多屬于貼膚用品。目前，我國紡織行業(yè)雖然制定了包括紡織品本身性能和抗菌性能檢測在內(nèi)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，但相關(guān)的抗菌劑和抗菌紡織品的衛(wèi)生安全性規(guī)定，尚需有關(guān)部門制定。由于抗菌技術(shù)使用不當(dāng)可能帶來潛在的安全性隱患，因而，在關(guān)注抗菌紡織品的抗菌效果的同時，更應(yīng)規(guī)范抗菌紡織品市場，保證抗菌紡織品應(yīng)用時安全、可靠、實用。本發(fā)明因此而來。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種抗菌紡織品的安全性測試方法，可適用于經(jīng)無機抗菌整理劑整理后的各類抗菌紡織品及制品。
[0005]為了解決現(xiàn)有技術(shù)中的這些問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是:
[0006]一種抗菌紡織品的安全性測試方法，其特征在于所述方法包括以下步驟:
[0007](I)對待測紡織品進行抗菌性試驗判斷紡織品是否是抗菌紡織品；如果紡織品為抗菌紡織品，則進行步驟(2)和/或步驟(3)的安全性測試步驟；如果紡織品不為抗菌紡織品，則結(jié)束安全性測試；
[0008](2)利用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進行待測的抗菌紡織品金屬溶出量測定，根據(jù)金屬溶出量是否超過限值判斷待測的抗菌紡織品是否安全；當(dāng)金屬溶出量超過限值則認(rèn)為待測的抗菌紡織品至少具有潛在危害；當(dāng)金屬溶出量沒有超過限值則認(rèn)為待測的抗菌紡織品為安全的抗菌紡織品；
[0009](3)利用EP1-M0DEL人體皮膚模型對待測的抗菌紡織品進行織物萃取液的皮膚刺激性試驗，根據(jù)待測的抗菌紡織品是否具有某種刺激性判斷待測的抗菌紡織品是否安全；當(dāng)待測的抗菌紡織品具有某種刺激性則認(rèn)為待測的抗菌紡織品至少具有潛在危害；當(dāng)待測的抗菌紡織品沒有刺激性則認(rèn)為待測的抗菌紡織品為安全的抗菌紡織品。
[0010]優(yōu)選的技術(shù)方案是:所述方法步驟(I)中抗菌性試驗是采用瓊脂平皿擴散法對待測紡織品抗菌性能進行定性試驗，根據(jù)含有待測紡織品的培養(yǎng)基中是否存在細(xì)菌生長以及抑菌帶寬度來判斷是否是抗菌紡織品。
[0011]優(yōu)選的技術(shù)方案是:所述方法步驟(I)中檢測的細(xì)菌包括金黃色葡萄球菌、大腸桿菌。
[0012]優(yōu)選的技術(shù)方案是:所述方法步驟(2)中電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進行金屬溶出量測定時，將試樣剪成約5mmX 5mm大小，加入的萃取劑是人工酸性汗液，加入量為10倍試樣質(zhì)量，萃取條件是:在37 ±2 °C下振蕩提取60±5min ;過0.45 μ m水系濾膜后測定。
[0013]優(yōu)選的技術(shù)方案是:所述方法步驟(2)中金屬溶出量的限值為50mg/kg。
[0014]優(yōu)選的技術(shù)方案是:所述方法步驟(3)中利用EP1-M0DEL人體皮膚模型對待測的抗菌紡織品進行織物萃取液的皮膚刺激性試驗是對抗菌紡織品的人工酸性汗液萃取液進行皮膚刺激性試驗；將試樣剪成約5mmX 5mm大小，加入人工酸性汗液，加入量為10倍試樣質(zhì)量，萃取條件是:在37±2°C下振蕩提取60±5min。
[0015]優(yōu)選的技術(shù)方案是:所述方法步驟(3)中待測的抗菌紡織品是否具有某種刺激性是通過抗菌紡織品的人工酸性汗液萃取液中細(xì)胞活性是否大于50%進行判斷；當(dāng)細(xì)胞活性(50%判斷為抗菌紡織品有刺激性，當(dāng)細(xì)胞活性>50%為抗菌紡織品無刺激性；其中細(xì)胞活性=(受試物OD平均值/陰性對照OD平均值)*100%。
[0016]本發(fā)明技術(shù)方案提供了一種抗菌紡織品的安全性測試方法，可以作為紡織品的安全性評價指標(biāo)。具體的安全性測試方法包括以下步驟:1)確定紡織品是否是抗菌紡織品:用瓊脂平皿擴散法對試樣抗菌性能進行定性試驗；2)對抗菌紡織品利用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進行金屬溶出量測定；3)對抗菌紡織品利用EP1-M0DEL人體皮膚模型，進行了織物水萃取液的皮膚刺激性試驗；4)根據(jù)步驟2)、3)的結(jié)果判斷抗菌紡織品的安全性。
[0017]所述方法步驟(I)中電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進行金屬溶出量測定時，萃取采用的試樣剪成約5mmX5mm大小，加入的萃取劑是人工酸性汗液，加入量為10倍試樣質(zhì)量，萃取條件是:在(37 ± 2 ) 0C下振蕩提取(60 ± 5 ) min然后過0.45 μ m水系濾膜。
[0018]所述方法中使用利用EP1-M0DEL人體皮膚模型進行皮膚刺激性試驗。方法中使用對抗菌紡織品的人工酸性汗液萃取液進行皮膚刺激性試驗。將試樣剪成約5mmX 5mm大小，加入人工酸性汗液，加入量為10倍試樣質(zhì)量，萃取條件是:在(37±2) °C下振蕩提取(60 + 5) min。
[0019]本發(fā)明提供了一種抗菌紡織品的安全性測試方法，建立了適合抗菌紡織品抗菌劑溶出測試和皮膚刺激性試驗的技術(shù)程序。本發(fā)明進行抗菌紡織品安全性評價，采用瓊脂平皿擴散法進行試樣抗菌性能確認(rèn)，采用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀測定樣品的金屬溶出量，同時利用EP1-M0DEL人體皮膚模型，進行織物萃取液的皮膚刺激性試驗，建立抗菌紡織品安全評價方法，本發(fā)明方法有利于進一步完善抗菌紡織品的產(chǎn)品技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，可適用于無機抗菌整理劑整理后的服裝、纖維填料、紗線、服裝材料和家庭裝飾產(chǎn)品等各類紡織品。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0020]下面結(jié)合附圖及實施例對本發(fā)明作進一步描述:
[0021]圖1為抗菌紡織品的安全性測試方法的方法流程圖。
【具體實施方式】
[0022]以下結(jié)合具體實施例對上述方案做進一步說明。應(yīng)理解，這些實施例是用于說明本發(fā)明而不限于限制本發(fā)明的范圍。實施例中采用的實施條件可以根據(jù)具體樣品的條件做進一步調(diào)整，未注明的實施條件通常為常規(guī)實驗中的條件。
[0023]實施例納米銀整理抗菌絲織物安全性評價方法
[0024]I 材料
[0025]1.1.儀器與設(shè)備:
[0026]Agilent7500cx四極桿電感I禹合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS)純水機；可調(diào)溫振蕩水浴鍋；KQ5200DE型超聲波清洗器(昆山超聲波有限公司);Mettler AL204分析天平(梅特勒-托利多，上海)；0.45 μ m水系濾膜；LabCyte EP1-M0DEL24試劑盒；二級生物安全柜(蘇凈集團);C02培養(yǎng)箱；酶標(biāo)儀(450、570、650nm);比濁儀、VITEK-1I全自動微生物鑒定系統(tǒng)及革蘭氏陰性/陽性測試卡(法國生物梅里埃公司)；光學(xué)顯微鏡(Motic);旋渦儀(德國IKA);微量移液器(艾本德)。
[0027]1.2.菌株
[0028]標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸桿菌8099、金黃色葡萄球菌ATCC6538 (美國菌種保藏中心)
[0029]1.3.試劑與材料
[0030]Agilent 內(nèi)標(biāo) Part#5183: 100mg/L ；Agilent 調(diào)諧液 Part#5185-5959:1 μ g/L ;銀溶液標(biāo)準(zhǔn)(100mg/L，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心)；MTT(SIGMA:M5655) ；SLS(SIGMA:L4390);異丙醇(HPLC)5PBS(SIGMA) ；0.1%的蛋白胨培養(yǎng)基、革蘭氏染色液、生化鑒定試劑盒、大豆蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA)、大豆蛋白胨液體培養(yǎng)基(TSB)、營養(yǎng)肉湯(NB)、S⑶LP液體培養(yǎng)基、計數(shù)瓊月旨(EA)等(北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司)；納米銀整理抗菌絲織物。
[0031]2 方法
[0032]2.1金屬溶出物測定
[0033]取有代表性的樣品，剪碎至約5mmX5mm，混勻。準(zhǔn)確稱取已剪碎的樣品放入IOmL離心管，加入人工酸性汗液，加入量為1:10 (w/w,萃取液是試樣的10倍重量),萃取條件是為在(37±2) °C下振蕩提取(60±5)min然后過0.45μπι水系濾膜。根據(jù)需要進行稀釋，ICP-MS內(nèi)標(biāo)法(In)測定其中金屬溶出量。
[0034]2.2抗菌性能試驗
[0035]準(zhǔn)備下層無菌培養(yǎng)基:向無菌平皿中傾注IOml瓊脂培養(yǎng)基，并使其凝結(jié)；準(zhǔn)備上層接種培養(yǎng)基:取45±5°C的瓊脂培養(yǎng)基150ml放入燒瓶，加入Iml試驗菌液，混合均勻，向上述無菌培養(yǎng)基平皿中傾注5ml，并使其凝結(jié)；用無菌鑷子將試樣和對照樣分別放于平皿中央，均勻按壓在瓊脂平皿上，直到試樣和瓊脂培養(yǎng)基之間很好的接觸；將試樣放于瓊脂培養(yǎng)基后，立即放入37±2°C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24h。測量并計算抑菌帶寬度。
[0036]2.3體外皮膚刺激試驗
[0037]按照LabCyte EP1-M0DEL24試劑盒用戶手冊，以織物人工酸液萃取液25 μ L為受試品涂抹于人工皮膚表面作用15min，SLS (5%水溶液，w/v)為陽性對照物，蒸餾水為陰性對照物；與化學(xué)品接觸15min后用PBS沖洗活性皮膚`不少于10次(盡可能沖凈殘留化學(xué)物質(zhì)去除受試物)，用無菌棉簽將表皮組織內(nèi)外輕輕吸干；繼續(xù)在飽和濕度、5%C02、37°C的條件下孵育(42±1)小時；加入0.5mL濃度0.5mg/mL的MTT溶液，在飽和濕度、5%C02、37°C孵化3h ;將表皮組織移至1.5mL離心微管，加入300 μ L異丙醇，搖動使整個表皮組織浸沒，至于4°C冰箱避光培養(yǎng)過夜O 15h);振蕩混勻溶液，取200 μ L溶液至96孔板，在酶標(biāo)儀570nm和650nm波長下讀取光密度值(OD)，異丙醇作空白對照；計算細(xì)胞活性。[0038]3.結(jié)果與討論
[0039]3.1.抗菌織物抗菌性及金屬溶出量
[0040]測定結(jié)果如下。
[0041]表1織物的抗菌性和金屬溶出量(n=3)
[0042]
【權(quán)利要求】
1.一種抗菌紡織品的安全性測試方法，其特征在于所述方法包括以下步驟: (1)對待測紡織品進行抗菌性試驗判斷紡織品是否是抗菌紡織品；如果紡織品為抗菌紡織品，則進行步驟(2)和/或步驟(3)的安全性測試步驟；如果紡織品不為抗菌紡織品，則結(jié)束安全性測試； (2)利用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進行待測的抗菌紡織品金屬溶出量測定，根據(jù)金屬溶出量是否超過限值判斷待測的抗菌紡織品是否安全；當(dāng)金屬溶出量超過限值則認(rèn)為待測的抗菌紡織品至少具有潛在危害；當(dāng)金屬溶出量沒有超過限值則認(rèn)為待測的抗菌紡織品為安全的抗菌紡織品； (3)利用EP1-MODEL人體皮膚模型對待測的抗菌紡織品進行織物萃取液的皮膚刺激性試驗，根據(jù)待測的抗菌紡織品是否具有某種刺激性判斷待測的抗菌紡織品是否安全；當(dāng)待測的抗菌紡織品具有某種刺激性則認(rèn)為待測的抗菌紡織品至少具有潛在危害；當(dāng)待測的抗菌紡織品沒有刺激性則認(rèn)為待測的抗菌紡織品為安全的抗菌紡織品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的安全性測試方法，其特征在于所述方法步驟(I)中抗菌性試驗是采用瓊脂平皿擴散法對待測紡織品抗菌性能進行定性試驗，根據(jù)含有待測紡織品的培養(yǎng)基中是否存在細(xì)菌生長以及抑菌帶寬度來判斷是否是抗菌紡織品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的安全性測試方法，其特征在于所述方法步驟(I)中檢測的細(xì)菌包括金黃色葡萄球菌、大腸桿菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的安全性測試方法，其特征在于所述方法步驟(2)中電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進行金屬溶出量測定時，將試樣剪成約5mmX 5mm大小，加入的萃取劑是人工酸性汗液，加入量為10倍試樣質(zhì)量,萃取條件是:在37±2 °C下振蕩提取60±5 min ;過0.45 μ m水系濾膜后測定。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的安全性測試方法，其特征在于所述方法步驟(2)中金屬溶出量的限值為50mg/kg。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述方法步驟(3)中利用EP1-M0DEL人體皮膚模型對待測的抗菌紡織品進行織物萃取液的皮膚刺激性試驗是對抗菌紡織品的人工酸性汗液萃取液進行皮膚刺激性試驗；將試樣剪成約5mmX 5mm大小，加入人工酸性汗液，加入量為10倍試樣質(zhì)量，萃取條件是:在37±2°C下振蕩提取60±5 min。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述方法步驟(3)中待測的抗菌紡織品是否具有某種刺激性是通過抗菌紡織品的人工酸性汗液萃取液中細(xì)胞活性是否大于50%進行判斷；當(dāng)細(xì)胞活性< 50%判斷為抗菌紡織品有刺激性，當(dāng)細(xì)胞活性>50%為抗菌紡織品無刺激性；其中細(xì)胞活性=(受試物OD平均值/陰性對照OD平均值)*100%。
【文檔編號】G01N21/25GK103760323SQ201410008779
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2014年1月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月9日
【發(fā)明者】顧娟紅, 石建華, 徐振東, 陳軍, 朱振華, 潘葵, 柳艷 申請人:中華人民共和國蘇州出入境檢驗檢疫局