一種測定雙酚類物質(zhì)遷移量的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測定雙酚類物質(zhì)遷移量的方法，主要采用基質(zhì)固相萃取法提取和凈化樣品，運用液相色譜-串聯(lián)司機(jī)桿質(zhì)譜測定方法測定雙酚類物質(zhì)的遷移量，本發(fā)明所述的保健品中雙酚類物質(zhì)遷移量的測定方法，用于膠囊、粉劑、口服液等各類保健品中11種雙酚類物質(zhì)（BPA、BPF、BADGE、BADGE-H2O、BADGE-HCl、BADGE-2H2O、BADGE-HCl-H2O、BADGE-2HCl、BFDGE、BFDGE-2H20和BFDGE-2HCl）含量的制樣和液相色譜-串聯(lián)四級桿質(zhì)譜法測定，簡單、快速、準(zhǔn)確、高效；該方法能夠快捷、準(zhǔn)確、高效地測定出保健品中雙酚類物質(zhì)的遷移量。
【專利說明】一種測定雙酚類物質(zhì)遷移量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種測定方法，尤其涉及一種測定雙酚類物質(zhì)遷移量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]雙酚類化合物具有類似苯酚的縮合結(jié)構(gòu)，其中雙酚A(BPA)是目前生產(chǎn)聚碳酸樹脂和環(huán)氧樹脂的重要原料，雙酚F(BPF)是由苯酚和甲醛縮合而成，適于制造成型材料和薄膜。雙酚A-二縮水甘油醚(BADGE)是雙酚A和環(huán)氧氯丙烷的縮合產(chǎn)物，雙酚F-二縮水甘油醚(BFDGE)是酚醛系列中結(jié)構(gòu)最簡單的化合物。當(dāng)BADGE和BFDGE接觸到水溶性和酸性食品，會轉(zhuǎn)變成BADGE-H20，BADGE-2H20和BFDGE-2H20 ;當(dāng)被用作去除鹽酸時，會轉(zhuǎn)變成BADGE-HC1, BADGE-HC1-H20, BADGE-2HC1 和 BFDGE-2HC1。在食品包裝和儲藏過程中，用環(huán)氧樹脂等制成食品包裝內(nèi)涂層中的雙酚類化合物會遷移到內(nèi)容的食品中，對人體健康產(chǎn)生潛在威脅。
[0003]盡管食品行業(yè)已經(jīng)嚴(yán)格監(jiān)管雙酚類物質(zhì)的含量，然后至今還未有任何文獻(xiàn)或者標(biāo)準(zhǔn)涉及保健品中雙酚類物質(zhì)的檢測方法。對同樣會被人體直接進(jìn)食、或者飲用的保健品行業(yè)而言，其產(chǎn)品的包裝材料與食品包裝的材質(zhì)基本相同，非常需要和食品一樣，對該種環(huán)境影響物質(zhì)實現(xiàn)監(jiān)測和管控。本方法作為首個實現(xiàn)保健品中雙酚類化合物檢測的發(fā)明，將填補(bǔ)目前食品安全體系中缺少相關(guān)檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)的空白，對保健品行業(yè)監(jiān)測環(huán)境影響物質(zhì)，對雙酚類物質(zhì)從環(huán)境遷移到食物的研究等具有重要的意義。因此本方法的創(chuàng)新點在于首創(chuàng)性地建立了保健品中雙酚類物質(zhì)檢測的方法體系。方法適用于各種不同類型的保健品基質(zhì)，采用QuEChERS法結(jié)合液相色譜四級桿串聯(lián)質(zhì)譜，同時檢測各類11種雙酚類化合物，本方法靈敏、簡單、快速，適合保健食品中雙酚類化合物的測定。綜上所述，本項目為保健品類首創(chuàng)性的發(fā)明方法，可靠、方便、準(zhǔn)確，是對食品安全問題的擴(kuò)展和深入，同時也為促進(jìn)國內(nèi)的分析測試視角與國際接軌，降低未來的技術(shù)貿(mào)易壁壘的奠定了基礎(chǔ)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]為彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供簡單的測定雙酚類物質(zhì)遷移量的方法，本方法首創(chuàng)性地建立了保健品中雙酚類物質(zhì)檢測的方法體系，方法能夠快捷、準(zhǔn)確、高效地測定出保健品中雙酚類物質(zhì)的遷移量。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
一種測定雙酚類物質(zhì)遷移量的方法，主要采用基質(zhì)固相萃取法提取和凈化樣品，運用液相色譜-串聯(lián)司機(jī)桿質(zhì)譜測定方法測定雙酚類物質(zhì)的遷移量，其具體步驟如下:
第一步，樣品提取，具體操作步驟如下:
(I)粉狀固體或口服液類樣品:
a、稱取均質(zhì)粉狀固體樣品或口服液類樣品2g；
b、將樣品置于50mL離心管中；
C、向離心管內(nèi)加入適量的雙酚類標(biāo)準(zhǔn)溶液；4mL去離子水；15mL0.1%的乙酸乙腈溶液；1.5g醋酸鈉及Ig的NaCl ;得到粉狀固體樣品或口服液類樣品的混合品；
d、將步驟c中混合品進(jìn)行超聲混合5min,并5000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ；f、將步驟d中樣品沉淀，得到樣品的上清液；取上清液IOmL,并放置在另一離心管內(nèi)，待凈化；
(2)膠囊類樣品:
a、稱取膠囊的內(nèi)置物Ig；
b、將樣品置于50mL離心管中；
C、向離心管內(nèi)加入適量的雙酚類標(biāo)準(zhǔn)溶液；4mL的乙腈飽和正乙烷溶液；得到混合樣
品;
d、將步驟c中混合樣品進(jìn)行漩渦混合3min，加入5mL正乙烷飽和乙腈溶液；進(jìn)行超聲混合5min,并4000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ；
f、將步驟d中樣品靜置；取下層清液7mL，并放置在另一離心管內(nèi)，待凈化；
第二步、凈化，采用QuEChERS的方法對其進(jìn)行凈化，具體步驟如下:
a、向第一步中得到的待凈化樣品中分別加入IOOg的PSA、50mg的GCB、50mg的C18和Ig的無水Na2S04 ;得到混合樣品；鏇潤混合5min,并以5000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ；
b、移取上清液5mL，在40°C下氮氣吹干，并用I mL含0.1%甲酸的甲醇-水(50: 50，V/V)復(fù)溶；得到復(fù)溶溶液；
C、將步驟c中復(fù)溶溶液轉(zhuǎn)移至1.5mL的離心管中，并以10000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ;得到復(fù)溶溶液的上清液；
d、將上清液轉(zhuǎn)移至測樣小瓶中，待進(jìn)行LC-MS-MS分析；
第三步、測定，主要是采用液相色譜-串聯(lián)司機(jī)桿質(zhì)譜測定方法進(jìn)行樣品的LC-MS-MS分析；具體步驟如下:
a、根據(jù)液相色譜-質(zhì)譜儀器工作條件表中規(guī)定的條件確定液相色譜-質(zhì)譜儀器工作的條件；
b、根據(jù)流動相梯度洗脫程序表中規(guī)定的條件確定不同時間對不同樣品的洗脫條件及洗脫程度；
C、根據(jù)化合物定性、定量離子對、碎裂電壓、碰撞能量表中規(guī)定的參數(shù)，設(shè)定不同的樣品的化合物定性值、定量離子對值、碎裂電壓值、碰撞能量值；
d、根據(jù)雙酚類物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品化學(xué)參數(shù)對于測試得到的結(jié)果數(shù)據(jù)，具體分析雙酚類物質(zhì)的遷移量。
[0006]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明所述的保健品中雙酚類物質(zhì)遷移量的測定方法，用于膠囊、粉劑、口服液等各類保健品中11種雙酚類物質(zhì)(BPA、BPF、BADGE、BADGE-H20、BADGE-HC1、BADGE-2H20、BADGE-HC1-H20、BADGE-2HC1、BFDGE, BFDGE-2H20 和BFDGE-2HC1)含量的制樣和液相色譜-串聯(lián)四級桿質(zhì)譜法測定，簡單、快速、準(zhǔn)確、高效；發(fā)明采用QuEChERS方法與LC-MS技術(shù)結(jié)合，對保健品中雙酚類物質(zhì)進(jìn)行同時提取、凈化、用液相色譜-串聯(lián)四級桿質(zhì)譜法分離檢測，操作簡單，靈敏度高；方法檢出限LOQ:BPA, BPF,BADGE，BADGE-H2O, BADGE-2H20，BADGE-HC1-2H20，BFDGE 和 BFDGE-2 HCl 的 LOQ 為 1.0ug/kg,線性范圍為 1.0-20.0ug/kgο BADGE-HC1, BADGE-2HC1，BFDGE_2H20 的 LOQ 為 2.0ug/kg,線性范圍為2.0-50.0ug/kg ;本發(fā)明屬于首個實現(xiàn)保健品中雙酚類物質(zhì)檢測的方法發(fā)明，填補(bǔ)了目前我國食品安全體系中缺少相關(guān)檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)的空白，并且對保健品行業(yè)監(jiān)測環(huán)境影響物質(zhì)，對雙酚類物質(zhì)從環(huán)境遷移到食物的研究等具有重要的意義。
【具體實施方式】
[0007]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述:
實施例1:粉狀固體:
a、稱取均質(zhì)粉狀固體樣品2g；
b、將樣品置于50mL離心管中；
C、向離心管內(nèi)加入適量的雙酚類標(biāo)準(zhǔn)溶液；4mL去離子水；15mL0.1%的乙酸乙腈溶液；1.5g醋酸鈉及Ig的NaCl ;得到粉狀固體樣品的混合品；
d、將步驟c中混合品進(jìn)行超聲混合5min,并5000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ； f、將步驟d中樣品靜置；取上清液10mL，并放置在另一離心管內(nèi)，待凈化；
第二步、凈化，采用QuEChERS的方法對其進(jìn)行凈化，具體步驟如下:
a、向第一步中得到的待凈化樣品中分別加入IOOg的PSA、50mg的GCB、50mg的C18和Ig的無水Na2S04 ;得到混合樣品；鏇潤混合5min,并以5000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ；
b、移取上清液5mL，在40°C下氮氣吹干，并用I mL含0.1%甲酸的甲醇-水(50: 50，V/V)復(fù)溶；得到復(fù)溶溶液；
C、將步驟c中復(fù)溶溶液轉(zhuǎn)移至1.5mL的離心管中，并以10000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ;得到復(fù)溶溶液的上清液；
d、將上清液轉(zhuǎn)移至測樣小瓶中，待進(jìn)行LC-MS-MS分析；
第三步、測定，主要是采用液相色譜-串聯(lián)司機(jī)桿質(zhì)譜測定方法進(jìn)行樣品的LC-MS-MS分析；具體步驟如下:
a、根據(jù)液相色譜-質(zhì)譜儀器工作條件表中規(guī)定的條件確定液相色譜-質(zhì)譜儀器工作的條件；
b、根據(jù)流動相梯度洗脫程序表中規(guī)定的條件確定不同時間對不同樣品的洗脫條件及洗脫程度；
C、根據(jù)化合物定性、定量離子對、碎裂電壓、碰撞能量表中規(guī)定的參數(shù)，設(shè)定不同的樣品的化合物定性值、定量離子對值、碎裂電壓值、碰撞能量值；
d、根據(jù)雙酚類物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品化學(xué)參數(shù)對于測試得到的結(jié)果數(shù)據(jù)，具體分析雙酚類物質(zhì)的遷移量；
實施例2: 口服液類樣品:
a、稱取口服液類樣品2g;
b、將樣品置于50mL離心管中；
C、向離心管內(nèi)加入適量的雙酚類標(biāo)準(zhǔn)溶液；4mL去離子水；15mL0.1%的乙酸乙腈溶液；
1.5g醋酸鈉及Ig的NaCl ;得到口服液類樣品的混合品；
d、將步驟c中混合品進(jìn)行超聲混合5min,并5000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ； f、將步驟d中樣品靜置；取上清液10mL，并放置在另一離心管內(nèi)，待凈化；
第二步、凈化，采用QuEChERS的方法對其進(jìn)行凈化，具體步驟如下:
a、向第一步中得到的待凈化樣品中分別加入IOOg的PSA、50mg的GCB、50mg的C18和Ig的無水Na2S04 ;得到混合樣品；鏇潤混合5min,并以5000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ；
b、移取上清液5 mL，在40°C下氮氣吹干，并用I mL含0.1%甲酸的甲醇-水(50: 50，V/V)復(fù)溶；得到復(fù)溶溶液；
C、將步驟c中復(fù)溶溶液轉(zhuǎn)移至1.5mL的離心管中，并以10000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ;得到復(fù)溶溶液的上清液；
d、將上清液轉(zhuǎn)移至測樣小瓶中，待進(jìn)行LC-MS-MS分析；
第三步、測定，主要是采用液相色譜-串聯(lián)司機(jī)桿質(zhì)譜測定方法進(jìn)行樣品的LC-MS-MS分析；具體步驟如下:
a、根據(jù)液相色譜-質(zhì)譜儀器工作條件表中規(guī)定的條件確定液相色譜-質(zhì)譜儀器工作的條件；
b、根據(jù)流動相梯度洗脫程序表中規(guī)定的條件確定不同時間對不同樣品的洗脫條件及洗脫程度；
C、根據(jù)化合物定性、定量離子對、碎裂電壓、碰撞能量表中規(guī)定的參數(shù)，設(shè)定不同的樣品的化合物定性值、定量離子對值、碎裂電壓值、碰撞能量值；
d、根據(jù)雙酚類物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品化學(xué)參數(shù)對于測試得到的結(jié)果數(shù)據(jù)，具體分析雙酚類物質(zhì)的遷移量；
實施例3:膠囊類樣品:
a、稱取膠囊的內(nèi)置物Ig；
b、將樣品置于50mL離心管中；
C、向離心管內(nèi)加入適量的雙酚類標(biāo)準(zhǔn)溶液；4mL的乙腈飽和正乙烷溶液；得到混合樣
品;
d、將步驟c中混合樣品進(jìn)行漩渦混合3min，加入5mL正乙烷飽和乙腈溶液；進(jìn)行超聲混合5min,并4000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ；
f、將步驟d中樣品靜置；取下層清液7mL，并放置在另一離心管內(nèi)，待凈化；
第二步、凈化，采用QuEChERS的方法對其進(jìn)行凈化，具體步驟如下:
a、向第一步中得到的待凈化樣品中分別加入IOOg的PSA、50mg的GCB、50mg的C18和Ig的無水Na2S04 ;得到混合樣品；鏇潤混合5min,并以5000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ；
b、、移取上清液5mL，在40°C下氮氣吹干，并用I mL含0.1%甲酸的甲醇-水(50: 50，V/V)復(fù)溶；得到復(fù)溶溶液；
C、將步驟c中復(fù)溶溶液轉(zhuǎn)移至1.5mL的離心管中，并以10000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ;得到復(fù)溶溶液的上清液；
d、將上清液轉(zhuǎn)移至測樣小瓶中，待進(jìn)行LC-MS-MS分析；
第三步、測定，主要是采用液相色譜-串聯(lián)司機(jī)桿質(zhì)譜測定方法進(jìn)行樣品的LC-MS-MS分析；具體步驟如下:
a、根據(jù)液相色譜-質(zhì)譜儀器工作條件表中規(guī)定的條件確定液相色譜-質(zhì)譜儀器工作的條件；
b、根據(jù)流動相梯度洗脫程序表中規(guī)定的條件確定不同時間對不同樣品的洗脫條件及洗脫程度；
C、根據(jù)化合物定性、定量離子對、碎裂電壓、碰撞能量表中規(guī)定的參數(shù)，設(shè)定不同的樣品的化合物定性值、定量離子對值、碎裂電壓值、碰撞能量值；
d、根據(jù)雙酚類物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品化學(xué)參數(shù)對于測試得到的結(jié)果數(shù)據(jù)，具體分析雙酚類物質(zhì)的遷移量；
表1液相色譜-質(zhì)譜儀器工作條件的確定_
【權(quán)利要求】
1.一種測定雙酚類物質(zhì)遷移量的方法，主要采用基質(zhì)固相萃取法提取和凈化樣品，運用液相色譜-串聯(lián)司機(jī)桿質(zhì)譜測定方法測定雙酚類物質(zhì)的遷移量，其特征在于，具體步驟如下: 第一步，樣品提取，具體操作步驟如下: (1)粉狀固體或口服液類樣品: a、稱取均質(zhì)粉狀固體樣品或口服液類樣品2g； b、將樣品置于50mL離心管中； C、向離心管內(nèi)加入適量的雙酚類標(biāo)準(zhǔn)溶液；4mL去離子水；15mL0.1%的乙酸乙腈溶液；1.5g醋酸鈉及Ig的NaCl ;得到粉狀固體樣品或口服液類樣品的混合品； d、將步驟c中混合品進(jìn)行超聲混合5min,并5000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ；f、將步驟d中樣品沉淀，得到樣品的上清液；取上清液IOmL,并放置在另一離心管內(nèi)，待凈化； (2)膠囊類樣品: a、稱取膠囊的內(nèi)置物Ig； b、將樣品置于50mL離心管中； C、向離心管內(nèi)加入適量的雙酚類標(biāo)準(zhǔn)溶液；4mL的乙腈飽和正乙烷溶液；得到混合樣品; d、將步驟c中混合樣品進(jìn)行漩渦混合3min，加入5mL正乙烷飽和乙腈溶液；進(jìn)行超聲混合5min,并4000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ； f、將步驟d中樣品靜置；取下層清液7mL，并放置在另一離心管內(nèi)，待凈化； 第二步、凈化，采用QuEChERS的方法對其進(jìn)行凈化，具體步驟如下: a、向第一步中得到的待凈化樣品中分別加入IOOg的PSA、50mg的GCB、50mg的C18和Ig的無水Na2S04 ;得到混合樣品；鏇潤混合5min,并以5000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ； b、移取上清液5mL，在40°C下氮氣吹干，并用I mL含0.1%甲酸的甲醇-水(50: 50，V/V)復(fù)溶；得到復(fù)溶溶液； C、將步驟c中復(fù)溶溶液轉(zhuǎn)移至1.5mL的離心管中，并以10000r/min的離心速度進(jìn)行離心5min ;得到復(fù)溶溶液的上清液； d、將上清液轉(zhuǎn)移至測樣小瓶中，待進(jìn)行LC-MS-MS分析； 第三步、測定，主要是采用液相色譜-串聯(lián)司機(jī)桿質(zhì)譜測定方法進(jìn)行樣品的LC-MS-MS分析；具體步驟如下: a、根據(jù)液相色譜-質(zhì)譜儀器工作條件表中規(guī)定的條件確定液相色譜-質(zhì)譜儀器工作的條件； b、根據(jù)流動相梯度洗脫程序表中規(guī)定的條件確定不同時間對不同樣品的洗脫條件及洗脫程度； C、根據(jù)化合物定性、定量離子對、碎裂電壓、碰撞能量表中規(guī)定的參數(shù)，設(shè)定不同的樣品的化合物定性值、定量離子對值、碎裂電壓值、碰撞能量值； d、根據(jù)雙酚類物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品化學(xué)參數(shù)對于測試得到的結(jié)果數(shù)據(jù)，具體分析雙酚類物質(zhì)的遷移量。
【文檔編號】G01N30/14GK103837614SQ201410054758
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年2月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月18日
【發(fā)明者】鄧曉軍, 強(qiáng)維, 高夢婕, 曲栗, 曹辰, 周瑤 申請人:上海安譜科學(xué)儀器有限公司, 上海出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢驗檢疫技術(shù)中心