一種高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的方法，利用玻璃纖維濾片捕集卷煙側(cè)流煙氣中的烏洛托品，用乙腈萃取濾片和清洗魚尾罩及管路，分別取0.5mL的萃取液和0.5mL的清洗液合并，經(jīng)有機(jī)相濾膜凈化，用LC-MS/MS進(jìn)行檢測(cè)，分析卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的含量。本發(fā)明采用LC-MS/MS測(cè)定卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的含量，采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）進(jìn)行定性，能夠有效提高定性準(zhǔn)確度和方法的靈敏度，適用于各類卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的測(cè)定。不僅應(yīng)用廣泛，測(cè)定精準(zhǔn)，而且方法簡(jiǎn)單，環(huán)境友好，具有很好的實(shí)用性。
【專利說(shuō)明】 一種高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏
洛托品的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于卷煙煙氣【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS/MS)檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]環(huán)境煙草煙氣(ETS)是重要的室內(nèi)污染物，被動(dòng)吸煙者感受的就是該種物質(zhì)，而卷煙的側(cè)流煙氣是環(huán)境煙氣的主要來(lái)源，約占環(huán)境煙氣的85%。目前，加拿大等一些國(guó)家和地區(qū)已經(jīng)指定了相關(guān)的法律，要求卷煙生產(chǎn)商提供卷煙煙氣中有害成分的釋放量，有鑒于此，有必要對(duì)側(cè)流煙氣中的有害成分進(jìn)行深入分析。側(cè)流煙氣是從卷煙燃燒錐直接釋放到空氣以及從卷煙紙擴(kuò)散出來(lái)的煙氣物質(zhì)，大部分側(cè)流煙氣是在卷煙陰燃過(guò)程中發(fā)生的，也有一小部分是從抽吸過(guò)程中生成，因此，主流和側(cè)流煙氣的化合物種類基本相同，但是含量有較大差別。烏洛托品在卷煙主流和側(cè)流煙氣中均有分布，但是其在側(cè)流煙氣中的含量要高于在主流煙氣中的含量。
[0003]烏洛托品是是一種有害化學(xué)成分，具腐蝕性，可致人體灼傷，其熔點(diǎn)263°C，如超過(guò)此熔點(diǎn)即升華并分解，但不熔融。升溫至300°C時(shí)放出氰化氫，溫度再升高時(shí)，則分解為甲烷、氫和氮。當(dāng)人體接觸該品時(shí)，主要引起皮炎和濕疹。
[0004]隨著公眾對(duì)吸煙與健康問(wèn)題的日益關(guān)注，卷煙煙氣中有害成分烏洛托品成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題，由于側(cè)流煙氣組成復(fù)雜，成分種類繁多，基質(zhì)干擾嚴(yán)重，而目前國(guó)內(nèi)外尚沒(méi)有檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的任何文獻(xiàn)報(bào)道和專利。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]發(fā)明目的:針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的方法，能準(zhǔn)確靈敏適用于各類卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的測(cè)定。
[0006]技術(shù)方案:為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的方法，利用玻璃纖維濾片捕集卷煙側(cè)流煙氣中的烏洛托品，用乙腈萃取濾片和清洗魚尾罩及管路，分別取0.5mL的萃取液和0.5mL的清洗液合并，經(jīng)有機(jī)相濾膜凈化，用LC-MS/MS進(jìn)行檢測(cè)，分析卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的含量。
[0007]所述LC-MS/MS聯(lián)用檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的方法，具體步驟如下:
I)將待測(cè)卷煙在GB/T 16447-2004規(guī)定的大氣環(huán)境條件下平衡48h，然后按照“重量允差±20mg，吸阻允差±50Pa”的要求篩選卷煙，標(biāo)記卷煙的抽吸停止線，按照YC/T185中側(cè)流煙氣抽吸方法，調(diào)節(jié)側(cè)流吸煙機(jī)的抽吸流量為3000mL/min，抽吸2支卷煙，用劍橋?yàn)V片和裝有25mL乙腈的吸收瓶捕集側(cè)流煙氣總粒相物；抽吸完成后，用1/4的濾片擦拭捕集器后與濾片合并置于IOOmL錐形瓶中，向其中加入50mL的乙腈萃取溶液然后將錐形瓶置于調(diào)速振蕩器上振蕩40分鐘；用30mL乙腈分2~3次清洗魚尾罩清洗液合并后定容至50mL ；
2)移取吸收液和萃取液各0.5mL合并后稀釋定容于25mL容量瓶中，上LC-MS/MS進(jìn)行測(cè)定；高效液相色譜儀條件為:C18反相柱，檢測(cè)溫度301:，進(jìn)樣量111171(^1^，流速
0.2^0.4mL/min,乙腈和水作為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫；所述質(zhì)譜儀條件為:離子化模式為電噴霧；掃描模式為正離子；霧化氣40psi ;氣簾氣IOpsi ;輔助加熱氣40psi ;碰撞氣5psi ；離子源射電壓400(T5000V ;離子源溫度25(T350°C。
[0008]所述高效液相色譜儀流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為lOmmol/L的乙酸銨，A的比例高于70%，B的比例低于30%，進(jìn)行等度洗脫。
[0009]有益效果:與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用LC-MS/MS測(cè)定卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的含量，采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)進(jìn)行定性，能夠有效提高定性準(zhǔn)確度和方法的靈敏度，適用于各類卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的測(cè)定。不僅應(yīng)用廣泛，測(cè)定精準(zhǔn)，而且方法簡(jiǎn)單，環(huán)境友好，具有很好的實(shí)用性。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0010]圖1為標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0011]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明。
[0012]以下實(shí)施例所使用的主要儀器、試劑如下:
美國(guó)Applied Biosystem公司API3200型三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀,配有電噴霧離子源以及Analyst系統(tǒng)軟件,美國(guó)Agilent公司1200型高效液相色譜儀,帶自動(dòng)進(jìn)樣器，德國(guó)Borgwaldt KC LM5型吸煙機(jī)，電子天平(感量0.1mg),回旋可調(diào)機(jī)械振蕩器,上海安譜科學(xué)儀器有限公司有機(jī)相濾膜(0.45 μ m)。
[0013]乙腈為色譜純，乙酸銨為分析純，去離子水；烏洛托品標(biāo)準(zhǔn)品，純度> 99%。
[0014]實(shí)施例1
一種高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的方法，包括以下步
驟:
抽吸卷煙樣品:選擇某種市售卷煙A在(22±1) °C、相對(duì)濕度(60±3)%條件下平衡48小時(shí)，然后按照“重量允差±20mg，吸阻允差±50Pa”的要求篩選卷煙，然后標(biāo)記卷煙的抽吸停止線，按照YC/T185中側(cè)流煙氣抽吸方法，調(diào)節(jié)側(cè)流吸煙機(jī)的抽吸流量為3000mL/min，抽吸2支卷煙，用裝有25mL的吸收瓶、魚尾罩和玻璃纖維濾片捕集側(cè)流煙氣的總粒相物。
[0015]抽吸后，用1/4的濾片擦拭捕集器與含有側(cè)流煙氣粒相物的濾片合并后放入IOOmL錐形瓶中，向其中加入50mL的乙腈萃取溶液振蕩40分鐘；30mL乙腈分2~3次清洗魚尾罩清洗液合并后定容至50mL ;移取上述吸收液和萃取液各0.5mL合并后稀釋定容于25mL容量瓶中；取適量溶液過(guò)0.45微米有機(jī)相濾膜后，得到樣品待測(cè)液，上LC-MS/MS進(jìn)行檢測(cè)分析。高效液相色譜 柱:C18反相柱，檢測(cè)溫度30°C，進(jìn)樣量5 μ L，流速0.2mL/min,乙腈和10mmol/L乙酸銨溶液的比例為80:20等度洗脫。質(zhì)譜儀的條件參數(shù)為:離子化模式為電噴霧；掃描模式為正離子；霧化氣40psi ;氣簾氣IOpsi ;輔助加熱氣40psi ;碰撞氣5psi ；離子源射電壓4500V;離子源溫度250°C。烏洛托品的定性離子對(duì)m/z為141.2/111.9、141.2/97.8,141.2/84.8，駐留時(shí)間為 200ms，碰撞能為 15。
[0016]標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制:準(zhǔn)確稱取約IOOyg的烏洛托品于50mL燒杯中，精確至
0.0OOlg，加入約20mL乙腈完全溶解后轉(zhuǎn)移至IOOmL容量瓶中，用少量乙腈蕩洗燒杯3~5
次，洗滌液一并轉(zhuǎn)移至容量瓶中，然后用乙腈定容至刻度。
[0017]系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制:分別準(zhǔn)確移取lmL、5mL、10mL、15mL、20mL烏洛托品標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至IOOmL容量瓶中得到5級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液,用該系列標(biāo)準(zhǔn)溶液制作外標(biāo)法校正曲線。在10~200 ng/ml范圍內(nèi)，線性方程為Y=9986X_252，線性相關(guān)系數(shù)浐為0.9989。。
[0018]標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖如圖1所示，經(jīng)分析，該卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的釋放量為57.23 μ g /cigo
[0019]實(shí)施例2
按照實(shí)施例1的方法對(duì)某卷煙平行測(cè)定12次，得到樣品的重復(fù)性結(jié)果如表1所示。
[0020]表1某卷煙樣品的平行實(shí)驗(yàn)(單位:μ g /cig)
【權(quán)利要求】
1.一種高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)將待測(cè)卷煙在GB/T16447-2004規(guī)定的大氣環(huán)境條件下平衡48h，然后按照“重量允差±20mg，吸阻允差±50Pa”的要求篩選卷煙，標(biāo)記卷煙的抽吸停止線，按照YC/T185中側(cè)流煙氣抽吸方法，調(diào)節(jié)側(cè)流吸煙機(jī)的抽吸流量為3000mL/min，抽吸2支卷煙，用劍橋?yàn)V片和裝有25mL乙腈的吸收瓶捕集側(cè)流煙氣總粒相物；抽吸完成后，用1/4的濾片擦拭捕集器后與濾片合并置于IOOmL錐形瓶中，向其中加入50mL的乙腈萃取溶液然后將錐形瓶置于調(diào)速振蕩器上振蕩40分鐘；用30mL乙腈分2?3次清洗魚尾罩清洗液合并后定容至50mL ； 2)移取吸收液和萃取液各0.5mL合并后稀釋定容于25mL容量瓶中，上LC-MS/MS進(jìn)行測(cè)定；高效液相色譜儀條件為:C18反相柱，檢測(cè)溫度30°C，進(jìn)樣量I μ L?10 μ L，流速0.2"0.4mL/min,乙腈和10mmol/L的乙酸銨作為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫；所述質(zhì)譜儀條件為:離子化模式為電噴霧；掃描模式為正離子；霧化氣40psi ;氣簾氣IOpsi ;輔助加熱氣40psi ;碰撞氣5psi ;離子源射電壓400(T5000V ;離子源溫度25(T350°C。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙側(cè)流煙氣中烏洛托品的方法，其特征在于，步驟2)中，所述高效液相色譜儀流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為IOmmoI/L的乙酸銨，A的比例高于70%，B的比例低于30%，進(jìn)行等度洗脫。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK103792317SQ201410068905
【公開(kāi)日】2014年5月14日 申請(qǐng)日期:2014年2月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月28日
【發(fā)明者】沈曉晨, 莊亞?wèn)|, 張華 , 石懷彬, 王晨輝, 曹毅, 朱懷遠(yuǎn), 韓開(kāi)冬, 張媛, 朱瑩, 何紅梅, 盛金 申請(qǐng)人:江蘇中煙工業(yè)有限責(zé)任公司