一種灰氈毛忍冬花蕾藥材儲藏條件的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明開創(chuàng)性地提出了一種灰氈毛忍冬花蕾藥材儲藏條件的檢測方法：分別在儲藏前后測定灰氈毛忍冬花蕾的顏色以及山銀花中綠原酸、咖啡酸、3,5-二咖啡?？鼘幩?、木犀草苷、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙六種成分的含量，結(jié)合儲藏前后外觀顏色變化的程度和六種成分含量變化的程度，來評價灰氈毛忍冬花蕾所經(jīng)歷的儲藏條件是否適宜。該方法科學、簡便，有利于藥材質(zhì)量的保障，填補了目前對于灰氈毛忍冬花蕾的儲藏條件沒有合適的檢測評價方法的空白。
【專利說明】一種灰氈毛忍冬花蕾藥材儲藏條件的檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥山銀花的儲藏，特別是對山銀花中的儲藏條件進行檢測的方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]山銀花是一種常用中藥材，可用于清熱解毒、涼散風熱?！吨袊幍洹分?，山銀花的來源為:忍冬科植物灰租毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.)、紅腺忍冬、華南忍冬或黃褐毛忍冬的干燥花蕾或帶初開的花。
[0003]山銀花具有質(zhì)輕、易碎、易霉變和蟲蛀等特點，如何進行儲藏是十分重要的問題?，F(xiàn)有技術(shù)中報道有多種方法。如:
[0004]CN201110175699.1公開了一種山銀花茶的儲藏方法:將山銀花茶包裝后，放入專用保質(zhì)冷庫中進行保質(zhì)儲藏，保質(zhì)冷庫的溫度為0-5°C，濕度為40%-60%。
[0005]而對于與山銀花基源相近的藥材金銀花(忍冬科植物園忍冬的干燥花蕾或帶初開的花)，其儲藏方法也有一些報道，如:
[0006]CN201110041809.5公開了一種金銀花的保藏方法:包裝前，將金銀花的含水量降低到8%-14%;包裝材料的顏色選擇黑色、藏青色或深綠色，材質(zhì)選擇鐵質(zhì)、紙質(zhì)或塑料，厚度為0.10至I毫米；包裝形式為密封；儲藏養(yǎng)護方式為覆蓋或包裹一種能夠避光和/或恒溫的材料。
[0007]CN201310030915.2公開了一種金銀花儲藏保鮮方法:將干燥后的金銀花裝入包裝袋，通過管路向包裝袋內(nèi)分別充入氮氣、二氧化碳或兩種混合氣體進行氣調(diào)；氣調(diào)處理后將包裝袋封口，置于溫度在0-6 °C的冷庫中儲藏。
[0008]CN201110312031.7公開了一種金銀花茶的儲藏方法:金銀花茶攤晾后放入藥品級塑料袋，外套編織袋，放入專用溫控儲藏室進行保質(zhì)儲藏，儲藏室溫度18-26°C，濕度為45%-65%。
[0009]《中國藥典》中則規(guī)定了山銀花的儲藏條件為“置陰涼干燥處、防潮，防蛀”。
[0010]然而，中國藥典只記載“陰涼處”為不超過20°C，對于“陰涼干燥處”這一要求則較為模糊。而且，實踐中受生產(chǎn)、經(jīng)營、使用單位倉儲條件、管理措施及人員素質(zhì)等因素制約，對光照、溫度、濕度、氧氣、時間等儲藏影響因素并未一一進行研究和控制；另外，儲藏之后藥材的質(zhì)量到底如何，儲藏條件是否恰當?shù)鹊染鶝]有進行研究。綜上，目前的現(xiàn)狀導致山銀花的儲藏條件差別較大，藥材質(zhì)量參差不齊。
[0011]因此，有必要對山銀花的儲藏條件進行研究，提供一種檢測其儲藏條件優(yōu)劣的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012]本發(fā)明的目的是提供一種檢測山銀花儲藏條件的方法，特別是以有效成分含量和藥材顏色來評價藥材儲藏條件的適應性。
[0013]發(fā)明人對山銀花儲藏中的光照、溫度、濕度、氧氣、時間等條件進行了研究，發(fā)現(xiàn)這幾個因素在整個儲藏過程中所起的作用具有較大的差別。在研究過程中，發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn):將山銀花中幾種特定有效成分的含量變化，與藥材的顏色變化相結(jié)合，可以作為表征藥材儲藏條件的因素。發(fā)明人從而得到一種檢測山銀花儲藏過程是否得當?shù)姆椒?。其技術(shù)方案是:
[0014]一種山銀花儲藏條件的檢測方法，分別在儲藏前和儲藏后測定山銀花的顏色以及山銀花中綠原酸、咖啡酸、3，5- 二咖啡酰奎寧酸、木犀草苷、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙六種成分的含量；再計算出在儲藏前后所述山銀花顏色變化的程度以及所述六種成分含量變化的程度，以此得出所述山銀花所經(jīng)歷的儲藏條件。
[0015]上述山銀花儲藏條件的檢測方法，具體來說，包括以下步驟:
[0016]I)測定山銀花的顏色，得到顏色值L、A和B;再測定山銀花中綠原酸、咖啡酸、3，5- 二咖啡?？鼘幩帷⒛鞠蒈?、灰租毛忍冬阜苷乙和川續(xù)斷阜苷乙六種成分的含量,對應得到六個含量值:C1、C2、C3、C4、C5和C6 ； [0017]2)將I)中的山銀花 置于一定條件下儲藏之后，測定其顏色，得到顏色值L’、A’和B’;再測定步驟I)中六種成分的含量，對應得到六個含量值:C1’、C2’、C3’、C4’、C5’和C6’；
[0018]3)根據(jù)公式 AL=| 1-L，/L|、ΛΑ=| 1_A，/Α|、ΛΒ=| 1_B，/B |、AC1=1_C1，/Cl、AC2=1-C2/C2，、AC3=1-C3，/C3、AC4=1_C4，/C4、AC5=1_C5，/C5 和 AC6=1_C6，/C6，計算得到 AL、ΛΑ、Λ B、Λ Cl、AC2、AC3、AC4、Λ C5 和 Λ C6 九個評價值；
[0019]4)評價:若ACl > 0.15或AC2 > 0.20，則所述山銀花的儲藏條件為不合格；若ACl < 0.15且AC2 < 0.20，則所述山銀花的儲藏條件達到合格；若ACl < 0.15、AC2<0.20且AC6<0.15，則所述山銀花的儲藏條件達到良好；若Λ L≤0.2、Λ A≤0.2、ΔΒ ≤ 0.2、ACl ≤ 0.15、Δ C2 ^ 0.20、Δ C3 ^ 0.15、Δ C4 ^ 0.20、AC5 ≤ 0.15 且AC6 < 0.1，則所述山銀花的儲藏條件達到優(yōu)秀。
[0020]中國藥典中對山銀花質(zhì)量的規(guī)定為:綠原酸含量不小于2%，灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙的總量不小于5%。而現(xiàn)有技術(shù)中對山銀花或金銀花等忍冬屬中藥的儲藏方法也有報道，如陰涼干燥處、防潮，防蛀等。本發(fā)明所提供的方法不是單純地測定金銀花中有效成分的含量，而是通過其含量的變化以及顏色的變化來表征儲藏條件，進而評價儲藏條件是否適宜。現(xiàn)有技術(shù)中，還未見到一種對山銀花儲藏條件進行檢測和科學評價的方法。
[0021]上述山銀花儲藏條件的檢測方法，所述不合格是指在非陰涼干燥處；所述合格是指在陰涼干燥處；所述良好是指在陰涼干燥處避光儲藏少于兩年；所述優(yōu)秀是指在陰涼干燥處和真空包裝中避光儲藏少于一年。
[0022]其中，“達到”某級別是指屬于該級別或該級別以上。如達到合格是指為合格或合格以上的級別(如合格、良好或優(yōu)秀)，達到良好是指為良好或良好以上的級別(如良好或優(yōu)秀)。公式中計算AL、ΛΑ、Λ B所得的值均為絕對值。
[0023]發(fā)明人通過大量實驗，摸索出了山銀花的顏色變化以及其中特定成分的含量變化與儲藏條件之間的關(guān)系:
[0024]綠原酸在儲藏過程中的含量會降低，其對濕度尤其敏感，當綠原酸含量的變化值不大于15%時(即ACl < 0.15)，可表明藥材處于“干燥處”儲藏。
[0025]咖啡酸在儲藏過程中含量會升高，其對溫度尤其敏感，當咖啡酸含量的變化值不大于20%時(B卩AC2 < 0.20)，可表明藥材是處于“陰涼處”儲藏。[0026]因此，Λ Cl和Λ C2兩個值基本能夠作為山銀花儲藏條件的評價值，當ACl < 0.15且AC2 < 0.20時，可以認為藥材所經(jīng)歷的儲藏條件達到藥典要求的合格，即“陰涼干燥處”，例如在溫度20°C以下且相對濕度50%以下的環(huán)境中儲藏；當ACl >0.15或AC2 > 0.20時，則儲藏條件不符合藥典的要求，為不合格。
[0027]川續(xù)斷皂苷乙在儲藏過程中含量會降低，其對儲藏時間非常敏感，當川續(xù)斷皂苷乙的含量變化值不大于15%時(AC6 ( 0.15)，可以認為儲藏的時間在兩年之內(nèi)；當川續(xù)斷皂苷乙的含量變化值不大于10%時(AC6 ( 0.1)，可以認為儲藏的時間在一年之內(nèi)。
[0028]因此，Λ Cl、Λ C2、Λ C6三個值相結(jié)合可以評價出山銀花的儲藏條件達到良好。當ACl ^ 0.15、AC2 < 0.20且AC6 < 0.15時，可以認為藥材所經(jīng)歷的儲藏條件達到良好，即:在陰涼干燥處儲藏小于兩年，例如在溫度20°C以下且相對濕度50%以下的環(huán)境中儲藏少于兩年。
[0029]3，5-二咖啡?？鼘幩帷⒛鞠蒈?、灰氈毛忍冬皂苷乙對空氣中的氧氣較為敏感。當3，5-二咖啡?？鼘幩岬暮孔兓挡淮笥?5%( AC3 ( 0.15)，木犀草苷的含量變化值不大于20%( AC4 ( 0.20)，以及灰氈毛忍冬皂苷乙的含量變化值不大于15%時(AC5 ( 0.15)，可以認為藥材與氧氣基本沒有接觸，如處于真空包裝中儲藏。
[0030]山銀花的外觀顏色在儲藏過程中會逐漸變深，如從綠色到黃色再到褐色，而光照是影響山銀花顏色的決定因素，用分光測色計可以測定山銀花顏色的L、A、B值，表征藥材所經(jīng)歷的光照條件:在避光的情況下儲藏，L、A、B三個值的變化的絕對值一般不超過20%(即 AL < 0.2、ΔΑ ^ 0.2、ΔΒ ^ 0.2)。
[0031]因此，AL、ΛΑ、ΛΒ、ACUAC2、AC3、AC4、Λ C5 和 Δ C6 九個值相結(jié)合，可以反映出藥材的儲藏條件達到優(yōu)秀，即:當AL≤0.2、ΔΑ ≤ 0.2、ΔΒ ≤ 0.2、ACl ≤ 0.15、AC2 ≤ 0.20、AC3 ≤ 0.15、Δ C4 ≤ 0.20、Λ C5 ≤ 0.15 且 Λ C6 ≤ 0.1 時，可以認為藥材所經(jīng)歷的儲藏條件為優(yōu)秀，即:在陰涼干燥處和真空包裝下避光儲藏小于一年，例如在溫度20°C以下且濕度50%以下的環(huán)境中，處于真空包裝中避光儲藏少于一年。
[0032]上述山銀花儲藏條件的檢測方法，測定所述六種成分含量所用的方法為HPLC法。
[0033]具體來說，其中測定綠原酸、咖啡酸、木犀草苷和3，5- 二咖啡酰奎寧酸的HPLC色譜條件為:色譜柱均為C18柱，250X4.6mm，4ym;檢測器均為紫外檢測器；檢測波長分別為:327nm、322nm、437nm和327nm (即綠原酸為327nm，咖啡酸為322nm，木犀草苷為437nm，3，5-二咖啡?？鼘幩釣?27nm);流動相均為乙腈-0.4%磷酸水溶液，洗脫方法為梯度洗脫。具體的梯度洗脫條件見表1:
[0034]表1:綠原酸、咖啡酸、木犀草苷和3，5- 二咖啡酰奎寧酸的梯度洗脫條件
[0035]
【權(quán)利要求】
1.一種山銀花儲藏條件的檢測方法，其特征是:分別在儲藏前和儲藏后測定山銀花的顏色以及山銀花中綠原酸、咖啡酸、3，5-二咖啡?？鼘幩帷⒛鞠蒈?、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙六種成分的含量；再得出儲藏前后所述山銀花顏色變化情況以及所述六種成分含量變化情況，以此確定所述山銀花所經(jīng)歷的儲藏條件。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其特征是包括以下步驟: 1)在儲藏前，測定山銀花的顏色，得到顏色值L、A和B;測定山銀花中綠原酸、咖啡酸、3，5- 二咖啡酰奎寧酸、木犀草苷、灰租毛忍冬阜苷乙和川續(xù)斷阜苷乙六種成分的含量,對應得到含量值Cl、C2、C3、C4、C5和C6 ； 2)將步驟I)中的山銀花置于一定條件下儲藏后，再測定其顏色，得到顏色值L’、A’和B’ ；再測定步驟I)中所述六種成分的含量，對應得到含量值C1’、C2’、C3’、C4’、C5’和C6’ ； 3)根據(jù)以下公式計算得出儲藏條件的評價值:
3.權(quán)利要求2所述的方法，其特征是，所述陰涼干燥處是指溫度20°C以下且相對濕度50%以下的環(huán)境中。
4.權(quán)利要求1~3中任一所述的方法，其特征是，測定所述六種成分的含量所用的方法為HPLC法。
5.權(quán)利要求4所述的方法，其特征是，測定綠原酸、咖啡酸、木犀草苷和3，5-二咖啡?？鼘幩岬腍PLC色譜條件為:色譜柱均為C18柱，250 X 4.6mm，4 μ m ;檢測器為紫外檢測器；檢測波長分別為:327nm、322nm、437nm和327nm ;流動相均為乙腈-0.4%磷酸水溶液，洗脫方法為梯度洗脫。
6.權(quán)利要求4所述的方法，其特征是，測定灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙的HPLC色譜條件為:色譜柱均為C18柱，250X4.6_，4μπι;檢測器為蒸發(fā)光散射檢測器；流動相均為乙腈-0.4%乙酸水溶液，洗脫方法為梯度洗脫。
7.權(quán)利要求1~3中任一所述的方法，其特征是，測定所述山銀花的顏色所用的儀器為分光測色計。
8.權(quán)利要求1~3中 任一所述的方法，其特征是，所述山銀花為灰氈毛忍冬的干燥花蕾或帶初開的花。
【文檔編號】G01N21/25GK103940749SQ201410107883
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年3月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月21日
【發(fā)明者】馬鵬, 李隆云, 譚軍, 吳葉寬, 張應
申請人:重慶市中藥研究院