草本植物木質(zhì)素含量的測量方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種草本植物木質(zhì)素含量的測量方法，該方法包括以下步驟：⑴植物樣本烘干、粉碎、過篩，得植物樣本粉末；⑵植物樣本粉末中加醋酸，得到充分軟化的植物樣本粉末；⑶離心得沉淀物A；用醋酸清洗沉淀物A；⑷乙醇-乙醚溶液浸洗沉淀物A，得到沉淀物B；⑸沉淀物B蒸干后加硫酸，攪拌均勻后室溫下靜置；⑹加入蒸餾水，攪拌均勻后，經(jīng)沸水浴、室溫下冷卻后，再依次加入蒸餾水和氯化鋇搖勻離心，得到沉淀物C；⑺沉淀物C水沖洗后，依次加硫酸、重鉻酸鉀，反應(yīng)后冷卻至室溫；⑻將步驟⑺所得物質(zhì)轉(zhuǎn)移至錐形瓶中；⑼錐形瓶中加碘化鉀反應(yīng)后加淀粉指示劑，并用硫代硫酸鈉溶液滴定至終點；⑽空白試驗；⑾計算木質(zhì)素含量即可。本發(fā)明簡便、準確。
【專利說明】草本植物木質(zhì)素含量的測量方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種測量方法，尤其涉及草本植物木質(zhì)素含量的測量方法。
【背景技術(shù)】
[0002]眾所周知，木質(zhì)素是自然界中含量僅次于纖維素的第二位有機高分子化合物。木質(zhì)素主要分布在植物體內(nèi)木質(zhì)部的管狀分子和纖維、厚壁細胞、厚角細胞、特定類型表皮細胞的次生壁中，與纖維素、半纖維素構(gòu)成植物骨架的三種主要成分，在植物體中主要起機械支撐、防止生物降解、病害防御、輸送水分等功能。木質(zhì)素是由3類苯丙烯醇(單木質(zhì)醇)聚合而成:香豆醇(coumarly alcohol)、松柏醇(coniferly alcohol)和芥子醇(sinapyaalcohol)。因為木質(zhì)素單體不同，可將木質(zhì)素分為3種:由紫丁香基丙烷單體聚合而成的紫丁香基木質(zhì)素(syringyl lignin, S-木質(zhì)素)，由愈創(chuàng)木基丙燒單體聚合而成的愈創(chuàng)木基木質(zhì)素(guaiacyl lignin, G-木質(zhì)素)和由對輕基苯基丙燒單體聚合而成的對輕基苯基木質(zhì)素(hydroxy-phenyl, H-木質(zhì)素)。
[0003]木質(zhì)素對不同的工業(yè)生產(chǎn)、生物質(zhì)能源利用有著不同的影響。一方面，木質(zhì)素對工業(yè)生產(chǎn)具有消極的影響。植物體內(nèi)木質(zhì)素與纖維素、半纖維素結(jié)合緊密，在工業(yè)生產(chǎn)酒精的過程中，會影響纖維素、半纖維素的轉(zhuǎn)化效率。木質(zhì)素還是造紙工業(yè)生產(chǎn)中產(chǎn)生的工業(yè)廢液(黑液)的主要成分。另一方面，木質(zhì)素本身可以作為工業(yè)原料進行工業(yè)生產(chǎn)。例如，以黑液為工業(yè)原料，將黑液中的木質(zhì)素轉(zhuǎn)化為酚醛樹脂膠粘劑；木質(zhì)素與膠乳共沉，形成木質(zhì)素母膠用于橡膠工業(yè)，木質(zhì)素在其中起到補強劑的作用。此外，木質(zhì)素具有高熱值，可以通過化學修飾或改性轉(zhuǎn)化為可再生的生物能源和資源(如:柴油、酒精等)；木質(zhì)素對人體和動物基本上無毒，某些木質(zhì)素類低聚物可能還具有抗癌、抗腫瘤等功效，可廣泛用于食品工業(yè)，以減少消化道疾病的發(fā)生。
[0004]在植物體內(nèi)，木質(zhì)素總是與纖維素、半纖維素共存，纖維素和半纖維素都是多糖類大分子化合物，除此之外還有一些寡糖(低聚糖)與木質(zhì)素共存。這主要是由于在木質(zhì)素的生物合成過程中，木質(zhì)素單體有一個糖苷化的過程，分別形成香豆醇葡萄糖苷、松柏醇葡萄糖苷、芥子醇葡萄糖苷，這些單體會在細胞壁木質(zhì)素合成位點上聚合成木質(zhì)素大分子，因此在木質(zhì)素大分子上結(jié)合有糖類。但木質(zhì)素與這些多糖的共存方式是物理性混合還是化學結(jié)合尚不確定。目前有大量實驗證明木質(zhì)素的部分結(jié)構(gòu)單元與半纖維素中的某些糖基能夠通過化學鍵結(jié)合在一起，形成木質(zhì)素-糖類復(fù)合體，表明木質(zhì)素和半纖維素為化學結(jié)合，因此將二者分離就相對較為困難。此外，植物體內(nèi)可與木質(zhì)素縮合的糖基還有吡喃型糖醛酸基、木吡喃糖基、阿拉伯呋喃糖基、半乳吡喃糖基。
[0005]木質(zhì)素是一種復(fù)雜的、非結(jié)晶性的、三維網(wǎng)狀的高分子化合物，不同于蛋白質(zhì)、多糖、核酸等天然高分子化合物具有規(guī)則的結(jié)構(gòu)，可以用化學式來表示，木質(zhì)素的結(jié)構(gòu)不規(guī)貝U，只能采用結(jié)構(gòu)模型來表示。此外，不同植物纖維原料的木質(zhì)素的結(jié)構(gòu)不同。針葉樹種木材中木質(zhì)素的結(jié)構(gòu)單元以愈創(chuàng)木基為主，其余為少量的對羥苯基，在一些杉木成熟材(杉木成熟材中的木質(zhì)素在官能團的結(jié)構(gòu)和量上都與幼齡材中的木質(zhì)素不同)的木質(zhì)素中還存在少量的紫丁香基木質(zhì)素。闊葉樹種木材中除具有愈創(chuàng)木基結(jié)構(gòu)單元外，還存在著較多的紫丁香基結(jié)構(gòu)單元。而草本植物中的木質(zhì)素由愈創(chuàng)木基、紫丁香基和對羥基苯基三種結(jié)構(gòu)單元組成，其中愈創(chuàng)木基結(jié)構(gòu)單元和紫丁香基結(jié)構(gòu)單元的比例與闊葉樹相似，但同時含有更多的對羥基苯基結(jié)構(gòu)單元。由于木質(zhì)素的復(fù)雜結(jié)構(gòu)使其難以通過化學或生物降解，因而導致從植物體內(nèi)定量化的測定木質(zhì)素含量很困難。
[0006]目前，木質(zhì)素的測定方法主要有硫酸法(Klason法)、酸性洗滌纖維(AcidDetergent Fiber,簡稱ADF)法、乙酰溴(Acetyl Bromide,簡稱AB)法、紫外分光光度(Ultraviolet，簡稱UV)法等。這些方法主要分為兩類:第一類是無創(chuàng)性分析法，包括紫外分光光度(UV)法、紅外光譜(Infrared Spectroscopy,簡稱IRS)法、近紅外光譜(Near-1nfrared Spectroscopy,簡稱 NIRS)法、核磁共振光譜(Nuclear MagneticResonance Spectroscopy,簡稱NMRS)法。所有這些無創(chuàng)性方法的優(yōu)點均為可以在不改變樣本木質(zhì)素化學結(jié)構(gòu)的條件下測定樣本木質(zhì)素的含量，但是這些方法都必須依賴一個適當?shù)摹澳举|(zhì)素標準樣”來校正儀器以便進行木質(zhì)素的測定。第二類是依賴重量法進行測定的方法。該類方法又分為直接測定法和間接測定法。其中，直接測定法主要有72% (v/v)濃硫酸法(Klason法)、酸性洗滌纖維法(ADF法)等；間接測定法主要有乙酰溴法(AB法)、疏基乙酸鹽測定法等。
[0007]其中，硫酸法(Klason法)是一種傳統(tǒng)的測定木質(zhì)素含量的方法，原理是利用濃硫酸水解樣品中的非木質(zhì)素部分，剩下的殘渣即為木質(zhì)素。該方法的缺點是不準確，因為有少量木質(zhì)素可以溶解于濃硫酸，而且這種方法只適合于硬木木質(zhì)素(如桃心木、樺木、黃楊等樹木的木質(zhì)素)的測定，不適合軟木木質(zhì)素(如橡樹、木栓櫟、栓皮櫟等樹種的木質(zhì)素)、草本木質(zhì)素(如紫花苜蓿、柳枝稷、玉米等植物的木質(zhì)素)，以及一年生植物的木質(zhì)素含量(如大豆、花生、狗尾草等植物的木質(zhì)素)的測定，因為這些植物體內(nèi)不明確的蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)會對木質(zhì)素的測定產(chǎn)生干擾。酸性洗滌纖維法(ADF法)主要用于草本植物或一年生植物木質(zhì)素的測定，它主要測量出的是酸不溶性木質(zhì)素的含量，在測定的過程中，木質(zhì)素的化學結(jié)構(gòu)會發(fā)生較大變化。紫外光譜法是木質(zhì)素測定的一種無創(chuàng)性方法，其原理為:以木質(zhì)素的特征吸收波長280nm來定量測定樣品中木質(zhì)素的含量。這種方法雖然操作簡單，但對于測定標樣的獲取較難。乙酰溴法(AB法)主要是使用乙酰溴的冰醋酸溶液提取木質(zhì)素，再用紫外分光光度計測定木質(zhì)素含量，該法測定結(jié)果較上述方法來說都較為理想，但該方法涉及的反應(yīng)中會有木聚糖的降解，且降解產(chǎn)物在波長280nm處也有吸收，會干擾測定結(jié)果的準確性，且對于紫外分光光度計測量時標樣的獲取也比較困難。
[0008]目前，有關(guān)木質(zhì)素測定方法的專利技術(shù)較少，只涉及某一類或某一種植物的木質(zhì)素測定方法，針對性較強而普遍適用性較弱。如:公布號為CN103335974A的“一種煙草中木質(zhì)素含量的測定方法”，該發(fā)明主要應(yīng)用于煙草成分分析領(lǐng)域，具體涉及到一種煙草中木質(zhì)素含量的測定方法，該方法采用對煙草進行預(yù)處理(使用氫氧化鈉/尿素溶液)，使煙草中的蛋白質(zhì)、水溶性糖和其他游離雜質(zhì)等物質(zhì)從煙草中除去，然后使用硫酸溶液(較低濃度)處理，后在低溫條件下，將煙草中的纖維素和半纖維素在氫氧化鈉/尿素溶液中溶解，獲得酸不溶木質(zhì)素，再通過計算，得到酸不溶木質(zhì)素的含量，同時采用紫外吸收光譜法測定煙草酸溶木質(zhì)素的含量，兩者相加可得煙草木質(zhì)素的含量。公布號為CN101105444A的“一種棉花纖維中木質(zhì)素含量的檢測分析方法”，該發(fā)明涉及一種棉花纖維中木質(zhì)素含量的檢測分析方法，主要操作為先將棉纖維的雜質(zhì)挑去干凈，清洗可溶物質(zhì)。然后消化水解棉纖維，溶解木質(zhì)素，將消化水解后的溶液稀釋，加入氫氧化鈉和鹽酸羥胺消除溶液背景的影響，定容，靜置，采用紫外分光光度計在波長280nm處測定吸光度。公布號為CN102608054A的“一種梨果肉中木質(zhì)素含量的檢測分析方法”，該發(fā)明公開了一種梨果肉中木質(zhì)素含量的檢測分析方法，其步驟包括首先對待檢測的梨果肉經(jīng)過一系列的化學處理后，采用紫外分光光度計在波長280nm處測定吸光度值，代入公式計算木質(zhì)素含量。上述專利只針對了某一種植物或植物的果實等其他含有木質(zhì)素的組織、器官的木質(zhì)素含量的測定，不適用于其它植物或植物組織器官中木質(zhì)素的測定。公布號為CN101799389A確立棉花纖維中木質(zhì)素含量和纖維品質(zhì)相關(guān)關(guān)系的方法中提到的棉花木質(zhì)素測定的方法，主要是使用濃硫酸將棉花中除木質(zhì)素外的其他物質(zhì)都溶解后，烘干剩余殘渣并且在575°C下灰化，稱取的灰分重量即為棉花木質(zhì)素測定值。該方法對植物材料處理的過程較為簡單化，致使測定的木質(zhì)素含量誤差過大。此外，除了上述幾種發(fā)明專利與測定植物體內(nèi)木質(zhì)素方法有關(guān)外，少有或沒有其他類似的測定木質(zhì)素方法的專利，這說明在木質(zhì)素測定方法方面尚具有很多問題需要深入研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種簡便、準確的草本植物木質(zhì)素含量的測量方法。
[0010]為解決上述問題，本發(fā)明所述的草本植物木質(zhì)素含量的測量方法，包括以下步驟:
⑴將采集到的植物樣本在80°c條件下烘干48?72h，采用微型植物粉碎機將植物樣品粉碎，粉碎后過30目篩，收集植物樣本粉末；
⑵稱取0.05、.1Og所述植物樣本粉末，并將具體數(shù)值記為η ;然后將所述植物樣本粉末放入50mL離心管中，加入質(zhì)量濃度為0.1%的醋酸溶液10mL，用玻璃棒攪拌均勻后放置2(T30min，得到充分軟化的植物樣本粉末；
⑶將內(nèi)置所述充分軟化的植物樣本粉末的尚心管蓋上蓋子，放入尚心機中，以3500rpm的轉(zhuǎn)速離心5min，分別得到上清液A和沉淀物A ;倒掉所述上清液A，并用質(zhì)量濃度為0.1%的醋酸溶液5mL清洗所述沉淀物A ；
⑷用乙醇-乙醚溶液5mL浸洗所述步驟⑶所得的沉淀物A 3飛min，分別得到上清液B和沉淀物B ;棄去所述上清液B ;重復(fù)浸洗3次；
(5)將內(nèi)置所述沉淀物B的離心管在水溫為80°C時放入水浴或直接在冷水中加熱直至該離心管內(nèi)液體蒸干；然后在該離心管中加入質(zhì)量濃度為72%的硫酸溶液3mL，用玻璃棒攪拌均勻，在室溫條件下靜置16h，使纖維素充分溶解到硫酸中；
(6)向所述步驟(5)所得的離心管中加入IOmL蒸餾水，攪拌均勻后，放置到95?100°C沸水浴中5min，取出該離心管后室溫下冷卻，再依次加入5mL蒸餾水和質(zhì)量濃度為10%的氯化鋇溶液0.5mL并搖勻,在4000rpm條件下離心5min ;分別得到上清液C和沉淀物C ;棄去所述上清液C ；
(7)所述沉淀物C用蒸餾水沖洗2?3次后，先加入質(zhì)量濃度為10%的硫酸溶液10mL，再加入0.lmol/L的重鉻酸鉀溶液10mL，攪拌均勻，然后在95?100°C沸水浴中攪拌反應(yīng)15min至反應(yīng)充分完成；將離心管從沸水浴中取出，靜置待管內(nèi)溶液冷卻至室溫；
⑶將所述步驟(7)所得的離心管中的所有物質(zhì)轉(zhuǎn)移至150mL錐形瓶中，用15~20mL蒸餾水將該離心管清洗2~3次，并將清洗液全部轉(zhuǎn)移到所述錐形瓶中；
⑶向所述步驟⑶所得的含有殘留物的溶液中加入質(zhì)量濃度為20%的碘化鉀溶液5mL，搖動所述錐形瓶使其充分反應(yīng)；然后加入質(zhì)量濃度為0.5%的淀粉指示劑lmL，用配置好的硫代硫酸鈉溶液滴定，待溶液顏色變?yōu)榱辆G色，且30s內(nèi)溶液顏色不變化時即為滴定終點；記錄滴定所消耗硫代硫酸鈉溶液用量，并記為b ；
(10)空白試驗:在150mL錐形瓶中加入質(zhì)量濃度為10%的硫酸溶液IOmL和0.lmol/L重鉻酸鉀溶液IOmL并混勻，用所述步驟⑶中已配置好的硫代硫酸鈉溶液滴定，所消耗的硫代硫酸鈉溶液體積記為a，作為空白對照結(jié)果；
(11)按下式計算木質(zhì)素含量即可:
X=K(a-b)/ (n*48)
式中:48為lmol C11H12O4相當于硫代硫酸鈉的當量數(shù)；
K為硫代硫Ife納濃度，mol/L ； a為空白滴定所消耗硫代硫酸鈉體積，mL ； b為滴定溶液所消耗硫代硫酸鈉體積，mL ； η為樣品所取質(zhì)量，go`[0011]所述步驟⑷中乙醇-乙醚溶液是指乙醇與乙醚等體積混合均勻后所得的混合液。
[0012]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點:
1、本發(fā)明使用實驗室常用的實驗裝置和儀器設(shè)備，沒有特殊的專用設(shè)備，實驗藥品為常用的普通試劑，價格低廉，因此，不但工作量小、方法簡單、操作容易，而且分析結(jié)果正確、分析速度較快、重現(xiàn)性好，且本發(fā)明可以有效克服現(xiàn)有技術(shù)體系的不足，為草本植物的纖維結(jié)構(gòu)組成和品質(zhì)評價提供了一種有效的方法。
[0013]2、本發(fā)明為草本植物的木質(zhì)素測定建立一套較為完整、簡便、快捷、普及性廣的技術(shù)體系，將有利于開展優(yōu)良牧草(如紫花苜蓿、白三葉、黑麥草等)進行品種選育以及品質(zhì)評價。此外，對一些優(yōu)良的生物質(zhì)能源植物(如柳枝稷、芒草等)草本植物的工業(yè)生產(chǎn)效率的評估和提高產(chǎn)量具有重要的價值，可以在各個實驗室以及相關(guān)工廠中推廣應(yīng)用。
【具體實施方式】
[0014]草本植物木質(zhì)素含量的測量方法，包括以下步驟:
⑴將采集到的植物樣本在80°c條件下烘干48~72h，采用微型植物粉碎機將植物樣品粉碎，粉碎后過30目篩，收集植物樣本粉末。
[0015](2)稱取0.05、.1Og植物樣本粉末，并將具體數(shù)值記為η ;然后將植物樣本粉末放入50mL離心管中，加入質(zhì)量濃度為0.1%的醋酸溶液10mL，用玻璃棒攪拌均勻后放置2(T30min，得到充分軟化的植物樣本粉末。
[0016]⑶將內(nèi)置充分軟化的植物樣本粉末的離心管蓋上蓋子，放入離心機中，以3500rpm的轉(zhuǎn)速離心5min，分別得到上清液A和沉淀物A ;倒掉上清液A，并用質(zhì)量濃度為0.1%的醋酸溶液5mL清洗沉淀物A。
[0017]⑷用乙醇-乙醚溶液5mL浸洗步驟⑶所得的沉淀物A 3飛min，分別得到上清液B和沉淀物B ;棄去上清液B ;重復(fù)浸洗3次。
[0018]其中:乙醇-乙醚溶液是指乙醇與乙醚等體積混合均勻后所得的混合液。
[0019](5)將內(nèi)置沉淀物B的離心管在水溫為80°C時放入水浴或直接在冷水中加熱直至該離心管內(nèi)液體蒸干；然后在該離心管中加入質(zhì)量濃度為72%的硫酸溶液3mL，用玻璃棒攪拌均勻，在室溫條件下靜置16h，使纖維素充分溶解到硫酸中。
[0020](6)向步驟(5)所得的離心管中加入IOmL蒸餾水，攪拌均勻后，放置到95~100°C沸水浴中5min，取出該離心管后室溫下冷卻，再依次加入5mL蒸餾水和質(zhì)量濃度為10%的氯化鋇溶液0.5mL并搖勻,在4000rpm條件下離心5min ;分別得到上清液C和沉淀物C ;棄去上清液C。
[0021](7)沉淀物C用蒸餾水沖洗2~3次后，先加入質(zhì)量濃度為10%的硫酸溶液10mL，再加入0.lmol/L的重鉻酸鉀溶液10mL，攪拌均勻，然后在95~100°C沸水浴中攪拌反應(yīng)15min至反應(yīng)充分完成；將離心管從沸水浴中取出，靜置待管內(nèi)溶液冷卻至室溫。
[0022](8)將步驟(7)所得的離心管中的所有物質(zhì)轉(zhuǎn)移至150mL錐形瓶中，用15~20mL蒸餾水將該離心管清洗2~3次，并將清洗液全部轉(zhuǎn)移到錐形瓶中。
[0023]⑶向步驟(8)所得的含有殘留物的溶液中加入質(zhì)量濃度為20%的碘化鉀溶液5mL，搖動錐形瓶使其充分反應(yīng)；然后加入質(zhì)量濃度為0.5%的淀粉指示劑lmL，用配置好的硫代硫酸鈉溶液滴定，待溶液顏色變?yōu)榱辆G色，且30s內(nèi)溶液顏色不變化時即為滴定終點；記錄滴定所消耗硫代硫酸鈉溶液用量，并記為b。
[0024](10)空白試驗:在150mL錐形瓶中加入質(zhì)量濃度為10%的硫酸溶液IOmL和0.lmol/L重鉻酸鉀溶液IOmL并混勻，用步`驟⑶中已配置好的硫代硫酸鈉溶液滴定，所消耗的硫代硫酸鈉溶液體積記為a，作為空白對照結(jié)果；
(11)按下式計算木質(zhì)素含量即可:
X=K(a-b)/ (n*48)
式中:48為lmol C11H12O4相當于硫代硫酸鈉的當量數(shù)；
K為硫代硫Ife納濃度，mol/L ； a為空白滴定所消耗硫代硫酸鈉體積，mL ； b為滴定溶液所消耗硫代硫酸鈉體積，mL ； η為樣品所取質(zhì)量，go
[0025]測定數(shù)值實例如表1:
表1.紫花苜蓿3個品種樣品木質(zhì)素含量檢測結(jié)果實例樣品序列號滴定消耗Na2S2i>3值(iiiL ) 重量百分比含量
【權(quán)利要求】
1.草本植物木質(zhì)素含量的測量方法，包括以下步驟: ⑴將采集到的植物樣本在80°c條件下烘干48~72h，采用微型植物粉碎機將植物樣品粉碎，粉碎后過30目篩，收集植物樣本粉末； ⑵稱取0.05、.1Og所述植物樣本粉末，并將具體數(shù)值記為η ;然后將所述植物樣本粉末放入50mL離心管中，加入質(zhì)量濃度為0.1%的醋酸溶液10mL，用玻璃棒攪拌均勻后放置2(T30min，得到充分軟化的植物樣本粉末； ⑶將內(nèi)置所述充分軟化的植物樣本粉末的尚心管蓋上蓋子，放入尚心機中，以3500rpm的轉(zhuǎn)速離心5min，分別得到上清液A和沉淀物A ;倒掉所述上清液A，并用質(zhì)量濃度為0.1%的醋酸溶液5mL清洗所述沉淀物A ； ⑷用乙醇-乙醚溶液5mL浸洗所述步驟⑶所得的沉淀物A 3飛min，分別得到上清液B和沉淀物B ;棄去所述上清液B ;重復(fù)浸洗3次； (5)將內(nèi)置所述沉淀物B的離心管在水溫為80°C時放入水浴或直接在冷水中加熱直至該離心管內(nèi)液體蒸干；然后在該離心管中加入質(zhì)量濃度為72%的硫酸溶液3mL，用玻璃棒攪拌均勻，在室溫條件下靜置16h，使纖維素充分溶解到硫酸中； (6)向所述步驟(5)所得的離心管中加入IOmL蒸餾水，攪拌均勻后，放置到95~100°C沸水浴中5min，取出該離心管后室溫下冷卻，再依次加入5mL蒸餾水和質(zhì)量濃度為10%的氯化鋇溶液0.5mL并搖勻,在4000rpm條件下離心5min ;分別得到上清液C和沉淀物C ;棄去所述上清液C ； (7)所述沉淀物C用蒸餾水沖洗2~3次后，先加入質(zhì)量濃度為10%的硫酸溶液10mL，再加入0.lmol/L的重鉻酸鉀溶液`10mL，攪拌均勻，然后在95~100°C沸水浴中攪拌反應(yīng)15min至反應(yīng)充分完成；將離心管從沸水浴中取出，靜置待管內(nèi)溶液冷卻至室溫； ⑶將所述步驟(7)所得的離心管中的所有物質(zhì)轉(zhuǎn)移至150mL錐形瓶中，用15~20mL蒸餾水將該離心管清洗2~3次，并將清洗液全部轉(zhuǎn)移到所述錐形瓶中； ⑶向所述步驟⑶所得的含有殘留物的溶液中加入質(zhì)量濃度為20%的碘化鉀溶液5mL，搖動所述錐形瓶使其充分反應(yīng)；然后加入質(zhì)量濃度為0.5%的淀粉指示劑lmL，用配置好的硫代硫酸鈉溶液滴定，待溶液顏色變?yōu)榱辆G色，且30s內(nèi)溶液顏色不變化時即為滴定終點；記錄滴定所消耗硫代硫酸鈉溶液用量，并記為b ； (10)空白試驗:在150mL錐形瓶中加入質(zhì)量濃度為10%的硫酸溶液IOmL和0.lmol/L重鉻酸鉀溶液IOmL并混勻，用所述步驟⑶中已配置好的硫代硫酸鈉溶液滴定，所消耗的硫代硫酸鈉溶液體積記為a，作為空白對照結(jié)果； (11)按下式計算木質(zhì)素含量即可:
X=K(a-b)/ (n*48) 式中:48為lmol C11H12O4相當于硫代硫酸鈉的當量數(shù)； K為硫代硫Ife納濃度，mol/L ； a為空白滴定所消耗硫代硫酸鈉體積，mL ； b為滴定溶液所消耗硫代硫酸鈉體積，mL ； η為樣品所取質(zhì)量，go
2.如權(quán)利要求1所述的草本植物木質(zhì)素含量的測量方法，其特征在于:所述步驟⑷中乙醇-乙醚溶液是指乙醇與乙醚等體積混合均勻后所得的混合液。
【文檔編號】G01N1/28GK103868778SQ201410130470
【公開日】2014年6月18日 申請日期:2014年4月2日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月2日
【發(fā)明者】王曉娟, 楊陽, 張曉強, 姜少俊, 楊龍, 金樑 申請人:蘭州大學