一種快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白含量比色卡的制備方法，通過用不同濃度的亞硝酸鹽溶液分別作用血液樣本，繪制亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖；根據(jù)所述效量關(guān)系圖將血液樣本配置不同高鐵血紅蛋白濃度；然后將所述不同高鐵血紅蛋白濃度血液樣本分別滴于空白采血卡上掃描并測(cè)定其RGB值，根據(jù)這些RGB值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并繪制出不同濃度的高鐵血紅蛋白比色卡，最后打印出來即可以使用。本發(fā)明通過上述制備方法得到的比色卡能夠?qū)Ω哞F血紅蛋白含量快速檢測(cè)，使用簡(jiǎn)便，并且更加安全經(jīng)濟(jì)。
【專利說明】—種快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于高鐵血紅蛋白血癥檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白含量比色卡的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]高鐵血紅蛋白(methemoglobin，MetHb)是遺傳因素或吸收毒性化合物后由紅細(xì)胞產(chǎn)生的。其含量超過血紅蛋白總量I%時(shí)即可引起高鐵血紅蛋白血癥(methemoglobinemia),按原因分為獲得性和遺傳性兩大類。獲得性高鐵血紅蛋白血癥最常見，多為攝入某些氧化(還原)性藥物(如磺胺類、氯喹、伯氨喹等藥物)或毒物(如亞硝酸鹽、硝酸銨、硝酸鉀等化學(xué)試劑)時(shí)的一過性表現(xiàn)。遺傳性高鐵血紅蛋白血癥(hereditarymethemoglobinemia, HM)絕大部分為NADH-細(xì)胞色素b5還原酶(NADH-cytochromeb5reductase, b5R)的遺傳缺陷所致,呈常染色體隱性遺傳，故又稱隱性先天性高鐵血紅蛋白血癥(recessivecongenitalmethemoglobinemia, RCM)；一小部分由血紅蛋白先天異常(即血紅蛋白M)引起，一般呈顯性遺傳。
[0003]MetHb含量測(cè)定方法有很多種，分為三大類，幾乎所有方法都以比爾_朗伯定律(Beer-Lambert’ sLaw) A=EXCXL (A為吸光度，E為吸光系數(shù)，C為吸光物質(zhì)濃度，L為吸光物質(zhì)溶液的液層厚度或者光程長(zhǎng)度)為基礎(chǔ)。但是這些測(cè)定方法都普遍存在這設(shè)備要求高、檢測(cè)速度慢、臨床效果差等問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法，旨在解決現(xiàn)有檢測(cè)方法設(shè)備要求高、檢測(cè)速度慢、臨床效果差的問題。
[0005]本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法，包括以下步驟:
[0006](I)用不同濃度的亞硝酸鹽溶液分別作用多份不同組織來源的一級(jí)血液樣本，繪制亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖；
[0007]( 2 )根據(jù)所述效量關(guān)系圖，將上述一級(jí)血液樣本配置成具有不同高鐵血紅蛋白濃度的二級(jí)血液樣本；
[0008](3)將所述二級(jí)血液樣本分別滴于空白采血卡上，晾干5?15s后掃描后用繪圖軟件測(cè)定高鐵血紅蛋白的R、G、B值，將具有相同高鐵血紅蛋白濃度的R值、G值以及B值分別求和算均值得到R均值、G均值以及B均值；
[0009](4)將所述R均值、G均值以及B均值用繪圖軟件整合并繪制出不同高鐵血紅蛋白濃度的高鐵血紅蛋白比色卡，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后，打印比色卡。
[0010]優(yōu)選地，在步驟(I)中，所述亞硝酸鹽溶液的摩爾濃度與高鐵血紅蛋白血濃度的關(guān)系用函數(shù)定義為:Y=1.2876+24.80X，r=0.995 (P〈0.001);其中，X代表亞硝酸鹽溶液的摩爾濃度；Y代表高鐵血紅蛋白血濃度；[0011]在步驟(1)中，所述多份不同組織來源的一級(jí)血液樣本具體為:采集50名健康人的靜脈血液樣本，并定義該靜脈血液樣本為一級(jí)血液樣本。
[0012]優(yōu)選地，在步驟(2)中，所述二級(jí)血液樣本中高鐵血紅蛋白濃度包括:包括正常組、5%~80%百分比濃度，其中，所述5%~80%百分比濃度之間的濃度間隔為5%。
[0013]優(yōu)選地，在步驟(3)中，所述晾干的時(shí)間為IOs ；
[0014] 在步驟(3)中，所述掃描為通過圖片掃描儀掃描，所述繪圖軟件為Photoshop或CorelDRAW繪圖軟件。
[0015]優(yōu)選地，在步驟(4)中，所述繪圖軟件為Photoshop或CorelDRAW繪圖軟件；
[0016]在步驟(4)中，所述統(tǒng)計(jì)學(xué)分析為將具有相同高鐵血紅蛋白濃度二級(jí)血樣R值、G值以及B值分別求和后，在求其算數(shù)平均值，得到具有相同高鐵血紅蛋白濃度二級(jí)血樣的R算數(shù)平均值、G算數(shù)平均值以及B算數(shù)平均值。
[0017]本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白含量比色卡的制備方法。由于與正常的血液相比，高鐵血紅蛋白的血液呈現(xiàn)出一種特殊的棕褐色。而且其濃度越高，顏色越深。此外，RGB色彩模式，即是代表紅(Red)、綠(Green)、藍(lán)(Blue)三個(gè)通道的顏色使用RGB模型為圖像中每一個(gè)像素的RGB分量分配一個(gè)O~255范圍內(nèi)的強(qiáng)度值。RGB圖像只使用三種顏色，就可以使它們按照不同的比例混合，在屏幕上重現(xiàn)16777216種顏色。這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)幾乎包括了人類視力所能感知的所有顏色，是目前運(yùn)用最廣的顏色系統(tǒng)之一。
[0018]本發(fā)明利用高鐵血紅蛋白這一特殊的物理化學(xué)特性，以及RGB色彩模式，通過用不同濃度的亞硝酸鹽溶液分別作用血液樣本，繪制亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖；根據(jù)所述效量關(guān)系圖將血液樣本配置不同高鐵血紅蛋白濃度；然后將所述不同高鐵血紅蛋白濃度血液樣本分別滴于空白采血卡上掃描并測(cè)定其RGB值，根據(jù)這些RGB值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并繪制出不同濃度的高鐵血紅蛋白比色卡，最后打印出來即可以使用。
[0019]本發(fā)明通過上述快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法得到的比色卡能夠?qū)Ω哞F血紅蛋白血含量快速測(cè)定，使用簡(jiǎn)便，并且更加安全經(jīng)濟(jì)。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0020]圖1是本發(fā)明的快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量的比色卡的制備方法的步驟流程圖；
[0021]圖2是本發(fā)明實(shí)施例中亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖；
【具體實(shí)施方式】
[0022]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0023]本發(fā)明提供了一種快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法，如圖1所示，包括以下步驟:
[0024]S1、用不同濃度的亞硝酸鹽溶液分別作用多份不同組織來源的一級(jí)血液樣本，繪制亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖；[0025]在步驟SI中，更具體包括以下步驟:
[0026]A、采集50名健康人的靜脈血液樣本，定義該靜脈血液樣本為一級(jí)血液樣本,并編號(hào)I~50號(hào)；
[0027]B、將不同摩爾濃度的亞硝酸鹽溶液分別作用一級(jí)血液樣本I~50號(hào)，其中，亞硝酸鹽溶液的摩爾濃度與高鐵血紅蛋白血濃度的關(guān)系用函數(shù)定義為:Y=1.2876+24.80Χ，r=0.995 (P〈0.001);其中，X代表亞硝酸鹽溶液的摩爾濃度；Y代表高鐵血紅蛋白血濃度。繪制亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖，如圖2所示，圖2為亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖。
[0028]其中，制作高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖的根據(jù)如下表1所示:
[0029]表1
【權(quán)利要求】
1.一種快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白含量比色卡的制備方法，其特征在于包括以下步驟: (1)用不同濃度的亞硝酸鹽溶液分別作用多份不同組織來源的一級(jí)血液樣本，繪制亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖； (2)根據(jù)所述效量關(guān)系圖，將上述一級(jí)血液樣本配置成具有不同高鐵血紅蛋白濃度的二級(jí)血液樣本； (3)將所述二級(jí)血液樣本分別滴于空白采血卡上，晾干5?15s后掃描后用繪圖軟件測(cè)定高鐵血紅蛋白的R、G、B值，將具有相同高鐵血紅蛋白濃度的R值、G值以及B值分別求和算均值得到R均值、G均值以及B均值； (4)將所述R均值、G均值以及B均值用繪圖軟件整合并繪制出不同濃度的高鐵血紅蛋白比色卡，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后，打印比色卡。
2.如權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法，其特征在于，在步驟(I)中，所述亞硝酸鹽溶液的摩爾濃度與高鐵血紅蛋白血濃度的關(guān)系用函數(shù)定義為:Y=1.2876+24.80Χ, r=0.995 (Ρ〈0.001);其中，X代表亞硝酸鹽溶液的摩爾濃度；Υ代表高鐵血紅蛋白血濃度； 在步驟(I)中，所述多份不同組織來源的一級(jí)血液樣本具體為:采集50名健康人的靜脈血液樣本，并定義該靜脈血液樣本為一級(jí)血液樣本。
3.如權(quán)利要求2所述的快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法，其特征在于，在步驟(2 )中，所述二級(jí)血液樣本中高鐵血紅蛋白濃度包括:包括正常組、5%?80%百分比濃度，其中，所述5%?80%百分比濃度之間的濃度間隔為5%。
4.如權(quán)利要求3所述的快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法，其特征在于，在步驟(3)中，所述晾干的時(shí)間為IOs ； 在步驟(3)中，所述掃描為通過圖片掃描儀掃描，所述繪圖軟件為Photoshop或CorelDRAW繪圖軟件。
5.如權(quán)利要求4所述的快速檢測(cè)高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法，其特征在于，在步驟(4)中，所述繪圖軟件為Photoshop或CorelDRAW繪圖軟件； 在步驟(4)中，所述統(tǒng)計(jì)學(xué)分析為將具有相同高鐵血紅蛋白濃度二級(jí)血樣R值、G值以及B值分別求和后，在求其算數(shù)平均值，得到具有相同高鐵血紅蛋白濃度二級(jí)血樣的R算數(shù)平均值、G算數(shù)平均值以及B算數(shù)平均值。
【文檔編號(hào)】G01N21/78GK103913454SQ201410134594
【公開日】2014年7月9日 申請(qǐng)日期:2014年4月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月4日
【發(fā)明者】李劍波, 王徐 申請(qǐng)人:重慶醫(yī)科大學(xué)