一種用于檢測(cè)17β-雌二醇的光電適配體傳感器的制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種用于檢測(cè)17β-雌二醇的光電適配體傳感器的制備方法，所述光電適配體傳感器以制備的硒化鎘納米粒子修飾二氧化鈦納米管作為基體電極，用殼聚糖和戊二醛將電極表面功能化后，將17β-雌二醇適配體滴于電極表面，制備得到17β-雌二醇的光電適配體傳感器。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明將具有特異性識(shí)別能力17β-雌二醇適配體和超靈敏的光電分析技術(shù)結(jié)合用于對(duì)環(huán)境內(nèi)分泌干擾物17β-雌二醇的檢測(cè)，不僅能獲得了高的靈敏度，而且能抵制復(fù)雜基體環(huán)境的干擾獲得高的選擇性，在用于低濃度17β-雌二醇的檢測(cè)中，獲得了寬的工作曲線范圍5×10-13-15×10-12mol/L，最低檢測(cè)限可達(dá)3.3×10-14mol/L。且該17β-雌二醇傳感器制備方法簡(jiǎn)單，成本低，穩(wěn)定性及重現(xiàn)性好。
【專(zhuān)利說(shuō)明】—種用于檢測(cè)17 β -雌二醇的光電適配體傳感器的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及環(huán)境監(jiān)測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】與納米修飾電極，尤其是涉及一種用于檢測(cè)17 β -雌二醇的光電適配體傳感器的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]內(nèi)分泌干擾物對(duì)人體和其他生物體的內(nèi)分泌功能有嚴(yán)重的影響，近幾年倍受關(guān)注，其中17 β-雌二醇被認(rèn)為是對(duì)人體和動(dòng)物內(nèi)分泌系統(tǒng)危害最大的一種環(huán)境內(nèi)分泌物。它是一種天然的雌性激素，主要來(lái)源于人類(lèi)或家畜的排泄物，以及含有人工合成激素藥物的使用和排放。當(dāng)17 β-雌二醇通過(guò)食物鏈從外部環(huán)境進(jìn)入人體和其他生物體后會(huì)，干擾正常的生理過(guò)程，影響人的生長(zhǎng)發(fā)育，降低男性出生率，增長(zhǎng)腫瘤的病發(fā)機(jī)會(huì)，近幾年對(duì)它的研究受到全世界的廣泛關(guān)注。因此，建立一種快速的，靈敏的分析方法具有非常重要的意義。
[0003]目前，測(cè)定17 β -雌二醇的方法主要有傳統(tǒng)儀器分析方法例如HPLC，GC,這些方法具有好的靈敏度和準(zhǔn)確性，然而分析過(guò)程往往非常復(fù)雜，費(fèi)力且耗時(shí)。Seifert etal提出的酶聯(lián)受體分析法(ELRA)主要利用人類(lèi)的雌激素受體(hER)結(jié)合雌激素物質(zhì)的特性，測(cè)定17 β-雌二醇，然而雌激素受體對(duì)其他的外源雌激素均具有強(qiáng)的親和作用，所以該方法無(wú)法實(shí)現(xiàn)選擇性檢測(cè)。之后，報(bào)道了基于抗體的酶聯(lián)免疫傳感器對(duì)17 β -雌二醇測(cè)定，該方法的選擇性比酶聯(lián)受體法有了很大的提高，但是由于抗體本身需要在生物體內(nèi)提取，提取純化過(guò)程復(fù)雜、昂貴，且穩(wěn)定性差，限制了其廣泛地使用。
[0004]適配體，它具有類(lèi)似于抗體的性質(zhì)，是通過(guò)SELEX技術(shù)篩選出具有高度專(zhuān)一性結(jié)合靶物質(zhì)的一系列短鏈核苷酸序列，同時(shí)它又有大量?jī)?yōu)于抗體的性質(zhì)，如它可在體外化合成，合成周期短，不需要復(fù)雜的提取步驟，且穩(wěn)定性好。由于其獨(dú)特的性能，基于不同方法發(fā)展的適配體傳感器具有廣泛地應(yīng)用前景。自17 β-雌二醇適配體被篩選出來(lái)后，用于17 β-雌二醇測(cè)定的適配體傳感器已有大量報(bào)道。如熒光法，比色法，電化學(xué)適配體傳感器等。其中熒光適配體傳感器需要對(duì)適配體進(jìn)行熒光基團(tuán)標(biāo)記來(lái)獲得響應(yīng)信號(hào)，然后標(biāo)記過(guò)程復(fù)雜，費(fèi)時(shí)且可能影響17 β-雌二醇和適配體間的親和性。比色適配體傳感器，方法簡(jiǎn)單，快速，但往往靈敏度較低。而電化學(xué)方法由于其方法簡(jiǎn)單、快速，且靈敏度高，對(duì)環(huán)境友好，宜實(shí)現(xiàn)在線監(jiān)測(cè)等優(yōu)點(diǎn)受到了越來(lái)越多的應(yīng)用。在此基礎(chǔ)上，發(fā)展起來(lái)的一光電分析法既具有光學(xué)方法又具有電化學(xué)方法的優(yōu)點(diǎn)，且由于其具有光激發(fā)和電流檢測(cè)不同的信號(hào)轉(zhuǎn)化形式，所以它是一種超靈敏的分析方法。因此，我們?cè)O(shè)想將超靈敏的光電分析方法與具有高親和力的17 β-雌二醇適配體結(jié)合構(gòu)筑一種光電適配體傳感器，用于實(shí)現(xiàn)高靈敏度，高選擇性檢測(cè)17 β-雌二醇，以此構(gòu)筑的光電適配體傳感器恰好滿足環(huán)境水體中痕量17 β -雌二醇檢測(cè)的迫切要求。
[0005]在本發(fā)明中我們選用在Ti基底上直立有序生長(zhǎng)TiO2 NTs作為光學(xué)材料，由于TiO2NTs具有好的光電穩(wěn)定性，大的比表面積，好的生物兼容性等優(yōu)點(diǎn)，使其成為光電傳感器設(shè)計(jì)的一種理想的傳感材料。然而，由于TiO2 NTs具有較寬的帶隙，只能吸收400納米以下的可見(jiàn)光，這會(huì)使修飾在TiO2 NTs表面的生物分子失活，在某種程度上限制了它在生物光電傳感器設(shè)計(jì)中的直接應(yīng)用，需要用窄帶的光電材料與TiO2 NTs復(fù)合以實(shí)現(xiàn)可見(jiàn)光下下的生物傳感。因此我們將窄帶的半導(dǎo)體材料CdSe通過(guò)簡(jiǎn)單的電化學(xué)沉積法一步修飾在TiO2NTs的內(nèi)外，之后利用殼聚糖-戊二醛作為交聯(lián)劑通過(guò)交連耦合的方法將17 β-雌二醇適配體修飾在復(fù)合的CMSe NPs-TiO2 NTs納米材料電極上成功地構(gòu)筑了光電適配體傳感器。當(dāng)17 β -雌二醇存在時(shí)，在傳感界面形成了 17 β -雌二醇-適配體配合物，使電極表面的空間位阻增大，從而使光電流發(fā)生明顯變化，實(shí)現(xiàn)了在可見(jiàn)光下對(duì)17 β -雌二醇定量測(cè)定。由此建立了一種光電適配體傳感器的方法檢測(cè)環(huán)境中低濃度的17 β -雌二醇。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種制備簡(jiǎn)單、成本低廉、檢測(cè)速度快、高靈敏度高選擇性的用于檢測(cè)17 β-雌二醇的光電適配體傳感器的制備方法。
[0007]本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn):
用于檢測(cè)17 β-雌二醇的光電適配體傳感器的制備方法，所述光電適配體傳感器以硒化鎘納米粒子(CdSe NPs)修飾二氧化鈦納米管(TiO2 NTs)為基體電極，在二氧化鈦納米管內(nèi)外修飾具有專(zhuān)一性識(shí)別能力的17 β-雌二醇適配體作為探針，并與光電分析技術(shù)結(jié)合構(gòu)筑了一種簡(jiǎn)單、快速的光電適配體傳感器，所述光電適配體傳感器可實(shí)現(xiàn)高靈敏度和高選擇性檢測(cè)17 β -雌二醇；具體步驟如下:
(I)鈦板依次用不同細(xì)度的磨砂紙機(jī)械打磨，接著將其放入二次蒸餾水和乙醇溶液中分別進(jìn)行超聲清洗5?10 min。然后將所得鈦板用18%的HCl刻蝕10 min ;之后將其放在兩電極體系中進(jìn)行陽(yáng)極化，鉬片作陰極，鈦板作陽(yáng)極，兩電極間間距為I cm，外加槽電壓為40 V，在25°C溫度時(shí)，陽(yáng)極化2?3 h ;電解液采用0.3 wt% NH4F和3.0 Vo 1% H2O的乙二醇溶液。陽(yáng)極化后的TiO2 NTs用二次蒸餾水沖洗并在氮?dú)鈿夥罩写蹈伞Ｖ髮⑵渲糜诠苁綘t中在氧氣氣氛下500 °C燒結(jié)，得到晶形化的TiO2 NTs。
[0008](2)將步驟⑴制備得到的TiO2 NTs放入三電極體系，TiO2 NTs為工作電極，鉬電極為輔助電極，飽和甘萊電極為參比電極，電解液為0.1 mol/L硫酸鎘,0.1 mol/L無(wú)水硫酸鈉和1.0 mmol/L 二氧化硒，在-0.7 V的恒電壓下，沉積I?2 h ;將CdSe NPs均勻的沉積在TiO2 NTs的管內(nèi)外，得到CdSe NPs-TiO2 NTs電極，并將CdSe NPs-TiO2 NTs電極在氮?dú)鈿夥罩校?00 °C下燒結(jié)；
(3)將步驟⑵得到的CdSe NPs-TiO2 NTs電極留有IcmX Icm大小的電極面積，將I %乙酸的殼聚糖溶液滴在I cm2的CdSe NPs-TiO2 NTs電極上，在40 °C恒溫下干燥。之后用0.1 mol/L NaOH和去離子水沖洗數(shù)次，并干燥。然后將5 %的戊二醛溶液滴在CdSeNPs-TiO2 NTs電極表面，室溫下，反應(yīng)30 min，用去離子水沖洗并干燥。
[0009](4)取末端氨基修飾的17 β-雌二醇適配體，滴于步驟(3)所得附有殼聚糖和戊二醛的NPs-TiO2 NTs電極表面，在4 °C下反應(yīng)12?18 h。并沖洗以去除物理吸附的適配體，然后用牛血清蛋白堵塞未鍵合的戊二醛活性位點(diǎn)，以避免非特性吸附，得到17 β-雌二醇適配體修飾的CdSe NPs-TiO2 NTs的傳感器，不用時(shí)，將其置于0.1 mol/L PBS (pH 7.41)的緩沖溶液。
[0010]本發(fā)明中，步驟(I)中二氧化鈦納米管燒結(jié)時(shí)的升溫和冷卻速率為2 V /min，步驟(2)中CdSe NPs-TiO2 NTs電極燒結(jié)時(shí)的升溫和冷卻速率為2 V /min。
[0011]本發(fā)明中，步驟(4)中所用的牛血清蛋白的濃度為3% (w/v)。
[0012]本發(fā)明制得的光電適配體傳感器對(duì)17 β_雌二醇具有專(zhuān)一性的識(shí)別能力，避免了檢測(cè)過(guò)程中其他內(nèi)分泌物的干擾，并且該傳感器具有高的靈敏度和良好的重現(xiàn)性。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)及有益效果:
(I)與現(xiàn)有的生物傳感器相比，本發(fā)明采用CdSe NPs-TiO2 NTs為基體電極材料，不僅具有良好的生物兼容性有利于生物分子適配體的穩(wěn)定負(fù)載并保持好的生物活性，而且由于其具有高度有序地納米管陣列，能夠提供大的比表面積和三維管式結(jié)構(gòu)更有利于提高了適配體分子的負(fù)載量，進(jìn)一步改善了傳感器的靈敏度。
[0014](2)本發(fā)明將17 β -雌二醇適配體修飾在CdSe NPs-TiO2 NTs上制備得到的基于適配體的光電傳感器首次用于17 β -雌二醇的檢測(cè)。由于適配體對(duì)待測(cè)物質(zhì)17 β -雌二醇的專(zhuān)一性結(jié)合能力，大大提高了傳感器的選擇性，使得該光電傳感器能夠在100倍于待測(cè)物質(zhì)濃度的結(jié)構(gòu)相似的內(nèi)分泌干擾物質(zhì)中選擇性的識(shí)別出待測(cè)物質(zhì)17 β -雌二醇。
[0015](3)與傳統(tǒng)的檢測(cè)17β-雌二醇的方法相比，本發(fā)明的利用了高靈敏的光電分析技術(shù)與高專(zhuān)一性識(shí)別能力的適配體有效地結(jié)合，首次實(shí)現(xiàn)了超靈敏，高專(zhuān)一性的檢測(cè)環(huán)境中低濃度的17 β-雌二醇。
[0016](4)本發(fā)明中采用的儀器廉價(jià)便攜，方法簡(jiǎn)單易行，檢測(cè)限達(dá)到10_14 mol/L。適用于復(fù)雜環(huán)境體系中17 β -雌二醇的在線檢測(cè)。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0017]圖1為本發(fā)明中制備的CdSe NPs-TiO2 NTs的管式納米結(jié)構(gòu)圖；
圖2為本發(fā)明中制備光電適配體傳感器在不同濃度的17 β-雌二醇溶液中的響應(yīng)曲
線.圖3為本發(fā)明中制備的光電適配體傳感器在100倍濃度的干擾物存在體系中對(duì)17 β -雌二醇的高選擇性圖。
【具體實(shí)施方式】
[0018]下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
[0019]實(shí)施例1
一種高靈敏的高選擇性的17 β-雌二醇光電適配體傳感器，該傳感器構(gòu)筑在以CdSeNPs-TiO2 NTs為基體，將17 β-雌二醇的適配體修飾在CdSe NPs-TiO2 NTs的管內(nèi)外。具體制作過(guò)程如下:
(I)鈦板依次用不同細(xì)度的磨砂紙機(jī)械打磨，之后將其放入二次蒸餾水和乙醇溶液中分別進(jìn)行超聲清洗5?10 min。在陽(yáng)極化之前，鈦板用18%的HCl刻蝕10 min，之后將其放在兩電極體系中進(jìn)行陽(yáng)極化，鉬片作陰極，鈦板作陽(yáng)極，兩電極間I cm，外加槽電壓為40V，在溫度為25 °C時(shí)，陽(yáng)極化2?3 h。電解液包括0.3 wt% NH4F和3.0 Vo 1% H2O的乙二醇溶液。陽(yáng)極化后的TiO2 NTs用二次蒸餾水沖洗并在氮?dú)鈿夥罩写蹈伞Ｖ髮⑵渲糜诠苁綘t中在氧氣氣氛下500 °C燒結(jié)晶形化的TiO2 NTs，升溫和冷卻速率為2 V /min。
[0020](2)將制備的TiO2 NTs放入三電極體系，TiO2 NTs為工作電極，鉬電極為輔助電極，飽和甘萊電極為參比電極，放入0.1 mol/L硫酸鎘,0.1 mol/L無(wú)水硫酸鈉，1.0 mmol/L二氧化硒的混合電解液中，在-0.7 V的恒電壓下，沉積I~2 h.將CdSe NPs均勻的沉積在TiO2 NTs管內(nèi)外(CdSe NPs-TiO2 NTs)并將電極在氮?dú)鈿夥罩校?00 °C下燒結(jié)，升溫和冷卻速率為2 V /min，制備得到了晶形化的CdSe NPs-TiO2 NTs，如圖1所示。
[0021](3)將上述方法制備得到的CdSe NPs-TiO2 NTs留有IcmX Icm大小的電極面積，將I %乙酸的殼聚糖溶液滴在I cm2的CdSe NPs-TiO2 NTs上，在40 °C恒溫下干燥。之后用0.1 mol/L NaOH和去離子水沖洗數(shù)次，并干燥。然后將5 %的戊二醛溶液滴在電極表面，室溫下，反應(yīng)30 min,用去離子水沖洗并干燥。然后將20 μ L, 2 X l(T6mol/L的17 β -雌二醇適配體溶液滴涂到功能化的電極表面，在4 °C下組裝12~18 h，并沖洗以去除物理吸附的適配體，然后用牛血清蛋白堵塞未鍵合的戊二醛活性位點(diǎn)，以避免非特性吸附。制備了 17 β-雌二醇適配體修飾的 CdSe NPs-TiO2 NTs，不用時(shí)置于 0.1 mol/L PBS (pH 7.41)的緩沖溶液。 [0022]實(shí)施例2
采用無(wú)水乙醇作溶劑配制I mmol/L 17 β -雌二醇的母液后，用0.1 mol/L PBS緩沖液(pH 7.41)稀釋配制一系列不同濃度的17 β-雌二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液。以0.1 mol/L PBSCpH 7.41)與0.1 mol/L抗壞血酸(AA)的緩沖液為電解液，在這里AA是作為一種電子犧牲劑。在0.0V電壓下，電極與可見(jiàn)光源保持5 cm。以核酸適配體修飾的CdSe NPs-TiO2 NTs為工作電極，飽和甘汞電極為參比電極，鉬絲為對(duì)電極的三電極體系中，在電化學(xué)池加入不同濃度的17 β-雌二醇時(shí)，每個(gè)樣品加入需反應(yīng)30 min后進(jìn)行安培1-t曲線測(cè)定。由于適配體與其靶物質(zhì)的專(zhuān)一性識(shí)別作用，17 β -雌二醇被捕獲在電極表面，形成了適配體-17 β -雌二醇配合物，阻止AA向電極表面擴(kuò)散，致使光電流降低。根據(jù)光電適配體傳感器光電流隨濃度的變化對(duì)其進(jìn)行定量分析。且光電流的變化和17 β -雌二醇的濃度在5.0X 10_14~15Χ 10_12mol/L范圍內(nèi)成良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)0.9920.最低檢測(cè)限為3.3 XlO^4 mol/L (3S/Μ)。這個(gè)最低檢測(cè)限低于已報(bào)道的其他分析方法，且足以檢測(cè)水體中微量存在的17β-雌二醇，如圖2所示。
[0023]實(shí)施例3
將 17 β-雌二醇適配體修飾的 CdSe NPs-TiO2 NTs 放置于 0.1 mol/L PBS +0.1 mol/L AA (pH 7.41)作為電解液，將1.0X 10_12 mol/L 17 β -雌二醇分別與不同濃度的干擾物兩兩混合進(jìn)行測(cè)定?？疾炝艘胰泊拼迹迫?，壬基酚，間苯二酚，雙酚Α，阿特拉津，鄰苯二甲酸二乙酯六種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對(duì)17 β -雌二醇測(cè)定的干擾實(shí)驗(yàn)。采用實(shí)施例2中測(cè)試條件，測(cè)定光電流響應(yīng)，研究結(jié)果顯示，100倍于7 β -雌二醇濃度的其他干擾物17 β -雌二醇的光電流造成的影響小于10.0%，如圖3所示。可見(jiàn)，所制備的適配體傳感器對(duì)17β-雌二醇具有高的選擇性，其他結(jié)構(gòu)相似或與17 β -雌二醇共存的六種環(huán)境內(nèi)分泌物對(duì)它的測(cè)定并不造成干擾。
[0024]實(shí)施例4
采用光電適配體傳感器對(duì)不同的環(huán)境污水中17 β-雌二醇的含量進(jìn)行評(píng)估。首先選取了上海市楊浦區(qū)四個(gè)不同醫(yī)院，如新華醫(yī)院，曲陽(yáng)醫(yī)院，上海海軍基地醫(yī)院以及同濟(jì)大學(xué)附屬醫(yī)院的醫(yī)藥廢水進(jìn)行分析。其次選取了同濟(jì)大學(xué)校內(nèi)不同景觀湖水樣品，由于在這些景觀湖水中常有魚(yú)，家禽類(lèi)動(dòng)物活動(dòng)。此外還選取本實(shí)驗(yàn)室自來(lái)水進(jìn)行分析。在實(shí)驗(yàn)前，所有的樣品首先用普通的濾膜進(jìn)行過(guò)濾，以除去顆粒物質(zhì)和懸浮物質(zhì)。之后用0.22 μ m的濾膜進(jìn)行再次過(guò)濾。將過(guò)濾后的樣品收集于棕色的玻璃瓶，并儲(chǔ)存在4 °C冰箱。采用實(shí)例2的1-t曲線的方法，在可見(jiàn)光照射下，施加偏壓0.0 V，將I mL樣品溶液注入9 mL的0.1 mol/L PBS +0.1 mol/L AA (pH 7.41)的電解液中進(jìn)行光電流測(cè)定，并根據(jù)工作曲線計(jì)算實(shí)際樣品的濃度以及回收率。
【權(quán)利要求】
1.一種用于檢測(cè)17β-雌二醇的光電適配體傳感器的制備方法，其特征在于所述光電適配體傳感器以硒化鎘納米粒子(CdSe NPs)修飾二氧化鈦納米管(TiO2 NTs)為基體電極，在二氧化鈦納米管內(nèi)外修飾具有專(zhuān)一性識(shí)別能力的17 β -雌二醇適配體作為探針，并與光電分析技術(shù)結(jié)合構(gòu)筑了一種簡(jiǎn)單、快速的光電適配體傳感器，所述光電適配體傳感器可實(shí)現(xiàn)高靈敏度和高選擇性檢測(cè)17 β -雌二醇；具體步驟如下: (1)鈦板依次用不同細(xì)度的磨砂紙機(jī)械打磨，接著將其放入二次蒸餾水和乙醇溶液中分別進(jìn)行超聲清洗5~10 min ;然后將所得鈦板用18%的HCl刻蝕10 min ;之后將其放在兩電極體系中進(jìn)行陽(yáng)極化，鉬片作陰極，鈦板作陽(yáng)極，兩電極間間距為I cm，外加槽電壓為40 V，在25°C溫度時(shí)，陽(yáng)極化2~3 h ;電解液采用0.3 wt% NH4F和3.0 Vo 1% H2O的乙二醇溶液；陽(yáng)極化后的TiO2 NTs用二次蒸餾水沖洗并在氮?dú)鈿夥罩写蹈?；之后將其置于管式爐中在氧氣氣氛下500 °C燒結(jié)，得到晶形化的TiO2 NTs ； (2)將步驟⑴制備得到的TiO2NTs放入三電極體系，TiO2 NTs為工作電極，鉬電極為輔助電極，飽和甘萊電極為參比電極，電解液為0.1 mol/L硫酸鎘,0.1 mol/L無(wú)水硫酸鈉和1.0 mmol/L 二氧化硒，在-0.7 V的恒電壓下，沉積I~2 h ;將CdSe NPs均勻的沉積在TiO2 NTs的管內(nèi)外，得到CdSe NPs-TiO2 NTs電極，并將CdSe NPs-TiO2 NTs電極在氮?dú)鈿夥罩校?00 °C下燒結(jié)； (3)將步驟⑵得到的CdSeNPs-TiO2 NTs電極留有IcmX Icm大小的電極面積，將1%乙酸的殼聚糖溶液滴在I cm2的CdSe NPs-TiO2 NTs電極上，在40 °C恒溫下干燥；之后用0.1 mol/L NaOH和去離子水沖洗數(shù)次，并干燥；然后將5 %的戊二醛溶液滴在CdSeNPs-TiO2 NTs電極表面，室溫下，反應(yīng)30 min，用去離子水沖洗并干燥； (4)取末端氨基修飾的17β-雌二醇適配體，滴于步驟(3)所得附有殼聚糖和戊二醛的NPs-TiO2 NTs電極表面，在4 °C下反應(yīng)12~18 h ;并沖洗以去除物理吸附的適配體，然后用牛血清蛋白堵塞未鍵合的戊二醛活性位點(diǎn)，以避免非特性吸附，得到17β-雌二醇適配體修飾的CdSe NPs-TiO2 NTs的傳感器，不用時(shí)，將其置于0.1 mol/L PBS (pH 7.41)的緩沖溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(1)中二氧化鈦納米管燒結(jié)時(shí)的升溫和冷卻速率為2 °C/min，步驟(2)中CdSe NPs-TiO2 NTs電極燒結(jié)時(shí)的升溫和冷卻速率為2°C /min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(4)中所用的牛血清蛋白的濃度為3%(w/v)。
【文檔編號(hào)】G01N27/26GK103940867SQ201410143464
【公開(kāi)日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2014年4月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月11日
【發(fā)明者】趙國(guó)華, 范麗芳, 史慧杰, 劉梅川 申請(qǐng)人:同濟(jì)大學(xué)