同時測定茶鮮葉中有機磷類及擬除蟲菊酯類農藥殘留量的分析方法
【專利摘要】一種同時測定茶鮮葉中有機磷類及擬除蟲菊酯類農藥殘留量的分析方法，其特征在于：茶鮮葉試樣用含體積分數(shù)為1%乙酸的乙腈溶液超聲提取，再用適量PSA、C18和GCB混合填料凈化，上清液氮吹濃縮至近干，分別用丙酮和正己烷溶解定容，DB-1701和HP-5石英毛細管柱程序升溫分離，GC/FPD和GC/μECD檢測，最后用基質外標法定量。通過試驗確證，該方法線性范圍寬，檢測靈敏度、準確度及精密度等技術指標均滿足殘留分析的要求，并且前處理操作簡單、方便快速，為同時測定茶鮮葉中有機磷及擬除蟲菊酯類農藥殘留的分析研究提供了可靠的手段。
【專利說明】同時測定茶鮮葉中有機磷類及擬除蟲菊酯類農藥殘留量的分析方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及農藥殘留量的分析方法領域，具體涉及一種同時測定茶鮮葉中有機磷類及擬除蟲菊酯類農藥殘留量的分析方法，該分析方法是采用改進的QuEChERS法對茶鮮葉進行提取、凈化，再用氣相色譜法對有機磷和擬除蟲菊酯類農藥進行檢測，以達到快速、簡便、可靠的目的。
【背景技術】
[0002]茶葉是世界三大植物飲料之一，因其獨特的口感和具有抗癌、防突變、清除自由基、延緩衰老等保健功效越來越受到人們的青睞。我國是茶葉生產大國也是出口大國，施用農藥是保證茶葉產量，控制其生長過程中免受病蟲害威脅的最有效的手段，有機磷類農藥(英文名稱:Organophosphorus pesticides)和擬除蟲菊酯類農藥(英文名稱:Pyrethroidpesticides)因廣譜、高效、成本低、用量少被廣泛應用于茶葉病蟲害的防治工作。但是已有研究證實這兩類農藥會對人體的神經系統(tǒng)產生毒害作用，部分品種具有致癌、致畸、致突變作用以及一定的蓄積性，過量使用有可能在人體內累積，造成慢性蓄積中毒。因此，關于有機磷和擬除蟲菊酯兩類農藥在茶葉中的殘留一直是人們關注的焦點問題。
[0003]國際上許多國家、特別是歐盟和日本制定了苛刻的農藥殘留限量法規(guī)，以限制茶葉中農藥的最大殘留限量(MRL)。我國國家標準GB2763-2012《食品中農藥最大殘留限量》規(guī)定了茶葉中25種農藥的MRL，《中華人民共和國農業(yè)部公告第199號》規(guī)定了 21種農藥禁止或限制在茶葉中使用。歐盟在2008年3月I日發(fā)布了新的農藥殘留限量標準法規(guī)(EC)Nol49/2008，更新了茶葉中農藥殘留的MRL，新法規(guī)涉及茶葉農藥殘留現(xiàn)行限量標準221項，臨時性限量標準171項，共392項，且90%以上的農藥采用方法檢出限作為MRL。日本于2006年5月29日正式實施食品中農業(yè)化學品“肯定列表制度”，該制度中與茶葉有關的農藥殘留限量標準達251項，且大多數(shù)農藥的MRL要求不大于0.lmg/kg，對未設定限量標準的農藥全部則執(zhí)行“一律標準”，即含量不得超過0.01mg/kg，且全部采用“干茶法”進行檢測。這在很大程度上限制了我國茶葉的出口，同時對茶葉中農藥殘留的檢測也提出了更高的要求。
[0004]近年來，有關茶葉中農藥殘留的分析方法已有不少研究報道，但主要集中在成茶上，對茶鮮葉中的殘留研究的不多。茶鮮葉作為茶葉加工的原料，是決定茶葉品質的物質基礎，它的質量好壞直接關系到茶葉品質的優(yōu)劣。因此，直接測定茶鮮葉中的農藥殘留量具有重要的現(xiàn)實意義，不但可以實現(xiàn)茶葉農藥的源頭控制，有效引導農民正確地對茶園用藥，提高飲茶安全性，而且可以減少農藥不合理地使用對茶園土壤環(huán)境造成污染。
[0005]由于茶鮮葉比成茶含有更多的水分、色素、水溶性灰分、茶多酚等干擾物質，更容易造成提取凈化困難，因此現(xiàn)有的測定茶葉中有機磷類及菊酯類農藥的檢測方法，不適用于茶鮮葉基質的測定。國內雖有一些關于茶鮮葉農殘的研究工作報道，但僅涉及六六六、滴滴涕等有機氯農藥以及少數(shù)幾種菊酯類農藥的檢測，對有機磷等其它類型農藥的檢測方法研究較少。同時分析茶鮮葉中多種有機磷類及菊酯類農藥的殘留分析方法更是鮮有報道。而且在茶鮮葉農藥殘留提取過程中，現(xiàn)有的報道主要運用傳統(tǒng)的振蕩提取、均質提取、液液萃取等方法，凈化手段針對不同的目標農藥多采用濃硫酸磺化法和柱層析凈化法。這些前處理方法消耗有機溶劑多、樣品通量小、應用范圍有限、操作繁瑣、耗費時間、成本高，對于多類多殘留不是簡單或有效的方法。

【發(fā)明內容】

[0006]本發(fā)明提供一種同時測定茶鮮葉中有機磷類及擬除蟲菊酯類農藥殘留量的分析方法，其目的在于解決現(xiàn)有的測定茶葉中有機磷類及菊酯類農藥的檢測方法耗時長、操作繁瑣、消耗有機溶劑多以及檢測結果不夠穩(wěn)定可靠的問題。
[0007]為達到上述目的，本發(fā)明采用的技術方案是:一種同時測定茶鮮葉中有機磷類及擬除蟲菊酯類農藥殘留量的分析方法，所述分析方法有兩部分組成:
[0008]第一部分，用氣相色譜法分別建立已知梯度濃度的被測的有機磷農藥和擬除蟲菊酯農藥的標準曲線；所述標準曲線的建立由以下步驟組成:
[0009]第一步，制備空白基質提取液，制備方法由以下步驟組成:
[0010](I)稱取5.0g經測定不含被測的有機磷農藥和擬除蟲菊酯農藥的空白茶鮮葉樣品，置于50mL離心管中，再向離心管中加入IOmL含體積分數(shù)為I %乙酸的乙腈溶液，混勻，超聲提取10?15min,再加入2g無水乙酸鈉和Ig無水硫酸鎂,潤旋1.5min?2.5min,然后，以9000r/min的轉速離心3.5min?4.5min，取上清液即為待凈化的空白基質提取液；
[0011](2)另取一支IOmL離心管,加入0.15g C18、0.15g N-丙基乙二胺、0.12g石墨化碳黑和0.3g無水硫酸鎂,加入4mL所述待凈化的空白基質提取液,潤旋1.5min?2.5min,以9000r/min的轉速離心4.5min?5.5min ;離心后移取2份上清液至2支刻度試管中，每份上清液為1.5mL,再在50?60°C水浴下將每份上清液用氮氣緩慢吹至50?70 μ L ;再在其中一份上清液中加入丙酮以定容至0.75mL，過有機系濾膜后，得到用于配制有機磷農藥的空白基質提取液，另一份上清液中加入正己烷以定容至0.75mL，過有機系濾膜后，得到擬除蟲菊酯農藥的空白基質提取液；
[0012]第二步，以所述第一步中得到的空白基質提取液為溶劑分別配制有機磷農藥的基質混合標準工作溶液和擬除蟲菊酯農藥的基質混合標準工作溶液，其中，所述有機磷農藥是指敵敵畏、樂果、毒死蜱、甲基對硫磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷、三唑磷，所述擬除蟲菊酯農藥是指甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯；所述有機磷農藥的基質混合標準工作溶液中各有機磷農藥的濃度范圍以及所述擬除蟲菊酯農藥的基質混合標準工作溶液中各擬除蟲菊酯農藥的濃度范圍為:
【權利要求】
1.一種同時測定茶鮮葉中有機磷類及擬除蟲菊酯類農藥殘留量的分析方法，其特征在于:所述分析方法有兩部分組成: 第一部分，用氣相色譜法分別建立已知梯度濃度的被測的有機磷農藥和擬除蟲菊酯農藥的標準曲線；所述標準曲線的建立由以下步驟組成: 第一步，制備空白基質提取液，制備方法由以下步驟組成: (1)稱取5.0 g經測定不含被測的有機磷農藥和擬除蟲菊酯農藥的空白茶鮮葉樣品，置于50 mL離心管中，再向離心管中加入10 mL含體積分數(shù)為1%乙酸的乙腈溶液，混勻，超聲提取10~15 min,再加入2 g無水乙酸鈉和I g無水硫酸鎂，潤旋1.5min~2.5min,然后，以9000 r/min的轉速離心3.5mirT4.5min，取上清液即為待凈化的空白基質提取液； (2)另取一支10mL離心管,加入0.15g C18、0.15g N-丙基乙二胺、0.12 g石墨化碳黑和0.3g無水硫酸鎂，加入4mL所述待凈化的空白基質提取液，渦旋1.5mirT2.5min,以9000r/min的轉速離心4.5mirT5.5min ;離心后移取2份上清液至2支刻度試管中，每份上清液為1.5 mL，再在50~60°C水浴下將每份上清液用氮氣緩慢吹至50-70 μ L ;再在其中一份上清液中加入丙酮以定容至0.75 mL，過有機系濾膜后，得到用于配制有機磷農藥的空白基質提取液，另一份上清液中加入正己烷以定容至0.75 mL，過有機系濾膜后，得到擬除蟲菊酷農藥的空白基質提取液； 第二步，以所述第一步中得到的空白基質提取液為溶劑分別配制有機磷農藥的基質混合標準工作溶液和擬除蟲菊酯農藥的基質混合標準工作溶液，其中，所述有機磷農藥是指敵敵畏、樂果、毒死蜱、甲基對硫磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷、三唑磷，所述擬除蟲菊酯農藥是指甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯；所述有機磷農藥的基質混合標準工作溶液中各有機磷農藥的濃度范圍以及所述擬除蟲菊酯農藥的基質混合標準工作溶液中各擬除蟲菊酯農藥的濃度范圍為:
2.根據(jù)權利要求1所述的同時測定茶鮮葉中有機磷類及擬除蟲菊酯類農藥殘留量的分析方法，其特征在于:所述第一部分的第一步和所述第二部分的第一步中超聲提取的條件為超聲功率在80W~100W之間 ，超聲溫度在20~30°C。
【文檔編號】G01N30/06GK103926348SQ201410168677
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年4月24日 優(yōu)先權日:2014年4月24日
【發(fā)明者】劉騰飛, 董明輝, 楊代鳳, 謝修慶, 蔣寶南, 鄧金花, 張麗, 顧俊榮, 陸?zhàn)┸? 李軍, 錢輝 申請人:江蘇太湖地區(qū)農業(yè)科學研究所