一種檢測芹菜素的分子印跡傳感器的制備方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種檢測芹菜素的分子印跡傳感器的制備方法，其特征是：首先將玻碳電極用碳納米管修飾。在反應(yīng)器中，按如下組成質(zhì)量百分濃度加入，二甲基丙烯酸乙二醇酯：10~30%，衣康酸：2.0~12%，無水乙醇：54~80%，偶氮二異丁腈：1.0~6%，芹菜素：0.1~2.5%，氬氣氛圍，60~70℃攪拌反應(yīng)30~36h，將得到的產(chǎn)物用甲醇與乙酸混合溶液浸泡6~8h，除去模板分子，干燥，即得芹菜素分子印跡聚合物；該印跡傳感器對芹菜素表現(xiàn)出較高的親和性和選擇性。該芹菜素分子印跡傳感器與電化學(xué)工作站連接構(gòu)成能夠?qū)Ｒ荒０宸肿幼R別傳感器。本發(fā)明制得的傳感器成本低、靈敏度高、特異性好、檢測快速，可反復(fù)使用。本發(fā)明制備的分子印跡傳感器對芹菜素的響應(yīng)大大提高。
【專利說明】—種檢測芹菜素的分子印跡傳感器的制備方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及的是一種分子印跡傳感器的制備方法及快速檢測應(yīng)用【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種芹菜素分子印跡傳感器的制備方法，具體是基于分子印跡特異性識別作用，用于檢測藥品、食品、生物樣品中的芹菜素技術(shù)。
【背景技術(shù)】
[0002]芹菜素(apigenin)是一種黃酮類化合物，又稱芹黃素、洋芹素，廣泛分布于溫?zé)釒У氖卟撕退?，尤以芹菜中含量為高；在一些藥用植物如車前子、絡(luò)石藤等中也有很高的含量，植物源性飲料如茶、酒以及一些調(diào)味品中也有分布。芹菜素的化學(xué)結(jié)構(gòu)為5，7，4’-三羥基黃酮，其分子式為C15HltlO6,相對分子質(zhì)量為270。芹菜素不溶于水，易溶于乙醇、二甲基亞砜(DMSO)。純品顯淺黃色或黃色微綠。芹菜素廣泛存在于自然界中，且易于人工合成，體外研究或動物實驗顯示芹菜素具有多方面的藥理作用，因此具有廣闊的開發(fā)前景。芹菜素對多種腫瘤細胞具有抑制生長、誘導(dǎo)凋亡作用，且毒性較小，為抗腫瘤新藥的進一步研究提供了重要線索，也增強了人們從天然植物中尋找抗腫瘤化學(xué)藥物的信心，體外實驗提示芹菜素可能對多種組織、器官及系統(tǒng)的病變具有預(yù)防或治療作用，為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎所致的骨質(zhì)疏松、前列腺增生、肝纖維化、脈絡(luò)膜新生血管、神經(jīng)退行性疾病、感染性疾病等的預(yù)防和治療提供了信息。同時，動物及細胞實驗顯示芹菜素對生殖內(nèi)分泌功能具有明顯影響，有可能被開發(fā)成經(jīng)濟、簡便、安全的天然抗生育藥，特別是男用避孕藥；芹菜素在體外尚具有抗過敏以及抗氧化防護輻射損傷等作用。芹菜素還具有抗炎癥、降血壓、抗動脈硬化和血栓、抗焦慮抗菌抗病毒以及抗氧化等多種藥理活性，有很高的研究與應(yīng)用價值。然而，目前芹菜素的藥理作用研究大多處于體外實驗和動物模型階段，與臨床實際應(yīng)用還有一定的距離，還有待于進一步研究。目前，檢測芹菜素的方法主要有高效液相色譜、液相色譜-質(zhì)譜，色譜法的準(zhǔn)確度受到一定限制、而且儀器比較貴需要專業(yè)人員操作，也限制了其應(yīng)用。另外，由于芹菜素與黃酮類如:槲皮素、山奈酚、異鼠李素等分子結(jié)構(gòu)十分相近很難分開，測定時互相干擾，準(zhǔn)確檢測芹菜素很困難。因此，找到一種選擇性好、靈敏度高、操作簡便使用的檢測芹菜素的方法十分重要。
[0003]分子印跡技術(shù)是當(dāng)前開發(fā)具有分子識別功能的高選擇性材料的主要方法之一，它是通過在模板分子周圍形成一個高度交聯(lián)的剛性高分子，除去模板分子后在分子印跡聚合物的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中留下具有結(jié)合能力的識別位點，對模板分子表現(xiàn)出高選擇識別性能的一種技術(shù)。這項技術(shù)以其構(gòu)效預(yù)定性和特異識別性越來越受到人們的關(guān)注，已經(jīng)成功用于固相萃取或微固相萃取，親和色譜或毛細管電泳及傳感器等領(lǐng)域。
[0004]依據(jù)此技術(shù)制備的分子印跡傳感器，應(yīng)用于藥物分析、環(huán)境保護及生命科學(xué)研究中起著十分重要的作用。將功能分子以適當(dāng)方式修飾到電極上，制備選擇性好、靈敏度高、有一定使用壽命可再生的電化學(xué)傳感器成為分析科學(xué)工作者努力探索的課題。但是傳統(tǒng)的印跡方法所制備的印跡膜厚度難以控制，高交聯(lián)度使得電子傳遞速度和響應(yīng)慢、檢測下限高而且再生和可逆性差，影響分子印跡技術(shù)在電化學(xué)傳感器中的應(yīng)用。因此，建立一種靈敏、快速、簡便、特異性高、重復(fù)性好經(jīng)濟使用的檢測方法，對研究人員、生產(chǎn)企業(yè)、質(zhì)控人員、進出口商檢、政府管理部門等的迫切需要的，對食品、藥品、環(huán)境安全中的芹菜素含量準(zhǔn)確定量測定十分必要，對于芹菜素生產(chǎn)和藥理研究也具有重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是將分子印跡與電化學(xué)傳感器相結(jié)合，提供了一種芹菜素分子印跡傳感器的制備方法，主要是以芹菜素為模板，在玻碳電極表面通過碳納米管、納米金粒子的修飾，提高了傳感器的靈敏度，采用滴涂法制制備芹菜素分子印跡傳感器。
[0006]儀器與試劑
CHI660B電化學(xué)工作站(上海辰華儀器公司)，實驗采用三電極體系:鉬絲電極為輔助電極，Ag/AgCl為參比電極(SCE )，玻碳電極(GCE )為工作電極；KQ_250E型超聲波清洗器(坤峰超聲儀器有限公司)。
[0007]碳納米管(MWNTs直徑20~40nm) ;二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)、衣康酸(AA);偶氮二異丁腈(AIBN)，無水乙醇；芹菜素；高錳酸鉀、硫酸、硝酸鈉、雙氧水、聚乙烯醇；磷酸緩沖溶液；所用試劑均為分析純，實驗用水為二次蒸餾水。
[0008]本發(fā)明的目的通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)。
[0009]一種芹菜素分子印跡傳感器的制備方法，特征在于該方法具有以下工藝步驟:
(1)氧化碳納米管的制備:在反應(yīng)器中，按如下組成質(zhì)量百分濃度加入38~60%濃硫酸，
0.5~2.0%碳納米管，0.5~2.0%硝酸鈉，1.0~6.0%高錳酸鉀，超聲分散60~90min，緩慢加入36~56% 二次蒸餾水，各組分含量之和為百分之百，然后在80~90°C攪拌反應(yīng)4~6h，冷卻至室溫，過濾，用I mol/LHCl洗滌，再用二次蒸餾水反復(fù)洗滌至濾液為中性，干燥，得到氧化碳納米管；
(2)碳納米管修飾玻碳電極制備:將玻碳電極依次用0.3 μ m、0.05 μ mAl203粉末進行表面拋光，然后用二次蒸餾水超聲清洗，用氮氣吹干，在玻碳電極表面滴加4~7 μ L氧化碳納米管的N，N-二甲基甲酰胺分散液(0.5g/L)，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得碳納米管修飾玻碳電極；
(3)芹菜素分子印跡聚合物的制備:在反應(yīng)器中，按如下組成質(zhì)量百分濃度加入，二甲基丙烯酸乙二醇酯:10~30%，衣康酸:2.0~12%，無水乙醇:54~80%，偶氮二異丁腈:1.0~6%，芹菜素:0.f 2.5%，各組分含量之和為百分之百，攪拌溶解，通氬除氧20 min，氬氣氛圍，6(T70°C攪拌反應(yīng)30~36 h，將得到的產(chǎn)物用甲醇與乙酸(體積比為甲醇:乙酸為10:1)混合溶液浸泡6~8 h，除去模板分子，干燥，即得芹菜素分子印跡聚合物；
(4)芹菜素分子印跡傳感器的制備方法:取步適量的芹菜素分子印跡聚合物分散于1%的聚乙烯醇溶液中，制得20g /L的芹菜素分子印跡聚合物溶液；然后將上述溶液5~10 μ L滴加到步驟(2)制備的碳納米管修飾玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得芹菜素分子印跡傳感器。
[0010]本發(fā)明的優(yōu)點及效果是:
本發(fā)明將印跡技術(shù)、層層自組裝法和滴涂法相結(jié)合，在碳納米管修飾玻碳電極表面成功地研制了一種具有特異選擇性的印跡電化學(xué)傳感器。通過與無碳納米管修飾的分子印跡電極那個的響應(yīng)進行比較，本發(fā)明制備的芹菜素分子印跡傳感器的響應(yīng)大大提高。該印跡傳感器對芹菜素表現(xiàn)出較高的親和性和選擇性，響應(yīng)電流與芹菜素的濃度在1.0\10-7~1.0父10-411101/1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，檢測限為7.2X10_8mol/L將本發(fā)明制備的芹菜素分子印跡傳感器成功用于藥品、食品中芹菜素的檢測中，回收率在96.22^104.2%之間，因此本發(fā)明制備的分子印跡傳感器可廣泛應(yīng)用于化工、生物醫(yī)藥、食品、環(huán)保檢測等相關(guān)領(lǐng)域。
【具體實施方式】
[0011]實施例1
(1)氧化碳納米管的制備:在反應(yīng)器中，分別加入22mL濃硫酸，0.5g碳納米管，0.5g硝酸鈉，3.0g高錳酸鉀，超聲分散80min，緩慢加入40mL 二次蒸餾水，在85°C攪拌反應(yīng)5 h，冷卻至室溫，過濾，用I mol/LHCl洗滌，再用二次蒸餾水反復(fù)洗滌至濾液為中性，干燥，得到氧化碳納米管；
(2)碳納米管修飾玻碳電極制備:將玻碳電極依次用0.3 μ m、0.05 μ mAl203粉末進行表面拋光，然后用二次蒸餾水超聲清洗，用氮氣吹干，在玻碳電極表面滴加6 μ L氧化碳納米管的N，N-二甲基甲酰胺分散液(0.5g/L)，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得碳納米管修飾玻碳電極；
(3)芹菜素分子印跡聚合物的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，IOmL二甲基丙烯酸乙二醇酯，3.3g衣康酸，70mL無水乙醇，1.5g偶氮二異丁腈，0.1g芹菜素，攪拌溶解，通氬除氧20 min，氬氣氛圍，65°C攪拌反應(yīng)32h，將得到的產(chǎn)物用甲醇與乙酸(體積比為甲醇:乙酸為10:1)混合溶液浸泡7 h，除去模板分子，干燥，即得芹菜素分子印跡聚合物； (4)芹菜素分子印跡傳感器的制備方法:取步適量的芹菜素分子印跡聚合物分散于1%的聚乙烯醇溶液中，制得20g /L的芹菜素分子印跡聚合物溶液；然后將上述溶液6 μ L滴加到碳納米管修飾玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得芹菜素分子印跡傳感器。
[0012]實施例2
(1)氧化碳納米管的制備:在反應(yīng)器中，分別加入IOmL濃硫酸，0.5g碳納米管，1.0g硝酸鈉，2.0g高錳酸鉀，超聲分散90min，緩慢加入40mL 二次蒸餾水，在90°C攪拌反應(yīng)4 h，冷卻至室溫，過濾，用I mol/LHCl洗滌，再用二次蒸餾水反復(fù)洗滌至濾液為中性，干燥，得到氧化碳納米管；
(2)碳納米管修飾玻碳電極制備:將玻碳電極依次用0.3 μ m、0.05 μ mAl203粉末進行表面拋光，然后用二次蒸餾水超聲清洗，用氮氣吹干，在玻碳電極表面滴加4 μ L氧化碳納米管的N，N-二甲基甲酰胺分散液(0.5g/L)，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得碳納米管修飾玻碳電極；
(3)芹菜素分子印跡聚合物的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，20mL二甲基丙烯酸乙二醇酯,6.5g衣康酸，85mL無水乙醇，5g偶氮二異丁腈,0.5g療菜素，攪拌溶解，通IS除氧20 min，氬氣氛圍，70°C攪拌反應(yīng)36h，將得到的產(chǎn)物用甲醇與乙酸(體積比為甲醇:乙酸為10:1)混合溶液浸泡6h，除去模板分子，干燥，即得芹菜素分子印跡聚合物；
(4)芹菜素分子印跡傳感器的制備方法:取步適量的芹菜素分子印跡聚合物分散于1%的聚乙烯醇溶液中，制得20g/L的芹菜素分子印跡聚合物溶液；然后將上述溶液10 μ L滴加到碳納米管修飾玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得芹菜素分子印跡傳感器。[0013]實施例3
(1)氧化碳納米管的制備:在反應(yīng)器中，分別加入ISmL濃硫酸，1.0g碳納米管，0.5g硝酸鈉，0.6g高錳酸鉀，超聲分散60min，緩慢加入20mL 二次蒸餾水，在80°C攪拌反應(yīng)6h，冷卻至室溫，過濾，用I mol/LHCl洗滌，再用二次蒸餾水反復(fù)洗滌至濾液為中性，干燥，得到氧化碳納米管；
(2)碳納米管修飾玻碳電極制備:將玻碳電極依次用0.3 μ m、0.05 μ mAl203粉末進行表面拋光，然后用二次蒸餾水超聲清洗，用氮氣吹干，在玻碳電極表面滴加5 μ L氧化碳納米管的N，N-二甲基甲酰胺分散液(0.5g/L)，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得碳納米管修飾玻碳電極；
(3)芹菜素分子印跡聚合物的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，24mL二甲基丙烯酸乙二醇酯，8.2g衣康酸，60mL無水乙醇，1.0g偶氮二異丁腈，0.2g芹菜素，攪拌溶解，通氬除氧20 min，氬氣氛圍，60°C攪拌反應(yīng)30h，將得到的產(chǎn)物用甲醇與乙酸(體積比為甲醇:乙酸為10:1)混合溶液浸泡8h，除去模板分子，干燥，即得芹菜素分子印跡聚合物；
(4)芹菜素分子印跡傳感器的制備方法:取步適量的芹菜素分子印跡聚合物分散于1%的聚乙烯醇溶液中，制得20g/L的芹菜素分子印跡聚合物溶液；然后將上述溶液5 μ L滴加到碳納米管修飾玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得芹菜素分子印跡傳感器。
[0014]實施例4
(1)氧化碳納米管的制備:在反應(yīng)器中，分別加入12mL濃硫酸，0.4g碳納米管，0.6g硝酸鈉，2.5g高錳酸鉀，超聲分散70min，緩慢加入18mL 二次蒸餾水，在85°C攪拌反應(yīng)5h，冷卻至室溫，過濾，用I mol/LHCl洗滌，再用二次蒸餾水反復(fù)洗滌至濾液為中性，干燥，得到氧化碳納米管；
(2)碳納米管修飾玻碳電極制備:將玻碳電極依次用0.3 μ m、0.05 μ mAl203粉末進行表面拋光，然后用二次蒸餾水超聲清洗，用氮氣吹干，在玻碳電極表面滴加7 μ L氧化碳納米管的N，N-二甲基甲酰胺分散液(0.5g/L)，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得碳納米管修飾玻碳電極；
(3)芹菜素分子印跡聚合物的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，5mL二甲基丙烯酸乙二醇酯，1.6g衣康酸，50mL無水乙醇，2.0g偶氮二異丁腈，1.0g芹菜素，攪拌溶解，通氬除氧20 min，氬氣氛圍，65°C攪拌反應(yīng)34h，將得到的產(chǎn)物用甲醇與乙酸(體積比為甲醇:乙酸為10:1)混合溶液浸泡7h，除去模板分子，干燥，即得芹菜素分子印跡聚合物；
(4)芹菜素分子印跡傳感器的制備方法:取步適量的芹菜素分子印跡聚合物分散于1%的聚乙烯醇溶液中，制得20g/L的芹菜素分子印跡聚合物溶液；然后將上述溶液8 μ L滴加到碳納米管修飾玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得芹菜素分子印跡傳感器。
[0015]實施例5
將上述實施例f 4所制備的芹菜素分子印跡傳感器，用于芹菜素的檢測，步驟如下:
(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:配制一組包括空白標(biāo)樣在內(nèi)的不同濃度的芹菜素標(biāo)準(zhǔn)溶液，底液為PH 6.5的磷酸鹽緩沖溶液；
(2)工作曲線繪制:將Ag/AgCl為參比電極，鉬絲電極為輔助電極，本發(fā)明制備的電極為工作電極組成三電極系統(tǒng)，連接CHI660B電化學(xué)工作站，在K3 [Fe (CN)6]溶液中，采用循環(huán)伏安法在-0.40-0.2V電位范圍內(nèi)進行檢測，空白標(biāo)樣的響應(yīng)電流記為10，含有不同濃度的芹菜素標(biāo)準(zhǔn)溶液的響應(yīng)電流即為Λ.，響應(yīng)電流降低的差值為ZlJ與芹菜素標(biāo)
準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度C之間呈線性關(guān)系，繪制Zl I~c工作曲線；
(3)芹菜素的檢測:用待測樣品代替步驟(1)中的芹菜素標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照步驟(2)的方法進行檢測，根據(jù)響應(yīng)電流降低的差值Zl /和工作曲線，得到待測樣品中芹菜素的含量；所述K3[Fe (CN)6]溶液的濃度為5mmol/L ；
所述pH 7.0的磷酸鹽緩沖溶液的濃度在55 mmol/L。
[0016]芹菜素的濃 度在1.0Χ1(Π0Χ10-4πιο1/1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，檢測限為7.2X10_8mol/L將本發(fā)明制備的芹菜素分子印跡傳感器成功用于藥品、食品中芹菜素的檢測中，回收率在96.22~104.2%之間。
【權(quán)利要求】
1.一種芹菜素分子印跡傳感器的制備方法，其特征是:在于該方法具有以下工藝步驟: (1)氧化碳納米管的制備:在反應(yīng)器中，按如下組成質(zhì)量百分濃度加入38飛0%濃硫酸，0.5~2.0%碳納米管，0.5~2.0%硝酸鈉，1.0~6.0%高錳酸鉀，超聲分散60~90min，緩慢加入36飛6% 二次蒸餾水，各組分含量之和為百分之百，然后在8(T90°C攪拌反應(yīng)4飛h，冷卻至室溫，過濾，用1 mol/LHCl洗滌，再用二次蒸餾水反復(fù)洗滌至濾液為中性，干燥，得到氧化碳納米管； (2)碳納米管修飾玻碳電極制備:將玻碳電極依次用0.3 μ m、0.05 μ mAl203粉末進行表面拋光，然后用二次蒸餾水超聲清洗，用氮氣吹干，在玻碳電極表面滴加4~7 μ L氧化碳納米管的N，N-二甲基甲酰胺分散液，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得碳納米管修飾玻碳電極； (3)芹菜素分子印跡聚合物的制備:在反應(yīng)器中，按如下組成質(zhì)量百分濃度加入，二甲基丙烯酸乙二醇酯:1 0~30%，衣康酸:2.0~12%，無水乙醇:54~80%，偶氮二異丁腈:1.0~6%，芹菜素:0.1~2.5%，各組分含量之和為百分之百，攪拌溶解，通氬除氧20 min，氬氣氛圍，60~70°C攪拌反應(yīng)30~36 h，將得到的產(chǎn)物用甲醇與乙酸混合溶液浸泡6~8 h，除去模板分子，干燥，即得芹菜素分子印跡聚合物； (4)芹菜素分子印跡傳感器的制備方法:取步適量的芹菜素分子印跡聚合物分散于1%的聚乙烯醇溶液中，制得20g /L的芹菜素分子印跡聚合物溶液；然后將上述溶液5~10 μ L滴加到碳納米管修飾玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，即得芹菜素分子印跡傳感器。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種芹菜素分子印跡傳感器的制備方法，其特征是:步驟(2)中所述的氧化碳納米管的N，N- 二甲基甲酰胺分散液的質(zhì)量體積濃度為0.5g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種芹菜素分子印跡傳感器的制備方法，其特征是:步驟(3)中所述的二甲基丙烯酸乙二醇酯與衣康酸摩爾比為2:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種芹菜素分子印跡傳感器的制備方法，其特征是:步驟(3)中所述的甲醇與乙酸混合溶液的體積比為甲醇:乙酸為10:1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種芹菜素分子印跡傳感器的制備方法，其特征是:步驟(3)中所述的氬氣氛圍為升溫后氬氣一直通入。
6.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種檢測芹菜素的分子印跡傳感器的制備方法，其特征是:所制備的檢測芹菜素的分子印跡傳感器應(yīng)用于芹菜素的檢測，其檢測步驟如下: (1)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:配制一組包括空白標(biāo)樣在內(nèi)的不同濃度的芹菜素標(biāo)準(zhǔn)溶液，底液為PH 7.0的磷酸鹽緩沖溶液； (2)工作曲線繪制:將Ag/AgCl為參比電極，鉬絲電極為輔助電極，本發(fā)明制備的電極為工作電極組成三電極系統(tǒng)，連接CHI660B電化學(xué)工作站，在K3 [Fe (CN)6]溶液中，采用循環(huán)伏安法在-0.40-0.2V電位范圍內(nèi)進行檢測，空白標(biāo)樣的響應(yīng)電流記為10，含有不同濃度的芹菜素標(biāo)準(zhǔn)溶液的響應(yīng)電流即為，響應(yīng)電流降低的差值為ZlJ與芹菜素標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度c之間呈線性關(guān)系，繪制Zl I~c工作曲線； (3)芹菜素的檢測:用待測樣品代替步驟(1)中的芹菜素標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照步驟(2)的方法進行檢測，根據(jù)響應(yīng)電流降低的差值Zl /和工作曲線，得到待測樣品中芹菜素的含量；所述K3[Fe (CN)6]溶液的濃度為5mmol/L ；所述pH 7.0的磷酸鹽緩沖溶液的濃度在55 mmol/L。
【文檔編號】G01N27/30GK103926291SQ201410186363
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年5月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月6日
【發(fā)明者】許崇娟, 李慧芝, 莊海燕 申請人:濟南大學(xué)