一種小麥粉中過氧化鈣的快速檢測試劑盒和檢測方法
【專利摘要】一種小麥粉中過氧化鈣的快速檢測試劑盒和檢測方法，其特征在于：所述檢測試劑盒由稀酸溶液、pH試紙、pH調(diào)節(jié)劑、增敏劑、顯色劑和標(biāo)準(zhǔn)比色帶組成。所述檢測方法為：取小麥粉試樣于50mL具塞三角瓶中，加入稀酸，搖勻后靜置，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH，然后加入增敏劑和顯色劑，搖勻后靜置，觀察顏色并與標(biāo)注比色帶對(duì)比，得出小麥粉中過氧化鈣的大致含量范圍。本發(fā)明的試劑盒和方法操作簡便，適合于現(xiàn)場檢測。
【專利說明】一種小麥粉中過氧化鈣的快速檢測試劑盒和檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品添加劑快速檢測試劑盒的制備及其應(yīng)用領(lǐng)域，具體的說涉及到一種小麥粉中過氧化鈣快速定性檢測的試劑盒以及檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]過氧化鈣分子式為CaO2，一般用作防腐劑、殺菌劑、漂白劑等。過氧化鈣添加到小麥粉中，可較高程度漂白小麥粉的同時(shí)提高面筋筋力和面團(tuán)韌性，我國在過去曾廣泛使用過氧化鈣作為小麥粉處理劑并規(guī)定其最大添加量為50 mg/Kg。但最近研究表明，食用含有過量過氧化鈣的小麥粉會(huì)刺激胃腸道，引發(fā)胃部不適，長期食用則可加重人體的肝臟代謝負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致慢性疾病。2011年2月，衛(wèi)生部等7部門聯(lián)合發(fā)布了《關(guān)于撤銷食品添加劑過氧化苯甲酰、過氧化鈣的公告(2011年第4號(hào))》的文件公告，撤銷了過氧化鈣作為小麥粉處理劑。目前，關(guān)于小麥粉中過氧化鈣的檢測，尚無國標(biāo)推薦方法，文獻(xiàn)已報(bào)道的檢測方法有組合分析法、比色法、化學(xué)發(fā)光檢測法等，但這些方法由于操作繁瑣、所需儀器昂貴、實(shí)驗(yàn)所需環(huán)境條件的限制，很難在現(xiàn)場進(jìn)行。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的正是為了提供一種簡便并可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場檢測的小麥粉中過氧化鈣的快速檢測試劑盒和基于此試劑盒的檢測方法。
[0004]本發(fā)明的目的是通過下述技術(shù)措施來實(shí)現(xiàn):
本發(fā)明的小麥粉中過氧化鈣的快速檢測試劑盒包括稀酸溶液、PH試紙、pH調(diào)節(jié)劑、增敏齊IJ、顯色劑和標(biāo)準(zhǔn)比色帶。
[0005]本發(fā)明中所述稀酸為0.lmol/L?0.3 mol/L稀硫酸；pH試紙為精密pH試紙，pH值范圍為4.5?9.0 ;所述pH值調(diào)節(jié)劑為0.2 mol/L的氫氧化鈉溶液；所述增敏劑包括0.5%辣根過氧化物酶、0.05 mol/L碘化鉀，其中，0.5%辣根過氧化物酶溶液由酶活力為250 U/mg的辣根過氧化物酶0.52 g溶于100 mL pH為6.0的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液制成，存放于棕色試劑瓶中，避光保存；所述顯色液為0.05 mol/L季胺[4，4’ - (二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液。所述標(biāo)準(zhǔn)比色帶由漸變色帶和刻度標(biāo)尺組成，漸變色帶的顏色自右至左依次加深，不同的顏色深度對(duì)應(yīng)不同的刻度標(biāo)尺標(biāo)注的過氧化鈣含量。
[0006]本發(fā)明中所述標(biāo)準(zhǔn)比色帶的制作方法為:稱取1.0g?3.0g空白小麥粉(不含任何添加劑)若干份，分別加入不同濃度的過氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)液，使過氧化鈣的含量分別為O mg/Kg?1000 mg/Kg,然后分別加入20 mL的0.lmol/L?0.3 mol/L稀硫酸,搖勻后靜置5 min,用0.2 mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為6.0左右,然后分別加入I滴(約40 μ L) 0.5%辣根過氧化物酶和0.05 mol/L的碘化鉀，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’ - (二甲氨基)-二苯基甲烷]，搖勻后靜置5 min，取上層清液，利用掃描儀采集不同濃度的過氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)液顯色后的顏色，利用Photoshop根據(jù)顏色的漸變規(guī)律進(jìn)行漸變擬合，根據(jù)過氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)液的濃度加注標(biāo)尺，得到過氧化鈣測定的標(biāo)準(zhǔn)比色帶。[0007]利用本發(fā)明檢測試劑盒，檢測方法為:
(1)取1.0g?3.0g小麥粉于50 mL具塞三角瓶中，加入20 mL的0.1 mo I/L?0.3 mol/L稀硫酸，搖勾后靜直5 min ；
(2)用0.2 mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為6.0
(3)分別加入I滴(約40μ L) 0.5%辣根過氧化物酶和0.05 mol/L的碘化鉀，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’ -( 二甲氨基)_ 二苯基甲燒],搖勻后靜置5 min ；
(4)觀察顏色并與標(biāo)準(zhǔn)比色帶對(duì)比，得出小麥粉中過氧化鈣的大致含量范圍。
[0008]步驟(I)稀硫酸與小麥粉中的過氧化鈣反應(yīng)，生成過氧化氫而存在于上層清夜中；
步驟(3)中0.5%辣根過氧化物酶和0.05 mol/L的碘化鉀充當(dāng)增敏劑的作用，其加入可很大程度提升顯色的靈敏度，0.05 mol/L季胺[4，4’ - (二甲氨基)-二苯基甲烷]充當(dāng)顯色劑，在增敏作用下，步驟(I)中生成的過氧化氫氧化顯色劑顯色；
本發(fā)明的有益效果如下:
(I)本發(fā)明檢測試劑盒攜帶方便，顯色速度快，操作簡便，可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場檢測。
[0009](2)本發(fā)明中標(biāo)準(zhǔn)比色帶刻度精確，其定性檢測具有一定的準(zhǔn)確性。
[0010]【專利附圖】

【附圖說明】:
圖1為本發(fā)明的標(biāo)準(zhǔn)比色帶。
[0011]【具體實(shí)施方式】:
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述 實(shí)施例1
本發(fā)明檢測試劑盒包括稀酸溶液、PH試紙、pH調(diào)節(jié)劑、增敏劑、顯色劑和標(biāo)準(zhǔn)比色帶。其中pH試紙為精密pH試紙，pH值范圍為4.5?9.0 ；pH值調(diào)節(jié)劑為0.2 mol/L的氫氧化鈉溶液；反應(yīng)提取劑為0.2 mol/L稀硫酸；增敏劑包括0.5%辣根過氧化物酶、0.05 mol/L碘化鉀，其中，0.5%辣根過氧化物酶溶液由酶活力為250 U/mg的辣根過氧化物酶0.52 g溶于100 mL pH為6.0的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液制成，存放于棕色試劑瓶中，避光保存；顯色液為0.05 mol/L季胺[4，4’ - (二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液；所述標(biāo)準(zhǔn)比色帶由漸變色帶和刻度標(biāo)尺組成，漸變色帶的顏色自右至左依次加深，不同的顏色深度對(duì)應(yīng)不同的刻度標(biāo)尺標(biāo)注的過氧化鈣含量。
[0012]標(biāo)準(zhǔn)比色帶的制作方法為:
稱取2.0 g空白小麥粉(不含任何添加劑)若干份，分別加入不同濃度的過氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)液，使過氧化I丐的含量分別為O mg/Kg、10 mg/Kg、15 mg/Kg >30 mg/Kg、40mg/Kg、50 mg/Kg、60 mg/Kg>70 mg/Kg、100 mg/Kg、300 mg/Kg、500 mg/Kg、700 mg/Kg、1000 mg/Kg,然后分別加入20 mL的0.2 mol/L稀硫酸，搖勻后靜置5 min，用0.2 mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為6.0左右，然后分別加入I滴(約40 μ L)0.5%辣根過氧化物酶和0.05 mol/L的碘化鉀，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’- (二甲氨基)-二苯基甲烷]，搖勻后靜置5 min，取上層清液，利用掃描儀采集不同濃度的過氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)液顯色后的顏色，利用Photoshop根據(jù)顏色的漸變規(guī)律進(jìn)行漸變擬合，根據(jù)過氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)液的濃度加注標(biāo)尺，得到過氧化鈣測定的標(biāo)準(zhǔn)比色帶。
[0013]利用本檢測試劑盒的檢測方法為: (1)取2.0g小麥粉于50 mL具塞三角瓶中，加入20 mL的0.2 mol/L稀硫酸，搖勻后靜置 5 min ;
(2)用0.2 mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為6.0
(3)分別加入I滴(約40μ L) 0.5%辣根過氧化物酶和0.05 mol/L的碘化鉀，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’ -( 二甲氨基)_ 二苯基甲燒],搖勻后靜置5 min ；
(4)觀察顏色并與標(biāo)準(zhǔn)比色帶對(duì)比，得出小麥粉中過氧化鈣的大致含量范圍。
[0014]實(shí)施例2
利用實(shí)施例1中的檢測試劑盒和檢測方法，對(duì)市售某品牌饅頭粉進(jìn)行檢測試驗(yàn)，檢測步驟如下:
(1)稱取2.0 g某品牌饅頭粉于50 mL具塞三角瓶中，加入20 mL的0.2 mol/L稀硫酸，搖勻后靜置5 min ；
(2)用0.2 mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為6.0左右；
(3)加入I滴(約40μ L)0.5%的辣根過氧化物酶和0.05mol/L的碘化鉀溶液，然后加Al mL季胺[4，4’-(二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液，搖勻，靜置5 min；
(4)觀察三角瓶中樣品溶液的顏色，該試樣顏色為淡黃色，說明該試樣含有過氧化鈣，經(jīng)與實(shí)施例1中的標(biāo)準(zhǔn)色帶進(jìn)行對(duì)比，得出其含量大致為36 mg/Kg。
[0015]上述實(shí)施例僅為對(duì)本發(fā)明的詳細(xì)說明，而不用于限制本發(fā)明，應(yīng)當(dāng)指出的是，本行業(yè)的技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的技術(shù)和構(gòu)思范圍內(nèi)對(duì)本發(fā)明的適當(dāng)修改和修飾，也應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種小麥粉中過氧化鈣的快速檢測試劑盒，其特征在于:所述檢測試劑盒由稀酸溶液、PH試紙、pH調(diào)節(jié)劑、增敏劑、顯色劑和標(biāo)準(zhǔn)比色帶組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥粉中的過氧化鈣檢快速檢測試劑盒的制備方法，其特征在于:所述稀酸為0.1 mol/L~0.3 mol/L稀硫酸；所述pH試紙為精密pH試紙；所述pH值調(diào)節(jié)劑為0.2 mol/L氫氧化鈉溶液；所述增敏劑包括0.5%辣根過氧化物酶、0.05 mol/L碘化鉀，其中，0.5%辣根過氧化物酶溶液由酶活力為250 U/mg的辣根過氧化物酶0.52 g溶于100 mL pH為6.0的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液制成，存放于棕色試劑瓶中，避光保存；所述顯色液為0.05 mol/L季胺[4，4’-(二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液。
3.所述標(biāo)準(zhǔn)比色帶由漸變色帶和刻度標(biāo)尺組成，漸變色帶的顏色自右至左依次加深，不同的顏色深度對(duì)應(yīng)不同的刻度標(biāo)尺標(biāo)注的過氧化鈣含量。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的小麥粉中過氧化鈣快速檢測試劑盒，其特征在于:其中標(biāo)準(zhǔn)比色帶的制備方法為:稱取1.0g~3.0g空白小麥粉(不含任何添加劑)若干份，分別加入不同濃度的過氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)液，使過氧化鈣的含量分別為O mg/Kg~1000 mg/Kg，然后分別加入20 mL的0.lmol/L^0.3 mol/L稀硫酸，搖勻后靜置5 min，用0.2 mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為6.0左右，然后分別加入I滴(約40 μ L)0.5%辣根過氧化物酶和0.05 mol/L的碘化鉀，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’ -( 二甲氨基)_ 二苯基甲燒]，搖勻后靜置5 min,取上層清液，利用掃描儀采集不同濃度的過氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)液顯色后的顏色，利用Photoshop根據(jù)顏色的漸變規(guī)律進(jìn)行漸變擬合，根據(jù)過氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)液的濃度加注標(biāo)尺，得到過氧化鈣測定的標(biāo)準(zhǔn)比色帶。
5.一種小麥粉中過氧化鈣的快速檢測試劑盒和檢測方法，其特征在于:所述檢測方法 為: (1)取1.0g~3.0g小麥粉于50 mL具塞三角瓶中，加入20 mL的0.1 mo I/L~0.3 mol/L稀硫酸，搖勾后靜直5 min ； (2)用0.2mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH為6.0 ; (3)分別加入I滴(約40μ L) 0.5%辣根過氧化物酶和0.05 mol/L的碘化鉀，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’- (二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液，搖勻后靜置5 min ； (4)觀察顏色并與標(biāo)準(zhǔn)比色帶對(duì)比，得出小麥粉中過氧化鈣的含量范圍。
【文檔編號(hào)】G01N21/78GK103983643SQ201410243446
【公開日】2014年8月13日 申請(qǐng)日期:2014年6月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月3日
【發(fā)明者】張玉榮, 張德偉, 周顯青, 孫靜 申請(qǐng)人:河南工業(yè)大學(xué)