一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種可視化檢測(cè)阿司匹林的雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針及其制備方法和應(yīng)用，屬材料制備和藥物含量檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】；所述探針的制備方法為首先將硼氫化鈉、碲粉和水在超聲環(huán)境下生成前驅(qū)體NaHTe溶液，然后將前驅(qū)體注入到有巰基乙酸存在的CdCl2·2.5H2O水溶液中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下回流反應(yīng)，得到所需的綠色熒光量子點(diǎn)和紅色熒光量子點(diǎn)；紅色熒光量子點(diǎn)利用溶膠凝膠法包覆硅球，并接上氨基；將綠色熒光量子點(diǎn)溶液和包硅后的紅色熒光量子點(diǎn)分散在MES緩沖溶液中，加EDC/NHS溶液，室溫避光反應(yīng)，得到雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針，并用于熒光定量與可視化分析測(cè)定阿司匹林含量；該方法制備的量子點(diǎn)熒光探針具有很好的光學(xué)性能和穩(wěn)定性，具可視化檢測(cè)阿司匹林的能力。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針及其制備方法和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針及其制備方法和應(yīng)用，屬材料制備和藥物含量檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]阿司匹林(aspirin),也叫乙酰水楊酸(acetylsalicylic acid),是一類(lèi)應(yīng)用最早，最廣和最普通的解熱鎮(zhèn)痛藥抗風(fēng)濕藥。具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗風(fēng)濕和抗血小板聚集等多方面的藥理作用，常用于感冒發(fā)熱，頭痛、神經(jīng)痛關(guān)節(jié)痛、肌肉痛、風(fēng)濕熱、急性?xún)?nèi)濕性關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及牙痛等。具有發(fā)揮藥效迅速，藥效穩(wěn)定，超劑量易于診斷和處理等特點(diǎn)。然而隨著阿司匹林的廣泛應(yīng)用，其不良反應(yīng)也逐漸增多，較常見(jiàn)的癥狀有惡心、嘔吐、上腹部不適或疼痛等，所以對(duì)阿司匹林用量的監(jiān)控至關(guān)重要。目前，阿司匹林含量的測(cè)定方法主要使用色譜法，但是色譜法具有一定的局限性，如溶劑消耗量大，費(fèi)時(shí)，繁瑣的樣品預(yù)處理和選擇性差等。因此，針對(duì)阿司匹林的廣泛使用，建立簡(jiǎn)單、快速、靈敏的檢測(cè)方法是做好阿司匹林含量測(cè)定的當(dāng)務(wù)之急。
[0003]近年來(lái)，基于量子點(diǎn)熒光探針的熒光分析法受到了科研工作者的廣泛歡迎，建立的熒光分析方法已廣泛用于測(cè)定無(wú)機(jī)物、有機(jī)物及生物大分子。熒光分析法具有靈敏度高、選擇性好、儀器結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單、價(jià)格便宜等特點(diǎn)。量子點(diǎn)具有制備方法簡(jiǎn)單、光學(xué)可調(diào)、表面易于修飾和表征簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)在分析領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。將量子點(diǎn)作為熒光探針用于傳感分析的研究正在逐年增加，同時(shí)隨著高性能量子點(diǎn)的制備以及表面修飾技術(shù)的逐步完善與成熟，使量子點(diǎn)熒光分析的檢測(cè)能力有了很大的提高。
[0004]經(jīng)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，張忠平研究員課題組2011年發(fā)表在JACS上的學(xué)術(shù)論文((Instant Visual Detect1n of Trinitrotoluene Particulates on Var1usSurfaces by Rat1metric Fluorescence of Dual-Emiss1n Quantum Dots Hybrid〉〉，該文成功利用量子點(diǎn)的光學(xué)性質(zhì)，分別選取紅色熒光和綠色熒光的量子點(diǎn)構(gòu)建雙發(fā)射比率熒光探針，用于可視化檢測(cè)三硝基甲苯，并取得了良好的檢測(cè)效果。比率熒光檢測(cè)就是指兩個(gè)熒光發(fā)射強(qiáng)度的比值隨著目標(biāo)分析物的變化而變化，當(dāng)微量目標(biāo)物作用后視覺(jué)變化非常明顯，易于分辨。比率熒光檢測(cè)的一個(gè)突出優(yōu)點(diǎn)就是通過(guò)強(qiáng)度比值的變化提高動(dòng)態(tài)響應(yīng)的范圍，通過(guò)建立內(nèi)標(biāo)，極大地削弱其他因素的干擾，實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)分析物的定量檢測(cè)。相對(duì)單一熒光強(qiáng)度變化的檢測(cè)方法而言，比率熒光檢測(cè)方法更加靈敏，其可視化檢測(cè)更加可靠、容易分辨。因此雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)探針的制備方法及應(yīng)用成為當(dāng)前化學(xué)工作者研究的熱點(diǎn)。利用雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)探針進(jìn)行熒光定量及可視化分析檢測(cè)阿司匹林含量的研究成為必要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種用于可視化檢測(cè)阿司匹林的雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針及其制備方法，克服現(xiàn)有技術(shù)中檢測(cè)阿司匹林過(guò)程中溶劑消耗量大，費(fèi)時(shí)，繁瑣的樣品預(yù)處理和選擇性差等缺點(diǎn)。
[0006]首先硼氫化鈉、碲粉和水在超聲環(huán)境下生成前驅(qū)體NaHTe溶液。然后將前驅(qū)體注入到通氮除氧的pH為10.5-11.5的有巰基乙酸(TGA)存在的CdCl2.2.5H20水溶液中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)100-110 °(:條件下回流反應(yīng)，根據(jù)回流時(shí)間的不同，得到了所需要的綠色熒光量子點(diǎn)和紅色熒光量子點(diǎn)。然后，紅色熒光量子點(diǎn)利用溶膠凝膠法包覆硅球，并接上氨基。最后，將綠色熒光量子點(diǎn)溶液和包硅后的紅色熒光量子點(diǎn)分散在MES緩沖溶液中，加入EDC/NHS，室溫避光條件下反應(yīng)，最終得到雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針，并用于熒光定量與可視化分析測(cè)定阿司匹林含量。制備的雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針具有很好的光學(xué)性能和穩(wěn)定性，且具可視化檢測(cè)阿司匹林的能力。
[0007]本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針的制備方法，按照以下步驟進(jìn)行:
(I)將硼氫化鈉(NaBH4)和碲粉加入到離心管中，然后再加入二次蒸餾水使固體完全溶解；將離心管放置于超聲機(jī)中超聲反應(yīng)，并保持管口出氣，最終的白色液體即為所需的前驅(qū)體NaHTe溶液。
[0008](2)在通氮除氧的條件下，將步驟(I)得到的前驅(qū)體NaHTe溶液注入到通氮除氧的有巰基乙酸(TGA)存在的水合氯化鎘(CdCl2.2.5H20)水溶液中，混合溶液在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下回流反應(yīng)，根據(jù)回流時(shí)間的不同，得到所需要的綠色熒光量子點(diǎn)和紅色熒光量子點(diǎn)。
[0009](3)將步驟(2)得到的紅色熒光量子點(diǎn)原液與乙醇混合加入到燒瓶中，攪拌均勻，加入3-巰丙基三乙氧基硅烷室溫?cái)嚢琛Ｈ缓髮⒄杷嵋阴ズ桶彼尤氲缴鲜鲶w系，反應(yīng)。為了在氧化硅表面修飾上氨基，加入3-氨丙基三乙氧基硅烷反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，用水和乙醇洗滌若干次，以除去未反應(yīng)完的物質(zhì)，最終產(chǎn)物在真空烘箱內(nèi)烘干，得到包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子，備用。
[0010](4)將步驟(3)得到的包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子和步驟(2)得到的綠色熒光量子點(diǎn)溶液分散于MES緩沖溶液中，并加入EDC/NHS溶液(I mg/mL，質(zhì)量比1:1 )，室溫避光條件下反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，備用。
[0011]其中，步驟(I)中所述的硼氫化鈉和碲粉的摩爾比為2-4:1。
[0012]其中，步驟(2)中所述的有巰基乙酸(TGA)存在的CdCl2.2.5H20水溶液的pH為
10.5-11.5 ;其中，CdCl2 *2.5H20、TGA 和 NaHTe 的摩爾比為 I:2.0-2.5:0.4-0.6，其中 NaHTe的摩爾量根據(jù)步驟(I)中碲粉的摩爾量得出；所述回流反應(yīng)溫度為100 0C-11
[0013]其中，步驟(3)中所述的量子點(diǎn)溶液和乙醇的體積比為1:2-2.5 ;所述加入的3_巰丙基三乙氧基硅烷與量子點(diǎn)溶液的體積比為1:1000 ;所述加入的正硅酸乙酯、氨水、3-氨丙基三乙氧基硅烷與3-巰丙基三乙氧基硅烷的體積比為30-60:30-60:2-3:1 ;所述的攪拌時(shí)間為4-6小時(shí)；所述反應(yīng)時(shí)間為10-14小時(shí)。
[0014]其中，步驟(4)中所述包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子、綠色熒光量子點(diǎn)溶液與MES溶液的質(zhì)量與體積比為3-6 mg =300-600 μ L:8-12mL ;所述MES緩沖溶液和EDC/NHS溶液體積比為8-12:1 ;所述避光反應(yīng)時(shí)間為2-5小時(shí)。
[0015]本發(fā)明的技術(shù)優(yōu)點(diǎn):該方法以水相合成的不同發(fā)射波長(zhǎng)的碲化鎘量子點(diǎn)(CdTeQDs)為光學(xué)材料，利用正硅酸乙酯的水解包埋紅色熒光量子點(diǎn)，對(duì)其進(jìn)行保護(hù)形成內(nèi)標(biāo)材料，在此基礎(chǔ)上，外部偶聯(lián)綠色熒光量子點(diǎn)形成雙發(fā)射比率型熒光探針。內(nèi)部紅色熒光量子點(diǎn)受到了氧化硅的保護(hù)，受到阿司匹林的影響很少，熒光強(qiáng)度基本不變，外部綠色量子點(diǎn)處于裸露狀態(tài)，阿司匹林加入后熒光會(huì)發(fā)生猝滅現(xiàn)象。溶液顏色會(huì)從綠色漸變到紅色，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)阿司匹林的可視化檢測(cè)。所以說(shuō)本發(fā)明獲得的量子點(diǎn)雙發(fā)射比率型熒光探針具有良好的光學(xué)性能和實(shí)現(xiàn)可視化快速檢測(cè)阿司匹林含量的能力。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0016]圖1:不同參量的雙發(fā)射比率型熒光探針的熒光光譜圖。
[0017]圖2:包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子的透射電鏡圖。
[0018]圖3:雙發(fā)射比率型熒光探針的透射電鏡圖。
[0019]圖4:pH對(duì)包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子熒光強(qiáng)度的影響。
[0020]圖5:pH對(duì)CdTe QDs熒光強(qiáng)度的影響。
[0021]圖6:反應(yīng)時(shí)間對(duì)CdTe QDs檢測(cè)阿司匹林的影響。
[0022]圖7:包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子隨阿司匹林加入的熒光光譜變化。
[0023]圖8:包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子的穩(wěn)定性(分鐘)。
[0024]圖9:包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子的穩(wěn)定性(天)。
[0025]圖10:隨著阿司匹林濃度的增加，(a)雙發(fā)射比率型熒光探針和(b)發(fā)綠色熒光量子點(diǎn)的熒光光譜變化。

【具體實(shí)施方式】
[0026]下面結(jié)合具體實(shí)施實(shí)例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。
[0027]實(shí)施例1:
(I)將30.3 mg硼氫化鈉(NaBH4)和51.04 mg碲粉加入到離心管中，然后再加入3.0 mL二次蒸餾水使固體完全溶解；將離心管放置于超聲機(jī)中超聲反應(yīng)，并保持管口出氣，最終的白色液體即為所需的前驅(qū)體NaHTe溶液。
[0028](2)將剛得到的前驅(qū)體NaHTe注入到通氮除氧的pH為10.5的有巰基乙酸(TGA)存在的CdCl2水溶液中，其中加入228.34 mg的CdCl2.2.5H20和138.5 μ L的TGA0混合溶液在氮?dú)獗Ｗo(hù)100 0C條件下回流反應(yīng)9小時(shí)和72小時(shí)，得到所需綠色熒光量子點(diǎn)和紅色熒光量子點(diǎn)。
[0029](3)將40 mL步驟(2)得到的紅色熒光量子點(diǎn)原液與80 mL乙醇混合加入到燒瓶中，攪拌均勻，加入40 μ L3-巰丙基三乙氧基硅烷室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后將1.2 mL正硅酸乙酯和1.2 mL氨水加入到上述體系，反應(yīng)10小時(shí)。為了在氧化硅表面修飾上氨基，加入80μ L 3-氨丙基三乙氧基硅烷反應(yīng)10小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，用水和乙醇洗滌若干次，以除去未反應(yīng)完的物質(zhì)，最終產(chǎn)物在真空烘箱內(nèi)烘干備用。
[0030](4)將3 mg步驟(3)得到的包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子和300 μ L步驟(2)得到的綠色熒光量子點(diǎn)溶液分散于8 mL MES緩沖溶液中，并加入I mL EDC/NHS溶液(I mg/mL，質(zhì)量比1:1 )，室溫避光條件下反應(yīng)2小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，備用。
[0031]其中，步驟(I)中所述的硼氫化鈉和碲粉的摩爾比為2:1。
[0032]其中，步驟(2)中所述的有巰基乙酸(TGA)存在的CdCl2.2.5H20水溶液的pH為
10.5 ;其中，CdCl2.2.5H20、TGA和NaHTe的摩爾比為1:2.0:0.4，其中NaHTe的摩爾量根據(jù)步驟(I)中碲粉的摩爾量得出；所述回流反應(yīng)溫度為100 0C
其中，步驟(3)中所述的量子點(diǎn)溶液和乙醇的體積比為1:2;所述加入的3-巰丙基三乙氧基硅烷、正硅酸乙酯、氨水與3-氨丙基三乙氧基硅烷體積比為1:30:30: 2。
[0033]其中，步驟(4)中所述包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子與綠色熒光量子點(diǎn)溶液的質(zhì)量與體積比為3 mg:300 μ L ;所述MES緩沖溶液和EDC/NHS溶液體積比為8:1。
[0034]實(shí)施例2:
(1)60.6 mg硼氫化鈉(NaBH4)和51.04 mg碲粉加入到離心管中，然后再加入3.0 mL
二次蒸餾水使固體完全溶解；將離心管放置于超聲機(jī)中超聲反應(yīng)，并保持管口出氣，最終的白色液體即為所需的前驅(qū)體NaHTe溶液。
[0035](2)將剛得到的前驅(qū)體NaHTe注入到通氮除氧的pH為11.5的有巰基乙酸(TGA)存在的CdCl2水溶液中，其中加入152.23 mg的CdCl2.2.5Η20和115.44 μ L的TGA0混合溶液在氮?dú)獗Ｗo(hù)110 0C條件下回流反應(yīng)9小時(shí)和72小時(shí)，得到所需綠色熒光量子點(diǎn)和紅色熒光量子點(diǎn)。
[0036](3)將40 mL步驟(2)得到的紅色熒光量子點(diǎn)原液與100 mL乙醇混合加入到燒瓶中，攪拌均勻，加入40 μ L 3-巰丙基三乙氧基硅烷室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后將2.4 mL正硅酸乙酯和2.4 mL氨水加入到上述體系，反應(yīng)14小時(shí)。為了在氧化硅表面修飾上氨基，加入120 UL 3-氨丙基三乙氧基硅烷反應(yīng)14小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，用水和乙醇洗滌若干次，以除去未反應(yīng)完的物質(zhì)，最終產(chǎn)物在真空烘箱內(nèi)烘干備用。
[0037](4)將6 mg步驟(3)得到的包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子和600 μ L步驟(2)得到的綠色熒光量子點(diǎn)溶液分散于12 mL MES緩沖溶液中，并加入I mL EDC/NHS溶液(I mg/mL，質(zhì)量比1:1 )，室溫避光條件下反應(yīng)5小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，備用。
[0038]其中，步驟(I)中所述的硼氫化鈉和碲粉的摩爾比為4:1。
[0039]其中，步驟(2)中所述的有巰基乙酸(TGA)存在的CdCl2.2.5H20水溶液的pH為
11.5 ;其中，CdCl2.2.5H20、TGA和NaHTe的摩爾比為1:2.5:0.6，其中NaHTe的摩爾量根據(jù)步驟(I)中碲粉的摩爾量得出；所述回流反應(yīng)溫度為110
[0040]其中，步驟(3)中所述的量子點(diǎn)溶液和乙醇的體積比為1: 2.5 ;所述加入的3-巰丙基三乙氧基硅烷、正硅酸乙酯、氨水與3-氨丙基三乙氧基硅烷體積比為1: 60: 60: 3。
[0041]其中，步驟(4)中所述包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子與綠色熒光量子點(diǎn)溶液的質(zhì)量與體積比為6 mg:600 μ L ;所述MES緩沖溶液和EDC/NHS溶液體積比為12:1。
[0042]實(shí)施例3:
(I)將45.4 mg硼氫化鈉(NaBH4)和51.04 mg碲粉加入到離心管中，然后再加入3.0 mL二次蒸餾水使固體完全溶解；將離心管放置于超聲機(jī)中超聲反應(yīng)，并保持管口出氣，最終的白色液體即為所需的前驅(qū)體NaHTe溶液。
[0043](2)將剛得到的前驅(qū)體NaHTe注入到通氮除氧的pH為11.2的有巰基乙酸(TGA)存在的CdCl2水溶液中，其中加入182.672 mg的CdCl2.2.5Η20和133 μ L的TGA0混合溶液在氮?dú)獗Ｗo(hù)105 °(:條件下回流反應(yīng)9小時(shí)和72小時(shí)，得到所需綠色熒光量子點(diǎn)和紅色熒光量子點(diǎn)。
[0044](3)將40 mL步驟(2)得到的紅色熒光量子點(diǎn)原液與96 mL乙醇混合加入到燒瓶中，攪拌均勻，加入40 μ L 3-巰丙基三乙氧基硅烷室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后將2.0 mL正硅酸乙酯和2.0 mL氨水加入到上述體系，反應(yīng)12小時(shí)。為了在氧化硅表面修飾上氨基，加入100 UL 3-氨丙基三乙氧基硅烷反應(yīng)12小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，用水和乙醇洗滌若干次，以除去未反應(yīng)完的物質(zhì)，最終產(chǎn)物在真空烘箱內(nèi)烘干備用。
[0045](4)將4 mg步驟(3)得到的包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子和500 μ L步驟(2)得到的綠色熒光量子點(diǎn)溶液分散于10 mL MES緩沖溶液中，并加入I mL EDC/NHS溶液(I mg/mL，質(zhì)量比1:1)，室溫避光條件下反應(yīng)4小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，備用。
[0046]其中，步驟(I)中所述的硼氫化鈉和碲粉的摩爾比為3:1。
[0047]其中，步驟(2)中所述的有巰基乙酸(TGA)存在的CdCl2.2.5H20水溶液的pH為
11.2 ;其中，CdCl2.2.5H20、TGA和NaHTe的摩爾比為1:2.4:0.5，其中NaHTe的摩爾量根據(jù)步驟(I)中碲粉的摩爾量得出；所述回流反應(yīng)溫度為105
[0048]其中，步驟(3沖所述的量子點(diǎn)溶液和乙醇的體積比為1:2.4 ;所述加入的3-巰丙基三乙氧基硅烷、正硅酸乙酯、氨水與3-氨丙基三乙氧基硅烷體積比為1:50:50:2.5。
[0049]其中，步驟(4)中所述包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子與綠色熒光量子點(diǎn)溶液的質(zhì)量與體積比為4 mg:500 μ L ;所述MES緩沖溶液和EDC/NHS溶液體積比為10:1。
[0050]圖1為不同參量的雙發(fā)射比率型熒光探針的熒光光譜圖。依次對(duì)應(yīng)參量為:5 mg包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子和400 μ L綠色熒光量子點(diǎn)溶液、3 mg包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子和500 μ L綠色熒光量子點(diǎn)溶液和4 mg包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子和500 μ L綠色熒光量子點(diǎn)溶液。由圖1可知，不同參量對(duì)應(yīng)不同的雙發(fā)射圖譜，為了滿足可視化檢測(cè)的需要，最終采用4 mg包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子和500 μ L綠色熒光量子點(diǎn)溶液構(gòu)建雙發(fā)射比率型熒光探針進(jìn)行光學(xué)識(shí)別與可視化檢測(cè)。
[0051]圖2為包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子的透射電鏡圖，由圖可知，包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子尺寸均一，分散性好。
[0052]本發(fā)明【具體實(shí)施方式】中光學(xué)檢測(cè)性能評(píng)價(jià)按照下述方法進(jìn)行:將200 μ L雙發(fā)射比率型熒光探針溶液、緩沖溶液和一系列已知濃度的目標(biāo)物溶液加入到10 mL玻璃樣品瓶中，靜置10分鐘(如圖6所不，可以看出CMTe QDs與阿司匹林作用10分鐘后基本穩(wěn)定)。用三用紫外分析儀照射得到對(duì)應(yīng)光致發(fā)熒光顏色，用分子熒光光度計(jì)測(cè)量系統(tǒng)檢測(cè)溶液的熒光強(qiáng)度。根據(jù)顏色漸變結(jié)合對(duì)應(yīng)的雙發(fā)射熒光光譜建立對(duì)阿司匹林的可視化檢測(cè)方法。
[0053]試驗(yàn)例1:首先考察了 pH值對(duì)CdTe QDs和包覆量子點(diǎn)的硅納米粒子熒光強(qiáng)度的影響(如圖4、圖5所示，前者受pH影響較大，后者較為穩(wěn)定，在pH值為7的條件下，影響最小)，確定實(shí)驗(yàn)PH條件為7.0。其次考察了包覆量子點(diǎn)的硅納米粒子的穩(wěn)定性，從短時(shí)間、長(zhǎng)時(shí)間和目標(biāo)物影響三方面考察熒光強(qiáng)度的變化(如圖7、圖8和圖9所示，短時(shí)間測(cè)量熒光強(qiáng)度穩(wěn)定，長(zhǎng)時(shí)間放置熒光強(qiáng)度穩(wěn)定，目標(biāo)物作用后強(qiáng)度有少量降低，但穩(wěn)定性良好)，這為雙發(fā)射雙比率熒光探針的建立，奠定了良好的理論基礎(chǔ)。最后取200 μ L CdTe QDs溶液和一系列目標(biāo)物溶液加入到10 mL玻璃樣品瓶中，靜置10分鐘。然后用三用紫外分析儀照射得到對(duì)應(yīng)光致發(fā)熒光顏色，用分子熒光光度計(jì)測(cè)量系統(tǒng)檢測(cè)溶液的熒光強(qiáng)度。雙發(fā)射比率型熒光探針溶液的熒光顏色隨著不同阿司匹林的加入從綠色漸變?yōu)榧t色，并且得到對(duì)應(yīng)的雙發(fā)射熒光圖譜。圖10為隨著阿司匹林濃度的增加，Ca)雙發(fā)射比率型熒光探針和(b)發(fā)綠色熒光量子點(diǎn)的熒光光譜變化。結(jié)果表明，雙發(fā)射比率型熒光探針對(duì)阿司匹林具有良好的光學(xué)檢測(cè)能力和可視化檢測(cè)效果。
【權(quán)利要求】
1.一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針，其特征在于，該熒光探針以不同發(fā)射波長(zhǎng)的碲化鎘量子點(diǎn)為光學(xué)材料，包埋紅色熒光量子點(diǎn)，對(duì)其進(jìn)行保護(hù)形成內(nèi)標(biāo)材料，外部偶聯(lián)綠色熒光量子點(diǎn)形成雙發(fā)射比率型熒光探針，具可視化檢測(cè)阿司匹林的能力。
2.一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針的制備方法，其特征在于，按照以下步驟進(jìn)行: (1)將硼氫化鈉和碲粉加入到離心管中，然后再加入二次蒸餾水使固體完全溶解；將離心管放置于超聲機(jī)中超聲反應(yīng)，并保持管口出氣，最終的白色液體即為所需的前驅(qū)體NaHTe溶液； (2)在通氮除氧的條件下，將步驟(I)得到的前驅(qū)體NaHTe溶液注入到通氮除氧的有巰基乙酸存在的CdCl2.2.5H20水溶液中，混合溶液在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下回流反應(yīng)，根據(jù)回流時(shí)間的不同，得到所需要的綠色熒光量子點(diǎn)和紅色熒光量子點(diǎn)； (3)將步驟(2)得到的紅色熒光量子點(diǎn)原液與乙醇混合加入到燒瓶中，攪拌均勻，加入3-巰丙基三乙氧基硅烷室溫?cái)嚢?；然后將正硅酸乙酯和氨水加入到上述體系中反應(yīng)；為了在氧化硅表面修飾上氨基，再加入3-氨丙基三乙氧基硅烷反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，用水和乙醇洗滌若干次，以除去未反應(yīng)完的物質(zhì)，最終產(chǎn)物在真空烘箱內(nèi)烘干，得到包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子，備用； (4)將步驟(3)得到的包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子和步驟(2)得到的綠色熒光量子點(diǎn)溶液分散于MES緩沖溶液中，并加入EDC/NHS溶液，室溫避光條件下反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述的硼氫化鈉和碲粉的摩爾比為2-4:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的有巰基乙酸存在的CdCl2.2.5H20水溶液的pH為10.5-11.5 ;混合溶液中 CdCl2.2.5H20、TGA 和 NaHTe 的摩爾比為 1:2.0-2.5:0.4-0.6，其中 NaHTe 的摩爾量根據(jù)步驟(I)中碲粉的摩爾量得出；所述回流反應(yīng)溫度為100 0C-1lO
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述的量子點(diǎn)溶液和乙醇的體積比為1:2-2.5 ;所述加入的3-巰丙基三乙氧基硅烷與量子點(diǎn)溶液的體積比為1:1000 ;所述加入的正硅酸乙酯、氨水、3-氨丙基三乙氧基硅烷與3-巰丙基三乙氧基硅烷的體積比為30-60:30-60:2-3:1 ;所述的攪拌時(shí)間為4_6小時(shí)；所述反應(yīng)時(shí)間均為10-14小時(shí)。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述包埋紅色熒光量子點(diǎn)的氧化硅納米粒子、綠色熒光量子點(diǎn)溶液與MES溶液的比例為3-6 mg =300-600 μ L:8-12mL ;所述MES緩沖溶液和EDC/NHS溶液體積比為8-12:1 ;所述避光反應(yīng)時(shí)間為2-5小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針的制備方法，其特征在于，按照該方法制備的雙發(fā)射比率型量子點(diǎn)熒光探針用于熒光定量與可視化分析測(cè)定阿司匹林含量。
【文檔編號(hào)】G01N21/64GK104198447SQ201410353134
【公開(kāi)日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年7月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月24日
【發(fā)明者】衛(wèi)瀟, 戴江棟, 李洪吉, 周志平, 閆永勝 申請(qǐng)人:江蘇大學(xué)