一種植物維生素c含量的測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種植物維生素C含量的測(cè)定方法，通過(guò)稱取待測(cè)樣品，加入等質(zhì)量的草酸溶液，經(jīng)搗碎成漿狀樣品，再稱取漿狀樣品，然后用草酸溶液將漿狀樣品稀釋得到樣液，加入白陶土去色，再離心分離吸取上清液，用常規(guī)染料溶液滴定直至上清液呈粉紅色，最后按公式計(jì)算每百克樣品中所含抗壞血酸的毫克數(shù)。本發(fā)明能大大縮短提取分析時(shí)間，避免維生素C暴露于空氣中造成氧化，防止了維生素C的損失，保全了植物中維生素C的本來(lái)含量，所測(cè)得維生素C的含量準(zhǔn)確，測(cè)量結(jié)果精度高。另外，對(duì)于油脂類植物不僅能實(shí)現(xiàn)完全分離，還避免了過(guò)濾器具難以清洗的問(wèn)題，解決了現(xiàn)有技術(shù)對(duì)油脂類植物維生素C測(cè)定的不準(zhǔn)確問(wèn)題。
【專利說(shuō)明】一種植物維生素C含量的測(cè)定方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種維生素C測(cè)定方法，尤其是一種植物維生素C含量的測(cè)定方法，屬于分析化學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]在植物提取、植物營(yíng)養(yǎng)成分分析中，常常涉及到植物維生素C含量的測(cè)定。然而，現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)維生素C的標(biāo)準(zhǔn)分析時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，特別是在待測(cè)樣品過(guò)濾時(shí)，常規(guī)的自然過(guò)濾使維生素C暴露于空氣中易于氧化，以使維生素C損失過(guò)多，導(dǎo)致測(cè)定時(shí)所得維生素C含量過(guò)低，不能準(zhǔn)確測(cè)定。
[0003]另外，對(duì)于堅(jiān)果等油脂類植物，在常規(guī)自然過(guò)濾時(shí)耗時(shí)更長(zhǎng)，且不能達(dá)到完全過(guò)濾效果，還會(huì)黏附過(guò)濾器具。這樣不僅造成維生素C損失過(guò)多，還使得維生素C含量測(cè)定誤差更大，難以獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。因此，有必要對(duì)現(xiàn)有技術(shù)加以改進(jìn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為克服現(xiàn)有技術(shù)存在耗時(shí)過(guò)長(zhǎng)、維生素C易損失等問(wèn)題，本發(fā)明提供一種植物維生素C含量的測(cè)定方法，以實(shí)現(xiàn)快速、準(zhǔn)確的測(cè)定。
[0005]本發(fā)明通過(guò)下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種植物維生素C含量的測(cè)定方法，其特征在于對(duì)樣液進(jìn)行離心分離，具體經(jīng)過(guò)下列各步驟:
(1)稱取待測(cè)樣品50?100克，加入等質(zhì)量的質(zhì)量濃度為2%的草酸溶液，經(jīng)搗碎成漿狀樣品，再稱取10?30克漿狀樣品，然后用質(zhì)量濃度為I %的草酸溶液將漿狀樣品稀釋至I克漿狀樣品/毫升草酸，并搖勻得到樣液；
(2)在步驟(I)所得樣液中，按0.4?5克/克待測(cè)樣品的量加入白陶土去色，再在轉(zhuǎn)速為2000?2500rpm下進(jìn)行離心分離5?1min,再靜置5?1min,然后迅速吸取上清液，用常規(guī)染料溶液滴定直至上清液呈粉紅色于15秒內(nèi)不褪色為止；
(3)計(jì)算每百克樣品中所含抗壞血酸的毫克數(shù)=(VXTXA)/WX 100
式中，V—滴定時(shí)所耗去染料溶液的量(mL) ；T—每毫升染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)(mg) ；A——稀釋倍數(shù)10倍;W——滴定時(shí)所取的漿狀樣品中的待測(cè)樣品量(g)。
[0006]所述步驟(I)的搗碎是使用除金屬容器以外的器具進(jìn)行搗碎，防止浸提劑草酸與金屬發(fā)生反應(yīng)。
[0007]本發(fā)明具有下列優(yōu)點(diǎn)和效果:采用上述方案測(cè)定植物維生素C含量時(shí)，是用離心沉淀法取代現(xiàn)有分析技術(shù)中的常規(guī)濾法，同時(shí)將脫色與過(guò)濾一步完成。在轉(zhuǎn)速為2000?2500rpm下進(jìn)行離心分離，能達(dá)到植物樣液的分層效果佳，避免了轉(zhuǎn)速過(guò)慢導(dǎo)致分層不完全，也避免了轉(zhuǎn)速過(guò)快造成油脂類植物的樣液與水在劇烈運(yùn)動(dòng)下形成乳狀而無(wú)法分離；而采用離心分離5?1min也是經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)才能獲得的最佳分離時(shí)間，時(shí)間過(guò)短難以達(dá)到分離效果，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使油脂類植物的樣液形成難以判別的輕微乳狀，對(duì)分析測(cè)定結(jié)果造成非常大的誤差。本發(fā)明能大大縮短提取分析時(shí)間，避免維生素C暴露于空氣中造成氧化，防止了維生素C的損失，保全了植物中維生素C的本來(lái)含量，所測(cè)得維生素C的含量準(zhǔn)確，測(cè)量結(jié)果精度高。另外，對(duì)于油脂類植物不僅能實(shí)現(xiàn)完全分離，還避免了過(guò)濾器具難以清洗的問(wèn)題，解決了現(xiàn)有技術(shù)對(duì)油脂類植物維生素C測(cè)定的不準(zhǔn)確問(wèn)題。

【具體實(shí)施方式】
[0008]下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。
[0009]實(shí)施例1
A、準(zhǔn)確稱取20mg抗壞血酸，于1mL量瓶中溶解抗壞血酸于質(zhì)量濃度為I%的草酸溶液中，再用質(zhì)量濃度為I %的草酸溶液稀釋至10mL,混勻后即得到抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于4°C下保存；
B、吸取步驟A所得抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL，再用質(zhì)量濃度為I%的草酸溶液定容至50mL,即得到抗壞血酸使用溶液，然后吸取抗壞血酸使用溶液5mL，再加入質(zhì)量濃度為6%的碘化鉀溶液0.5mL,并滴入質(zhì)量濃度為I %的淀粉溶液3滴，然后以濃度為0.0OlN的碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至混合溶液呈淡黃色；
C、計(jì)算抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mg/mL)= (V1X0.088) /V2=0.0238mg/mL
式中，V1—滴定時(shí)所耗0.0OlN碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的量1.35mL ；V2——所取抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量5mL ；0.088——ImL的0.0OlN碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于抗壞血酸的量(mg/mL)；
D、取碳酸氫鈉52mg,溶于200mL沸水中，再將2，6-二氯靛酹50mg溶解于上述碳酸氫鈉溶液中，待冷卻至室溫，置于4°C下靜置過(guò)夜，次日經(jīng)過(guò)濾后將濾液用水稀釋至250mL，然后搖勻，即得到染料溶液，置于棕色瓶并于4°C下保存；
E、取5mL步驟A所得的抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入質(zhì)量濃度為I%的草酸溶液5mL，經(jīng)搖勻后，用步驟D所得染料溶液滴定至混合溶液呈粉紅色并于15秒不褪色為止；
F、計(jì)算每毫升染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)T(mg) = (CXV1) /V2=0.107mg 式中，C—步驟C所得抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(0.0238mg/mL)；V1——步驟E所用抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量5mL ；V2——步驟E所消耗染料溶液的量1.1lmL ；
G、稱取油橄欖鮮果樣50克，加入50克的質(zhì)量濃度為2%的草酸溶液，經(jīng)陶瓷研缽搗碎成漿狀樣品，再稱取10克漿狀樣品，然后用質(zhì)量濃度為I %的草酸溶液將漿狀樣品稀釋至I克漿狀樣品/毫升草酸，并搖勻得到樣液；
H、在步驟G所得樣液中，按3克/克待測(cè)樣品的量加入白陶土去色，再在轉(zhuǎn)速為2000rpm下進(jìn)行離心分離5min，再靜置5min，然后迅速吸取上清液，用常規(guī)染料溶液滴定直至上清液呈粉紅色于15秒內(nèi)不褪色為止；
1、計(jì)算每百克樣品中所含抗壞血酸的毫克數(shù)=(VXTXA)/WX 100=23.5mg/100g樣式中，V——滴定時(shí)所耗去染料溶液的量1.1OmL ；T——每毫升染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)(mg) ；A——稀釋倍數(shù)10倍;W——滴定時(shí)所取的漿狀樣品中的待測(cè)樣品量為5g=50%X10。
[0010]實(shí)施例2
A、準(zhǔn)確稱取20mg抗壞血酸，于1mL量瓶中溶解抗壞血酸于質(zhì)量濃度為I %的草酸溶液中，再用質(zhì)量濃度為I %的草酸溶液稀釋至10mL,混勻后即得到抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于5°C下保存； B、吸取步驟A所得抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL，再用質(zhì)量濃度為I%的草酸溶液定容至50mL,即得到抗壞血酸使用溶液，然后吸取抗壞血酸使用溶液5mL，再加入質(zhì)量濃度為6%的碘化鉀溶液0.5mL,并滴入質(zhì)量濃度為I %的淀粉溶液3滴，然后以濃度為0.0OlN的碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至混合溶液呈淡黃色；
C、計(jì)算抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mg/mL)= (V1X0.088) /V2=0.0208mg/mL
式中，V1—滴定時(shí)所耗0.0OlN碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的量1.18mL ；V2——所取抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量5mL ；0.088——ImL的0.0OlN碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于抗壞血酸的量(mg/mL)；
D、取碳酸氫鈉52mg,溶于200mL沸水中，再將2，6-二氯靛酹50mg溶解于上述碳酸氫鈉溶液中，待冷卻至室溫，置于5°C下靜置過(guò)夜，次日經(jīng)過(guò)濾后將濾液用水稀釋至250mL，然后搖勻，即得到染料溶液，置于棕色瓶并于5°C下保存；
E、取5mL步驟A所得的抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入質(zhì)量濃度為I%的草酸溶液5mL，經(jīng)搖勻后，用步驟D所得染料溶液滴定至混合溶液呈粉紅色并于15秒不褪色為止；
F、計(jì)算每毫升染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)T(mg) = (CXV1) /V2=0.104mg 式中，C—步驟C所得抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度0.0208mg/mL -,N1——步驟E所用抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量(5mL) ；V2——步驟E所消耗染料溶液的量(1.0OmL)；
G、稱取新鮮核桃仁樣80克，加入80克的質(zhì)量濃度為2%的草酸溶液，經(jīng)陶瓷器皿搗碎成漿狀樣品，再稱取20克漿狀樣品，然后用質(zhì)量濃度為I %的草酸溶液將漿狀樣品稀釋至I克漿狀樣品/毫升草酸，并搖勻得到樣液；
H、在步驟G所得樣液中，按0.4克/克待測(cè)樣品的量加入白陶土去色，再在轉(zhuǎn)速為2200rpm下進(jìn)行離心分離8min，再靜置lOmin，然后迅速吸取上清液，用常規(guī)染料溶液滴定直至上清液呈粉紅色于15秒內(nèi)不褪色為止；
1、計(jì)算每百克樣品中所含抗壞血酸的毫克數(shù)=(VXTXA)/WX100=20.5mg/100g樣式中，V——滴定時(shí)所耗去染料溶液的量(1.97mL) ；T——每毫升染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)(0.104mg) ；A——稀釋倍數(shù)10倍；W——滴定時(shí)所取的漿狀樣品中的待測(cè)樣品量 10g=50%X20。
[0011]實(shí)施例3
A、準(zhǔn)確稱取20mg抗壞血酸，于1mL量瓶中溶解抗壞血酸于質(zhì)量濃度為I%的草酸溶液中，再用質(zhì)量濃度為I %的草酸溶液稀釋至10mL,混勻后即得到抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于4°C下保存；
B、吸取步驟A所得抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL，再用質(zhì)量濃度為I%的草酸溶液定容至50mL,即得到抗壞血酸使用溶液，然后吸取抗壞血酸使用溶液5mL，再加入質(zhì)量濃度為6%的碘化鉀溶液0.5mL,并滴入質(zhì)量濃度為I %的淀粉溶液3滴，然后以濃度為0.0OlN的碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至混合溶液呈淡黃色；
C、計(jì)算抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mg/mL)= (V1X0.088) /V2=0.0201mg/mL
式中，V1——滴定時(shí)所耗0.0OlN碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的量(1.14mL) ；V2——所取抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量(5mL) ；0.088-1mL的0.0OlN碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于抗壞血酸的量(mg/
mL)；
D、取碳酸氫鈉52mg,溶于200mL沸水中，再將2，6-二氯靛酹50mg溶解于上述碳酸氫鈉溶液中，待冷卻至室溫，置于5°C下靜置過(guò)夜，次日經(jīng)過(guò)濾后將濾液用水稀釋至250mL，然后搖勻，即得到染料溶液，置于棕色瓶并于4°C下保存；
E、取5mL步驟A所得的抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入質(zhì)量濃度為I%的草酸溶液5mL，經(jīng)搖勻后，用步驟D所得染料溶液滴定至混合溶液呈粉紅色并于15秒不褪色為止；
F、計(jì)算每毫升染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)T(mg) = (CXV1) /V2=0.1Olmg 式中，C—步驟C所得抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(0.0201mg/mL)；V1——步驟E所用抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量(5mL) ；V2——步驟E所消耗染料溶液的量(1.0OmL)；
G、稱取新鮮板栗果樣100克，加入100克的質(zhì)量濃度為2%的草酸溶液，經(jīng)陶瓷器皿搗碎成漿狀樣品，再稱取30克漿狀樣品，然后用質(zhì)量濃度為I %的草酸溶液將漿狀樣品稀釋至I克漿狀樣品/毫升草酸，并搖勻得到樣液；
H、在步驟G所得樣液中，按5克/克待測(cè)樣品的量加入白陶土去色，再在轉(zhuǎn)速為2500rpm下進(jìn)行離心分離lOmin，再靜置8min，然后迅速吸取上清液，用常規(guī)染料溶液滴定直至上清液呈粉紅色于15秒內(nèi)不褪色為止；
1、計(jì)算每百克樣品中所含抗壞血酸的毫克數(shù)=(VXTXA)/WX 100=33.6mg/100g樣式中，V——滴定時(shí)所耗去染料溶液的量(4.99mL) ；T——每毫升染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)；A——稀釋倍數(shù)10倍;W——滴定時(shí)所取的漿狀樣品中的待測(cè)樣品量15g=50%X30。
[0012]下面采用對(duì)比試驗(yàn)對(duì)本發(fā)明的效果進(jìn)行說(shuō)明。
[0013]試驗(yàn)組:采用實(shí)施例2的植物和方法。
[0014]對(duì)照組:采用與實(shí)施例2相同的植物，測(cè)定維生素C時(shí)用現(xiàn)有技術(shù)的常規(guī)濾法，即使用定性濾紙進(jìn)行過(guò)濾。
[0015]試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表所示:
組別I分離過(guò)濾時(shí)間I整個(gè)測(cè)定過(guò)程時(shí)間 I維生素C含量測(cè)定值試驗(yàn)組 20 ?30min 2 ?2.5h_20.5mg/100g 樣_
對(duì)照組4?5h6?8h10.lmg/100g樣由上表可知，本發(fā)明提供的方法能大大縮短提取分析時(shí)間，避免維生素C暴露于空氣中造成氧化，防止了維生素C的損失，保全了植物中維生素C的本來(lái)含量，所測(cè)得維生素C
的含量準(zhǔn)確，測(cè)量結(jié)果精度高。
【權(quán)利要求】
1.一種植物維生素C含量的測(cè)定方法，其特征在于經(jīng)過(guò)下列各步驟: (1)稱取待測(cè)樣品50?100克，加入等質(zhì)量的質(zhì)量濃度為2%的草酸溶液，經(jīng)搗碎成漿狀樣品，再稱取10?30克漿狀樣品，然后用質(zhì)量濃度為I %的草酸溶液將漿狀樣品稀釋至I克漿狀樣品/毫升草酸，并搖勻得到樣液； (2)在步驟(I)所得樣液中，按0.4?5克/克待測(cè)樣品的量加入白陶土去色，再在轉(zhuǎn)速為2000?2500rpm下進(jìn)行離心分離5?1min,再靜置5?1min,然后迅速吸取上清液，用常規(guī)染料溶液滴定直至上清液呈粉紅色于15秒內(nèi)不褪色為止； (3)計(jì)算每百克樣品中所含抗壞血酸的毫克數(shù)=(VXTXA)/WX 100 式中，V—滴定時(shí)所耗去染料溶液的量(mL) ；T—每毫升染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)(mg) ；A——稀釋倍數(shù)10倍;W——滴定時(shí)所取的漿狀樣品中的待測(cè)樣品量(g)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物維生素C含量的測(cè)定方法，其特征在于:所述步驟(I)的搗碎是使用除金屬容器以外的器具進(jìn)行搗碎。
【文檔編號(hào)】G01N31/16GK104181274SQ201410460275
【公開(kāi)日】2014年12月3日 申請(qǐng)日期:2014年9月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月11日
【發(fā)明者】耿樹(shù)香, 陳海云, 馬婷, 寧德魯, 張艷麗, 李勇杰, 賀娜, 肖良俊, 徐田 申請(qǐng)人:云南省林業(yè)科學(xué)院