一種N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的檢測試劑的制作方法
【專利摘要】用于檢測N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的試劑,所述檢測試劑由試劑A和試劑B兩個(gè)試劑組成,其特征在于,所述試劑A包括以下濃度的組分:PH=7.0~8.0的緩沖液50~200mmol/L;穩(wěn)定劑0.5~10g/L;防腐劑0.5~2g/L;所述試劑B包括以下濃度的組分:PH=7.0~8.0的緩沖液50~200mmol/L;底物8~12g/L;穩(wěn)定劑0.5~10g/L;防腐劑0.5~2g/L。本發(fā)明的檢測試劑的穩(wěn)定性好,各項(xiàng)檢測指標(biāo)符合標(biāo)準(zhǔn),靈敏度高,使用方便。
【專利說明】-種N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶的檢測試劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶的檢測試劑。
【背景技術(shù)】
[0002] Ν-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)是細(xì)胞內(nèi)溶酶體水解酶之一,分子量為 140000。血液中的NAG不能通過腎小球?yàn)V膜,因此NAG在腎單位中含量較高,尤其是在近曲 小管上皮細(xì)胞中。研究表明,NAG在糖尿病、高血壓腎小管早期損傷、藥物腎毒性以及感染、 休克、腎移植排異反應(yīng)等造成的急性腎小管損害中具有重要的檢測價(jià)值,也是環(huán)境腎毒性 物質(zhì)對(duì)人群影響的排查手段之一。
[0003] 目前,NAG測定是應(yīng)用率最高的尿液酶學(xué)診斷項(xiàng)目,其對(duì)腎小管損傷的反應(yīng)很靈 敏,此外,用尿液作為標(biāo)本,是一種無創(chuàng)傷檢查,適合于日常檢驗(yàn)和連續(xù)動(dòng)態(tài)分析,也便于人 群篩查的應(yīng)用。NAG在臨床應(yīng)用中的測定方法主要包括放免分析法、熒光分析法和紫外-可 見分光光度法等,其中,分光光度法以合成色原底物為方法學(xué)主流。在NAG的作用下,底物 發(fā)生分解,通過測定底物的分解產(chǎn)物在特定波長下的吸光度來判斷NAG的濃度。但目前的 底物普遍存在著穩(wěn)定性欠佳、靈敏度度等缺點(diǎn)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的不足,本發(fā)明提供了一種底物穩(wěn)定、靈敏度高、方便檢測的試 劑。
[0005] 本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
[0006] 一種N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶的檢測試劑,所述檢測試劑由試劑A和試劑 B兩個(gè)試劑組成,其特征在于,
[0007] 所述試劑A包括以下濃度的組分:
[0008] PH = 7. 0 ?8. 0 的緩沖液 50 ?200mmol/L
[0009] 穩(wěn)定劑 0· 5 ?10g/L
[0010] 防腐劑 0. 5 ?2g/L;
[0011] 所述試劑B包括以下濃度的組分:
[0012] ΡΗ=7·0?8·0 的緩沖液 50-200 mmol/L 底物 8?12g/L 穩(wěn)定劑 0.5?10g/L 防腐劑 0.5?2 g/L;
[0013] 所述底物具有以下的結(jié)構(gòu)通式中的一種:
[0014]
[0015]
【權(quán)利要求】
1. 一種N-乙酰-0 -D-氨基葡萄糖苷酶的檢測試劑,所述檢測試劑由試劑A和試劑B 兩個(gè)試劑組成,其特征在于, 所述試劑A包括以下濃度的組分: PH = 7. 0 ?8. 0 的緩沖液 50 ?200mmol/L 穩(wěn)定劑 0. 5?10g/L 防腐劑 0. 5?2g/L ; 所述試劑B包括以下濃度的組分: PH=7.0?8.0 W緩沖液 50~200 mmol/L 底物 8?〗2g/L 穩(wěn)定劑 0.5-10 g/L 防腐劑 0.5?2 g/L; 所述底物具有以下的結(jié)構(gòu)通式中的一種:
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種N-乙酰-0 -D-氨基葡萄糖苷酶的檢測試劑,其特征在 于,所述試劑A與試劑B混合后,混合液中的組分具有以下濃度: PH=7.0?8.0 的緩沖液 50-200 mmol/L 防腐劑 1?2g/'L 穩(wěn)'/if 劑 1 ?lOg/L 底物 2?3g/L。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種N-乙酰-0 -D-氨基葡萄糖苷酶的檢測試劑,其特征在 于,所述緩沖液選自PBS緩沖液、TRIS緩沖液、PIPES緩沖液、GOOD' S緩沖液、CAPS緩沖液、 HEPES緩沖液中的一種。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種N-乙酰-0 -D-氨基葡萄糖苷酶的檢測試劑,其特征在 于,所述穩(wěn)定劑選自EDTA、EDTA-2Na、乙二醇、亞氨基二乙酸中的一種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種N-乙酰-0 -D-氨基葡萄糖苷酶的檢測試劑,其特征在 于,所述防腐劑選自NaN3、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、4-氯-3, 5-二甲基苯酚中的一種。
【文檔編號(hào)】G01N21/31GK104280352SQ201410531868
【公開日】2015年1月14日 申請(qǐng)日期:2014年10月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月10日
【發(fā)明者】王君平, 梁洪澤, 呂綺, 陳浩, 李詠梅, 呂邦泰 申請(qǐng)人:寧波大學(xué)