一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，以紫外分光光度法測定藥材中總聯芐含量，步驟包括：以聯芐類化合物為對照品，用外標法在270-290nm進行總聯芐的含量測定。該方法簡便、易行、重復性好，能夠確切反映鐵皮石斛藥材質量，進一步完善了鐵皮石斛藥材的質量標準，彌補了鐵皮石斛質量評價中缺乏對以聯芐為代表的脂溶性特征成分的檢測方法的不足，使鐵皮石斛藥材的質量檢測技術更科學、合理。采用本發(fā)明所述檢測方法可有效控制鐵皮石斛藥材的質量，從而確保其臨床應用的安全性、穩(wěn)定性和有效性。
【專利說明】一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術領域】，具體是一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法。
【背景技術】
[0002] 鐵皮石斛是蘭科石斛屬多年生草本植物，其主要藥用部位是新鮮或干燥莖，主要 分布于安徽、浙江、廣西、湖南、云南、貴州等地，是傳統名貴中藥材。鐵皮石斛具有益胃生 津，滋陰清熱之功效，用于陰傷津虧，口干煩渴，胃陰不足，食少干嘔，病后虛熱不退，陰虛火 旺，骨蒸勞熱，目暗不明，筋骨痿軟等癥?！渡褶r本草經》將其列為上品，道家養(yǎng)生經典《道藏》 將它譽為"中華九大仙草"之首。
[0003] 鐵皮石斛中主要含有水溶性的多糖、脂溶性的聯芐類，還含有少量的水溶性的氨 基酸、水溶性的微量元素、水溶性的酚酸類，以及微量的偏脂溶性的石斛生物堿、脂溶性的 石斛倍半萜、偏脂溶性的芴酮類化合物、偏脂溶性的木脂素、水溶性的酚類、偏脂溶性的黃 酮、脂溶性的留體等，其中聯芐類具有抗腫瘤、抗氧化等重要藥理活性作用。
[0004] 然而目前的質量控制方法仍然落后，2005年版《中國藥典》以性狀和顯微特征作 為鑒別石斛的唯一手段，2010年版《中國藥典》有所改進，雖然將鐵皮石斛從石斛藥材中 單列出來，增加了水分、浸出物等項目檢查，同時，對鐵皮石斛多糖和甘露糖進行含量測定。 但多糖和甘露糖在植物中的存在較普遍，對其特征性的次生代謝產物仍沒有進行科學的控 制。目前，以性狀鑒別鐵皮石斛原料和以粗多糖為主要指標鑒別產品的做法，既難以辨別是 否含有鐵皮石斛特征成分，又難以測定鐵皮石斛特征有效成分的含量，特別是以聯芐為代 表的脂溶性特征成分。因此，迫切需要提供一種科學、全面反映鐵皮石斛藥材質量的檢測方 法。
【發(fā)明內容】
[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，可有效控制鐵皮石斛 藥材的質量，從而確保其臨床應用的安全性、穩(wěn)定性和有效性。
[0006] 為實現上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：
[0007] -種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，采用紫外分光光度法，以聯芐類化合物為對 照品，用外標法對鐵皮石斛中的總聯芐進行含量測定。
[0008] 所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，具體檢測步驟如下：
[0009] 1)供試品溶液的制備：取鐵皮石斛藥材，粉碎，過40-60目篩，精密稱取0. 5-1. 0g， 以重量/體積比為30-70倍量的高濃度醇水系統或中極性有機溶劑提取2-3次，提取液轉 移至容量瓶中并定容，搖勻，取l_5mL離心10-20min，轉速為10000r/min，精密量取上清液 用甲醇稀釋，即得供試品溶液；
[0010] 2)對照品溶液的制備：精密稱取聯芐類化合物對照品，加甲醇溶解制成溶液；
[0011] 3)測定法：以甲醇為空白參比溶劑；采用紫外分光光度法，測試在270-290nm波長 處的吸光度，空白溶液無干擾；用標準曲線法計算含量。
[0012] 作為本發(fā)明進一步的方案：具體檢測步驟如下：
[0013] 1)供試品溶液的制備：取鐵皮石斛藥材，粉碎，過50目篩，精密稱取lg，置IOOml 圓底燒瓶中，加入50%乙醇70ml水浴回流提取3次，每次3小時，合并提取液，取其中的4ml 離心15min，轉速為10000r/min，精密量取上清液Iml用甲醇稀釋10倍，即得供試品溶液；
[0014] 2)對照品溶液的制備：精密稱取毛蘭素對照品25. Omg，置于25ml容量瓶中，力口 甲醇溶解，定容，精密量取毛蘭素標準溶液〇. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9、1. 0、1. 1、1. 2、1. 3、1. 4、 1. 5、I. 6ml，分別置于25ml容量瓶中定容，即得對照品溶液；
[0015] 3)測定法：以甲醇為空白參比溶劑；按照紫外分光光度法在280nm波長處測吸光 度，空白溶液無干擾；用標準曲線法計算含量，以吸光度為縱坐標Y，毛蘭素濃度為橫坐標X 進行線性回歸，求得回歸方程式為A = 11.002C+0. 018,線性范圍為0. 02mg/ml-0. 064mg/ ml,相關系數r = 0. 9997,線性關系良好。
[0016] 作為本發(fā)明進一步的方案：所述對照品包括但不限于毛蘭素和二氫白藜蘆醇。
[0017] 作為本發(fā)明進一步的方案：所述中極性有機溶劑包括但不限于二氯甲烷、乙酸乙 酯、氯仿和丙酮，所述高濃度醇水系統包括但不限于濃度為50% -95%的甲醇水溶液體系、 乙醇水溶液體系和異丙醇水溶液體系。
[0018] 作為本發(fā)明進一步的方案：所述鐵皮石斛藥材中的總聯芐的含量不低于5%。
[0019] 與現有技術相比，本發(fā)明的有益效果是：簡便、易行、重復性好，能夠確切反映鐵皮 石斛藥材質量，進一步完善了鐵皮石斛藥材的質量標準，彌補了鐵皮石斛質量評價中缺乏 對以聯芐為代表的脂溶性特征成分的檢測方法的不足，使鐵皮石斛藥材的質量檢測技術更 科學、合理；可有效控制鐵皮石斛藥材的質量，從而確保其臨床應用的安全性、穩(wěn)定性和有 效性。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0020] 圖1是聯芐提取率與乙醇濃度的關系；
[0021] 圖2是聯芐提取率與提取溫度的關系；
[0022] 圖3是聯芐提取率與提取時間的關系；
[0023] 圖4是聯芐提取率與液料比的關系；
[0024] 圖5是聯芐提取率與提取次數的關系；
[0025] 圖6是毛蘭素標準曲線圖。
【具體實施方式】
[0026] 下面將結合本發(fā)明實施例，對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述， 顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的 實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都 屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0027] 實施例1 :提取方法考察
[0028] 1.稱取Ig過50目篩的鐵皮石斛粉末，共4份，分別記為A、B、C、D ;
[0029] A、50ml乙酸乙酯超聲提取20min ;B、50ml80%的乙醇熱提2h ;C、40ml丙酮超聲提 取30min ;D、60ml甲醇熱提lh。
[0030] 各取4ml提取液離心lOmin，轉速為10000r/min，取上清液稀釋一定倍數，測定其 總聯芐含量，各個提取方法中總聯芐提取率如表1所示：這些溶劑都可以將聯芐類化合物 提取出來，優(yōu)選乙醇熱提法。
[0031] 表1不同提取方法的總聯芐提取率
[0032]
【權利要求】
1. 一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，采用紫外分光光度法，以聯芐類 化合物為對照品，用外標法對鐵皮石斛中的總聯芐進行含量測定。
2. 根據權利要求1所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，具體檢測步驟 如下： 1) 供試品溶液的制備：取鐵皮石斛藥材，粉碎，過40-60目篩，精密稱取0. 5-1. Og，以重 量/體積比為30-70倍量的高濃度醇水系統或中極性有機溶劑提取2-3次，提取液轉移至 容量瓶中并定容，搖勻，取l_5mL離心10-20min，轉速為10000r/min，精密量取上清液用甲 醇稀釋，即得供試品溶液； 2) 對照品溶液的制備：精密稱取聯芐類化合物對照品，加甲醇溶解制成溶液； 3) 測定法：以甲醇為空白參比溶劑；采用紫外分光光度法，測試在270-290nm波長處的 吸光度，空白溶液無干擾；用標準曲線法計算含量。
3. 根據權利要求2所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，具體檢測步驟 如下： 1) 供試品溶液的制備：取鐵皮石斛藥材，粉碎，過50目篩，精密稱取lg，置100ml圓底 燒瓶中，加入70ml 50%的乙醇，水浴回流提取3次，每次3小時，合并提取液，取其中的4ml 離心15min，轉速為10000r/min，精密量取上清液lml用甲醇稀釋10倍，即得供試品溶液； 2) 對照品溶液的制備：精密稱取毛蘭素對照品25. Omg，置于25ml容量瓶中，加甲醇 溶解，定容，精密量取毛蘭素標準溶液 〇. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9、1. 0、1. 1、1. 2、1. 3、1. 4、1. 5、 1. 6ml，分別置于25ml容量瓶中定容，即得對照品溶液； 3) 測定法：以甲醇為空白參比溶劑；按照紫外分光光度法在280nm波長處測吸光度，空 白溶液無干擾；用標準曲線法計算含量，以吸光度為縱坐標Y，毛蘭素濃度為橫坐標X進行 線性回歸，求得回歸方程式為A = 11. 002C+0. 018,線性范圍為0. 02mg/ml-0. 064mg/ml，相 關系數r = 0. 9997,線性關系良好。
4. 根據權利要求1-2任一所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，所述對 照品包括但不限于毛蘭素和二氫白藜蘆醇。
5. 根據權利要求2所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，所述中極性有 機溶劑包括但不限于二氯甲烷、乙酸乙酯、氯仿和丙酮，所述高濃度醇水系統包括但不限于 濃度為50% -95%的甲醇水溶液體系、乙醇水溶液體系和異丙醇水溶液體系。
6. 根據權利要求1-2任一所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，所述鐵 皮石斛藥材中的總聯節(jié)的含量不低于5%。
【文檔編號】G01N21/33GK104237151SQ201410542575
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年10月14日 優(yōu)先權日:2014年10月14日
【發(fā)明者】陳賢良 申請人:寧波楓康生物科技有限公司