本發(fā)明涉及檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種利用頂空-氣相質(zhì)譜的三乙酸甘油酯中苯及苯系物的內(nèi)標(biāo)測(cè)定方法。

背景技術(shù)：
三乙酸甘油酯施加于絲束制備成為濾棒，接裝成卷煙。三乙酸甘油酯的質(zhì)量，不但對(duì)濾棒生產(chǎn)加工過(guò)程以及影響濾棒的物理指標(biāo)，而且對(duì)卷煙的品質(zhì)及吃味、消費(fèi)者的身體健康也產(chǎn)生影響。目前工業(yè)上生產(chǎn)三乙酸甘油酯通常采用酸催化合成法，為了使反應(yīng)向生產(chǎn)三乙酸甘油酯的方向移動(dòng)，會(huì)加入苯以及苯系物。三乙酸甘油酯中苯及苯系物含量的測(cè)定對(duì)于三乙酸甘油酯的質(zhì)量、對(duì)濾棒和卷煙品質(zhì)和吃味、消費(fèi)者的健康方面均具有重要的意義。公開(kāi)號(hào)為102854279的中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)了一種測(cè)定煙用三乙酸甘油酯中苯及苯系物含量的方法，以2-己酮為內(nèi)標(biāo)物，用正戊烷作溶劑，制備內(nèi)標(biāo)萃取液，樣品溶液的制備是采用內(nèi)標(biāo)萃取液超聲提取煙用三乙酸甘油酯樣品，靜置后取上層清液作為樣品溶液，用氣相色譜質(zhì)譜儀對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣品溶液進(jìn)行檢測(cè)分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行結(jié)果計(jì)算。該方法樣品處理繁瑣，耗時(shí)較長(zhǎng)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)三乙酸甘油酯，提供一種利用頂空-氣相質(zhì)譜的三乙酸甘油酯中苯及苯系物的內(nèi)標(biāo)測(cè)定方法，樣品的前處理更為簡(jiǎn)單快速，誤差較小，具有很好的線性相關(guān)性，靈敏度高、重復(fù)性好、回收率高等優(yōu)點(diǎn)，實(shí)用性好。本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：提供一種利用頂空-氣相質(zhì)譜的三乙酸甘油酯中苯及苯系物的內(nèi)標(biāo)測(cè)定方法，從溶劑和基質(zhì)校正劑的選擇確定、內(nèi)標(biāo)溶液的制備、標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備，樣品溶液的前處理和進(jìn)樣方式、氣相色譜質(zhì)譜分析綜合條件等方面進(jìn)行細(xì)致的優(yōu)化，經(jīng)優(yōu)化后的檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單準(zhǔn)確，有效減少了現(xiàn)有方法樣品前處理所帶來(lái)的誤差，保證了苯、甲苯、乙苯、鄰二甲苯、間二甲苯和對(duì)二甲苯的色譜峰更好的分離效果，并具有較好的線性相關(guān)性，靈敏度高、重復(fù)性好、回收率高等優(yōu)點(diǎn)，實(shí)用性好。具體地，所述方法包括以下步驟：S1.標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備：以色譜純?nèi)宜岣视王槿軇?，逐?jí)稀釋配置苯、甲苯、乙苯、鄰二甲苯、間二甲苯和對(duì)二甲苯的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加適量濃度的內(nèi)標(biāo)物；S2.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液經(jīng)頂空處理后，選用苯及苯系物的特征離子，采用氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)分析，以每一種待測(cè)物物質(zhì)色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值Y為縱坐標(biāo)、其相應(yīng)質(zhì)量濃度X（μg/mL）為橫坐標(biāo)進(jìn)行回歸分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；S3.檢測(cè)樣品：以與S2相同的檢測(cè)條件，將待測(cè)樣品溶液經(jīng)頂空處理后采用氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)分析，測(cè)得待測(cè)樣品溶液中苯及苯系物色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值，代入S2所得標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得樣品中苯及苯系物的含量（μg/mL）；所述待測(cè)樣品溶液的配制方法為在待測(cè)三乙酸甘油酯樣品中添加與標(biāo)準(zhǔn)溶液相同濃度的內(nèi)標(biāo)物2-己酮即得。其中，S1所述內(nèi)標(biāo)物為2-己酮；S2和S3所述頂空處理的條件為：頂空儀樣品平衡溫度：80℃；樣品環(huán)溫度：100℃；傳輸線溫度：120℃；平衡時(shí)間：30min；樣品環(huán)體積：3.0ml；加壓壓力：20.0psi（138kPa）；加壓時(shí)間：0.2min；充氣時(shí)間：0.2min。樣品環(huán)平衡時(shí)間：0.05min；進(jìn)樣時(shí)間：1.0min；S2所述檢測(cè)分析的條件為：色譜柱：HP-INNOWAX(60m×0.25mm，0.25μm)；進(jìn)樣口溫度：200℃；載氣：高純氦氣，純度≥99.999%；流速：1.0mL/min(恒流模式)；分流比:5:1；升溫程序：升溫程序:初始溫度40℃，保持3min，以10℃/min升到130℃，保持3min，再以20℃/min升至200℃，保持5min；傳輸線溫度：240℃；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；溶劑延遲：2.5min；電離方式：EI源；電離能量：70eV，離子監(jiān)測(cè)。優(yōu)選地，S1所述逐級(jí)稀釋配制成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法為：準(zhǔn)確稱(chēng)取苯、甲苯、乙苯、鄰二甲苯、間二甲苯和對(duì)二甲苯各100mg于50mL容量瓶，用色譜純的三乙酸甘油酯定容，得2mg/mL的一級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；移取50μL定容至10mL，得到各組分濃度分別為10ug/mL二級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。準(zhǔn)確移取10ug/mL二級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10、20、40、100、200、500μL于6只10mL容量瓶中，分別加入5μL濃度為2mg/mLIS溶液，并用色譜純?nèi)宜岣视王ザㄈ葜?0mL，得到濃度分別為0.01、0.02、0.04、0.1、0.2、0.5μg/mL和IS濃度為1.0μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。具體地，內(nèi)標(biāo)液的配制方法為：準(zhǔn)確稱(chēng)取0.05g2–己酮（IS）于25mL容量瓶，用色譜純的三乙酸甘油酯定容，得2mg/mLIS溶液。具體地，樣品溶液制備方法為：加入5μL濃度為2mg/mLIS溶液到10mL容量瓶中，用待測(cè)三乙酸甘油酯樣品定容。準(zhǔn)確移取上述樣品1.0mL于頂空瓶中，迅速密封待測(cè)，每個(gè)樣品測(cè)定兩次，平均測(cè)量結(jié)果其相對(duì)平均偏差應(yīng)小于10%。優(yōu)選地，S3所述檢測(cè)分析采用的特征離子為：化合物目標(biāo)離子（m/z）輔助定量離子（m/z）苯7851甲苯91512-己酮58100乙苯91106對(duì)二甲苯91106間二甲苯91106鄰二甲苯91106優(yōu)選地，S2所述使用頂空儀進(jìn)行樣品前處理的方法為準(zhǔn)確移取1.0mL樣品于10mL頂空瓶中，添加與標(biāo)準(zhǔn)溶液相同濃度的內(nèi)標(biāo)物2-己酮，在頂空儀中平衡30min后，導(dǎo)入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中待測(cè)。優(yōu)選地，S2所述標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，每級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液平行測(cè)定２次，取平均值。優(yōu)選地，S3所述檢測(cè)樣品是每個(gè)樣品測(cè)定兩次，平均測(cè)量結(jié)果其相對(duì)平均偏差應(yīng)小于10%。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明利用頂空-氣相質(zhì)譜方法測(cè)定三乙酸甘油酯中苯及苯系物，在樣品溶劑的選擇方面，創(chuàng)造性地確定了以色譜純?nèi)宜岣视王槿軇?，在本發(fā)明中，選用色譜純的三乙酸甘油酯作為標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的溶劑，同時(shí)又用作頂空測(cè)定方法的基質(zhì)校正劑，而測(cè)定樣品時(shí)，三乙酸甘油酯既作為溶劑，又是基質(zhì)校正劑。這樣做大大簡(jiǎn)化了前處理步驟、操作簡(jiǎn)單，解放了人力，減少了繁瑣的操作。進(jìn)一步地，本發(fā)明確定了科學(xué)的頂空處理?xiàng)l件，完成樣品溶液的處理，樣品經(jīng)本發(fā)明頂空儀科學(xué)合理的處理后，直接導(dǎo)入氣相色譜質(zhì)譜分析，有效減少了因?yàn)榍疤幚硭鶐?lái)的誤差和操作上的繁瑣，與現(xiàn)有分析檢測(cè)方法的樣品前處理方法相比較，處理時(shí)間也大大減少。在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明提供了整體技術(shù)方案，采用內(nèi)標(biāo)法定量，結(jié)合色譜純?nèi)宜岣视王槿軇悠非疤幚矸椒ǖ葍?yōu)化措施，進(jìn)一步針對(duì)性優(yōu)化了檢測(cè)色譜條件，保證了苯、甲苯、乙苯、鄰二甲苯、間二甲苯和對(duì)二甲苯的色譜峰分離較好，并具有較好的線性相關(guān)性。本發(fā)明方法苯及苯系物的檢測(cè)限為0.01ug/mL，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.4～3.6%之間，回收率在84.1～98.3%之間。附圖說(shuō)明圖1苯的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖2甲苯的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖3乙苯的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖4對(duì)二甲苯的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖5間二甲苯的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖6鄰二甲苯的標(biāo)準(zhǔn)曲線。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明方法。下述實(shí)施例和附圖僅用于示例性說(shuō)明，不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制。除非特別說(shuō)明，下述實(shí)施例中使用的試劑原料為常規(guī)市購(gòu)或商業(yè)途徑獲得的生試劑原料，除非特別說(shuō)明，下述實(shí)施例中使用的方法和設(shè)備為本領(lǐng)域常規(guī)使用的方法和設(shè)備。實(shí)施例1：建立頂空-氣相質(zhì)譜的三乙酸甘油酯中苯及苯系物的內(nèi)標(biāo)測(cè)定方法S1.標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備：準(zhǔn)確稱(chēng)取苯、甲苯、乙苯、鄰二甲苯、間二甲苯和對(duì)二甲苯各100mg于50mL容量瓶，用色譜純的三乙酸甘油酯定容，得2mg/mL的一級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；移取50μL定容至10mL，得到各組分濃度分別為10ug/mL二級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。準(zhǔn)確移取10ug/mL二級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10、20、40、100、200、500μL于6只10mL容量瓶中，分別加入5μL濃度為2mg/mLIS溶液，并用色譜純?nèi)宜岣视王ザㄈ葜?0mL，得到濃度分別為0.01、0.02、0.04、0.1、0.2、0.5μg/mL和IS濃度為1.0μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。S2.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液經(jīng)頂空處理后，選用苯及苯系物的特征離子，采用氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)分析，以每一種待測(cè)物物質(zhì)色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值Y為縱坐標(biāo)、其相應(yīng)質(zhì)量濃度X（μg/mL）為橫坐標(biāo)進(jìn)行回歸分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；頂空儀樣品平衡溫度：80℃；樣品環(huán)溫度：100℃；傳輸線溫度：120℃；平衡時(shí)間：30min；樣品環(huán)體積：3.0ml；加壓壓力：20.0psi（138kPa）；加壓時(shí)間：0.2min；充氣時(shí)間：0.2min。樣品環(huán)平衡時(shí)間：0.05min；進(jìn)樣時(shí)間：1.0min。S3.檢測(cè)樣品：以與S2相同的檢測(cè)條件，將待測(cè)樣品溶液經(jīng)頂空處理后采用氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)分析，測(cè)得待測(cè)樣品溶液中苯及苯系物色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值，代入S2所得標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得樣品中苯及苯系物的含量（μg/mL）；樣品溶液的制備：加入5μL濃度為2mg/mLIS溶液到10mL容量瓶中，用待測(cè)三乙酸甘油酯樣品定容。準(zhǔn)確移取上述樣品1.0mL于頂空瓶中，迅速密封待測(cè)。每個(gè)樣品測(cè)定兩次，平均測(cè)量結(jié)果其相對(duì)平均偏差應(yīng)小于10%。頂空儀樣品平衡溫度：80℃；樣品環(huán)溫度：100℃；傳輸線溫度：120℃；平衡時(shí)間：30min；樣品環(huán)體積：3.0ml；加壓壓力：20.0psi（138kPa）；加壓時(shí)間：0.2min；充氣時(shí)間：0.2min。樣品環(huán)平衡時(shí)間：0.05min；進(jìn)樣時(shí)間：1.0min。氣相色譜-質(zhì)譜分析條件：色譜柱：HP-INNOWAX(60m×0.25mm，0.25μm)；進(jìn)樣口溫度：200℃；載氣：高純氦氣，純度≥99.999%；流速：1.0mL/min(恒流模式)；分流比:5:1；升溫程序：升溫程序:初始溫度40℃，保持3min，以10℃/min升到130℃，保持3min，再以20℃/min升至200℃，保持5min；傳輸線溫度：240℃；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；溶劑延遲：2.5min；電離方式：EI源；電離能量：70eV。選擇離子監(jiān)測(cè)（SIM）監(jiān)測(cè)。每級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液平行測(cè)定２次，取平均值。以每一種待測(cè)物物質(zhì)色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值Y為縱坐標(biāo)、其相應(yīng)質(zhì)量濃度X（μg/mL）為橫坐標(biāo)進(jìn)行回歸分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。附圖1至6分別為苯、甲苯、乙苯、對(duì)二甲苯、間二甲苯、鄰二甲苯的標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程分別如表1所示：表1化合物線性方程線性濃度范圍（ug/mL）苯Y(jié)=2.705X-0.016780.01-0.5甲苯Y(jié)=2.957X-0.012540.01-0.5乙苯Y(jié)=3.357X-0.016890.01-0.5對(duì)二甲苯Y(jié)=2.93X-0.01850.01-0.5間二甲苯Y(jié)=2.85X-0.014810.01-0.5鄰二甲苯Y(jié)=2.248X-0.010380.01-0.5將相同條件下測(cè)得的樣品溶液中的6種苯及苯系物色譜峰面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得樣品中苯及苯系物的含量（ug/mL）。每個(gè)樣品測(cè)定兩次，平均測(cè)量結(jié)果其相對(duì)平均偏差應(yīng)小于10%。表2特征離子化合物目標(biāo)離子（m/z）輔助定量離子（m/z）苯7851甲苯91512-己酮58100乙苯91106對(duì)二甲苯91106間二甲苯91106鄰二甲苯91106實(shí)施例2實(shí)際應(yīng)用例其他操作及條件同實(shí)施例1，隨機(jī)選取5個(gè)三乙酸甘油酯樣品為檢測(cè)分析對(duì)象，其他操作同實(shí)施例1。檢測(cè)結(jié)果如表3所示：表3樣品中苯及苯系物檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性和回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4所示：表4檢測(cè)結(jié)果化合物檢測(cè)限(ug/mL)回收率（%）RSD（%,n=6）苯0.0191.02.7甲苯0.0194.21.4乙苯0.0198.33.1對(duì)二甲苯0.0195.01.5間二甲苯0.0184.12.3鄰二甲苯0.0197.03.6本發(fā)明確定了科學(xué)的頂空處理?xiàng)l件，完成樣品溶液的處理，樣品經(jīng)本發(fā)明頂空儀科學(xué)合理的處理后，直接導(dǎo)入氣相色譜質(zhì)譜分析，有效減少了因?yàn)榍疤幚硭鶐?lái)的誤差和操作上的繁瑣，與現(xiàn)有分析檢測(cè)方法的樣品前處理方法相比較，處理時(shí)間也大大減少。在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明提供了整體技術(shù)方案，采用內(nèi)標(biāo)法定量，結(jié)合以色譜純?nèi)宜岣视王ネ瑫r(shí)作為溶劑和基質(zhì)校正劑的處理、樣品前處理方法改進(jìn)等措施，針對(duì)性優(yōu)化了檢測(cè)色譜條件，保證了苯、甲苯、乙苯、鄰二甲苯、間二甲苯和對(duì)二甲苯的色譜峰分離較好，并具有較好的線性相關(guān)性。由表4可見(jiàn)，本發(fā)明方法苯及苯系物的檢測(cè)限為0.01ug/mL，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.4～3.6%之間，回收率在84.1～98.3%之間。