一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒及其使用方法，包括如下步驟:（1）樣品的制備：稱(chēng)取2.5g蜂蜜樣品于小燒杯中，加入10mL蒸餾水?dāng)噭蚝螅貌ＡО魧⑵滢D(zhuǎn)入50mL的容量瓶，加蒸餾水定容至刻度，搖勻；（2）顯色：取1.00mL待測(cè)樣品于具塞刻度試管中，然后向試管中加入1.0mL試劑Ⅰ，塞緊瓶蓋，放在沸水中加熱15min后馬上取出，加入5mL試劑Ⅱ顯色5min;（3）檢測(cè):通過(guò)顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對(duì)比，確定出脯氨酸的含量值。本發(fā)明顯色體系穩(wěn)定、快速、操作簡(jiǎn)便，適合于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)蜂蜜中的脯氨酸含量。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明具體涉及一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒及其使用方法，屬于食品質(zhì)量安全檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]蜂蜜中雖然含有很多種氨基酸，然而只有脯氨酸才能作為衡量蜂蜜質(zhì)量的指標(biāo)之一。蜂蜜中脯氨酸的含量比總酚及總黃酮的還要高，并且脯氨酸的含量與酚類(lèi)化合物濃度成正比。因此，脯氨酸不僅具有抗氧化性，可以用來(lái)衡量蜂蜜的抗氧化性，而且也可以為檢測(cè)蜂蜜質(zhì)量指標(biāo)提供科學(xué)依據(jù)。目前國(guó)內(nèi)外檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的方法主要有分光光度法和色譜法。以上方法雖然較準(zhǔn)確，但耗時(shí)，并且對(duì)設(shè)備和檢測(cè)人員的技術(shù)要求較高，無(wú)法在基層部門(mén)得到廣泛應(yīng)用。因此，本發(fā)明在前人對(duì)蜂蜜中脯氨酸含量檢測(cè)技術(shù)研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)優(yōu)化顯色體系中各組成成分的濃度和體積，制備了試劑盒及包含多種顏色的脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)比色卡，旨在建立一種對(duì)蜂蜜中的脯氨酸含量進(jìn)行簡(jiǎn)單、快速測(cè)定的方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是在于提供一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒及其使用方法，能夠現(xiàn)場(chǎng)完成對(duì)蜂蜜中脯氨酸的快速測(cè)定，具有所用顯色體系穩(wěn)定、操作簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為:
一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒，由試劑I和試劑II組成；所述試劑I由茚三酮、甲酸和乙二醇甲醚組成，所述試劑II由丙酮組成。
[0005]所述試劑I中茚三酮的濃度為2wt.%，甲酸和乙二醇甲醚的體積比為1:1。
[0006]快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒的使用方法，包括以下步驟:
(1)樣品的制備:稱(chēng)取2.5g蜂蜜樣品于小燒杯中，加入1mL蒸餾水?dāng)噭蚝?，用玻璃棒將其轉(zhuǎn)入50mL的容量瓶，加蒸餾水定容至刻度，搖勻；
(2)顯色:取1.0OmL待測(cè)樣品于具塞刻度試管中,然后向試管中加入1.0mL試劑I ,塞緊瓶蓋，放在沸水中加熱15min后馬上取出，加入5mL試劑II顯色5min。
[0007](3)檢測(cè):通過(guò)顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對(duì)比，確定出脯氨酸的含量值。
[0008]上述步驟(2)中所述的比色管為25mL具塞比色管,管徑2cm,管高15 cm;上述步驟(3)中所述的比色卡，在常溫下，將一系列脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液按上述中所述的步驟顯色，根據(jù)所獲顏色，制成比色卡，比色卡對(duì)應(yīng)的脯氨酸含量范圍為0-50 (mg/100g)。
[0009]本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明研制的蜂蜜中脯氨酸含量快速檢測(cè)的試劑盒和方法，其顯著特點(diǎn)是:1.顯色體系穩(wěn)定，通過(guò)篩選，把國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法中所使用的異丙醇換成丙酮后，有效克服了之前顯色體系不穩(wěn)定的缺點(diǎn)，從而大大提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性；2.本發(fā)明借助比色卡對(duì)照檢測(cè)，不需要分光光度計(jì)等儀器設(shè)備，操作簡(jiǎn)便，便于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)；3.本方法快速、操作簡(jiǎn)便。該方法適合于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)蜂蜜中的脯氨酸含量，是快速判斷蜂蜜產(chǎn)品質(zhì)量水平的重要依據(jù)之一。
[0010]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1:
比色卡的制作方法
(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備:準(zhǔn)確吸取25μ g/mL脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、
1.0mL(相當(dāng)于蜂蜜中脯氨酸的含量分別為0、10、20、30、40、50 mg/100g)到六支具塞刻度試管中，加蒸餾水補(bǔ)足體積到ImL;
(2)顯色:向試管中加入1.0mL試劑I，塞緊瓶蓋，放在沸水中加熱15min后馬上取出，加入5mL試劑II顯色5min。根據(jù)所獲顏色，制成比色卡，比色卡對(duì)應(yīng)的脯氨酸的含量范圍為0-50 (mg/100g)ο
[0011]實(shí)際樣品測(cè)定
(1)樣品的制備:稱(chēng)取2.5g龍眼蜜于小燒杯中，加入1mL蒸餾水?dāng)噭蚝?，用玻璃棒將其轉(zhuǎn)入50mL的容量瓶，加蒸餾水定容至刻度，搖勻；
(2)顯色:取1.0OmL待測(cè)樣品于具塞刻度試管中,然后向試管中加入1.0mL試劑I ,塞緊瓶蓋，放在沸水中加熱15min后馬上取出，加入5mL試劑II顯色5min;
(3)檢測(cè):通過(guò)顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對(duì)比，其顏色介于脯氨酸含量為10 (mg/100g)和20 (mg/100g)的色澤之間，故確定蜂蜜樣品中的脯氨酸含量為15
(mg/100g) ο
[0012]實(shí)施例2:
比色卡的制作方法(同實(shí)例I)
實(shí)際樣品測(cè)定
(1)樣品的制備:稱(chēng)取2.5g野桂花蜜于小燒杯中，加入1mL蒸餾水?dāng)噭蚝?，用玻璃棒將其轉(zhuǎn)入50mL的容量瓶，加蒸餾水定容至刻度，搖勻；
(2)顯色:取1.0OmL待測(cè)樣品于具塞刻度試管中,然后向試管中加入1.0mL試劑I ,塞緊瓶蓋，放在沸水中加熱15min后馬上取出，加入5mL試劑II顯色5min;
(3)檢測(cè):通過(guò)顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對(duì)比，其顏色與脯氨酸含量為40(mg/100g)的色澤相近，故確定蜂蜜樣品中的脯氨酸含量為40 (mg/100g)。
【權(quán)利要求】
1.一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒，其特征在于:由試劑I和試劑II組成；所述試劑I由茚三酮、甲酸和乙二醇甲醚組成，所述試劑II由丙酮組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒，其特征在于:所述試劑I中茚三酮的濃度為2wt.%，甲酸和乙二醇甲醚的體積比為1:1。
3.—種如權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒的使用方法，其特征在于包括以下步驟: (1)樣品的制備:稱(chēng)取2.5g蜂蜜樣品于小燒杯中，加入1mL蒸餾水?dāng)噭蚝?，用玻璃棒將其轉(zhuǎn)入50mL的容量瓶，加蒸餾水定容至刻度，搖勻； (2)顯色:取1.0OmL待測(cè)樣品于具塞刻度試管中,然后向試管中加入1.0mL試劑I ,塞緊瓶蓋，放在沸水中加熱15min后馬上取出，加入5mL試劑II顯色5min ； (3)檢測(cè):通過(guò)顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對(duì)比，確定出脯氨酸的含量值。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒的使用方法，其特征在于:比色管為25mL具塞比色管,管徑2cm,管高15 cm。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種快速檢測(cè)蜂蜜中脯氨酸含量的試劑盒的使用方法，其特征在于:所述比色卡的制備方法為在常溫下，將一系列脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液按權(quán)利要求3中所述步驟顯色，根據(jù)所獲顏色，制成比色卡，比色卡對(duì)應(yīng)的脯氨酸含量范圍為0-50mg/100g。
【文檔編號(hào)】G01N21/78GK104359900SQ201410619143
【公開(kāi)日】2015年2月18日 申請(qǐng)日期:2014年11月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月7日
【發(fā)明者】張金彪, 張素平, 周碧青 申請(qǐng)人:福建農(nóng)林大學(xué)