一種痕量三嗪類除草劑的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明的一種痕量三嗪類除草劑的檢測方法屬于分析化學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明提供的檢測方法，以稀釋的待測樣品作為待測液；在待測液中加入1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽，超聲分散后向待測液中加入羰基鐵粉，振搖后用磁鐵磁性分離，得到吸附鐵粉；向吸附鐵粉中加入二次蒸餾水和弱極性有機(jī)試劑，振搖分層，將上層試劑轉(zhuǎn)移至試管中，用氮?dú)獯蹈?，加入乙腈振搖，得到進(jìn)樣溶液；用超快速液相色譜儀測定所述進(jìn)樣溶液的色譜圖，根據(jù)色譜峰面積A與三嗪類除草劑濃度c的回歸方程定量分析待測樣品中三嗪類除草劑的濃度。本發(fā)明的檢測方法操作簡單，重現(xiàn)性良好，靈敏度高，可實(shí)現(xiàn)痕量三嗪類除草劑的檢測，具有良好的應(yīng)用前景。
【專利說明】一種痕量三嗪類除草劑的檢測方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及分析化學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種痕量三嗪類除草劑的檢測方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 三嗪類除草劑是一類通過影響光合作用抑制雜草的農(nóng)藥，廣泛用于清除玉米、大 豆、高粱等農(nóng)作物的雜草。在20世紀(jì)50年代三嗪類除草劑被推出，我國從上世紀(jì)80年代 開始使用，近年來已經(jīng)成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)主要除草劑品種之一。由于其性質(zhì)穩(wěn)定，并且能夠穩(wěn)定 存在于農(nóng)作物中，多種農(nóng)產(chǎn)品已經(jīng)檢測出三嗪類除草劑的殘留。研究表明，三嗪類除草劑易 導(dǎo)致癌癥、新生兒畸形以及影響內(nèi)分泌系統(tǒng)。
[0003] 植物油是由不飽和脂肪酸和甘油化合而成的化合物，是從植物的果實(shí)、種子、胚芽 等部位提取得到的油脂，如大豆、花生、橄欖、椰子及玉米。殘存在植物不同部位的三嗪類除 草劑會在壓榨植物油的過程中累積到植物油中，進(jìn)而影響人體健康。歐盟已對多種農(nóng)產(chǎn)品 中三嗪類除草劑的最大殘留標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行限量，其中對于油料種子的限量為50?100ng/g。因 此，有必要提出一種有效的方法應(yīng)對植物油中痕量三嗪類除草劑的提取及檢測。
[0004] 常見的三嗪類除草劑提取方法有液-液提取法、固相萃取法、冷凍沉淀法、基質(zhì)固 相分散法、超臨界流體萃取法、磁性固相萃取等方法。也可以多種提取方法以聯(lián)用，以得到 更好的凈化效果。但很多方法都存在操作復(fù)雜、耗時長及有機(jī)試劑用量大等缺點(diǎn)。因此，開 發(fā)出一種操作簡單、節(jié)省時間、低有機(jī)試劑消耗的前處理方法，有利于植物油中三嗪類除草 劑的富集及分析。
[0005] 目前，常用的檢測三嗪類除草劑的方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相 色譜-質(zhì)譜法、液相色譜-質(zhì)譜法及毛細(xì)管電泳等方法。色譜法及色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是 目前應(yīng)用最為廣泛的一類檢測方法。
[0006] 因此，如何實(shí)現(xiàn)痕量三嗪類除草劑的高靈敏、高重現(xiàn)、易操作及低成本的檢測的方 法，是目前急需解決的關(guān)鍵性技術(shù)問題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種檢測痕量三嗪類除草劑的色譜方法。
[0008] 本發(fā)明采用的具體技術(shù)方案如下：
[0009] -種痕量三嗪類除草劑的檢測方法，將1毫升待測樣品與7毫升正己烷混合后搖 勻，得到待測液；向所述待測液中加入70?110微升1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽，超聲分 散3?7分鐘；超聲分散后向待測液中加入200?500毫克羰基鐵粉，振搖30秒后用磁鐵磁 性分離，得到吸附鐵粉；向所述吸附鐵粉中加入二次蒸餾水和弱極性有機(jī)試劑，振搖30秒 后分層，將上層試劑轉(zhuǎn)移至試管中，用氮?dú)獯蹈?，加?00微升乙腈振搖30秒，得到進(jìn)樣溶 液；用超快速液相色譜儀測定所述進(jìn)樣溶液的色譜圖，根據(jù)色譜峰面積A與三嗪類除草劑 濃度c的回歸方程定量分析待測樣品中三嗪類除草劑的濃度；所述弱極性有機(jī)試劑為石油 醚、二氯甲烷或乙酸乙酯；弱極性有機(jī)試劑、二次蒸餾水及待測樣品的體積比為1?5:3:2。
[0010] 所述超快速液相色譜儀色譜條件為：流動相分別為乙腈和水；梯度洗脫程序：〇? IOmin,水的體積分?jǐn)?shù)從80%減少到70% ;10?18min，水的體積分?jǐn)?shù)從70%減少到40% ; 18?2511^11，水的體積分?jǐn)?shù)從40%增大到80%;流速為1.0111171^11;進(jìn)樣體積為101^ ;檢 測波長為220nm;當(dāng)待測樣品中含有氰草津時，所述回歸方程為A1 = 190.0C-120. 2(r = 0. 9994)，線性范圍10. O?1000. Ong/g ;當(dāng)待測樣品中含有敵草凈時，所述回歸方程為A2 = 401. lc-502. 0(r = 0. 9992)，線性范圍10. 0?1000. Ong/g ;當(dāng)待測樣品中含有密草通時， 所述回歸方程為 A3 = 460. 2c+3100 (r = 0· 9995)，線性范圍 KX 0 ?1000. Ong/g。 toon] 所述回歸方程通過下述方法得到：將氰草津、敵草凈和密草通加標(biāo)濃度分別為 10, 25, 50,100, 200, 500, 750,1000ng/g的樣品，進(jìn)行前處理，用超快速液相色譜儀測定進(jìn)樣 溶液的色譜圖，進(jìn)行定量分析；不同濃度下，根據(jù)三種三嗪類農(nóng)藥的色譜峰面積A與濃度c 建立回歸方程。
[0012] 本發(fā)明的三嗪類除草劑的檢測方法針對痕量三嗪類除草劑進(jìn)行檢測，樣品的前處 理方式簡單，使用綠色環(huán)保的1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽作為萃取溶劑，環(huán)境友好；線 性范圍為10. 0?1000. 〇ng/g，線性范圍廣；線性相關(guān)系數(shù)大于0. 9990,線性關(guān)系良好；靈 敏度高，檢出限為2. 6?2. 9ng/g，定量限為8. 7?9. 7ng/g，精密度高，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于 10%，重現(xiàn)性良好；實(shí)際樣品測定回收率良好，適用于痕量三嗪類除草劑的定量檢測，具有 良好的應(yīng)用前景。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0013] 圖1實(shí)施例1中1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽用量選擇圖。
[0014] 圖2實(shí)施例2中超聲提取時間選擇圖。
[0015] 圖3實(shí)施例3中羰基鐵粉用量的選擇圖。
[0016] 圖4實(shí)施例3中乙酸乙酯用量選擇圖。
[0017] 圖5實(shí)施例4中弱極性有機(jī)試劑的選擇圖。
[0018] 圖6實(shí)施例6中空白樣品和加標(biāo)樣品色譜圖。

【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面通過【具體實(shí)施方式】來說明本發(fā)明，但并不限于此。
[0020] 在實(shí)施例1?6中，均采用加標(biāo)濃度為IOOng g_1的大豆油樣品，平行測定3次，優(yōu) 化前處理?xiàng)l件，通過色譜峰面積強(qiáng)度考察最優(yōu)條件。
[0021] 實(shí)施例1
[0022] 將1毫升大豆油與7毫升正己烷混合后搖勻，得到待測液；向所述待測液中加入 70?110微升1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽，超聲分散5分鐘；超聲分散后向待測液中加 入400毫克羰基鐵粉，振搖30秒后用磁鐵磁性分離，得到吸附鐵粉；向所述吸附鐵粉中加入 1. 5毫升二次蒸餾水和1. 5毫升乙酸乙酯，振搖30秒后分層，將上層試劑轉(zhuǎn)移至試管中，用 氮?dú)獯蹈?，加?00微升乙腈振搖30秒，得到進(jìn)樣溶液；用超快速液相色譜儀測定所述進(jìn)樣 溶液的色譜圖。1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽的用量對目標(biāo)分析物的峰面積的影響如圖1 所示。在70?110微升范圍內(nèi)，隨著1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽用量的增大，峰面積隨 之增大，當(dāng)用量大于90微升時，峰面積基本保持不變。因此，1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽 的最佳用量為90微升。
[0023] 實(shí)施例2
[0024] 將1毫升大豆油與7毫升正己烷混合后搖勻，得到待測液；向所述待測液中加入 90微升1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽，超聲分散3?7分鐘；超聲分散后向待測液中加入 400毫克羰基鐵粉，振搖30秒后用磁鐵磁性分離，得到吸附鐵粉；向所述吸附鐵粉中加入 1. 5毫升二次蒸餾水和1. 5毫升乙酸乙酯，振搖30秒后分層，將上層試劑轉(zhuǎn)移至試管中，用 氮?dú)獯蹈?，加?00微升乙腈振搖30秒，得到進(jìn)樣溶液；用超快速液相色譜儀測定所述進(jìn)樣 溶液的色譜圖。超聲提取時間對目標(biāo)分析物的峰面積的影響如圖2所示。在3?5分鐘范 圍內(nèi)，隨著超聲萃取時間的延長，峰面積隨之增大，當(dāng)超聲時間大于5分鐘時，峰面積基本 保持不變。因此超聲提取最佳時間為5分鐘。
[0025] 實(shí)施例3
[0026] 將1毫升大豆油與7毫升正己烷混合后搖勻，得到待測液；向所述待測液中加 入90微升1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽，超聲分散5分鐘；超聲分散后向待測液中加入 200?500毫克羰基鐵粉，振搖30秒后用磁鐵磁性分離，得到吸附鐵粉；向所述吸附鐵粉中 加入1. 5毫升二次蒸餾水和1. 5毫升乙酸乙酯，振搖30秒后分層，將上層試劑轉(zhuǎn)移至試管 中，用氮?dú)獯蹈桑尤?00微升乙腈振搖30秒，得到進(jìn)樣溶液；用超快速液相色譜儀測定所 述進(jìn)樣溶液的色譜圖。羰基鐵粉用量對目標(biāo)分析物的峰面積的影響如圖3所示。在200? 500毫克范圍內(nèi)，隨著羰基鐵粉用量的增加，峰面積隨之增大，當(dāng)用量大于400毫克時，峰面 積基本保持不變。因此羰基鐵粉最佳用量為400毫克。
[0027] 實(shí)施例4
[0028] 將1毫升大豆油與7毫升正己烷混合后搖勻，得到待測液；向所述待測液中加 入90微升1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽，超聲分散5分鐘；超聲分散后向待測液中加入 200?500毫克羰基鐵粉，振搖30秒后用磁鐵磁性分離，得到吸附鐵粉；向所述吸附鐵粉中 加入1. 5毫升二次蒸餾水和1. 5毫升弱極性有機(jī)試劑（石油醚、二氯甲烷或乙酸乙酯），振 搖30秒后分層，將上層試劑轉(zhuǎn)移至試管中，用氮?dú)獯蹈?，加?00微升乙腈振搖30秒，得到 進(jìn)樣溶液；用超快速液相色譜儀測定所述進(jìn)樣溶液的色譜圖。弱極性有機(jī)試劑的種類對目 標(biāo)分析物的峰面積的影響如圖4所示。當(dāng)使用石油醚或二氯甲烷進(jìn)行萃取時，峰面積偏低， 使用乙酸乙酯進(jìn)行萃取時，峰面積良好。因此弱極性有機(jī)試劑選擇為乙酸乙酯。
[0029] 實(shí)施例5
[0030] 將1毫升大豆油與7毫升正己烷混合后搖勻，得到待測液；向所述待測液中加 入90微升1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽，超聲分散5分鐘；超聲分散后向待測液中加入 200?500毫克羰基鐵粉，振搖30秒后用磁鐵磁性分離，得到吸附鐵粉；向所述吸附鐵粉中 加入1. 5毫升二次蒸餾水和0. 5?2. 5毫升乙酸乙酯，振搖30秒后分層，將上層試劑轉(zhuǎn)移 至試管中，用氮?dú)獯蹈?，加?00微升乙腈振搖30秒，得到進(jìn)樣溶液；用超快速液相色譜儀 測定所述進(jìn)樣溶液的色譜圖。乙酸乙酯用量對目標(biāo)分析物的峰面積的影響如圖5所示。在 0. 5?1. 5毫升范圍內(nèi)，隨著乙酸乙酯用量的增加，峰面積隨之增大，當(dāng)用量大于1. 5毫升 時，峰面積基本保持不變。因此乙酸乙酯最佳用量為1. 5毫升。
[0031] 實(shí)施例6
[0032] 將1毫升大豆油與7毫升正己烷混合后搖勻，得到待測液；向所述待測液中加 入90微升1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽，超聲分散5分鐘；超聲分散后向待測液中加入 200?500毫克羰基鐵粉，振搖30秒后用磁鐵磁性分離，得到吸附鐵粉；向所述吸附鐵粉中 加入1. 5毫升二次蒸餾水和1. 5毫升乙酸乙酯，振搖30秒后分層，將上層試劑轉(zhuǎn)移至試管 中，用氮?dú)獯蹈?，加?00微升乙腈振搖30秒，得到進(jìn)樣溶液；用超快速液相色譜儀測定所 述進(jìn)樣溶液的色譜圖。積分保留時間分別為14. 5,16. 6,17. 3min處的色譜峰峰面積ApA2, A3，分析結(jié)果見表1。相應(yīng)空白樣品和加標(biāo)樣品色譜圖見圖6。
[0033] 表1大豆油樣品中三嗪類農(nóng)藥的保留時間及峰面積
[0034]

【權(quán)利要求】
1. 一種痕量三嗪類除草劑的檢測方法，其特征是，將1毫升待測樣品與7毫升正己烷混 合后搖勻，得到待測液；向所述待測液中加入70?110微升1-己基-3-甲基咪唑氯化鐵鹽， 超聲分散3?7分鐘；超聲分散后向待測液中加入200?500毫克羰基鐵粉，振搖30秒后 用磁鐵磁性分離，得到吸附鐵粉；向所述吸附鐵粉中加入二次蒸餾水和弱極性有機(jī)試劑，振 搖30秒后分層，將上層試劑轉(zhuǎn)移至試管中，用氮?dú)獯蹈?，加?00微升乙腈振搖30秒，得到 進(jìn)樣溶液；用超快速液相色譜儀測定所述進(jìn)樣溶液的色譜圖，根據(jù)色譜峰面積A與三嗪類 除草劑濃度c的回歸方程定量分析待測樣品中三嗪類除草劑的濃度；所述弱極性有機(jī)試劑 為石油醚、二氯甲烷或乙酸乙酯；弱極性有機(jī)試劑、二次蒸餾水及待測樣品的體積比為1? 5:3:2。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種痕量三嗪類除草劑的檢測方法，其特征是，所述超快速 液相色譜儀色譜條件為：流動相分別為乙腈和水；梯度洗脫程序：〇?l〇min，水的體積分 數(shù)從80%減少到70% ;10?18min，水的體積分?jǐn)?shù)從70%減少到40% ;18?25min，水的 體積分?jǐn)?shù)從40%增大到80%;流速為1.〇111171^11;進(jìn)樣體積為1〇111 ;檢測波長為22〇11111; 當(dāng)待測樣品中含有氰草津時，所述回歸方程為A1 = 190. 0c-120. 2, r = 0.9994,線性范圍 10. 0?1000. Ong/g ;當(dāng)待測樣品中含有敵草凈時，所述回歸方程為A2 = 401. lc-502. 0, r =0. 9992,線性范圍10. 0?1000. Ong/g ;當(dāng)待測樣品中含有密草通時，所述回歸方程為A3 =460. 2c+3100, r = 0? 9995,線性范圍 10. 0 ?1000. Ong/g。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種痕量三嗪類除草劑的檢測方法，其特征是，所述回歸方程 通過下述方法得到：將氰草津、敵草凈和密草通加標(biāo)濃度分別為10, 25, 50,100, 200, 500， 750,1000ng/g的樣品，進(jìn)行前處理，用超快速液相色譜儀測定進(jìn)樣溶液的色譜圖，進(jìn)行定量 分析；不同濃度下，根據(jù)三種三嗪類農(nóng)藥的色譜峰面積A與濃度c建立回歸方程。
【文檔編號】G01N30/02GK104316620SQ201410641520
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年11月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月12日
【發(fā)明者】宋大千, 孫穎, 王遠(yuǎn)鵬, 王興華 申請人:吉林大學(xué)