(mk-7)含量的測定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種維生素K2（MK-7）含量的測定方法，主要涉及維生素K2（MK-7）的樣品提取技術(shù)和色譜分離技術(shù)。該含量測定方法包括以下步驟:（1）樣品溶液的制備；（2）維生素K2（MK-7）含量測定：利用高效液相色譜技術(shù)對(duì)樣品溶液進(jìn)行測定，得到維生素Ｋ2（MK-7）色譜峰的峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算供試品中維生素K2（MK-7）的含量，并結(jié)合樣品的質(zhì)量，經(jīng)計(jì)算得到維生素K2（MK-7）的含量。該方法可以用于含有維生素K2（MK-7）保健食品、藥品、普通食品或預(yù)混料的含量快速測定，對(duì)含維生素K2（MK-7）的保健食品、藥品、普通食品或預(yù)混料的質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)，該含量測定方法準(zhǔn)確、快捷、方便、有效。
【專利說明】一種維生素K2 (MK-7)含量的測定方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于維生素K2 (MK-7)功效成分測定領(lǐng)域，具體地說，涉及一種保健食品、 藥品、普通食品或預(yù)混料中維生素1( 2 (MK-7)的含量的測定方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 維生素K2是一種脂溶性維生素，是一系列含有2-甲基-1，4-萘醌母核及C3位 帶有數(shù)目不等的異戊二烯結(jié)構(gòu)單元的萜烯側(cè)鏈化合物的統(tǒng)稱，其中最為重要的是維生素K 2(MK-5)、K^ (MK-7)，是人體中不可缺少的重要維生素之一。預(yù)防骨質(zhì)疏松作用的主要是維 生素K2(MK-7)。為保證產(chǎn)品質(zhì)量，其有效成分的含量測定就不能忽視。對(duì)食品中維生素K2 (MK-7)含量測定很少報(bào)道，尤其是復(fù)雜組分中的維生素1(2 (MK-7)的含量測定，國內(nèi)公開 報(bào)告僅有《反相高效液相色譜法測定納豆提取物中維生素K2(35)含量》（《中國藥品標(biāo)準(zhǔn)》 2010年第11卷第4期287頁)，該樣品處理方法和色譜條件均不適合復(fù)雜組分中微量維生 素1( 2 (MK-7)的含量測定，且回收率偏低，色譜過程溫度控制高達(dá)50°C，保留時(shí)間在25~ 35 分鐘,該色譜條件對(duì)色譜柱產(chǎn)生傷害較大，大大縮短了色譜柱的使用壽命，同時(shí)保留時(shí)間過 長，工作效率不高。因此，為了控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們對(duì)食品中的維生素K2(MK-7)含量測定進(jìn) 行了研究，為該類產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是針對(duì)上述檢測方法的不足，向質(zhì)量控制部門提供一種具有靈敏度 高、準(zhǔn)確度好、操作簡便、快速、應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)，適用于各類保健食品、藥品、普通食品或 預(yù)混料中維生素1( 2 (MK-7)含量的測定，從而建立一種快速簡便的維生素K2 (MK-7)快速 測定方法。
[0004] 為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案： 一種維生素K2 (MK-7)含量的測定方法，包括以下步驟： (1) 樣品溶液的配制： 取3. 0-5. 0g樣品于50ml棕色容量瓶中，加入30ml異丙醇，在45~55°C恒溫水浴鍋渦 旋振蕩〇. 5~1. 0小時(shí)，冷卻至室溫下，用異丙醇定容至刻度，搖勻，即為樣品溶液； (2) 高效液相色譜實(shí)驗(yàn)條件： 色譜柱：JADE-PAK0DS(150X4. 6mm，5um)或等效色譜柱； 流速：〇? 8~1. 5ml/min; 檢測波長：270nm; 流動(dòng)相：無水乙醇與乙腈的混合溶液，其中無水乙醇占比50。/『60% ; 進(jìn)樣量：10iil; 柱溫：35~45°C; 洗脫時(shí)間：20min; (3) 對(duì)照品溶液的配制：取維生素1(2(1?-7)對(duì)照品【CAS號(hào)：2124-57-4】，制成每1ml 分別含 1. 0yg、2. 0yg、4. 0i!g、6. 0i!g、8. 0i!g的對(duì)照品溶液； (4)維生素K2 (MK-7)含量測定： 高效液相色譜測定：不同濃度的對(duì)照品溶液分別以10Ul進(jìn)樣，測得各標(biāo)準(zhǔn)品溶液的 高效液相色譜峰面積；以所得各標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品峰面積為縱坐標(biāo)，各對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品濃度為橫 坐標(biāo)分別做標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別計(jì)算得線性回歸方程；然后對(duì)樣品溶液進(jìn)行高效液相色譜測定， 得到維生素K2 (MK-7)色譜峰的峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中維生素K2 (MK-7)的含 量，并結(jié)合樣品的質(zhì)量，經(jīng)計(jì)算得到維生素K2 (MK-7)的含量。
[0005] 所述步驟四中的維生素K2 (MK-7)含量的計(jì)算公式為：

【權(quán)利要求】
1. 一種維生素K2 (MK-7)含量的測定方法，其特征在于：包括以下步驟： (1) 樣品溶液的配制： 取3. 0-5.Og樣品于50ml棕色容量瓶中，加入30ml異丙醇，在45~55°C恒溫水浴鍋渦 旋振蕩〇. 5~1. 0小時(shí)，冷卻至室溫下，用異丙醇定容至刻度，搖勻，即為樣品溶液； (2) 高效液相色譜實(shí)驗(yàn)條件： 色譜柱：JADE-PAKODS(150X4. 6mm，5um)或等效色譜柱； 流速：〇· 8~1. 5ml/min; 檢測波長：270nm; 流動(dòng)相：無水乙醇與乙腈的混合溶液，其中無水乙醇占比50。/『60% ; 進(jìn)樣量：10μ1 ; 柱溫：35~45°C; 洗脫時(shí)間：20min; (3) 對(duì)照品溶液的配制：取維生素1(2 (MK-7)對(duì)照品【CAS號(hào)：2124-57-4】，制成每Iml 分別含 1. 〇μg、2. 0μg、4. 0μg、6. 0μg、8. 0μg的對(duì)照品溶液； (4) 維生素K2 (MK-7)含量測定： 高效液相色譜測定：不同濃度的對(duì)照品溶液分別以10μ1進(jìn)樣，測得各標(biāo)準(zhǔn)品溶液的 高效液相色譜峰面積；以所得各標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品峰面積為縱坐標(biāo)，各對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品濃度為橫 坐標(biāo)分別做標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別計(jì)算得線性回歸方程；然后對(duì)樣品溶液進(jìn)行高效液相色譜測定， 得到維生素K2 (ΜΚ-7)色譜峰的峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中維生素K2 (ΜΚ-7)的含 量，并結(jié)合樣品的質(zhì)量，經(jīng)計(jì)算得到維生素K2 (ΜΚ-7)的含量。
2. 如權(quán)利要求1所述的維生素K2 (ΜΚ-7)含量的測定方法，其特征在于：所述步驟四中 的維生素1(2 (ΜΚ-7)含量的計(jì)算公式為：
式中A樣：樣品溶液的維生素1(2峰面積； C:對(duì)照品溶液的濃度，μg/ml; A標(biāo)：對(duì)照品溶液的維生素1(2峰面積； W樣：樣品稱重，g。
3. 如權(quán)利要求1所述的維生素K2 (MK-7)含量的測定方法，其特征在于：所述的樣品溶 液經(jīng)0. 45um微孔濾膜過濾后再進(jìn)樣。
4. 如權(quán)利要求1所述的維生素K2 (MK-7)含量的測定方法，其特征在于：所述的步驟一 中的樣品為固體樣品則需先用研缽及研杵研磨成細(xì)粉后使用，若樣品為液體樣品則直接取 用，若樣品為膠囊樣品則取若干膠囊的內(nèi)容物，研磨混合均勻后使用。
5. 如權(quán)利要求1所述的維生素K2 (MK-7)含量的測定方法，其特征在于：所述方法適 用于含維生素K2 (MK-7)的片劑、維生素1(2 (MK-7)類硬膠囊、維生素1(2 (MK-7)類粉劑、維 生素K2 (MK-7)類軟膠囊、維生素K2 (MK-7)類滴劑、維生素K2 (MK-7)類丸劑、維生素K2 (MK-7)類軟糖、維生素K2 (MK-7)類飲料，產(chǎn)品可以是保健食品、藥品、普通食品或預(yù)混料。
【文檔編號(hào)】G01N30/88GK104458990SQ201410755707
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年12月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月11日
【發(fā)明者】張興, 高平, 張國棟, 夏旭東 申請(qǐng)人:江蘇艾蘭得營養(yǎng)品有限公司