一種抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，所述組合物由西洋參、蟾酥、天冬、土貝母、倒卵葉五加、獼猴桃根、沙棘果、佛手原料藥制成。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證表明，本發(fā)明提供的指紋圖譜檢測(cè)方法，可以全面、客觀、準(zhǔn)確的檢測(cè)和評(píng)價(jià)該組合物的質(zhì)量，確保其臨床療效。
【專利說明】一種抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，具體涉及一種具有抗腫瘤作用 的中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 天佛參口服液系用現(xiàn)代先進(jìn)工藝提煉精制而成的一種純天然中藥制劑，由常熟雷 允上制藥有限公司生產(chǎn)，具有養(yǎng)陰益氣，解毒散結(jié)的功效，與抗腫瘤化學(xué)藥品合用，用于非 小細(xì)胞肺癌屬氣陰兩虛證，可減輕化療所致的惡心、嘔吐、便秘、脫發(fā)等現(xiàn)象，臨床上得到的 廣泛的應(yīng)用，療效確切可靠。其中天佛參口服液由西洋參、蟾酥、天門冬、土貝母、倒卵葉五 力口、獼猴桃根、沙棘果、佛手8味藥材組成。其中倒卵葉五加、獼猴桃根、沙棘果為水提工藝 提取，西洋參、天門冬、土貝母為醇提工藝，總提取物中所含化合物極性涵蓋強(qiáng)極性和中等 極性范圍，現(xiàn)有技術(shù)的檢測(cè)方法，并不能全面、客觀的檢測(cè)和評(píng)價(jià)天佛參口服液的質(zhì)量。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]發(fā)明目的：本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種抗腫瘤中藥組合物的 指紋圖譜檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法可以客觀、全面、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)抗腫瘤中藥組合物的質(zhì)量，對(duì) 控制該抗腫瘤中藥組合物的內(nèi)在質(zhì)量與保證臨床療效具有重要意義。
[0004] 技術(shù)方案：為了實(shí)現(xiàn)以上技術(shù)目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：
[0005]-種抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，包括以下步驟：
[0006] (1)供試品溶液制備：取中藥組合物，經(jīng)適當(dāng)方法處理后制成供試品溶液，
[0007] (2)高效液相色譜法測(cè)定本品的對(duì)照指紋圖譜：取10批以上中藥組合物供試品在 適當(dāng)?shù)纳V條件下進(jìn)樣，測(cè)得各批次供試品的指紋圖譜，以這些指紋圖譜為基礎(chǔ)，用相似度 軟件計(jì)算獲得共有模式作為本品的對(duì)照指紋圖譜；
[0008] (3)高效液相色譜法測(cè)定供試品溶液指紋圖譜：取步驟⑴供試品溶液按步驟（2) 相同的色譜條件進(jìn)樣，測(cè)得供試品溶液的指紋圖譜；
[0009] (4)將步驟（3)得到的供試品溶液指紋圖譜和步驟⑵得到的對(duì)照指紋圖譜用相 似度軟件評(píng)價(jià)。
[0010] 作為優(yōu)選方案，以上所述的抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，步驟（1)中 供試品溶液制備方法為：用0. 22i!m的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液；或lOOOOrpm離心lOmin， 取上清液即得；
[0011] 步驟（2)中，所述的色譜條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲 醇為流動(dòng)相A，以體積濃度為0. 05'0. 1 %甲酸溶液為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度 洗脫；柱溫為35?40°C;流速為每分鐘0. 8?10ml;檢測(cè)波長(zhǎng)：270?290nm;
[0012]

【權(quán)利要求】
1. 一種抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，按重量份數(shù)計(jì)，所述的中藥組合物由 西洋參40?60份、蟾酥0. 22?0. 30份、天冬160?180份、土貝母190?210份、倒卵葉 五加560?620份、獼猴桃根900?1100份、沙棘果320?340份、佛手190?210份制成 口服液制劑，其特征在于，所述指紋圖譜檢測(cè)方法，包括以下步驟： (1) 供試品溶液制備：取中藥組合物，經(jīng)適當(dāng)方法處理后制成供試品溶液； (2) 高效液相色譜法測(cè)定本品的對(duì)照指紋圖譜：取10批以上中藥組合物供試品在適當(dāng) 的色譜條件下進(jìn)樣，測(cè)得各批次供試品的指紋圖譜，以這些指紋圖譜為基礎(chǔ)，用相似度軟件 計(jì)算獲得共有模式作為本品的對(duì)照指紋圖譜； (3) 高效液相色譜法測(cè)定供試品溶液指紋圖譜：取步驟（1)供試品溶液按步驟（2)相 同的色譜條件進(jìn)樣，測(cè)得供試品溶液的指紋圖譜； (4) 將步驟（3)得到的供試品溶液指紋圖譜和步驟（2)得到的對(duì)照指紋圖譜用相似度 軟件評(píng)價(jià)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于，所述 的中藥組合物由西洋參50份、蟾酥0. 25份、天冬167份、土貝母200份、倒卵葉五加599份、 獼猴桃根1000份、沙棘果333份、佛手167份制成口服液制劑。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于，步 驟（1)中供試品溶液制備方法為：用〇. 22μm的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液；或IOOOOrpm離心 IOmin,取上清液即得； 步驟（2)中，所述的色譜條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為 流動(dòng)相A，以體積濃度為0. 05?0. 1 %甲酸溶液為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗 脫；柱溫為35?40°C;流速為每分鐘0. 8?I.Oml;檢測(cè)波長(zhǎng)：270?290nm；
O
4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于，步 驟（1)中供試品溶液制備方法為：用〇. 22μm的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液；或IOOOOrpm離心 IOmin,取上清液即得； 步驟（2)中，所述的色譜條件為：色譜柱：Waters Atiantis T3,250_X4.6mmi.d., 5 μ m ;以甲醇為流動(dòng)相A，以體積濃度為0. 05%甲酸溶液為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行 梯度洗脫；柱溫為35°C :流諫為毎分鐘0.8ml
:給涮濾長(zhǎng)：270削： 〇
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于，步 驟（1)中供試品溶液制備方法為：精密吸取中藥組合物口服液制劑5.Oml上樣于經(jīng)預(yù)處理 的C18固相萃取柱中，加純水洗脫，棄去洗脫液，再加體積濃度20%甲醇溶液洗脫，棄去洗脫 液，加甲醇洗脫，洗脫液收集于量瓶中，IOOOOrpm離心10?15min，取上清液即得； 步驟（2)中，所述的色譜條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以含 0. 05%甲酸的乙腈為流動(dòng)相A，以體積濃度為0. 05?0. 1 %甲酸溶液為流動(dòng)相B，并按下表 中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；柱溫為30?35°C;流速為每分鐘0. 8?I.Oml;檢測(cè)波長(zhǎng)：203? 210nm；

O
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗腫瘤中藥組合物的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于，步 驟（1)中供試品溶液制備方法為：精密吸取本中藥組合物5.Oml上樣于經(jīng)預(yù)處理的C18固相 萃取柱中，加純水洗脫，棄去洗脫液，再加體積濃度20%甲醇溶液洗脫，棄去洗脫液，加甲醇 洗脫，洗脫液收集于量瓶中，IOOOOrpm離心lOmin，取上清液即得； 步驟⑵中，所述的色譜條件為：色譜柱Agilent Zorbax SB-C18，規(guī)格為250mmX4. 6mmi. d.，5 μ m ;以含0. 05%甲酸的乙腈為流動(dòng)相A，以體積濃度為0. 05%甲酸溶 液為流動(dòng)相B，并按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；柱溫為30°C;流速為每分鐘0.8ml ;檢測(cè)波 長(zhǎng)：203nm ;
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【文檔編號(hào)】G01N30/02GK104458956SQ201410756068
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年12月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月10日
【發(fā)明者】顧治平, 闕瑞艷, 王恒斌, 陳力建, 張禮學(xué) 申請(qǐng)人:常熟雷允上制藥有限公司