利用硅納米粒子提高光學(xué)顯微成像分辨率的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了利用硅納米粒子的等離子體色散效應(yīng)提高光學(xué)顯微成像分辨率的方法,包括以下步驟:待測(cè)樣品預(yù)處理:在玻璃表面特定區(qū)域覆蓋一層非熒光的Si納米粒子;CCD圖像采集:首先用泵浦光照射在待測(cè)樣品表面,然后開啟顯微鏡信號(hào)光,所述顯微鏡信號(hào)光照射在待測(cè)樣品表面并發(fā)生散射,所得散射光在CCD上成像;高分辨重建:利用高斯差點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)處理CCD圖像得到高分辨率圖像;本發(fā)明利用硅納米粒子的等離子體色散效應(yīng)提高光學(xué)顯微成像分辨率,有利于在圖像采集過(guò)程中獲得非熒光的Si納米粒子的高分辨率圖像信息;本發(fā)明重新設(shè)計(jì)了點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù),可以有效對(duì)CCD圖像進(jìn)行高分辨重建。
【專利說(shuō)明】利用硅納米粒子提高光學(xué)顯微成像分辨率的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于光學(xué)顯微【技術(shù)領(lǐng)域】,涉及提高光學(xué)顯微鏡分辨率的方法,特別涉及利 用硅納米粒子提高光學(xué)顯微成像分辨率的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 分辨率是指顯微鏡分辨兩個(gè)物點(diǎn)的能力,目前普遍以瑞利判據(jù)作為分辨率的判斷 標(biāo)準(zhǔn),該判據(jù)的表達(dá)式如下:d = 0.618X//NA,其中d為分辨極限,A為照明光線波長(zhǎng),NA 為物鏡的數(shù)值孔徑;普通光學(xué)顯微鏡的分辨率一般不超過(guò)〇. 2微米,這遠(yuǎn)不能滿足一些高 分辨率圖像的處理要求。
[0003] 硅納米粒子的等離子體色散效應(yīng)(簡(jiǎn)稱TOE)是指在光注入情況下,粒子內(nèi)部會(huì)產(chǎn) 生載流子(電子和空穴),從而引起粒子的折射率減少和吸收系數(shù)增加的現(xiàn)象。研究表明, 粒子折射率減少和吸收系數(shù)的增加都會(huì)引起納米粒子暗視場(chǎng)顯微觀測(cè)信號(hào)能量的衰減。因 此,對(duì)于一定波長(zhǎng)、一定脈沖寬度和一定強(qiáng)度的激光的泵浦下,硅納米粒子這個(gè)觀察目標(biāo)對(duì) 探測(cè)信號(hào)具有吸收作用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 有鑒于此,本發(fā)明的目的在于提供一種提高光學(xué)顯微成像分辨率的方法。
[0005] 為達(dá)到上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
[0006] 利用硅納米粒子的等離子體色散效應(yīng)提高光學(xué)顯微成像分辨率的方法,包括以下 步驟:
[0007] a)待測(cè)樣品預(yù)處理:利用非熒光的Si納米粒子在玻璃上制作納米標(biāo)簽;
[0008] b)CCD圖像采集:首先用泵浦光照射在待測(cè)樣品表面,然后開啟顯微鏡信號(hào)光,所 述顯微鏡信號(hào)光照射在待測(cè)樣品表面并發(fā)生散射,所得散射光在CCD上成像;
[0009] c)高分辨重建:利用高斯差點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)處理步驟b)的CXD圖像得到高分辨率圖 像;所述高斯差點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)如式I所示:
【權(quán)利要求】
1. 利用硅納米粒子的等離子體色散效應(yīng)提高光學(xué)顯微成像分辨率的方法,其特征在 于,包括以下步驟: a) 待測(cè)樣品預(yù)處理:利用非熒光的Si納米粒子在玻璃上制作納米標(biāo)簽; b)CCD圖像采集:首先用泵浦光照射在待測(cè)樣品表面,然后開啟顯微鏡信號(hào)光,所述顯 微鏡信號(hào)光照射在待測(cè)樣品表面并發(fā)生散射,所得散射光在CCD上成像; c) 高分辨重建:利用高斯差點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)處理步驟b)的C⑶圖像得到高分辨率圖像;所 述高斯差點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)如式I所示:
其中:u是高斯函數(shù)的峰值位置,a是高斯函數(shù)的峰值,〇表示高斯函數(shù)的寬度;ai>a2,u10 = 0. 99-1. 01u20,〇 〇 2〇
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述利用硅納米粒子的等離子體色散效應(yīng)提高光學(xué)顯微成像分辨 率的方法,其特征在于叫=3a.u. ;a2 = 2. 8a.u. ; 〇1= 2nm; 〇2= 1. 9nm。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述利用硅納米粒子的等離子體色散效應(yīng)提高光學(xué)顯微成像 分辨率的方法,其特征在于:所述泵浦光波長(zhǎng)為532nm,譜線寬為0. 5nm,脈沖寬度為 0. 5±0. 001ms。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述利用硅納米粒子的等離子體色散效應(yīng)提高光學(xué)顯微成像分辨 率的方法,其特征在于:所述泵浦光依次經(jīng)過(guò)透鏡放大、針孔濾波、物鏡聚焦后到達(dá)待測(cè)樣 品表面;所述散射光先后經(jīng)過(guò)顯微鏡物鏡和濾波器后成像在C⑶上。
【文檔編號(hào)】G01N21/63GK104406944SQ201410793880
【公開日】2015年3月11日 申請(qǐng)日期:2014年12月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月18日
【發(fā)明者】劉丹平, 許亮, 劉松, 葉俊, 曾孝平, 印勇, 譚曉衡, 張玲, 蔣陽(yáng) 申請(qǐng)人:重慶大學(xué)