快速液體色譜分析方法
快速液體色譜分析方法
【專利摘要】為了提高液相色譜的分析速度，本發(fā)明提供了一種快速液體色譜分析方法，包括如下步驟：(1)采用化學聚合的方法讓一定比例的甲酰胺和硅酸鉀溶液先在空色譜柱的前端生成一定長度的、能耐高壓的溶膠；(2)設(shè)定進樣口溫度等參數(shù)；(3)色譜條件設(shè)置；(4)在高壓情況下，使樣品在初始溫度為55℃持續(xù)6min，以50℃/min的速率降溫至40℃后持續(xù)12min利用檢測器進行檢測，以5℃/min的速率降溫至30℃后持續(xù)5min利用檢測器進行檢測，以1℃/min的速率降溫至25℃后持續(xù)14min利用檢測器進行檢測。本發(fā)明提高了分析速度，避免了生產(chǎn)過程的待機時間，多個樣品同時檢測時效果更為顯著。
【專利說明】快速液體色譜分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于物質(zhì)分析【技術(shù)領(lǐng)域】，更具體地，涉及一種快速液體色譜分析方法。
【背景技術(shù)】
[0002]高效液相色譜技術(shù)(HPLC)作為一種傳統(tǒng)的分析技術(shù)具有分辨率高、重復性好、色譜柱可反復使用等優(yōu)點，目前廣泛應用于中藥有效成分的測定。常見的高效液相色譜分析方法均為離線分析，即分析人員在現(xiàn)場取樣后拿到實驗室進行樣品預處理后使用液相色譜進行分析。這樣的分析效率較低，分析人員工作量大，對于揮發(fā)性樣品還會有較大的分析誤差，最重要的是對生產(chǎn)過程質(zhì)控指標無法實現(xiàn)實時監(jiān)測和反饋。高效液相色譜樣品處理復雜、操作繁瑣并且分析周期長的缺陷限制了其作為在線分析技術(shù)的應用。近年來，超高效液相色譜的發(fā)展是分離技術(shù)的巨大進步，峰容量、分析效率、靈敏度和分辨率較常規(guī)HPLC有了很大的提高，這便為使液相色譜成為一種新的在線分析技術(shù)提供了可能。但是由于液相色譜復雜的預處理及進樣方式等問題仍然限制了其作為在線分析技術(shù)的應用。目前，已有液相色譜介質(zhì)的預處理系統(tǒng)的相關(guān)研宄并在不斷完善，例如張以民等發(fā)明的在線色譜分析的液相介質(zhì)預處理裝置(專利號ZL 200720074371.X)，該裝置除了可以實現(xiàn)液相介質(zhì)預處理外還可達到流量大、防堵及基本消除氣泡的目的。另外，也有液相色譜在線脫鹽、富集與質(zhì)譜在線聯(lián)用系統(tǒng)(專利號ZL 200610134981.4)以及固相萃取一液相色譜在線聯(lián)用分析水中痕量有機物的方法(專利號ZL 200610023536.0)的相關(guān)報道。但是，這些研宄都具有相應的局限性和不全面性。張以民等的發(fā)明僅提供了在線液相色譜分析的預處理裝置，并未將其與液相色譜儀真正連成一個在線分析系統(tǒng)，并不能真正實時得到分析結(jié)果，沒有真正意義上實現(xiàn)在線分析。張麗華等發(fā)明的液相色譜與質(zhì)譜在線聯(lián)用系統(tǒng)強調(diào)的也不是利用液相色譜實現(xiàn)在線分析，而僅僅將雙分流納升級HPLC用于脫鹽、富集并與質(zhì)譜聯(lián)用，并未實現(xiàn)液相色譜的在線分析。陳玲等采用固相萃取一液相色譜在線聯(lián)用分析水中痕量有機物，該在線聯(lián)用系統(tǒng)僅適合于飲用水、地表水及其他低粘度液體中痕量有機污染物的富集和分析，且不能真正實現(xiàn)在線取樣和在線分析，也不適用于大流量樣品，用途較為局限。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]為了提高液相色譜的分析速度，本發(fā)明提供了一種快速液體色譜分析方法，包括如下步驟:
[0004](I)采用化學聚合的方法讓一定比例的甲酰胺和硅酸鉀溶液先在空色譜柱的前端生成一定長度的、能耐高壓的溶膠；
[0005](2)進樣口溫度為150°C ；FID檢測器溫度為250°C，載氣流量為45ml/min，空氣流量為450ml/min，檢測器的靈敏度為I ;
[0006](3)色譜條件設(shè)置:采用C18柱，柱溫設(shè)置在20°C?50°C;以體積比52: 43的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相A，以體積比70: 9的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫；流速為0.5ml/min?2.0ml/min ;檢測波長為210nm?270nm ；
[0007](4)在高壓情況下，使樣品在初始溫度為55°C持續(xù)6min，以50°C /min的速率降溫至40°C后持續(xù)12min利用檢測器進行檢測，以5°C /min的速率降溫至30°C后持續(xù)5min利用檢測器進行檢測，以1°C /min的速率降溫至25°C后持續(xù)14min利用檢測器進行檢測。
[0008]進一步地，所述的色譜柱為反相色譜柱。
[0009]進一步地，所述檢測器為紫外多波長檢測器。
[0010]進一步地，所述多波長檢測器的工作范圍在150-500nm之間的不同波段上。
[0011]進一步地，色譜柱尺寸為50_70cm。
[0012]進一步地，色譜柱的內(nèi)徑75微米，外徑360微米。
[0013]進一步地，所述溶膠為甲酰胺/硅酸鉀溶液按3:4混合，虹吸至色譜柱前端2-3cm，烘箱80°C烘烤10分鐘。
[0014]本發(fā)明的有益效果是:提高了分析速度，相比現(xiàn)有技術(shù)縮短時間1/3-1/4，避免了生產(chǎn)過程的待機時間，多個樣品同時檢測時效果更為顯著。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0015]圖1示出了根據(jù)本發(fā)明的快速液體色譜分析方法的色譜圖。
【具體實施方式】
[0016]檢測儀器與色譜條件:
[0017]高效液相色譜儀:SSISeries 1500PUMP, Series 1500PDA 檢測器。
[0018]色譜柱:Agilent反相C18，色譜柱尺寸為70cm，內(nèi)徑75微米，外徑360微米。
[0019]流速:0.8ml/min ;檢測波長:250nm ;進樣體積:10 μ I。
[0020]實驗步驟:
[0021](I)甲酰胺/硅酸鉀溶液按3:4混合，虹吸至色譜柱前端2-3cm，烘箱80°C烘烤10分鐘。
[0022](2)進樣口溫度為150°C ；FID檢測器溫度為250°C，載氣流量為45ml/min，空氣流量為450ml/min，檢測器的靈敏度為I ;
[0023](3)色譜條件設(shè)置:采用C18柱，柱溫設(shè)置在30°C ；以體積比52: 43的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相A，以體積比70: 9的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫；流速為0.7ml/min ;檢測波長為260nm ；
[0024](4)在高壓情況下，使樣品在初始溫度為55°C持續(xù)6min，以50°C /min的速率降溫至40°C后持續(xù)12min利用檢測器進行檢測，以5°C /min的速率降溫至30°C后持續(xù)5min利用檢測器進行檢測，以1°C /min的速率降溫至25°C后持續(xù)14min利用檢測器進行檢測。上述檢測器為紫外多波長檢測器，在150-500nm之間的不同波段上工作。
[0025](5)記錄譜圖。
[0026]上面以文字和【專利附圖】
【附圖說明】的方式闡釋了本發(fā)明一些【具體實施方式】的結(jié)構(gòu)，并非詳盡無遺或限制于上述所述具體形式。應當指出，對于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種快速液體色譜分析方法，其特征在于包括如下步驟: (1)采用化學聚合的方法讓一定比例的甲酰胺和硅酸鉀溶液先在空色譜柱的前端生成一定長度的、能耐高壓的溶膠； (2)進樣口溫度為150°C；FID檢測器溫度為250°C，載氣流量為45ml/min，空氣流量為450ml/min，檢測器的靈敏度為1 ; (3)色譜條件設(shè)置:采用C18柱，柱溫設(shè)置在20°C?50°C;以體積比52: 43的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相A，以體積比70: 9的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫；流速為0.5ml/min?2.0ml/min ;檢測波長為210nm?270nm ； (4)在高壓情況下，使樣品在初始溫度為55°C持續(xù)6min，以50°C/min的速率降溫至40°C后持續(xù)12min利用檢測器進行檢測，以5°C /min的速率降溫至30°C后持續(xù)5min利用檢測器進行檢測，以1°C /min的速率降溫至25°C后持續(xù)14min利用檢測器進行檢測。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的色譜柱為反相色譜柱。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述檢測器為紫外多波長檢測器。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述多波長檢測器的工作范圍在150-500nm之間的不同波段上。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，色譜柱尺寸為50-70cm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，色譜柱的內(nèi)徑75微米，外徑360微米。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述溶膠為甲酰胺/硅酸鉀溶液按3:4混合，虹吸至色譜柱前端2-3cm，烘箱80°C烘烤10分鐘。
【文檔編號】G01N30/02GK104502490SQ201510018206
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2015年1月14日 優(yōu)先權(quán)日:2015年1月14日
【發(fā)明者】常建紅 申請人:成都彼斯特生物科技有限公司
【專利摘要】為了提高液相色譜的分析速度，本發(fā)明提供了一種快速液體色譜分析方法，包括如下步驟：(1)采用化學聚合的方法讓一定比例的甲酰胺和硅酸鉀溶液先在空色譜柱的前端生成一定長度的、能耐高壓的溶膠；(2)設(shè)定進樣口溫度等參數(shù)；(3)色譜條件設(shè)置；(4)在高壓情況下，使樣品在初始溫度為55℃持續(xù)6min，以50℃/min的速率降溫至40℃后持續(xù)12min利用檢測器進行檢測，以5℃/min的速率降溫至30℃后持續(xù)5min利用檢測器進行檢測，以1℃/min的速率降溫至25℃后持續(xù)14min利用檢測器進行檢測。本發(fā)明提高了分析速度，避免了生產(chǎn)過程的待機時間，多個樣品同時檢測時效果更為顯著。
【專利說明】快速液體色譜分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于物質(zhì)分析【技術(shù)領(lǐng)域】，更具體地，涉及一種快速液體色譜分析方法。
【背景技術(shù)】
[0002]高效液相色譜技術(shù)(HPLC)作為一種傳統(tǒng)的分析技術(shù)具有分辨率高、重復性好、色譜柱可反復使用等優(yōu)點，目前廣泛應用于中藥有效成分的測定。常見的高效液相色譜分析方法均為離線分析，即分析人員在現(xiàn)場取樣后拿到實驗室進行樣品預處理后使用液相色譜進行分析。這樣的分析效率較低，分析人員工作量大，對于揮發(fā)性樣品還會有較大的分析誤差，最重要的是對生產(chǎn)過程質(zhì)控指標無法實現(xiàn)實時監(jiān)測和反饋。高效液相色譜樣品處理復雜、操作繁瑣并且分析周期長的缺陷限制了其作為在線分析技術(shù)的應用。近年來，超高效液相色譜的發(fā)展是分離技術(shù)的巨大進步，峰容量、分析效率、靈敏度和分辨率較常規(guī)HPLC有了很大的提高，這便為使液相色譜成為一種新的在線分析技術(shù)提供了可能。但是由于液相色譜復雜的預處理及進樣方式等問題仍然限制了其作為在線分析技術(shù)的應用。目前，已有液相色譜介質(zhì)的預處理系統(tǒng)的相關(guān)研宄并在不斷完善，例如張以民等發(fā)明的在線色譜分析的液相介質(zhì)預處理裝置(專利號ZL 200720074371.X)，該裝置除了可以實現(xiàn)液相介質(zhì)預處理外還可達到流量大、防堵及基本消除氣泡的目的。另外，也有液相色譜在線脫鹽、富集與質(zhì)譜在線聯(lián)用系統(tǒng)(專利號ZL 200610134981.4)以及固相萃取一液相色譜在線聯(lián)用分析水中痕量有機物的方法(專利號ZL 200610023536.0)的相關(guān)報道。但是，這些研宄都具有相應的局限性和不全面性。張以民等的發(fā)明僅提供了在線液相色譜分析的預處理裝置，并未將其與液相色譜儀真正連成一個在線分析系統(tǒng)，并不能真正實時得到分析結(jié)果，沒有真正意義上實現(xiàn)在線分析。張麗華等發(fā)明的液相色譜與質(zhì)譜在線聯(lián)用系統(tǒng)強調(diào)的也不是利用液相色譜實現(xiàn)在線分析，而僅僅將雙分流納升級HPLC用于脫鹽、富集并與質(zhì)譜聯(lián)用，并未實現(xiàn)液相色譜的在線分析。陳玲等采用固相萃取一液相色譜在線聯(lián)用分析水中痕量有機物，該在線聯(lián)用系統(tǒng)僅適合于飲用水、地表水及其他低粘度液體中痕量有機污染物的富集和分析，且不能真正實現(xiàn)在線取樣和在線分析，也不適用于大流量樣品，用途較為局限。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]為了提高液相色譜的分析速度，本發(fā)明提供了一種快速液體色譜分析方法，包括如下步驟:
[0004](I)采用化學聚合的方法讓一定比例的甲酰胺和硅酸鉀溶液先在空色譜柱的前端生成一定長度的、能耐高壓的溶膠；
[0005](2)進樣口溫度為150°C ；FID檢測器溫度為250°C，載氣流量為45ml/min，空氣流量為450ml/min，檢測器的靈敏度為I ;
[0006](3)色譜條件設(shè)置:采用C18柱，柱溫設(shè)置在20°C?50°C;以體積比52: 43的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相A，以體積比70: 9的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫；流速為0.5ml/min?2.0ml/min ;檢測波長為210nm?270nm ；
[0007](4)在高壓情況下，使樣品在初始溫度為55°C持續(xù)6min，以50°C /min的速率降溫至40°C后持續(xù)12min利用檢測器進行檢測，以5°C /min的速率降溫至30°C后持續(xù)5min利用檢測器進行檢測，以1°C /min的速率降溫至25°C后持續(xù)14min利用檢測器進行檢測。
[0008]進一步地，所述的色譜柱為反相色譜柱。
[0009]進一步地，所述檢測器為紫外多波長檢測器。
[0010]進一步地，所述多波長檢測器的工作范圍在150-500nm之間的不同波段上。
[0011]進一步地，色譜柱尺寸為50_70cm。
[0012]進一步地，色譜柱的內(nèi)徑75微米，外徑360微米。
[0013]進一步地，所述溶膠為甲酰胺/硅酸鉀溶液按3:4混合，虹吸至色譜柱前端2-3cm，烘箱80°C烘烤10分鐘。
[0014]本發(fā)明的有益效果是:提高了分析速度，相比現(xiàn)有技術(shù)縮短時間1/3-1/4，避免了生產(chǎn)過程的待機時間，多個樣品同時檢測時效果更為顯著。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0015]圖1示出了根據(jù)本發(fā)明的快速液體色譜分析方法的色譜圖。
【具體實施方式】
[0016]檢測儀器與色譜條件:
[0017]高效液相色譜儀:SSISeries 1500PUMP, Series 1500PDA 檢測器。
[0018]色譜柱:Agilent反相C18，色譜柱尺寸為70cm，內(nèi)徑75微米，外徑360微米。
[0019]流速:0.8ml/min ;檢測波長:250nm ;進樣體積:10 μ I。
[0020]實驗步驟:
[0021](I)甲酰胺/硅酸鉀溶液按3:4混合，虹吸至色譜柱前端2-3cm，烘箱80°C烘烤10分鐘。
[0022](2)進樣口溫度為150°C ；FID檢測器溫度為250°C，載氣流量為45ml/min，空氣流量為450ml/min，檢測器的靈敏度為I ;
[0023](3)色譜條件設(shè)置:采用C18柱，柱溫設(shè)置在30°C ；以體積比52: 43的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相A，以體積比70: 9的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫；流速為0.7ml/min ;檢測波長為260nm ；
[0024](4)在高壓情況下，使樣品在初始溫度為55°C持續(xù)6min，以50°C /min的速率降溫至40°C后持續(xù)12min利用檢測器進行檢測，以5°C /min的速率降溫至30°C后持續(xù)5min利用檢測器進行檢測，以1°C /min的速率降溫至25°C后持續(xù)14min利用檢測器進行檢測。上述檢測器為紫外多波長檢測器，在150-500nm之間的不同波段上工作。
[0025](5)記錄譜圖。
[0026]上面以文字和【專利附圖】
【附圖說明】的方式闡釋了本發(fā)明一些【具體實施方式】的結(jié)構(gòu)，并非詳盡無遺或限制于上述所述具體形式。應當指出，對于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種快速液體色譜分析方法，其特征在于包括如下步驟: (1)采用化學聚合的方法讓一定比例的甲酰胺和硅酸鉀溶液先在空色譜柱的前端生成一定長度的、能耐高壓的溶膠； (2)進樣口溫度為150°C；FID檢測器溫度為250°C，載氣流量為45ml/min，空氣流量為450ml/min，檢測器的靈敏度為1 ; (3)色譜條件設(shè)置:采用C18柱，柱溫設(shè)置在20°C?50°C;以體積比52: 43的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相A，以體積比70: 9的乙腈-低濃度的鹽酸水溶液為流動相B，進行梯度洗脫；流速為0.5ml/min?2.0ml/min ;檢測波長為210nm?270nm ； (4)在高壓情況下，使樣品在初始溫度為55°C持續(xù)6min，以50°C/min的速率降溫至40°C后持續(xù)12min利用檢測器進行檢測，以5°C /min的速率降溫至30°C后持續(xù)5min利用檢測器進行檢測，以1°C /min的速率降溫至25°C后持續(xù)14min利用檢測器進行檢測。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的色譜柱為反相色譜柱。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述檢測器為紫外多波長檢測器。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述多波長檢測器的工作范圍在150-500nm之間的不同波段上。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，色譜柱尺寸為50-70cm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，色譜柱的內(nèi)徑75微米，外徑360微米。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述溶膠為甲酰胺/硅酸鉀溶液按3:4混合，虹吸至色譜柱前端2-3cm，烘箱80°C烘烤10分鐘。
【文檔編號】G01N30/02GK104502490SQ201510018206
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2015年1月14日 優(yōu)先權(quán)日:2015年1月14日
【發(fā)明者】常建紅 申請人:成都彼斯特生物科技有限公司
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