本發(fā)明屬于體外診斷技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于檢測血清樣品中葉酸含量的葉酸釋放劑。
背景技術(shù)：
葉酸(Folic acid)是廣泛分布的一種水溶性B族維生素，其輔酶形式是四氫葉酸的一些衍生物，在一碳單位的代謝中起作用，由喋呤啶、對氨基苯甲酸和谷氨酸等組成的化合物，是米切爾(H.K.Mitchell，1941)從菠菜葉中提取純化的，故而命名為葉酸，有促進(jìn)骨髓中幼細(xì)胞成熟的作用，人類如缺乏葉酸可引起巨紅細(xì)胞性貧血以及白細(xì)胞減少癥，對孕婦尤其重要。
葉酸是人體在利用糖分和氨基酸時的必要物質(zhì)，是機(jī)體細(xì)胞生長和繁殖所必需的物質(zhì)，在體內(nèi)葉酸以四氫葉酸的形式起作用，四氫葉酸在體內(nèi)參與嘌呤核酸和嘧啶核苷酸的合成和轉(zhuǎn)化。葉酸在制造核酸(核糖核酸、脫氧核糖核酸)上扮演重要的角色。葉酸幫助蛋白質(zhì)的代謝，并與葉酸共同促進(jìn)紅細(xì)胞的生成和成熟，是制造紅血球不可缺少的物質(zhì)。葉酸也作為干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)及其它微生物的促進(jìn)增殖因子而起作用，國外研究人員發(fā)現(xiàn)，葉酸可引起發(fā)癌細(xì)胞凋亡，對癌細(xì)胞的基因表達(dá)有一定影響，故屬于一種天然抗癌維生素。
血清葉酸升高常見于腸盲袢綜合征、惡性貧血或者是長期素食者葉酸可引起升高。血清葉酸降低多見于巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、酒精中毒或正常妊娠時血清葉酸也會降低，骨髓增生性疾病葉酸也會降低。
目前，測定葉酸的免疫學(xué)方法有放射性免疫法(RIA)、酶聯(lián)免疫法(ELISA)、化學(xué)發(fā)光免疫分析等，例如RIA存在放射性污染、標(biāo)記物半衰期短、對操作者具有放射性損傷，且操作繁瑣，時間長等缺點；而ELISA靈敏度低，檢測范 圍窄?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)具有較高的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性，但是如何將血清樣品中的葉酸從結(jié)合蛋白中完全釋放以獲得準(zhǔn)確的檢測結(jié)果仍然是一項技術(shù)難題。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的發(fā)明人提供了一種用于檢測血清樣品中葉酸含量的葉酸釋放劑，能夠提供葉酸合適的液體環(huán)境，保證葉酸結(jié)合蛋白的完全變性，同時在變性處理過程中葉酸的分子結(jié)構(gòu)和構(gòu)象保持完整性，使后續(xù)的檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確。
因此，本發(fā)明的第一個目的在于提供一種用于檢測血清樣品中葉酸含量的葉酸釋放劑。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
一種用于檢測血清樣品中葉酸含量的葉酸釋放劑，按照重量體積比計，包括：
海藻糖 0.3-1.5％
2-氯乙酰胺 0.1-1.5％
3-[(2-甲基-2-十一烷基-1,3二氧戊環(huán)-4基)甲氧基]-1-丙磺酸鈉 0.01-1.0％
硼酸 0.5-7％
抗壞血酸 0.5-4.0％。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施例，按照重量體積比計，所述用于檢測血清樣品中葉酸含量的葉酸釋放劑包括：
海藻糖 0.8％
2-氯乙酰胺 0.49％
3-[(2-甲基-2-十一烷基-1,3二氧戊環(huán)-4基)甲氧基]-1-丙磺酸鈉 0.1％
硼酸 2.97％
抗壞血酸 2.0％。
根據(jù)本發(fā)明，所述用于檢測血清樣品中葉酸含量的葉酸釋放劑的制備方法，包括如下步驟：按照所述配比，分別稱取海藻糖、2-氯乙酰胺、3-[(2-甲基-2-十一烷基-1,3二氧戊環(huán)-4基)甲氧基]-1-丙磺酸鈉、硼酸和抗壞血酸，然后將所 述組分分別溶解于水中，定容。
本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明的葉酸釋放劑能夠提供葉酸合適的液體環(huán)境，保證葉酸結(jié)合蛋白的完全變性，同時在變性處理過程中葉酸的分子結(jié)構(gòu)和構(gòu)象保持完整性，使后續(xù)的檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確。
附圖說明
圖1為采用不同方法檢測血清樣品中葉酸濃度的結(jié)果，其中，1代表本發(fā)明的葉酸釋放劑與放射性免疫試劑檢測結(jié)果對照；2代表現(xiàn)有的葉酸釋放劑與放射性免疫試劑檢測結(jié)果對照；3代表普通樣品稀釋液與放射性免疫試劑檢測結(jié)果對照。
具體實施方式
以下結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明做進(jìn)一步說明。應(yīng)理解，以下實施例僅用于說明本發(fā)明而非用于限制本發(fā)明的范圍。
以下實施例中，除特別注明外，所使用的原料均市售可得。
實施例1、制備
按照重量體積比計，本實施例的葉酸釋放劑的組分及配比如下：
海藻糖 0.8％
2-氯乙酰胺 0.49％
3-[(2-甲基-2-十一烷基-1,3二氧戊環(huán)-4基)甲氧基]-1-丙磺酸鈉 0.1％
硼酸 2.97％
抗壞血酸 2.0％。
按照上述配比，分別稱取海藻糖、2-氯乙酰胺、3-[(2-甲基-2-十一烷基-1,3二氧戊環(huán)-4基)甲氧基]-1-丙磺酸鈉、硼酸和抗壞血酸，然后將上述組分分別溶解于水中，定容。
實施例2、檢測
取110份臨床血清樣品，按照以下方法對血清樣品中的葉酸濃度進(jìn)行檢測：
實施例2：取200μl血清樣品，加入100μl實施例1中制備的葉酸釋放劑，室溫反應(yīng)15min，取50μl使用化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒(來源自鹽城拜明生物技術(shù)有限公司)進(jìn)行檢測；
陽性對照：取50μl血清樣品，使用FA放射性免疫試劑盒(來源自瑞士帝肯公司)進(jìn)行檢測；
對比例1：取200μl血清樣品，加入100μl現(xiàn)有的葉酸釋放劑(來源自深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司)，室溫反應(yīng)15min，取50μl使用化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒(來源自鹽城拜明生物技術(shù)有限公司)進(jìn)行檢測；
對比例2：取200μl血清樣品，加入100μl普通樣品稀釋液(0.01M pH7.2的PBS緩沖液)，使用化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒(來源自鹽城拜明生物技術(shù)有限公司)直接進(jìn)行檢測。
結(jié)果如表1和圖1所示。
表1 (單位：ng/ml)
表1和圖1的結(jié)果表明，以放射性免疫檢測方法的檢測結(jié)果作為陽性對照，采用本發(fā)明的葉酸釋放劑的檢測結(jié)果的直線方程為y＝1.041x+0.167，相關(guān)系數(shù)為R2＝0.960，采用現(xiàn)有的葉酸釋放劑的檢測結(jié)果的直線方程為y＝0.642x+0.137，相關(guān)系數(shù)為R2＝0.945，而不采用葉酸釋放劑處理的檢測結(jié)果的直線方程為y＝0.030x+0.950，相關(guān)系數(shù)為R2＝0.090。說明采用本發(fā)明的葉酸釋放劑處理后的樣品與陽性對照具有較好的一致性，相較于現(xiàn)有的葉酸釋放劑處理能夠提供更為準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，能夠很好地應(yīng)用于血清樣品的葉酸檢測，具有廣泛的應(yīng)用前景。