本發(fā)明涉及動物體內中藥物殘留的理化檢測技術領域，具體涉及一種基于磁分離一種基于磁分離快速測定動物肌肉組織中磺胺類抗生素殘留量的方法。
背景技術：
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隨著人民的生活水平的不斷提高，動物源性食品的消費量越來越大。為了滿足不斷增長的消費需求，提高動物的養(yǎng)殖產(chǎn)出，人們在其養(yǎng)殖過程中加入很多禁限用藥物，以保證其存活率。養(yǎng)殖過程中所涉及的藥物會通過食物鏈在生物體內累積濃縮并最終傳遞到人體，對人的食用安全帶來了潛在危害?；前奉惪股貞{借其廣譜、高效和價格低的特點，已經(jīng)廣泛應用到水產(chǎn)等各種動物的養(yǎng)殖環(huán)節(jié)中，給動物源性食品的食用安全性帶來了潛在的風險。雖然動物體內磺胺類抗生素的分析方法有高效液相色譜(HPLC)、高效液相色譜三重四級桿串聯(lián)質譜(HPLC-MS/MS)等檢測方法，但由于動物組織樣品的脂肪和蛋白質等干擾物質含量高，導致樣品制備方法復雜：需采用溶劑萃取、固相萃取、氮氣吹干、懸蒸濃縮等多種前處理技術進行純化、富集。
技術實現(xiàn)要素：
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本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術的缺陷和不足，提供一種基于磁分離一種基于磁分離快速測定動物肌肉組織中磺胺類抗生素殘留量的方法。
為了解決背景技術所存在的問題，本發(fā)明的一種基于磁分離快速 測定動物肌肉組織中磺胺類抗生素殘留量的方法，它的方法為：先將動物肌肉樣品經(jīng)酸化乙腈提取，F(xiàn)e3O4磁顆粒的快速相分離，上層清液經(jīng)正己烷去除脂肪，用HPLC-MS/MS分析測定磺胺類化合物含量，具體步驟如下：
(1)、制備：動物解剖、肌肉組織勻漿，-20℃冰箱中低溫保存；
(2)、提取：實驗過程中，肌肉糜室溫下融解；稱取肌肉糜樣品于具蓋離心試管中，加提取溶液充分浸潤，漩渦振蕩，加入Fe3O4磁性材料混合物，在外界磁鐵作用下快速相分離；
(3)、凈化：移取1mL樣品提取液上清液于離心管中，氮吹濃縮，加入1mL1‰甲酸溶液溶解殘雜，將溶液轉移到含有1mL正己烷的離心管中渦旋振蕩，離心，棄去上層正己烷相，吸取下層清液經(jīng)0.22μm有機相濾膜過濾后進行HPLC-MS/MS分析。
作為優(yōu)選，所述的提取溶液由1‰(V/V)甲酸的乙腈組成；所述的Fe3O4磁性材料混合物由2g無水硫酸鎂、0.5g氯化鈉和100mgFe3O4磁性顆粒組成。
本發(fā)明的儀器參數(shù)為：液相色譜：帶自動進樣器，毛細管電壓3.2kV；殼氣45Arb；輔助氣10Arb；毛細管溫度350℃；蒸發(fā)溫度200℃；峰寬Q1 0.7Da、Q3 0.7Da，碰撞氣壓力1.5mTorr；反相色譜柱為kromasil C18反相色譜柱(4.0mm×100mm，5.0μm)；液體自動進樣器：進樣體積3μL；三元流動相，流動相A：0.5％甲酸溶液(V/V)、流動相B：甲醇。
本發(fā)明具有以下有益效果：它克服了現(xiàn)有的方法前處理過程步驟多、耗時長的缺點，提供一種混合溶液提取，磁性分離的快速相分離，正己烷凈化，采用配置有自動進樣器的HPLC-MS/MS直接測定動物肌 肉組織中磺胺類抗生素的方法，該方法的前處理簡便、高效、節(jié)省溶劑，靈敏度高和成本低。
具體實施方式：
本具體實施方式采用如下技術方案：先將動物肌肉樣品經(jīng)酸化乙腈提取，F(xiàn)e3O4磁顆粒的快速相分離，上層清液經(jīng)正己烷去除脂肪，用HPLC-MS/MS分析測定磺胺類化合物含量，具體步驟如下：
(1)、制備：動物解剖、肌肉組織勻漿，-20℃冰箱中低溫保存；
(2)、提?。簩嶒炦^程中，肌肉糜室溫下融解。稱取肌肉糜樣品于具蓋離心試管中，加提取溶液充分浸潤，漩渦振蕩，加入Fe3O4磁性材料混合物，在外界磁鐵作用下快速相分離；
(3)、凈化：移取1mL樣品提取液上清液于離心管中，氮吹濃縮，加入1mL 1‰甲酸溶液溶解殘雜，將溶液轉移到含有1mL正己烷的離心管中渦旋振蕩，離心，棄去上層正己烷相，吸取下層清液經(jīng)0.22μm有機相濾膜過濾后進行HPLC-MS/MS分析。
進一步的，所述的提取溶液由1‰(V/V)甲酸的乙腈組成；所述的Fe3O4磁性材料混合物由2g無水硫酸鎂、0.5g氯化鈉和100mgFe3O4磁性顆粒組成。
本具體實施方式的儀器參數(shù)為：液相色譜：帶自動進樣器，毛細管電壓3.2kV；殼氣45Arb；輔助氣10Arb；毛細管溫度350℃；蒸發(fā)溫度200℃；峰寬Q1 0.7Da、Q3 0.7Da，碰撞氣壓力1.5mTorr；反相色譜柱為kromasil C18反相色譜柱(4.0mm×100mm，5.0μm)；液體自動進樣器：進樣體積3μL；三元流動相，流動相A：0.5％甲酸溶液(V/V)、流動相B：甲醇。
實施例：
實施例一：1、魚體樣品制備：鯉魚組織經(jīng)過勻漿，保存在-20℃ 冰箱中；
2、提?。呼~糜室溫下融解，稱取2g樣品于50mL具蓋離心管中，加5mL混合溶液充分浸潤，渦旋混勻；加入Fe3O4磁性材料混合物(由2g無水硫酸鎂、0.5g氯化鈉和100mgFe3O4磁性顆粒組成)，立即渦旋混勻，防止無水硫酸鎂結塊，在外界磁鐵的作用下快速相分離；
3、凈化：移取樣品提取液上清液1mL于5mL離心管中，氮吹濃縮，加入加入1mL 1‰甲酸溶液溶解殘雜，將溶液轉移到含有1mL正己烷的5mL離心管中渦旋振蕩，離心，棄去上層正己烷相，吸取下層清液經(jīng)0.22μm有機相濾膜過濾后進行HPLC-MS/MS分析。
儀器參數(shù)：HPLC-MS/MS：帶自動進樣器，毛細管電壓3.2kV；鞘氣45Arb；輔助氣10Arb；毛細管溫度350℃；蒸發(fā)溫度200℃；峰寬Q1 0.7Da、Q3 0.7Da，碰撞氣壓力1.5mTorr；反相色譜柱為kromasil C18反相色譜柱(4.0mm×100mm，5.0μm)；液體自動進樣器：進樣體積3μL；液體自動進樣器：進樣體積3μL。
實施例二：分別在空白魚樣品中添加0.1、0.25、0.5mg/kg三檔濃度的磺胺類類抗生素標樣，提取、凈化后進樣，計算回收率，重復5次。
鯉魚肌肉的加標回收率如下：
以上所述，僅用以說明本發(fā)明的技術方案而非限制，本領域普通技術人員對本發(fā)明的技術方案所做的其它修改或者等同替換，只要不脫離本發(fā)明技術方案的精神和范圍，均應涵蓋在本發(fā)明的權利要求范圍當中。