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一種利用自組裝石墨烯高靈敏檢測蛋白質分子的方法與流程

文檔序號:11062918閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種利用自組裝石墨烯高靈敏檢測蛋白質分子的方法,其特征是,包括以下步驟:

納米石墨烯的制備:取2 g石墨納米纖維、10 mL濃硫酸和1 g P2O5,混合加熱至80 °C,使其預氧化30 min,然后在6 h內冷卻到室溫,將混合物用蒸餾水稀釋、抽濾并洗至中性,預氧化后的石墨干燥后與50 mL濃硫酸混合,并緩慢加入6 g高錳酸鉀,攪拌,控制溫度低于20°C,然后將混合物放在 35 °C的油浴中攪拌 2 h, 然后加入280 mL水后終止反應,向反應結束后的混合物中加入5 mL 30 % 的過氧化氫,混合物變成明黃色,所得混合物用分散在水中,然后抽濾,抽濾后的濾餅用1:10 的稀鹽酸清洗,然后干燥,取15 mg干燥后氧化石墨烯分散于45 mL水中得到氧化石墨烯分散液,將氧化石墨烯分散液稀釋,用氨水調節(jié)至pH=10,用60%的水合肼 20 μL在95 °C還原1 h,得到單層納米石墨烯溶液;

蛋白質分子(MP-11)和石墨烯的自組裝: 將1 mL濃度為0.05 mg/mL 的納米石墨烯溶液和1 mL 濃度為0.186 mg/mL的 MP-11混合,然后稀釋到10 mL 并攪拌12 h,得到MP-11非共價鍵修飾的納米石墨烯;

蛋白質分子的電化學檢測: 采用三電極電化學工作站測量循環(huán)伏安和計時電流。

2.工作電極為直徑2 mm 和12.5 μm的金電極,Ag/AgCl為參比電極,Pt絲為對電極。

3.向pH=7,濃度為10 mM PBS溶液中加入MP-11/graphene,記錄電流和時間的關系曲線,工作電壓分別為-400,-600和-800 mV,數(shù)據(jù)采集時間間隔是50 ms。

4.根據(jù)權利要求1所述的檢測方法,其特征在于:步驟(1)中制備的石墨烯的平均尺寸為30±5 nm。

5.根據(jù)權利要求1所述的檢測方法,其特征在于:步驟(3)中石墨烯和MP-11的濃度分別為0.005 mg/mL 和0.0186 mg/mL。

6.根據(jù)權利要求1所述的檢測方法,其特征在于:步驟(3)中MP-11臨界還原電壓是-400 mV。

7.根據(jù)權利要求1所述的檢測方法,其特征在于:檢測到單片石墨烯上MP-11分子數(shù)是105±18。

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