本發(fā)明涉及分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種判斷二甲酚橙指示液穩(wěn)定性的方法。
背景技術(shù)：
二甲酚橙屬于三苯甲烷類顯色劑，化學(xué)名稱是3-3’-雙（二羧甲基氨甲基）-鄰甲酚磺酸，結(jié)構(gòu)式如下：
。
二甲酚橙是紫色結(jié)晶，易溶于水，它有7級酸式離解，其中H7In至H3In4-都是黃色，H2In5-至In7-是紅色。其在pH＞6.3時呈紅色；pH＜6.3時呈黃色；與金屬離子的絡(luò)合物是紅紫色，因此它只適于在pH＜6的酸性溶液中使用。二甲酚橙可用于許多金屬的直接滴定，如ZrO2+(pH＜1)；Bi3+(pH=1～2)；Th4+(pH=2.5～3.5)等，終點(diǎn)由紅紫色轉(zhuǎn)變?yōu)榱咙S色，變色敏銳。
《中國藥典》2010年版二部中共有10個品種使用了二甲酚橙指示液，分別為依地酸鈣鈉及注射液，枸櫞酸鉍鉀、片、膠囊及顆粒，氫氧化鋁及片，膠體果膠鉍，鋁酸鉍及膠囊，鋁鎂司片，硫糖鋁，堿式碳酸鉍及片，硅酸鎂鋁，枸櫞酸鉍雷尼替丁。
其顯色原理為二羧甲基氨甲基與金屬離子絡(luò)合生成紅紫色化合物，到滴定終點(diǎn)時，二甲酚橙游離出來，在酸性條件下顯黃色。
在通常工作中，二甲酚橙常使用其水溶液，配制方法為：取二甲酚橙0.2g，加水100ml使溶解，即得。每次使用量根據(jù)被測物具體情況有所區(qū)別，通常使用量為5滴（約0.25ml）。
由于二甲酚橙指示液變色敏銳，作為指示劑的性能優(yōu)越，使其在化學(xué)分析，尤其是藥物分析中的應(yīng)用十分廣泛，故而確保二甲酚橙的有效性和穩(wěn)定性的工作十分重要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種判斷二甲酚橙指示液穩(wěn)定性的方法。
本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：
一種判斷二甲酚橙指示液穩(wěn)定性的方法，包括：
1)高溫和強(qiáng)光的影響因素試驗，其中高溫為80℃，強(qiáng)光的照度為4500lx±500lx；
2)模型藥物滴定終點(diǎn)影響試驗，其中模型藥物為堿式水楊酸鉍；
3)靈敏度試驗是將二甲酚橙指示液作為測定硝酸鉛含量的指示液的靈敏度試驗；
通過三方面的結(jié)果綜合判斷二甲酚橙指示液的穩(wěn)定性。
優(yōu)選的，影響因素試驗包括：
1)高溫試驗：將二甲酚橙指示液放置80℃中，分別在5h、18h檢測其含量；
2)強(qiáng)光試驗：將二甲酚橙指示液放置于照度為4500lx±500lx的條件下，分別在第5天、第10天取樣檢測其含量；
通過實(shí)驗結(jié)果判斷不同保存條件下二甲酚橙指示液的穩(wěn)定性。
優(yōu)選的，模型藥物滴定終點(diǎn)影響試驗為將二甲酚橙指示液放置于5℃、20℃、25℃、40℃條件下，分別放置20天、40天、60天、140天、180天，用來作為測定堿式水楊酸鉍的含量的指示液，通過實(shí)驗結(jié)果判斷不同保存條件下二甲酚橙指示液的穩(wěn)定性。
優(yōu)選的，模型藥物滴定終點(diǎn)影響試驗的操作方法為：取在105℃干燥3小時的堿式水楊酸鉍約0.3g，精密稱定，加10ml混合液，所述混合液為高氯酸與水體積比為2：5混合，加熱溶解完全，向熱溶液中加入200ml水和5滴在選定溫度放置特定時間的二甲酚橙指示液，用0.05mol/L乙二胺四醋酸二鈉滴定液滴定至黃色即為終點(diǎn)，每1ml乙二胺四醋酸二鈉滴定液相當(dāng)于10.90mg的Bi，計算模型藥物中Bi的含量，并比較每次測定的結(jié)果；所述二甲酚橙指示液分別在5℃、20℃、25℃、40℃的條件下，放置20天、40天、60天、140天、180天。
優(yōu)選的，靈敏度試驗為將二甲酚橙指示液放置于5℃、20℃、25℃、40℃條件下，分別放置20天、40天、60天、140天、180天，用來作為測定硝酸鉛的含量的指示液，通過實(shí)驗中加入環(huán)六亞甲基四胺后溶液的顏色變化來判斷不同保存條件下二甲酚橙指示液的穩(wěn)定性。
優(yōu)選的，靈敏度試驗的操作方法為：于50ml水中加1ml的稀醋酸，加50mg的在選定溫度放置特定時間的二甲酚橙指示劑，加0.05ml的硝酸鉛溶液，加環(huán)六亞甲基四胺，觀察溶液變色情況，之后加0.1mol/L的乙二胺四醋酸二鈉溶液 0.1ml使溶液從紫紅色變?yōu)辄S色為滴定終點(diǎn)；所述二甲酚橙指示液分別放置于5℃、20℃、25℃、40℃條件下，放置20天、40天、60天、140天、180天。
優(yōu)選的，靈敏度試驗的判斷方法為：試驗中加入環(huán)六亞甲基四胺后溶液顏色變?yōu)樽霞t色的，說明二甲酚橙指示液正常；加入環(huán)六亞甲基四胺后顏色變?yōu)榧t色的，說明二甲酚橙指示液靈敏度已下降；加入環(huán)六亞甲基四胺后顏色變?yōu)辄S色的，說明二甲酚橙指示液已失效。
在上述模型藥物滴定終點(diǎn)影響實(shí)驗中，二甲酚橙與堿式水楊酸鉍的反應(yīng)原理為：二甲酚橙指示液與金屬離子鉍絡(luò)合后溶液顯紫色，反應(yīng)終點(diǎn)時乙二胺四醋酸二鈉滴定液與全部金屬離子鉍絡(luò)合，二甲酚橙游離出來，二甲酚橙在酸性條件下顏色為黃色，使溶液的顏色由紫色變?yōu)辄S色。
在上述靈敏性試驗中，其原理為：二甲酚橙與硝酸鉛加入環(huán)六甲基四胺緩沖液調(diào)節(jié)溶液pH在5～6時，絡(luò)合成紫紅色絡(luò)合物，滴加0.1mol/L的乙二胺四醋酸二鈉溶液滴定液在反應(yīng)終點(diǎn)后溶液由紫紅色變?yōu)辄S色。若二甲酚橙失效，則在加入環(huán)六甲基四胺緩沖液后，不會形成絡(luò)合物，即不會出現(xiàn)紫紅色。
本發(fā)明的有益效果是：
本發(fā)明方法具體的為通過影響因素試驗、對模型藥物滴定終點(diǎn)影響試驗和靈敏度試驗三個方面來確定二甲酚橙指示液的穩(wěn)定性，對于生產(chǎn)和檢驗工作中，正確的確定二甲酚橙指示液的保質(zhì)期以及有效性具有重要作用。
運(yùn)用本發(fā)明提供的方法，能夠準(zhǔn)確的考察出給定二甲酚橙的穩(wěn)定性，指導(dǎo)化學(xué)分析工作中的指示液配置、貯存和使用。
附圖說明
圖1為影響因素試驗中的色譜圖結(jié)果。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，但并不局限于此。
以下各實(shí)施例中所用二甲酚橙指示液的配制方法為：取二甲酚橙0.2g，加水100ml使溶解，即得。
二甲酚橙的含量采用液相色譜法進(jìn)行測定。色譜條件為：色譜柱：C18色譜柱；流動相：甲醇：1%醋酸溶液=15:85（V/V）；檢測波長：254nm，流速為1ml/min。
實(shí)施例1 影響因素試驗
①高溫試驗：將二甲酚橙指示液放置80℃中考察其穩(wěn)定性，分別在5h、18h檢測其含量。
②強(qiáng)光試驗：將二甲酚橙指示液放置于照度為4500lx±500lx的條件下，分別在第5天、第10天取樣檢測其含量。
③含量測定：
色譜柱：C18色譜柱；
流動相：甲醇：1%醋酸溶液=15:85（V/V）；
檢測波長：254nm；
流速為每分鐘1ml；
測定法：取試驗①和②中樣品，注入液相色譜儀，記錄譜圖，并觀察0h、5h、18h的主峰面積和雜質(zhì)峰面積的變化情況。結(jié)果見圖1。
由圖1的色譜圖結(jié)果可知，隨著二甲酚橙峰面積的減小，其與金屬離子絡(luò)合的能力也逐漸下降，第18小時時，由于其基本完全降解，直接顯示其在酸性條件下的顏色（黃色），表明此時其未與金屬離子絡(luò)合，從而證明二甲酚橙指示液在高溫條件下不穩(wěn)定。
實(shí)施例2 模型藥物滴定終點(diǎn)影響試驗
（1）將二甲酚橙指示液放置于5℃、20℃、25℃、40℃條件下，分別放置20天、40天、60天、140天、180天，用來作為測定堿式水楊酸鉍的含量的指示液。
（2）取在105℃干燥3小時的堿式水楊酸鉍約0.3g，精密稱定，加10ml混合液（2ml高氯酸和5ml水）加熱溶解完全，向熱溶液中加入200ml水和5滴步驟（1）中各溫度和時間點(diǎn)的二甲酚橙指示液，用0.05mol/L乙二胺四醋酸二鈉滴定液滴定至黃色即為終點(diǎn)。每1ml乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于10.90mg的Bi。結(jié)果見表1。
表1 利用二甲酚橙指示液測定堿式水楊酸鉍含量
由表1可知，在5℃、20℃、25℃條件下放置140天內(nèi)對含量測定結(jié)果無影響；40℃放置在40天時已失效。
實(shí)施例3靈敏度試驗
（1）將二甲酚橙指示液放置于5℃、20℃、25℃、40℃條件下，分別放置20天、40天、60天、140天、180天，用來作為測定硝酸鉛的含量的指示液。
（2）于50ml水中加1ml的稀醋酸，加入50mg的步驟（1）中各溫度各放置時間點(diǎn)的二甲酚橙指示劑，加入0.05ml的硝酸鉛溶液，繼續(xù)加入環(huán)六亞甲基四胺觀察顏色變化情況，之后加0.1mol/L的乙二胺四醋酸二鈉溶液 0.1ml使溶液由紫紅色變?yōu)辄S色為滴定終點(diǎn)。加入環(huán)六亞甲基四胺后的溶液顏色情況見表2。
表2 利用二甲酚橙指示液測定硝酸鉛的含量
表2結(jié)果以及實(shí)驗最終結(jié)果顯示：靈敏度試驗中加入環(huán)六亞甲基四胺后顏色變?yōu)樽霞t色的，對應(yīng)的滴定結(jié)果值正常；加入環(huán)六亞甲基四胺后顏色變?yōu)榧t色的，對應(yīng)的滴定結(jié)果同樣正常，但終點(diǎn)顏色由橙黃色變?yōu)辄S色，此時滴定終點(diǎn)不容易判斷，說明指示液靈敏度已下降；加入環(huán)六亞甲基四胺后顏色變?yōu)辄S色的，加入指示液后溶液顏色直接為滴定終點(diǎn)顏色，說明滴定液已失效。
結(jié)合靈敏度試驗結(jié)果與實(shí)施例2的模型藥物滴定結(jié)果顯示：通過這兩個指標(biāo)的考察，可以得到二甲酚橙指示液在40℃條件下放置有效期為1個月左右，20℃、25℃條件下放置有效期2～3個月，5℃條件下放置有效期為6個月。
上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。