本發(fā)明涉及生物檢測
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體地，涉及一種檢測細胞粘附分子的抗體芯片試劑盒。
背景技術(shù)：
：細胞粘附分子(celladhesionmolecules,cam)是眾多介導(dǎo)細胞間或細胞與細胞外基質(zhì)(extracellularmatrix,ecm)間相互接觸和結(jié)合分子的統(tǒng)稱，是位于細胞表面或細胞基質(zhì)中的糖蛋白，并以受體和配體結(jié)合的形式發(fā)揮作用。粘附分子使細胞與細胞間，細胞與基質(zhì)間發(fā)生粘附，參與細胞的識別，活化和信號傳導(dǎo)，細胞增值與分化，細胞的伸展與運動，使免疫應(yīng)答，炎癥發(fā)生，凝血，腫瘤轉(zhuǎn)移，創(chuàng)傷愈合等一系列重要生理和病理過程的分子基礎(chǔ)。細胞粘附分子不僅具有多種生理功能，在一定條件下也與病理過程的發(fā)生密切相關(guān)。在細胞因子、炎癥介質(zhì)以及其它因素的作用下，細胞表面粘附分子表達的水平和構(gòu)型可以發(fā)生改變，導(dǎo)致細胞粘附能力的變化。體內(nèi)某些粘附分子的表達是組成性(constitutive)的，即通常狀態(tài)下細胞表面就有一定水平的表達，如cd11/cd18、icam-1、icam-2和l-selectin等粘附分子在相應(yīng)細胞的靜止狀態(tài)下有一定水平的表達，在某些因素的作用下，這些粘附分子的表達也可發(fā)生上調(diào)或下調(diào)(up-regulationordown-regulation)。另外一些粘附分子的表達可以是非組成性(non-constitutive)的，即通常狀態(tài)下這些粘附分子在細胞表面表達很少或不表達，但在某些因素的作用下可誘導(dǎo)表達，如e-selectin、vcam-1在內(nèi)皮細胞的表達即屬此類。e-cadherin與腫瘤浸潤的關(guān)系包括大腸癌、乳腺癌等在內(nèi)的多種腫瘤細胞e-cadherin分子表達明顯減少或缺失，e-cadherin分子表達水平降低與腫瘤細胞惡性程度顯著相關(guān)。e-cadherin分子在惡性程度低的乳腺癌細胞的表達水平明顯高于惡性程度高的腫瘤細胞，而且其表達水平與腺小管形成成正比。integrin家族粘附分子在腫瘤細胞的表達水平也明顯改變，既可表達數(shù)量減少或缺失，也可以表達升高，分布在極性亦可能不同于正常細胞。integrin分子在腫瘤細胞表達變化的不一致性可能與integrin分子的不同作用有關(guān)。同一種粘附分子可以在轉(zhuǎn)移和附著兩個不同的過程中發(fā)揮作用，因此integrin分子表達的增加或減少都可能與腫瘤細胞浸潤及轉(zhuǎn)移有關(guān)。對腫瘤血行轉(zhuǎn)移的研究多采用小鼠尾靜脈注射黑素瘤細胞造成肺轉(zhuǎn)移的模型，已知黑素瘤細胞表達的cd44分子、層粘連蛋白受體等都可以促進黑素瘤細胞有肺部形成轉(zhuǎn)移灶，用相應(yīng)粘附分子的抗體或可溶性配體則可減少黑素瘤的肺部形成轉(zhuǎn)移灶。殺傷細胞與腫瘤細胞的接觸由兩種細胞表面粘附分子的相互作用來介導(dǎo)，lfa-1/icam-1的相互作用具有重要地位。多種腫瘤細胞表達icam-1分子，腫瘤細胞icam-1分子的表達可能與腫瘤組織內(nèi)淋巴細胞的浸潤有關(guān)。細胞因子如ifn-γ、ifn-α、il-4、tnf-α可促進某些腫瘤細胞icam-1分子的表達，從而增加其對殺傷細胞作用的敏感性。毛細胞白血病細胞不表達lfa-1和icam-1分子，使其對ctl的殺傷作用更為敏感。腫瘤患者血清中可溶性icam-1水平往往高于正常人，可能抑制nk對腫瘤細胞的殺傷作用。癌胚抗原相關(guān)細胞粘附分子1(ceacam1)是廣泛表達于中性粒細胞、巨噬細胞、上皮細胞及淋巴細胞表面的跨膜糖蛋白,屬癌胚抗原家族免疫球蛋白超家族粘附分子，其生物學(xué)功能包括促進血管的形成,調(diào)節(jié)血管的重塑，參與細胞凋亡的調(diào)控、促進腺體管腔的形成及調(diào)控胰島素的清除以維持細胞對胰島素的敏感性，同時ceacam1也是致病微生物的粘著受體。惡性腫瘤一個重要生物學(xué)特征是其對鄰近正常組織的浸潤及遠處轉(zhuǎn)移。目前已知腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移與其粘附分子表達的改變有關(guān)。一方面腫瘤細胞某些粘附分子表達的減少可以使細胞間的附著減弱，腫瘤細胞脫離與周圍細胞的附著，這是腫瘤浸潤及轉(zhuǎn)移的第一步；另一方面，腫瘤細胞表達的某些粘附分子使已入血的腫瘤細胞得以粘附血管內(nèi)皮細胞，造成血行轉(zhuǎn)移。檢測細胞粘附因子常用的方法包括生物學(xué)檢測法，免疫法，分子生物學(xué)及流式細胞術(shù)。上述四種方法，各有優(yōu)缺點，在實際應(yīng)用中，根據(jù)各自的實驗?zāi)康暮蛯嶒炇覘l件進行選擇。生物學(xué)檢測法比較敏感，又可直接測定生物學(xué)功能，是最可靠的方法，適用于各種實驗?zāi)康模强蒲胁块T最常用的技術(shù)，但需要長期培養(yǎng)依賴性細胞株，檢測耗時長，步驟繁雜，影響因素多，不容易熟練掌握。免疫學(xué)檢測法比較簡單，迅速，重復(fù)性好，但假陽性率高，每次只能檢測一個細胞粘附因子。分子生物學(xué)法只能檢測基因表達情況，不能直接提供有關(guān)因子的濃度及活性等資料，主要用于機制探討。流式細胞術(shù)是以高能量激光照射高速流動狀態(tài)下被熒光色素染色的單細胞或顆粒，測量其產(chǎn)生的散射光和發(fā)射熒光的強度，從而對細胞進行定性或定量檢測的一種細胞分析技術(shù)。由于流式細胞術(shù)需要昂貴的儀器和專業(yè)的操作人員，所以并沒有得到廣泛應(yīng)用。有鑒于此，有必要開發(fā)一種新型的細胞粘附因子定量檢測試劑盒，以克服現(xiàn)有技術(shù)中亟待解決的問題，實現(xiàn)多種受體的高通量、高靈敏度、高特異性和低成本檢測。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種檢測細胞粘附分子的抗體芯片試劑盒，該試劑盒能同時檢測多個臨床常用的細胞粘附因子，克服了現(xiàn)有技術(shù)操作繁瑣、檢測指標單一、靈敏度低等缺陷，具有廉價、便利、靈敏、準確、高通量、標本用量少、能在普通實驗室推廣和規(guī)?；葍?yōu)點。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)的：一種檢測多種細胞粘附分子的抗體芯片試劑盒，包括抗體芯片，細胞粘附因子標準品混合物，生物素標記的細胞粘附因子檢測抗體混合物；和熒光素cy3標記的鏈霉親和素；其中，所述抗體芯片以含有烷基糖苷的親水試劑處理的玻片作為固相載體，且多種細胞粘附因子的特異性抗體混合物在20～26℃、35～45％的濕度條件下點樣到固相載體上。以沒有空間限制的標準組織玻片作為載體，可使點在同一微陣列上檢測細胞粘附因子的數(shù)目不受空間的限制，另外，玻片具有非常低的自身熒光，而且熒光信號不具擴散性，不同點間的熒光信號不會彼此干擾，所以一次可以同時檢測多個細胞粘附因子。但是，以不同的方法來處理標準組織玻片，會影響玻片的背景、檢測靈敏度，本發(fā)明通過比較多種處理玻片的方法，發(fā)現(xiàn)以含有烷基糖苷的親水試劑處理的玻片背景低，檢測靈敏度高，實現(xiàn)了不僅一次可以檢測十幾個細胞粘附因子，并且所檢測的細胞粘附因子靈敏度可達單因子的elisa檢測靈敏度。優(yōu)選地，所述細胞粘附因子檢測抗體混合物為活性白細胞粘附分子，基底細胞粘附分子，癌胚抗原相關(guān)細胞粘附因1子，鈣粘附蛋白e，上皮細胞粘附分子，人e-選擇素，細胞間粘附分子-1，細胞間粘附分子-2，細胞間粘附分子-3，人l-選擇素，神經(jīng)細胞粘附分子-1，神經(jīng)細胞粘附分子，鈣粘附蛋白p，人p-選擇素，血小板內(nèi)皮細胞粘附分子-1，血管細胞粘附分子-1，血管內(nèi)皮鈣粘蛋白的特異性抗體的混合物。更優(yōu)選地，所述親水試劑為質(zhì)量分數(shù)為0.01～0.2％的烷基糖苷、0.01～0.1％的甘油，0.01～0.05％的聚乙二醇4000的超純水溶液；親水試劑處理玻片的方法為將玻片在親水試劑中浸泡3～5分鐘，晾干即可。最優(yōu)選地，所述親水試劑為質(zhì)量分數(shù)為0.1％的烷基糖苷、0.05％的甘油，0.01％的聚乙二醇4000的超純水溶液；親水試劑處理玻片的方法為將玻片在親水試劑中浸泡3分鐘，晾干即可。更優(yōu)選地，所述細胞粘附因子檢測抗體混合物在24℃、40％的濕度條件下點樣到固相載體上。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：以不同的方法來處理標準組織玻片，會影響玻片的背景、檢測靈敏度，本發(fā)明通過比較多種處理玻片的方法，發(fā)現(xiàn)以含有烷基糖苷的親水試劑處理的玻片背景低，檢測靈敏度高，實現(xiàn)了不僅一次可以檢測十幾個細胞粘附因子，并且所檢測的細胞粘附因子靈敏度可達單因子的elisa檢測靈敏度。本發(fā)明的抗體芯片試劑盒克服了現(xiàn)有技術(shù)操作繁瑣、檢測指標單一、靈敏度低等缺陷，具有廉價、便利、靈敏、準確、高通量、標本用量少、能在普通實驗室推廣和規(guī)?；葍?yōu)點。本發(fā)明的抗體芯片試劑盒尤其適用于活性白細胞粘附分子，基底細胞粘附分子，癌胚抗原相關(guān)細胞粘附因1子，鈣粘附蛋白e，上皮細胞粘附分子，人e-選擇素，細胞間粘附分子-1，細胞間粘附分子-2，細胞間粘附分子-3，人l-選擇素，神經(jīng)細胞粘附分子-1，神經(jīng)細胞粘附分子，鈣粘附蛋白p，人p-選擇素，血小板內(nèi)皮細胞粘附分子-1，血管細胞粘附分子-1，血管內(nèi)皮鈣粘蛋白，這17種細胞粘附因子對應(yīng)特異性抗體的組合方式。因為，不同的細胞粘附因子的特異性抗體在本發(fā)明所述芯片檢測系統(tǒng)中的靈敏性是不同的，所以，如果將一些低靈敏性的細胞粘附因子抗體與一些高靈敏性的細胞粘附因子抗體組合，會造成低靈敏性的細胞粘附因子的漏檢。附圖說明圖1為抗體芯片點陣圖。圖2為粘附因子的標準曲線圖。具體實施方式下面結(jié)合說明書附圖和具體實施例對本發(fā)明作出進一步地詳細闡述，所述實施例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。下述實施例中所使用的試驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所使用的材料、試劑等，如無特殊說明，為可從商業(yè)途徑得到的試劑和材料。實施例1抗體芯片載體的篩選：常規(guī)的抗體芯片多以硝酸纖維素膜為載體，由于硝酸纖維素膜是多層結(jié)構(gòu)，芯片的洗滌難度大，以致芯片的背景高，結(jié)果波動大。同時硝酸纖維素膜易碎，不易于大規(guī)模的操作，用于大規(guī)模臨床樣本的使用還不普遍。而傳統(tǒng)的玻片價廉背景低，這給診斷和研究領(lǐng)域的廣泛使用帶來了突破。我們篩選了市面上不用活性方法處理的玻片，無論是醛基化還氨基化的玻片點樣效果不穩(wěn)定。經(jīng)過大量的篩查得出溫度及玻片表面的活性試劑成分才是決定玻片點樣效果的關(guān)鍵。采用以下5組的玻片：第1組為氨基化玻片，購自康寧公司，貨號為ultragaps40019；第2組為醛基化玻片：將第1組玻片加入戊二醛浸泡40分鐘制作醛基化玻片；第3組為apes玻片：將普通玻片加入丙酮稀釋的apes中浸泡0.5～1分鐘，再用純丙酮清洗制成apes玻片；第4組為多聚賴氨酸玻片：將普通玻片加入pbs稀釋的多聚賴氨酸浸泡0.5～1個小時，再用純水清洗制成多聚賴氨酸玻片；第5組為經(jīng)親水試劑處理的玻片：將普通玻片用親水試劑浸泡3～5分鐘，室溫晾干即可；所述親水試劑為質(zhì)量分數(shù)為0.01～0.2％的烷基糖苷、0.01～0.1％的甘油，0.01～0.05％的聚乙二醇4000的超純水溶液。優(yōu)選地，所述親水試劑為質(zhì)量分數(shù)為0.1％的烷基糖苷、0.05％的甘油，0.01％的聚乙二醇4000的超純水溶液；親水試劑處理玻片的方法為將玻片在親水試劑中浸泡3分鐘，晾干即可。各種玻片的點樣效果不盡相同，加入親水涂層的玻片點樣效果較明顯，點樣效果較未處理過的高。其中經(jīng)過氨基化及親水處理的玻片較其他的類型效果較高。在20～26℃條件下，膜/玻片點樣效果較清晰，背景值低；而在27～30℃條件下，無論何種膜/玻片的點樣效果都出現(xiàn)擴散現(xiàn)象，溫度濕度越高，擴散越明顯。上述5組玻片結(jié)合抗體后加入二抗及底物，在不同的溫度及濕度條件下的靈敏度篩選結(jié)果如下表1，表1中表示靈敏度的指標是最低檢測線，單位ng/ml。表1綜合以上指標，最終選擇經(jīng)過上述含有烷基糖苷的親水試劑處理的玻片作為固相載體。實施例2一種同時定量檢測多個細胞粘附因子的抗體芯片試劑盒的制備：為了檢測樣品中是否存在相應(yīng)的受體，制備固定有17種細胞粘附因子對應(yīng)特異性抗體的玻片，17種細胞粘附因子對應(yīng)特異性抗體為普通市售產(chǎn)品?？贵w芯片的制備與保存：將100～1000pl的含特異性抗體的pbs緩沖液(含有0.01～10g/100ml牛白蛋白)用全自動點樣儀點樣于玻片上。具體的芯片點陣以生物素標記的牛igg作為陽性對照。17種抗體及兩種不同濃度的陽性對照在每個陣列中都有四個重復(fù)點。在本實施例中芯片陣列采用如圖1所示的排布方式，但事實上，在其他實施例中，芯片陣列還可以以其它的排布方式進行組合，并不局限于圖1所表示的形式。每張玻片上有16個相同的芯片陣列。將點樣好的玻片放于室溫條件下靜置過夜，然后在干燥器中抽氣干燥2小時。干燥后的玻片裝上配套的16孔框架把一張玻片分割成16個互不干擾的小區(qū)。u形框夾從兩側(cè)將16孔框架，硅膠墊與標準載玻片卡貼緊在一起，以致標準載玻片貼緊封閉16孔框架的底部，使16孔框架上的每個小格形成一個小的反應(yīng)孔，16孔框架邊緣分別按照孔的位置標注1至16的凹陷數(shù)字以方便辨認。用粘性膜封閉框架后，把整張芯片用不透氣的小袋封裝然后于2℃到8℃保存?zhèn)溆?。細胞粘附因子標準品的制備：制備細胞粘附因子的標準品。?7種細胞粘附因子用含0.1％小牛白蛋白的磷酸緩沖液稀釋后按照一定的量混合在一起，分裝后用冷凍干燥法干燥并于-80℃保存。在本實施例中，用于做標準曲線用的每種細胞粘附因子的最終使用濃度如表2所示。表2經(jīng)梯度稀釋后用于作標準曲線的粘附因子標準品的濃度(pg/ml)controlstd7std6std5std4std3std2std1alcam0516491484441,3334,000bcam01374121,2353,70411,11133,333100,000ceacam-101374121,2353,70411,11133,333100,000e-cadherin01103299882,9638,88926,66780,000epcam027822477412,2226,66720,000e-selectin01374121,2353,70411,11133,333100,000icam-101374121,2353,70411,11133,333100,000icam-201374121,2353,70411,11133,333100,000icam-301374121,2353,70411,11133,333100,000l-selectin05491,6464,93814,81544,444133,333400,000ncam-101374121,2353,70411,11133,333100,000nrcam01374121,2353,70411,11133,333100,000p-cadherin01374121,2353,70411,11133,333100,000pecam-101374121,2353,70411,11133,333100,000p-selectin027822477412,2226,66720,000vcam-105491,6464,93814,81544,444133,333400,000ve-cadherin02748232,4697,40722,22266,667200,000實施例3用本發(fā)明的試劑盒定量檢測粘附因子的實驗步驟如下：1、玻片芯片的完全干燥：將玻片芯片從盒子中取出來，在室溫平衡20～30min后，將包裝袋打開，揭開密封條，然后將芯片放在真空干燥器或者室溫干燥1～2小時。2、按表2對細胞粘附因子進行梯度稀釋2.1、添加500μl的樣品稀釋液到細胞粘附因子標準混合物的小管中，重新溶解標準品。打開小管前，先快速的離心，輕輕的上下抽打溶解粉末，標記這個小管為std1。2.2、分別標記6個干凈的離心管為std2、std3到std7，添加200μl的樣品稀釋液到每個小管中。2.3、抽取100μl的std1加入到std2中輕輕混合，然后從std2中抽取100μl加入到std3中，如此梯度稀釋至std7。2.4、抽取100μl的樣品稀釋液到另一個新的離心管中，標記為cntrl，作為陰性對照。注：因為每種細胞粘附因子的起始濃度是不同的，所以std1到std7的梯度稀釋后，每個細胞因子的系列濃度是不同的，本實施例中，梯度細胞粘附因子稀釋液的濃度如表2所示。3、芯片操作流程3.1、每個孔中加100μl的樣品稀釋液，室溫搖床上孵育30分鐘，封閉定量抗體芯片。3.2、抽去每個孔中的緩沖液，添加100μl的標準液和樣品到孔中，在搖床上4℃過夜孵育。注：不同樣品的孵育量不一樣：血漿、血清使用前用樣品稀釋液1：1稀釋；細胞上清液可用原液；細胞或組織裂解液經(jīng)蛋白濃度測定后加入5-50ug的量。3.3、清洗：抽去每個孔中的標準品或樣品，1×洗液i清洗5次，每次5min室溫搖床震蕩，每孔150μl的1×洗液i，每次清洗要抽干凈洗液，用去離子水稀釋20×洗液i。抽去每個孔中的1×洗液i，加入1×洗液ii清洗2次，每次5min室溫搖床震蕩，每孔150μl的1×洗液ii，每次清洗要抽干凈洗液，用去離子水稀釋20×洗液ii。3.4檢測抗體混合物的孵育：離心檢測抗體混合物小管，然后加入1.4ml的樣品稀釋液，混合均勻后再次快速離心。添加80μl的檢測抗體到每個孔中，室溫搖床上孵育2小時。3.5清洗：抽去每個孔中的檢測抗體，1×洗液i清洗5次，每次5min室溫搖床震蕩，每孔150μl的1×洗液i，每次清洗要抽干凈洗液，然后加入1×洗液ii清洗2次，每次5min室溫搖床震蕩，每孔150μl的1×洗液ii，每次清洗要抽干凈洗液。3.6cy3-鏈霉親和素的孵育：離心cy3-鏈霉親和素小管，然后加入1.4ml的樣品稀釋液，混合均勻后再次快速離心。添加80μl的cy3-鏈霉親和素到每個孔中，用鋁箔紙包住玻片避光孵育，室溫搖床上孵育1個小時。3.7清洗：抽去每個孔中的cy3-鏈霉親和素，1×洗液i清洗5次，每次5min室溫搖床震蕩，每孔150μl的1×洗液i，每次清洗要抽干凈洗液。3.8熒光檢測1)將玻片框架拆掉，小心不要用手接觸到玻片印制抗體的一面。2)將玻片放置在玻片清洗管中，添加約30ml的1×洗液i，能整個覆蓋住玻片，在室溫搖床上震蕩15min，棄去1×洗液i，添加約30ml的1×洗液ii，在室溫搖床上震蕩5min。3)去除玻片的殘留洗液。將玻片放置在玻片清洗管/干燥管中，不蓋蓋子，在1000rpm離心3min。4)采用激光掃描儀例如axongenepix掃描信號，采用cy3或者綠色通道(激發(fā)頻率＝532nm)。3.9芯片的數(shù)據(jù)提取以及用分析軟件來進行數(shù)據(jù)分析1)用genepix軟件來讀取生物芯片的熒光值。2)讀數(shù)后選用的數(shù)值為扣除點周圍背景的中間值讀數(shù)(f532median-localbackground)。用特定的定量芯片軟件來作每個粘附因子蛋白的標準曲線如圖2所示。實施例4實驗體系交叉反應(yīng)的測試?？贵w芯片實驗的準確性在一定程度上受限于所選擇的抗原或抗體的來源，純度與特異性，并且蛋白類抗體的生物與應(yīng)用存在著抗原性，免疫原性的強弱，異源抗體的類風濕因子和自身抗體的干擾，罕見抗體的高工作量篩選，因些篩選抗體對需要大量的實驗驗證?？贵w對間的交叉反應(yīng)測試是根據(jù)以下方法進行的。不同芯片首先與單個抗原濃度為100ng/ml的不同抗原孵育，洗片后再與每種抗原相對應(yīng)的檢測抗體反應(yīng).最后經(jīng)cy3-鏈霉親和素孵育，芯片掃描后讀數(shù)。以每種抗原的捕獲抗體為橫軸，以加入的抗原和相對應(yīng)的檢測抗體為縱軸可以得到表3的實驗結(jié)果。表3.抗體對間的交叉反應(yīng)測試結(jié)果實驗結(jié)果表明每種抗體對可以特異地識別自己的檢測抗原而與其他的抗原沒有交叉反應(yīng)。實施例5實驗體系的介質(zhì)回收率。該定量抗體芯片的在不同樣品介質(zhì)中的適用程度通過測定介質(zhì)回收率來顯示。在2倍稀釋的正常人血清和2倍稀釋的細胞上清液(cm)中分別加入不同濃度的各個細胞粘附因子，用該定量抗體芯片檢測，然后計算樣品的介質(zhì)回收率＝(介入樣品的粘附因子濃度-對照樣品的粘附因子濃度)/理論上介入的粘附因子濃度。實驗顯示該發(fā)明的試劑盒在人血清和細胞上清液中的回收率達31～126％。表4.定量抗體芯片在不同介質(zhì)中的回收率(pg/ml)spikingcmcm+agcm％serumserum+agserum％alcam2,00001,97399％411,88692％bcam50,000043,54387％030,47761％ceacam-150,000048,17596％39430,16360％e-cadherin40,000012,70832％012,48031％epcam10,00009,13791％06,27463％e-selectin50,000057,754116％30738,57477％icam-150,000041,00482％54,633112,939117％icam-250,000027,27355％14,33032,61737％icam-350,000031,86264％031,51863％l-selectin200,0000137,50669％73,849196,90362％ncam-150,0002,18465,343126％24,68979,904110％nrcam50,000045,91792％030,22160％p-cadherin50,00063047,04493％3,71662,841118％pecam-150,000038,20376％037,33375％p-selectin10,000011,348113％2,02913,415114％vcam-1200,0000228,073114％10,674133,38361％ve-cadherin100,000038,29738％040,05640％綜上所述，本發(fā)明公開了一種同時定量檢測多個粘附因子的抗體芯片試劑盒。該試劑盒一方面克服了常規(guī)elisa在受體檢測中的檢測指標單一，耗時，耗力，耗材等缺點，同時也克服了現(xiàn)有多因子檢測技術(shù)中的低通量，重復(fù)性差等弱點。該系統(tǒng)使用標準組織玻片作為表面載體，可以在玻片表面完成多重夾心elisa的反應(yīng)。同時抗體芯片的規(guī)格符合標準96孔酶標板的尺寸，使得高通量樣品操作成為可能。另外，我們也證實用該發(fā)明所檢測的受體的濃度可以達到單個elisa的檢測靈敏度和精確度。最后，通過對該芯片在不同樣品中介質(zhì)回收率的測定確準該發(fā)明的芯片試劑盒可以運用于血清，細胞上清液等不同的生物樣品。當前第1頁12