本發(fā)明涉及如本文所述用于評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險的方法。其公開了至少一種選自下組的標記物和任選地至少一種另外的標記物的量用于在如本文所述的受試者中評估增加的死亡率風(fēng)險的用途：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體；其中所述另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素2、生長分化因子15、過氧化物氧還蛋白4、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。本發(fā)明還涉及胰島素類似物，其用于在如本文所述的前糖尿病患者或糖尿病患者中減少死亡率。對死亡率的預(yù)測是重要的，進而可實施適當?shù)闹委煵呗砸匝舆t死亡率。具體而言，心血管(cv)疾病是世界范圍死亡率的主要誘因。已知多種死亡率風(fēng)險標記物：b型利尿鈉肽(bnp)(也稱為腦利鈉肽)是具有32個氨基酸的蛋白。其在響應(yīng)心肌細胞過度伸展中由心室分泌。bnp作為無生物活性的前肽與76個氨基酸長的n末端片段共同分泌(nt-原bnp；swissprot編號p16860)。nt-原bnp的生物半衰期高于bnp，這使nt-原bnp成為具有吸引力的診斷靶標。增加的nt-原bnp血漿水平(加上mcp-1和半乳凝素-3)已發(fā)現(xiàn)與更高的cv事件發(fā)生率相關(guān)(tunonj,amjcardiol,2013)。此外，在老年人中nt-原bnp鑒定為總死亡率和cv死亡率的指示劑(muscaria,intjclinpract,2013)。nt-原bnp(和hs-ctnt)還發(fā)現(xiàn)改善精確性，可在具有2型糖尿病患者的患者中使用其評估cv事件或死亡率的風(fēng)險(hillis等2013,diabetescare37(1):295-303)。還發(fā)現(xiàn)在穩(wěn)定型冠狀動脈疾病中nt-原bnp(+hstnt)可預(yù)測死亡率(giannitsise,clinchemlabmed,2013)。nt-原bnp的納入顯著改善18％、12％和13％的framingham、healthabc和aric心臟衰竭(hf)風(fēng)險預(yù)測(agarwalsk,circheartfail,2012)。過氧鐵氧還蛋白-4(uniprotnumberq13162)是抗氧化過氧化物酶的過氧化物氧還蛋白(prx)家族的可分泌和穩(wěn)定的同型，該家族由6個成員組成。由于其抗氧化活性，其為針對氧化應(yīng)激的保護劑。過氧鐵氧還蛋白-4參與轉(zhuǎn)錄因子nf-κb的活化。已顯示升高的血清水平與事件性心血管事件和心血管死亡率及無心血管疾病病史的患者中的全因死亡率顯著更高的風(fēng)險相關(guān)(abbasia,jaha,2012)。此外，已在具有2型糖尿病患者和外周動脈粥樣硬化疾病(pad)的患者中觀察到高水平的過氧鐵氧還蛋白-4(eterei,cellstresschaperones,2013)。血管生成素-2(ang-2；swissprot編號o15123)在人中是由angpt2基因編碼的蛋白。ang-2屬于血管生成素家族，該家族包括在血管生成中起作用的4個血管生長因子。血管生成素細胞因子參與控制微血管通透性且允許平滑肌細胞覆蓋血管，使得血管舒張和血管收縮成為可能。血管生成素-2促進細胞死亡并阻斷血管形成。循環(huán)的ang-2(及其受體stie-2)確定具有可遺傳性狀且與心血管疾病風(fēng)險因子相關(guān)，包括代謝綜合征(liebw,circcvgenet,2010)。高水平的ang-2發(fā)現(xiàn)與更大的全因和心血管死亡率風(fēng)險相關(guān)(lorbeerr,eurjheartfail,2013)。根據(jù)swissprot數(shù)據(jù)庫，gdf-15(swissprot編號q99988)屬于tgfβ超家族且在炎癥和細胞凋亡通路中起作用。血清gdf-15已與嚴重的腫瘤類型的進展陽性相關(guān)，包括一些結(jié)直腸癌、胰腺癌和前列腺癌。gdf-15還由觸發(fā)氧化應(yīng)激的心血管事件上調(diào)，包括動脈粥樣硬化。增加的循環(huán)gdf-15濃度已與未來增強的心血管副作用風(fēng)險關(guān)聯(lián)。ykl-40(swissprot編號p36222)還稱為幾丁質(zhì)酶-3-樣蛋白1，為對幾丁質(zhì)具有偏好的碳水化合物結(jié)合凝集素。其在針對病原體的防御和組織重構(gòu)中起作用。認為ykl-40在細胞響應(yīng)和應(yīng)對其環(huán)境的改變的能力中起重要作用。其為結(jié)締組織細胞的強效生長因子且作為內(nèi)皮細胞的遷移因子發(fā)揮作用。ykl-40在活化的巨噬細胞、關(guān)節(jié)軟骨細胞、滑膜細胞和肝臟中存在。其在肌肉組織、肺、胰腺、單核細胞或成纖維細胞中是不可檢測的。ykl-40結(jié)合幾丁質(zhì)；然而其不具有幾丁質(zhì)酶活性。在關(guān)節(jié)炎、嚴重細菌感染、炎性腸病和各種癌癥中看到升高的血清水平(swissprot數(shù)據(jù)庫)。ykl-40已報導(dǎo)可作為全因和心血管死亡率的指示劑(rathcke等,2010,internationaljournalofcardiology,143:35-42)。胰島素生長因子結(jié)合蛋白2(swissprot編號p18065)(igfbp-2)是富含半胱氨酸的蛋白，其具有在分子的氨基和羧基末端三分之一聚集的保守半胱氨酸殘基。igfbp調(diào)節(jié)igf蛋白的生物活性。一些igfbp還可具有不依賴其結(jié)合igf蛋白的能力的固有生物活性。在發(fā)育過程中，igfbp-2在多個組織中表達。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)了最高的表達水平。在成人中，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和多種發(fā)育組織中檢測到高表達水平。igfbp-2優(yōu)選與igfii結(jié)合，呈現(xiàn)對igfii比igfi高2-10倍的親和力(swissprot數(shù)據(jù)庫)。igfbp-2報導(dǎo)相關(guān)并在老年男性中增加8年的死亡率(vandenbeld等,2012,europeanjournalofendocomidology,167:111-117)。嗜鉻粒蛋白-a(cga,swissprot編號p10645)是主要的可溶性蛋白，其與兒茶酚胺共同儲存在神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細胞并從其共同釋放，且可作為激素原通過生成數(shù)種生物活性肽包括血管抑素、胰抑制素、抑制素、帕拉汀、色胺酸、we-14和ge-25發(fā)揮功能。其還保存在心肌的心房顆粒中。cga及其片段通過影響內(nèi)分泌和心血管，及免疫系統(tǒng)并通過影響葡萄糖或鈣的穩(wěn)態(tài)發(fā)揮廣譜的調(diào)節(jié)活性。cga血漿濃度與全因死亡率相關(guān)。對已知的死亡率風(fēng)險因子進行調(diào)整后，相關(guān)性喪失(rosjoh,eurjheartfail,2010)。cga是長期死亡率和貫穿acs范圍的心臟衰竭住院率的非依賴性指示劑且為常規(guī)心血管風(fēng)險標記物提供增量預(yù)后信息(janssonam,eurheartj,2009)。cga可識別具有增加的短期和長期死亡率風(fēng)險的受試者(goetzejp,endocrineconnections,2014)。急診科中在具有急性不穩(wěn)定的心臟衰竭的受試者中增加的cga(和ct-原et-1)水平除nt-原bnp測量外添加非依賴性的預(yù)后信息(dieplingerb.,clinchimacta,2009)。骨保護素(opg，swissprot編號o00300)是細胞因子受體，且為腫瘤壞死因子(tnf)受體超家族的成員。opg主要結(jié)合2種配體：trail(腫瘤壞死因子相關(guān)細胞凋亡誘導(dǎo)的配體)-預(yù)防腫瘤細胞的細胞凋亡。rankl(核因子κb配體受體活化劑-破骨細胞的細胞凋亡。骨和血管組織中礦物質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)opg可考慮為“血管鈣化”標記物。缺血性心臟病、缺血性中風(fēng)和全因死亡率的住院率的組合終點的非依賴預(yù)測因子(mogelvangr,heart,2012)。升高的水平與長期腎功能不全相關(guān)(lewisjr,amjnephrol,2014)。本發(fā)明的目的是研究是否能夠鑒定可用于評估增加的死亡率特別是心血管死亡率的風(fēng)險的新型生化標記物。驚訝的是，已發(fā)現(xiàn)生化標記物α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶(swissprot編號p08263)、三葉因子3(swissprot編號q07654)、α-2-巨球蛋白(swissprot編號p01023)和巨噬細胞來源的趨化因子(swissprot編號o00626)單獨，彼此組合或與本文所述的已知生化標記物組合為顯著的預(yù)測因子，特別是當添加至如本文所述的受試者的一個或多個風(fēng)險因子可用于評估增加的死亡率風(fēng)險，特別是在約7年內(nèi)。三葉因子3(tff3；swissprot編號q07654)是在人中由tff3基因(染色體21)編碼的蛋白。三葉家族成員的特征在于其具有至少一個拷貝的三葉基序，該基序為包含三個保守ss鍵的40-aa結(jié)構(gòu)域。三葉因子是粘蛋白產(chǎn)生細胞的次級產(chǎn)物。其在維持口腔黏膜的表面整體性中起關(guān)鍵作用并增強胃腸粘膜的愈合。tff包含胃肽(tff1)、解痙肽(tff2)和腸三葉因子(tff3)。已鑒定具有增加的腎病風(fēng)險的受試者的尿樣中的tff3可預(yù)測全因死亡率(o’seaghdha等,2013,j.am.soc.nephrol.,24:1880-1888)。o’seaghdha等人(表1)描述的隊列(framingham心臟研究)由<10％的糖尿病患者組成；相反origin隊列由>80％的糖尿病患者組成。α-2-巨球蛋白(swissprot編號p01023)是在血液中發(fā)現(xiàn)的大的血漿蛋白并由肝臟產(chǎn)生。其作為抗蛋白酶發(fā)揮作用且能夠滅活多種蛋白酶。其為急性期蛋白。其還作為細胞因子的載劑、生長因子和激素發(fā)揮作用。在腎病綜合征的血清中，α-2-巨球蛋白升高10倍或更多。α-2-巨球蛋白向尿液中的喪失通過其大的尺寸預(yù)防。未報導(dǎo)α-2-巨球蛋白為全因或心血管死亡率的預(yù)測因子。人α類谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶(gst)由在染色體6上的5個基因hgsta1-hgsta5和7個假基因組成。谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶(gst)包含真核和原核ii期代謝同工酶家族，最知名的是其出于解毒的目的催化谷胱甘肽(gsh)的還原形式與異生素底物偶聯(lián)的能力。在藥物代謝中活躍的哺乳動物gst現(xiàn)分為α、μ和π類α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶(swissprot編號p08263)，未報導(dǎo)其作為全因或心血管死亡率的預(yù)測因子。巨噬細胞來源的趨化因子(swissprot編號o00626)(mdc；ccl22)在巨噬細胞和單核細胞衍生的樹突細胞中高度表達。在正常胸腺中檢測到高表達且在肺和脾中檢測到較低表達。mdc通過在包含斑塊微血管的晚期動脈粥樣硬化斑塊區(qū)域內(nèi)由巨噬細胞亞群表達。mdc是嗜中性粒細胞的強效趨化劑，增強其殺菌活性并刺激溶菌酶的釋放(swissprot數(shù)據(jù)庫)。未報導(dǎo)巨噬細胞來源的趨化因子為全因或心血管死亡率的預(yù)測因子。載脂蛋白b(apob,swissprot編號p04114)是乳糜微粒和低密度脂蛋白(ldl)的初級載脂蛋白。ldl顆粒上的apob作為ldl受體的配體在貫穿機體的多種細胞中發(fā)揮作用。高水平的apob可導(dǎo)致引起血管疾病(動脈粥樣硬化)的斑塊，導(dǎo)致心臟疾病。存在相當多的證據(jù)指示apob的水平相比總膽固醇或ldl是心臟疾病風(fēng)險更好的指示劑。apob/apoa1比率優(yōu)于用于急性心肌梗塞風(fēng)險評估的任何膽固醇比率(mcqueenmj,lancet,2008)。apob(和apob/apoa-i比率)與頸動脈內(nèi)膜中層厚度相關(guān)(huangf,plosone,2013)。硒蛋白p(sep,swissprot編號p49908)是血漿中發(fā)現(xiàn)的最常見的硒蛋白(5-6mg/ml)。肝臟產(chǎn)生循環(huán)中發(fā)現(xiàn)的75％的該蛋白，但幾乎全部的組織都表達該蛋白。sep從肝臟將硒運輸至肝外組織且還具有抗氧化特性。sep在具有葡萄糖代謝失調(diào)的患者中升高且與多種心臟代謝參數(shù)相關(guān)，包括胰島素抗性、炎癥和動脈粥樣硬化(yangsl,jclinendocrinolmetab,2011)。sep的過度產(chǎn)生與具有2型糖尿病患者的患者中的低脂聯(lián)素血癥有關(guān)(misuh,plosone,2012)。生腱蛋白-c(swissprot編號p24821)屬于肌腱蛋白。肌腱蛋白是細胞外六聚體基質(zhì)糖蛋白。其為與胚胎發(fā)生、傷口愈合、細胞增殖、分化、運動和神經(jīng)再生相關(guān)的多種細胞功能的多效調(diào)節(jié)劑。存在四個成員：肌腱蛋白-r、肌腱蛋白-x和肌腱蛋白-w和肌腱蛋白-c。肌腱蛋白-c可考慮為組織重構(gòu)和心肌疾病活性的標記物。血清tn-c(+bnp水平)是心臟事件的非依賴預(yù)測因子(satoa,jcardfail,2012)。肌腱蛋白-c(以及mmp-9,timp_1)的高血清水平與具有擴張型心肌病(dcm)的受試者中減少的生存率相關(guān)(franzm,intjcardiol,2013)。高血清tn-c水平存在于成年心室非壓縮/過度小梁形成(nc/ht)中，其為先天性心肌病的一種罕見形式(ererhb,echocardiogr.2014)。review:tenascincinhumancardiacpathology.niebroj-doboszi,clinchimacta,2012。肝細胞生長因子受體(hgfr,swissprot編號p08581)是間充質(zhì)來源的異二聚體膜受體。刺激時，其具有促有絲分裂、抗細胞凋亡和血管生成特性，對多種細胞具有影響。其在胚胎發(fā)育和傷口愈合中起作用。肝細胞生長因子(hgf)是僅有的已知的hgfr配體。高水平的hgfr(及其配體hgf)可反映修復(fù)器官系統(tǒng)中衰竭的嘗試。具有高水平配體、hgf的受試者具有更多的cv疾病和更高的死亡率(n,expgerontol,2013)。配體、hgf的血清水平與chf嚴重性相關(guān)且與cv死亡率相關(guān)(lamblinn,circulation,2005)。配體、hgf在具有缺血性心肌病的旁路手術(shù)患者血清中很高且是心臟干細胞遷移的調(diào)節(jié)劑(d`’amario,d,circulation,2014)。具體而言，發(fā)明人使用了來自origin試驗的患者的隨機化集合并鑒定了共10種生化標記物，即nt-原bnp、α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、生長分化因子15、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、血管生成素-2、ykl-40、過氧鐵氧還蛋白-4和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，其單獨或彼此組合或與另外的標記物組合與死亡率，特別是心血管死亡率如致死性心肌梗死、致命性中風(fēng)和/或心臟衰竭顯著相關(guān)。此外，對于最終驗證，使用共8401參與者重復(fù)正向選擇過程用于死亡率結(jié)果。發(fā)明人確認了生物標記物α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子且額外發(fā)現(xiàn)了生物標記物載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白-c和肝細胞生長因子受體，其單獨或彼此組合或與其他已知的生物標記物與死亡率、特別是心血管死亡率如致死性心肌梗死、致命性中風(fēng)和/或心臟衰竭顯著相關(guān)。此外，在修飾的模型中(其中年齡和年齡及肌酐兩者添加至基礎(chǔ)臨床模型)，發(fā)明人確認了α谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子和其他鑒定的硒蛋白p和肌腱蛋白c作為生物標記物，其單獨或彼此組合或與其他已知的生物標記物組合與死亡率、特別是心血管死亡率如致死性心肌梗死、致命性中風(fēng)和/或心臟衰竭顯著相關(guān)。本發(fā)明因此涉及方法，例如體外用于評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險、特別是心血管死亡率風(fēng)險的方法，所述方法包括：(a)在來自所述的受試者樣品中確定(i)選自下組的至少一種第一標記物的量：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體；和(ii)任選地至少一種另外的標記物的量；和(b)當至少一種第一標記物的所述量相比參照量改變時，關(guān)聯(lián)所述受試者處于增加的死亡率風(fēng)險。在優(yōu)選的實施方案中，另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的方法中的另外的標記物選自下組：生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp、ykl-40、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。就本發(fā)明而言，“死亡率”是全因死亡率，例如由病理狀態(tài)或病癥、意外、感染或自殺引起的死亡率。具體地，優(yōu)選為由病理狀態(tài)或病癥引起的死亡率。最優(yōu)選的是心血管死亡率如致死性心肌梗死、致死性中風(fēng)或心臟衰竭。就本發(fā)明而言，“另外的標記物”是如果與第一標記物組合將添加評估增加的死亡率風(fēng)險的相關(guān)信息的任何標記物。如果例如通過危險比率另外的標記物的相關(guān)風(fēng)險與如定義的第一標記物的相關(guān)風(fēng)險相似，則認為信息是相關(guān)的。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及方法，例如，體外方法，用于評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險，特別是心血管死亡率，包括：(a)在來自所述的受試者樣品中確定(i)選自下組的至少一種第一標記物的量：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子；和(ii)任選地至少一種另外的標記物的量；和(b)當至少一種第一標記物的所述量相比參照量改變時，關(guān)聯(lián)所述受試者處于增加的死亡率風(fēng)險。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的方法中的另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在其他實施方案中，本發(fā)明涉及方法，例如，用于評估受試者中增加的死亡率特別是心血管死亡率的風(fēng)險的體外方法，其包括：(a)在來自所述的受試者樣品中確定(i)選自下組的至少一種第一標記物的量：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c；和(ii)任選地至少一種另外的標記物的量；和(b)當至少一種標記物的所述量相比參照量改變時，關(guān)聯(lián)所述受試者處于增加的死亡率風(fēng)險。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的方法中的另外的標記物選自下組：生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp、ykl-40和嗜鉻粒蛋白a。在本發(fā)明的另一優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶。任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在本發(fā)明的一個特別優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶且另外的標記物為nt-原bnp和血管生成素-2。在本發(fā)明的一個特別優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為肝細胞生長因子受體且另外的標記物為嗜鉻粒蛋白a。在本發(fā)明的另一優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為三葉因子3，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在本發(fā)明的另一優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為α-2-巨球蛋白，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在本發(fā)明的另一優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物，例如其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一標記物為α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和α-2-巨球蛋白，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一標記物為α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一標記物是α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體，任選地具有如本文所述的至少一種另外的標記物。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c，任選地具有如本文所述的至少一種另外的標記物。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一和另外的標記物為：nt-原bnp、α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、生長分化因子15、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、血管生成素-2、ykl-40、過氧鐵氧還蛋白-4和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在本發(fā)明的另一優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為載脂蛋白b，任選地具有如本文所述的至少一種另外的標記物。在本發(fā)明的另一優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為硒蛋白p，任選地具有如本文所述的至少一種另外的標記物。在本發(fā)明的另一優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為肌腱蛋白c，任選地具有如本文所述的至少一種另外的標記物。在本發(fā)明的另一優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的第一標記物為肝細胞生長因子受體，任選地具有如本文所述的至少一種另外的標記物。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一和另外的標記物為α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、嗜鉻粒蛋白a、硒蛋白p、肌腱蛋白c、肝細胞生長因子受體、骨保護素、載脂蛋白b、生長分化因子-15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp和ykl-40。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一和另外的標記物為α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c、肝細胞生長因子受體、nt-原bnp、血管生成素2、生長分化因子15、過氧化物氧還蛋白4、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2,骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。在本發(fā)明的另一實施方案中，如本文所述的第一和另外的標記物為α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、嗜鉻粒蛋白a、硒蛋白p、肌腱蛋白c、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp和ykl-40。根據(jù)本發(fā)明如本文所述的方法可用于評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險，其中所述增加的風(fēng)險在接下來的1、2、3、4、5、6或7年內(nèi)，特別是在接下來的1-7、1-3、2-7、2-5、3-7、4-7或5-7年內(nèi)。在一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法用于評估增加的死亡率風(fēng)險，所述死亡率為受試者中的心血管死亡率如致死性心肌梗死、致死性中風(fēng)和/或心臟衰竭。在本發(fā)明的方法和用途的另一實施方案中，第一標記物為三葉因子3且樣品為血清。在本發(fā)明的方法和用途的另一優(yōu)選的實施方案中，第一標記物為三葉因子3且死亡率是心血管死亡率。在本發(fā)明的另一實施方案中，第一標記物是三葉因子3且受試者罹患一種或多種如本文所述的風(fēng)險因子，例如所述風(fēng)險因子選自下組：既往心血管病癥、蛋白尿、男性、至少50歲的年齡、吸煙者、糖尿病患者或前糖尿病患者、升高的血膽固醇水平、肥胖和高血壓。在本發(fā)明的方法和用途的另一實施方案中，第一標記物是三葉因子3，樣品是血清，死亡率是心血管死亡率且受試者罹患一種或多種如本文所述的風(fēng)險因子，例如所述風(fēng)險因子選自下組：既往心血管病癥、蛋白尿、男性、至少50歲的年齡、吸煙者、糖尿病患者或前糖尿病患者、升高的血膽固醇水平、肥胖和高血壓。在本文所述的方法中，受試者可為不具有心血管病癥的風(fēng)險的受試者，如未滿足如調(diào)查風(fēng)險因子的心臟研究(例如interheart研究(yusuf等,2004,lancet364:953-962)或framingham心臟研究)中定義的一種或多種風(fēng)險因子的受試者。優(yōu)選地，在如本文所述的方法中，已知受試者處于高于心血管病癥的平均風(fēng)險，如滿足如調(diào)查風(fēng)險因子的心臟研究(例如interheart研究(yusuf等,2004,lancet364:953-962)或framingham心臟研究)中定義的一種或多種風(fēng)險因子的受試者。這樣的受試者可能罹患一種或多種選自下組的風(fēng)險因子：既往心血管病癥、蛋白尿、男性、至少50歲的年齡、升高的血膽固醇水平(例如ldl水平超過100mg/dl(2.5mmol/l)，升高的肌酐水平(例如對于女性≥1.0mg/dl和對于男性≥1.2mg/dl)、肥胖，優(yōu)選腹部肥胖、吸煙者、糖尿病患者，例如1型，優(yōu)選lada或2型糖尿病，高醇消耗和/或高血壓(例如超過140和/或90mmhg的值)。在一個特別優(yōu)選的實施方案中，受試者罹患一種或多種選自下組的風(fēng)險因子：既往心血管病癥、蛋白尿、男性、至少50歲的年齡、升高的血膽固醇水平、吸煙者、糖尿病患者，例如1型，優(yōu)選lada或2型糖尿病和/或高血壓。最優(yōu)選的為罹患風(fēng)險因子男性、至少50歲的年齡和吸煙者的受試者。在一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法用于評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險，優(yōu)選心血管死亡率的風(fēng)險，所述受試者具有既往心血管病癥、為前糖尿病患者或糖尿病患者，優(yōu)選lada或2型糖尿病，或具有至少50、55、60、63或65歲，優(yōu)選63歲的年齡。一個優(yōu)選的實施方案涉及根據(jù)本發(fā)明的方法，其用于評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險，所述受試者具有既往心血管病癥且為前糖尿病患者或糖尿病患者，優(yōu)選lada或2型糖尿病，且具有至少50、55、60、63或65歲，優(yōu)選63歲的年齡。受試者可為人或非人動物，如猴、兔、大鼠或小鼠。如貫穿本申請使用的術(shù)語“前糖尿病患者”或“前糖尿病”指例如具有葡萄糖耐量受損(igt)的患者，定義為ppg值≥140且<200mg/dl(即≥7.8且<11.1mmol/l)，具有fpg<126mg/dl(7.0mmol/l)如通過口服葡萄糖耐量測試(ogtt)確定的，或具有空腹血糖受損(ifg)的患者(定義為fpg≥110且<126mg/dl(≥6.1且<7mmol/l))，而不具有糖尿病(ppg必須為<200mg/dl[11.1mmol/l])的患者，兩者如通過例如75g口服葡萄糖耐量測試(ogtt)(其為本領(lǐng)域已知)確定的。例如，(ogtt)實施禁食(即至少8小時不消耗除水以外的食物或飲品)。兩個血漿葡萄糖值在ogtt過程中抽取-禁食值(fpg)和75g口服葡萄糖加載施用后2小時抽取的值(餐后血漿葡萄糖[ppg])。其還指具有早期2型糖尿病的患者，定義為fpg≥126mg/dl(7.0mmol/l)或≥200mg/dl(11.1mmol/l)的ppg。如貫穿本申請使用的術(shù)語“糖尿病患者”指具有2型糖尿病患者的受試者。術(shù)語還指具有1型糖尿病患者的受試者，優(yōu)選具有潛伏性自身免疫性糖尿病患者(lada)的受試者，例如，如通過測量針對如naik等,2009,jclinendocrinolmetab,94:4635-4644中所述的gad的自身抗體而診斷的。如貫穿本申請使用的術(shù)語“心血管病癥”指非致命性的心肌梗死、非致命性中風(fēng)、非致命性心臟衰竭、血運重建，例如冠狀動脈、頸動脈或外周動脈的血運重建，心絞痛、左心室肥厚、狹窄，例如冠狀動脈、頸動脈或下肢動脈的狹窄。如貫穿本申請使用的術(shù)語“既往心血管病癥”指診斷為一種或多種下述病癥的患者：非致命性心肌梗死(mi)；非致命性中風(fēng)；冠狀動脈、頸動脈或外周動脈血運重建；伴有記錄的缺血性改變的心絞痛(在分級運動測試[gxt]過程中在心電圖上至少2mm的st區(qū)段的抑制；或具有缺血陽性的心臟成像研究)；或伴有記錄的缺血性改變的不穩(wěn)定型心絞痛(至少1mm的st區(qū)段的抑制或正常范圍以上但低于急性心肌梗塞診斷范圍的肌鈣蛋白的增加)；微蛋白尿或臨床蛋白尿(在至少一次或定時收集的尿液中白蛋白:肌酐比率≥30μg/mg，具有白蛋白排泄≥20μg/分鐘或≥30mg/24小時或總蛋白排泄≥500mg/24小時)；通過心電圖或超聲心動圖的左心室肥大；冠狀動脈、頸動脈或下肢動脈的血管造影上的顯著狹窄(即50％以上狹窄)；和/或踝肱指數(shù)<0.9。如本文所述用于評估增加的死亡率風(fēng)險的方法包括在樣品中確定量，例如至少一種如本文所述的第一標記物的存在、水平和/或濃度和(ii)任選地如本文所述的至少一種另外的標記物的量；和(b)當至少一種第一標記物的所述量相比參照量改變時，關(guān)聯(lián)所述受試者處于增加的死亡率風(fēng)險。術(shù)語“確定”包括相比參照量定量確定樣品中如本文所述的第一或另外的標記物的量。在一個優(yōu)選的實施方案中，確定為定量或半定量確定，即確定所述第一或如本文所述的另外的標記物是否超過或低于臨界值(cutoffvalue)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員會理解的是在是(存在)或否(不存在)的測定中，測定敏感性通常設(shè)置為匹配臨界值。臨界值可例如從對照群體的測試確定。對照群體可為關(guān)于例如性別、年齡、死亡率風(fēng)險因子如本文所述的心血管風(fēng)險因子(例如吸煙、高滲/張力亢進(hypertonia)、肥胖、升高的血膽固醇水平、前糖尿病、糖尿病和/或增加的醇消耗)隨機化的受試者的群體。優(yōu)選地，設(shè)置臨界值以產(chǎn)生90％的特異性，還優(yōu)選設(shè)置臨界值以產(chǎn)生95％的特異性，或還優(yōu)選設(shè)置臨界值以產(chǎn)生98％的特異性。超過臨界值的值的存在可例如指示增加的死亡率風(fēng)險的存在?？商鎿Q地，確定所述第一或如本文所述的另外的標記物的濃度是否在所述標記物的具體的預(yù)定的濃度范圍內(nèi)并關(guān)聯(lián)具體預(yù)定的范圍是否與增加的死亡率風(fēng)險相關(guān)，例如通過應(yīng)用未調(diào)整和調(diào)整的cox回歸模型。例如，對在整個群體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的標記物濃度范圍預(yù)先確定類別，例如，3類(三分位(tertiles))、4類(四分位(quartiles))或5類(五分位(quintiles))，優(yōu)選五分位，其中類1定義為最低的濃度亞范圍且類5定義為最高的濃度亞范圍。死亡率風(fēng)險例如分別從類1增加至3-5?？商鎿Q地，術(shù)語“確定”包括如本文所述的第一標記物的量的定量確定。在此實施方案中，如本文所述的標記物的濃度與潛在的診斷問題相關(guān)，例如預(yù)死亡率階段的分類，在先前的病癥(例如心血管病癥)后的隨訪或?qū)Ο煼ǖ捻憫?yīng)。如對本領(lǐng)域的技術(shù)人員顯而易見的，本發(fā)明還不應(yīng)理解為局限于如本文所述的第一或另外的標記物的全長蛋白。如本文所述的第一或另外的標記物的生理或人工片段，如本所述的第一或另外的標記物的二級修飾，以及如本所述的第一或另外的標記物的等位基因變體也涵蓋在本發(fā)明中。人工片段優(yōu)選涵蓋合成或通過重組技術(shù)產(chǎn)生的肽，其至少包含一個感興趣的診斷表位，其由源自如本文所述的第一或另外的標記物的至少6個連續(xù)氨基酸組成。該片段可有利地用于生成抗體或作為免疫測定中的標準。更優(yōu)選地人工片段包含至少兩個感興趣的表位用于設(shè)置夾心免疫測定。冠詞“一種”和“一個”在本文用于指代物體的一個或多于一個的語法對象。例如，“標記物”意為一種或多于一種的標記物。術(shù)語“至少”用于指示可存在任選一種或多種其他對象。例如，標記物組包含作為標記物的至少第一標記物α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和三葉因子3和任選地至少一種或多種另外的標記物。如本文使用的術(shù)語“標記物”或“生化標記物”指用作分析患者的測試樣品的靶標的分子。在一個實施方案中，該分子靶標的實例是蛋白或多肽。在本發(fā)明中用作標記物的蛋白或多肽認為包括所述蛋白的天然存在的變體以及所述蛋白或所述變體的片段，具體而言，免疫上可檢測的片段。免疫上可檢測的片段優(yōu)選包含所述標記物多肽的至少6、7、8、10、12、15或20個連續(xù)的氨基酸。本領(lǐng)域的技術(shù)人員會認識到的是由細胞釋放或存在于細胞外基質(zhì)中的蛋白可以是損傷的，例如在炎癥過程中，且可以變成降解或裂解為這樣的片段。一些標記物以非活性的形式合成，其隨后可由蛋白水解活化。如本領(lǐng)域的技術(shù)人員會理解的，蛋白或其片段還可作為復(fù)合物的一部分存在。這種復(fù)合物還可用作本發(fā)明意義上的標記物。標記物多肽的變體由相同的基因編碼，但就其等電點(＝pi)或分子重量(＝mw)或兩者可有所差異，例如作為替代mrna或前mrna加工的結(jié)果。變體的氨基酸序列與相應(yīng)的標記物序列95％或更多相同。此外，或可替換地，標記物多肽或其變體可攜帶翻譯后修飾。優(yōu)選的翻譯后修飾為糖基化、乙?；?或磷酸化。優(yōu)選地，如本文所述的第一或另外的標記物通過使用特定的結(jié)合劑從樣品特異性地測量。特定的結(jié)合劑針對其相應(yīng)的靶標分子具有至少107l/mol的親和力。特定的結(jié)合劑優(yōu)選具有108l/mol的親和力或更優(yōu)選地，針對其靶標分子109l/mol的親和力。如本領(lǐng)域的技術(shù)人員會理解的，術(shù)語特異性用于指示樣品中存在的其他生物分子不與特異性針對標記物的結(jié)合劑顯著結(jié)合。優(yōu)選地，與靶標分子之外的生物分子結(jié)合的水平導(dǎo)致結(jié)合親和力，其分別為與靶標分子的親和力的至多僅10％或更少、僅5％或更少、僅2％或更少或僅1％或更少。優(yōu)選的特異性結(jié)合劑會滿足親和力以及特異性的上述最小標準兩者。特異性結(jié)合劑優(yōu)選為與本文所述的第一或另外的標記物具有反應(yīng)性的抗體。術(shù)語抗體指多克隆抗體、單克隆抗體、所述抗體的抗原結(jié)合片段、單鏈抗體以及包含抗體的結(jié)合域的遺傳構(gòu)建體?？墒褂帽Ａ籼禺愋越Y(jié)合劑的上述標準的任何抗體片段。抗體通過現(xiàn)有工藝方法生成，例如如tijssen(tijssen,p.,practiceandtheoryofenzymeimmunoassays,11,elseviersciencepublishersb.v.,amsterdam,全書，特別是第43-78頁)中所述。此外，本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知基于可用于抗體的特異性分離的免疫吸附劑的方法。通過這些方式，可增強多克隆抗體的量及由此它們在免疫測定中的表現(xiàn)(tijssen,p.,見上文,第108-115頁)。為實現(xiàn)本發(fā)明的公開內(nèi)容，可使用在兔中生成的多克隆抗體。然而，顯而易見的是還可使用來自不同物種例如大鼠或豚鼠的多克隆抗體以及單克隆抗體。由于單克隆抗體可以要求性質(zhì)恒定的任何量產(chǎn)生，其代表用于臨床常規(guī)的測定法開發(fā)中的理想工具。針對根據(jù)本發(fā)明的方法中如本文所述的第一或另外的標記物的單克隆抗體的生成和使用分別代表其他優(yōu)選的實施方案。如本領(lǐng)域的技術(shù)人員會理解的，既然如本文所述的第一或另外的標記物已鑒定為可用于評估增加的死亡率風(fēng)險的標記物，可使用多種免疫診斷方法以達到與本發(fā)明的成果可比較的結(jié)果。例如，可使用替換的策略生成抗體。這種策略包括合成的肽的使用等，代表如本文所述用于免疫的第一或另外的標記物的表位?？商鎿Q地，可使用dna免疫，也稱為dna疫苗接種。對于在從受試者獲得的樣品中確定所述第一或另外的標記物，將樣品與所述第一或另外的標記物的特異性結(jié)合劑在適于形成結(jié)合劑標記物復(fù)合物的條件下溫育。由于本領(lǐng)域的技術(shù)人員無需任何創(chuàng)造性努力就可容易地鑒定這種適當?shù)臏赜龡l件，無需詳明這樣的條件。測量結(jié)合劑標記物復(fù)合物的量并用于評估增加的死亡率風(fēng)險。如本領(lǐng)域的技術(shù)人員會理解的，存在多種測量特異性結(jié)合劑標記物復(fù)合物的量的方法，所述方法均在相關(guān)的教科書中詳述(參見例如tijssenp.,見上文，或diamandis,e.p.和christopoulos,t.k.(編),immunoassay,academicpress,boston(1996))。例如，可在夾心類型測定形式中檢測如本文所述的標記物。在該測定法中，第一特異性結(jié)合劑用于捕獲一側(cè)上的標記物且經(jīng)標記以直接或間接可檢測的第二特異性結(jié)合劑在另一側(cè)上使用。在優(yōu)選的實施方案中，樣品中如本文所述的標記物的測量通過使用夾心免疫測定法實施，其中使用了鏈霉親和素-涂覆的微量滴定板。將針對如本文所述的標記物的生物素化的多克隆抗體用作捕獲抗體且針對所述標記物的地高辛化的多克隆抗體在該夾心測定中用作第二特異性結(jié)合伴侶。形成的夾心復(fù)合物最終通過抗地高辛辣根過氧化物酶綴合物和適當?shù)倪^氧化物酶底物可視化。如上文所述，第一或另外的標記物可從由受試者樣品獲得的液體樣品確定。在優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法使用作為液體樣品材料的血清實踐。如本文使用的術(shù)語“樣品”指出于評估目的獲得的生物樣品。在本發(fā)明的方法中，樣品或受試者的樣品優(yōu)選可包含任何體液或組織提取物。例如，測試樣品包括血液、血清、血漿、腦脊液和唾液。優(yōu)選的樣品為全血、血清或血漿，血清是最優(yōu)選的。在一個實施方案中，評估在體外進行。隨后丟棄受試者樣品。受試者樣品僅用于本發(fā)明的體外方法且受試者的材料不轉(zhuǎn)移回至受試者體內(nèi)。通常，樣品是液體樣品，例如全血、血清或血漿，優(yōu)選血清。生化標記物可以單獨或在本發(fā)明優(yōu)選的實施方案中確定，其可使用芯片或基于珠的陣列技術(shù)同時測量。生物標記物的濃度隨后獨立解讀，例如對每種標記物使用單獨的臨界值或參照量，或?qū)⑵浣M合用于解讀。在本發(fā)明中建立的數(shù)據(jù)指示標記物α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體和任選地至少一種另外的標記物的量會形成適于診斷目的的標記物組的整合部分，且其中所述另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素2、生長分化因子15、過氧化物氧還蛋白4、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。在本發(fā)明中建立的數(shù)據(jù)還指示標記物α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子會形成適于診斷目的的標記物組的整合部分。本發(fā)明因此涉及至少一種選自下組的第一標記物和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物在評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險(優(yōu)選地心血管死亡率)中的用途：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體，其中確定來自受試者的樣品中所述第一標記物相比所述標記物的參照量所改變的量指示所述增加的風(fēng)險。本發(fā)明還涉及包含下述的標記物組和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物在評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險(優(yōu)選心血管死亡率)中的用途：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體，其中確定至少下述的改變的量指示所述風(fēng)險：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體。優(yōu)選的如本文所述的另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。在一個優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的另外的標記物選自下組：生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種選自下組的第一標記物和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物在評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險(優(yōu)選心血管死亡率)中的用途：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子，其中確定來自受試者的樣品中所述第一標記物相比所述標記物的參照量所改變的量指示所述增加的風(fēng)險。本發(fā)明還涉及包含下述的標記物組和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物在評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險(優(yōu)選心血管死亡率)中的用途：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子，其中確定至少下述的改變的量指示所述增加的風(fēng)險：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和/或巨噬細胞來源的趨化因子。使用的優(yōu)選的另外的標記物或如本文所述的標記物組選自下組：nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15、血管生成素-2和ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在另外的實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種選自下組的第一標記物和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物在評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險(優(yōu)選心血管死亡率)中的用途：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c，其中確定來自受試者的樣品中所述第一標記物相比所述標記物的參照量所改變的量指示所述風(fēng)險。在另外的實施方案中，本發(fā)明還涉及包含下述的標記物組和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物在評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險(優(yōu)選心血管死亡率)中的用途：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c，其中確定至少下述的改變的量指示所述增加的風(fēng)險：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和/或肌腱蛋白c。在一個優(yōu)選的實施方案中，如本文所述的另外的標記物選自：生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp、ykl-40和嗜鉻粒蛋白a。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述標記物為α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶，任選地具有至少一種另外的標記物，例如其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在一個特別優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明涉及第一和另外的標記物α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、nt-原bnp和促血管新生蛋白因子-2的用途。在一個特別優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明涉及第一和另外的標記物肝細胞生長因子受體和嗜鉻粒蛋白a的用途。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述標記物為三葉因子3，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述標記物為α-2-巨球蛋白，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述標記物為巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體，任選地具有至少一種如本文所述的另外的標記物。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、硒蛋白p和肌腱蛋白c，任選地具有至少一種如本文所述的另外的標記物。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述標記物為α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和α-2巨球蛋白，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述標記物為α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種如本文所述的第一標記物的用途，其中所述標記物為α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物，例如，其中所述至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。如本文所述的本發(fā)明優(yōu)選的標記物組的用途包括：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、ykl-40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15和血管生成素-2。如本文所述的本發(fā)明特別優(yōu)選的標記物組的用途包括：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、nt-原bnp和血管生成素-2。如本文所述的本發(fā)明特別優(yōu)選的標記物組的用途包括：肝細胞生長因子受體和另外的標記物嗜鉻粒蛋白a。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物為載脂蛋白b，任選地具有如本文所述的至少一種另外的標記物。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物為硒蛋白p，任選地具有至少一種另外的標記物。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物為肌腱蛋白c，任選地具有至少一種另外的標記物。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物為肝細胞生長因子受體，任選地具有至少一種另外的標記物。如本文所述的本發(fā)明優(yōu)選的標記物組的另一用途包括：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、嗜鉻粒蛋白a、硒蛋白p、肌腱蛋白c、肝細胞生長因子受體、骨保護素、載脂蛋白b、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp和ykl-40。如本文所述的本發(fā)明優(yōu)選的標記物組的另一用途包括：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、嗜鉻粒蛋白a、硒蛋白p、肌腱蛋白c、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp和ykl-40。如本文所述的本發(fā)明優(yōu)選的標記物組的另一用途包括：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、嗜鉻粒蛋白a、硒蛋白p、肌腱蛋白c、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp、ykl-40、載脂蛋白b、肝細胞生長因子受體、過氧化物氧還蛋白4和骨保護素。如本領(lǐng)域的技術(shù)人員會理解的，存在多種方式使用兩種或多種標記物的量的確定以在研究下關(guān)聯(lián)診斷問題。在相當簡單但仍經(jīng)常有效的方式中，如果樣品中標記物相比參照量改變，則假設(shè)陽性結(jié)果，即增加的死亡率風(fēng)險的存在。例如，對于標記物三葉因子3、α-2-巨球蛋白、生長分化因子15、nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2和血管生成素-2，高于參照量的水平預(yù)測增加的死亡率風(fēng)險。相反，例如，對于標記物谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和巨噬細胞來源的趨化因子，高于參照量的水平預(yù)測降低的死亡率風(fēng)險。然而通常，評估標記物的組合。優(yōu)選地，將測量的標記物組中標記物的值(例如三葉因子3和nt-原bnp)進行數(shù)學(xué)上的組合并將組合的值與潛在的診斷問題關(guān)聯(lián)。標記物的值可通過本領(lǐng)域已知的任何適當?shù)臄?shù)學(xué)方法組合。將標記物組合與疾病關(guān)聯(lián)的已知的數(shù)學(xué)方法采用下述方法，如判別分析(da)(即線性-、二次-、正則化-da)、核方法(kernelmethods，即svm)、非參數(shù)方法(即k-最近鄰分類(k-nearest-neighborclassifiers))、pls(偏最小二乘)、基于樹的方法(即邏輯回歸、cart，randomforest方法、boosting/bagging方法)、廣義線性模型(即邏輯回歸)、基于主成分的方法(即simca)、廣義加和模型、基于模糊邏輯的方法、基于神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)和遺傳算法的方法。本領(lǐng)域的技術(shù)人員在選擇適當方法以評估本發(fā)明標記物組合中沒有問題。涉及這些統(tǒng)計學(xué)方法的詳情可在下述參考文獻中獲得：ruczinski,i.,等,j.ofcomputationalandgraphicalstatistics,12(2003)475-511；friedman,j.h.,j.oftheamericanstatisticalassociation84(1989)165-175；hastie,trevor,tibshirani,robert,friedman,jerome,theelementsofstatisticallearning,springerseriesinstatistics,2001；breiman,l.,friedman,j.h.,olshen,r.a.,stone,c.j.(1984)classificationandregressiontrees,california:wadsworth；breiman,l.,randomforests,machinelearning,45(2001)5-32；pepe,m.s.,thestatisticalevaluationofmedicaltestsforclassificationandprediction,oxfordstatisticalscienceseries,28(2003)；和duda,r.o.,hart,p.e.,stork,d.g.,patternclassification,wileyinterscience,第2版(2001)。本發(fā)明進一步優(yōu)選的實施方案是使用生物標記物潛在組合的優(yōu)化多變量臨界并將狀態(tài)a與狀態(tài)b(例如風(fēng)險與非風(fēng)險)進行區(qū)分。在這類分析中，標記物不再是獨立的而是形成標記物組。診斷方法的精確性通過其受試者工作特征(roc)最佳描述(具體參見zweig,m.h.和campbell,g.,clin.chem.39(1993)561-577)。roc圖是全部敏感性/特異性對的繪圖，其通過在觀察到的數(shù)據(jù)整體范圍上不斷變化決定閾值獲得。實驗室測試的臨床表現(xiàn)依賴于其診斷精確性，或正確將受試者分類為臨床相關(guān)亞群的能力。診斷精確性測量測試的正確區(qū)分調(diào)查的受試者的兩種不同病況的能力。該病況為例如健康和疾病或良性對惡性疾病。在每個情況中，roc繪圖通過繪制決定閾值的全部范圍的敏感性對1-特異性而描述了兩種分布之間的重疊。在y軸上的是敏感性，或真陽性分數(shù)[定義為(真陽性測試結(jié)果的數(shù)目)/(真陽性的數(shù)目+假陰性測試結(jié)果的數(shù)目)]。這還指疾病或病況存在下的陽性。其僅從受影響的亞群計算。在x軸上的是假陽性分數(shù)，或1-特異性[定義為(假陽性結(jié)果的數(shù)目)/(真陰性結(jié)果的數(shù)目+假陽性結(jié)果的數(shù)目)]。其為特異性的指數(shù)且完全從受影響的亞群計算。由于真和假陽性分數(shù)通過該使用來自兩個不同亞組的測試結(jié)果完全分開計算，roc繪圖不依賴于樣品中疾病的流行。roc繪圖上的每個點代表對應(yīng)于特定決定閾值的敏感性/1-特異性對。具有完美區(qū)別的測試(在結(jié)果的兩個分布中無重疊)具有穿過左上角的roc繪圖，其中真陽性分數(shù)是1.0或100％(完美的敏感性)，且假陽性分數(shù)是0(完美的特異性)。無區(qū)別測試的理論繪圖(兩組結(jié)果分布相同)是從左下角至右上角的45°對角線。多數(shù)繪圖落入這兩個極端之間(如果roc繪圖完全落在45°對角線以下，其可通過將“陽性”的標準從“大于”逆轉(zhuǎn)為“小于”而容易地補救，或反之亦然。)定性地，繪圖越接近左上角，測試的整體精確性越高。量化實驗室測試的診斷精確性的一個優(yōu)選的方式是通過單一的數(shù)字表示其性能。該整體參數(shù)稱例如為所謂的“總誤差”或可替換地“曲線下面積＝auc”。最常見的整體量度是roc繪圖下的面積。按照慣例，該面積總是>0.5(如果不是如此，則技術(shù)人員可逆轉(zhuǎn)決定規(guī)則以使其如此)。值的范圍在1.0(兩組測試值的完美分開)至0.5(兩組測試值之間無明顯的分布差異)。面積不僅依賴于繪圖的特定部分如與對角線最接近的點或在90％特異性處的敏感性，還依賴于整體繪圖。這是roc繪圖與完美者(面積＝1.0)有多接近的定量、描述性表示。公開了用于開發(fā)診斷測試(例如檢測、篩選、監(jiān)測、預(yù)測和預(yù)后測試)的系統(tǒng)和方法，如，例如試劑盒。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體，和用于實施測定的輔助試劑。優(yōu)選的如本文所述的另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子-15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。另外的優(yōu)選標記物優(yōu)選選自下組：生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和/或巨噬細胞來源的趨化因子，和用于實施測定的輔助試劑。如本文所述的至少一種另外的標記物選自下組：nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15、血管生成素-2、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。在另外的實施方案，本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c，和用于實施測定的輔助試劑。優(yōu)選的另外的標記物選自下組：生長分化因子-15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40和嗜鉻粒蛋白a。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑，所述另外的標記物例如選自nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15血管生成素-2、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法特別優(yōu)選的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、nt-原bnp和血管生成素-2，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法特別優(yōu)選的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：肝細胞生長因子受體和嗜鉻粒蛋白a，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施根據(jù)本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少三葉因子3和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑，所述另外的標記物例如選自下組：nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15血管生成素-2、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少α-2-巨球蛋白和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑，所述另外的標記物例如選自下組：nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15、血管生成素-2、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少巨噬細胞來源的趨化因子和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑，所述另外的標記物例如選自下組：nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15、血管生成素-2、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2巨球蛋白和/或巨噬細胞來源的趨化因子，所述另外的標記物例如選自下組：nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15、血管生成素-2、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和α-2巨球蛋白，所述另外的標記物例如選自下組：nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15、血管生成素-2、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和巨噬細胞來源的趨化因子，所述另外的標記物例如選自下組：nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15、血管生成素-2、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述和任選地至少一種另外的標記物所需的試劑：α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子，所述另外的標記物例如選自下組：nt-原bnp、過氧鐵氧還蛋白-4、生長分化因子-15、血管生成素-2、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，和任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧化物氧還蛋白4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2，任選用于實施確定的輔助試劑。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：載脂蛋白b和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：硒蛋白p和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：肌腱蛋白c和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：肝細胞生長因子受體和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和/或肝細胞生長因子受體。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、嗜鉻粒蛋白a、硒蛋白p、肌腱蛋白c、肝細胞生長因子受體、骨保護素、載脂蛋白b、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp和ykl-40。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、嗜鉻粒蛋白a、硒蛋白p、肌腱蛋白c、肝細胞生長因子受體、骨保護素、過氧鐵氧還蛋白-4、嗜鉻粒蛋白a、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp和ykl-40。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述和任選地至少一種如本文所述的另外的標記物所需的試劑：肌腱蛋白c、α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白和硒蛋白p。本發(fā)明還涉及用于實施本發(fā)明的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、嗜鉻粒蛋白a、硒蛋白p、肌腱蛋白c、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素-2、nt-原bnp和ykl-40。發(fā)明人還在接受胰島素類似物甘精胰島素并具有減少的血管生成素-2水平的origin研究的患者集合中觀察到如本文所述的降低的死亡率。如貫穿本申請使用的“胰島素類似物”指具有形式上可源自天然存在的胰島素(例如人胰島素)的結(jié)構(gòu)的分子結(jié)構(gòu)的多肽(通過缺失和/或交換在天然存在的胰島素中存在的至少一個氨基酸殘基和/或添加至少一個氨基酸殘基)。添加和/或交換的氨基酸殘基可以是可編碼的氨基酸殘基或其他天然存在的殘基或純合成的氨基酸殘基。胰島素類似物的實例包括但不限于下述：(i).“門冬胰島素”通過重組dna技術(shù)生產(chǎn)使得人胰島素中其為脯氨酸的氨基酸b28(即人胰島素b鏈中的氨基酸編號28)由天冬氨酸替換；(ii).“賴脯胰島素”通過重組dna技術(shù)生產(chǎn)使得人胰島素b鏈c末端上的倒數(shù)第二個賴氨酸和脯氨酸殘基反轉(zhuǎn)(人胰島素：prob28lysb29；賴脯胰島素：lysb28prob29)；(iii).“賴谷胰島素”與人胰島素不同在于在位置b3處的氨基酸天冬酰胺由賴氨酸替換且位置b29中的賴氨酸由谷氨酸替換；(iv).“甘精胰島素”與人胰島素不同在于在位置a21處的天冬酰胺由甘氨酸替換且b鏈在羧基末端通過兩個精氨酸延伸。本發(fā)明優(yōu)選的胰島素類似物是甘精胰島素。有鑒于此，本發(fā)明的其他方面涉及胰島素類似物，例如甘精胰島素在降低死亡率，特別是如本文所述的心血管死亡率中的用途，其中所述受試者表達與如本文所述的參照量相比減少的量的血管生成素-2。優(yōu)選地，受試者是如本文所述的前糖尿病患者或糖尿病患者。在可替換的優(yōu)選的實施方案中，受試者是如本文所述的前糖尿病患者或糖尿病患者且具有至少50歲，優(yōu)選55歲、60歲、63歲或65歲的年齡。在可替換的優(yōu)選的實施方案中，受試者是如本文所述的前糖尿病患者或糖尿病患者且具有如本文所述的既往心血管病癥。更優(yōu)選地，受試者是如本文所述的前糖尿病患者或糖尿病患者，具有至少50歲，優(yōu)選55歲、60歲、63歲或65歲的年齡，且具有如本文所述的既往心血管病癥。實施例實施例i1.模型建立和驗證設(shè)置的生成如在批準的sap中注意到，8401名個體被分為2組，由地區(qū)分層：a)模型建立(67％)和b)驗證組(33％)。由于沒有從中國獲得血液，同意區(qū)域如下：北美和澳大利亞；南美：歐洲(包括南非)；和印度。每個設(shè)置中參與者的特征如下所示。2.當添加至基礎(chǔ)臨床模型時死亡率的獨立預(yù)測因子1.由于最終的生物標記物列表包括284個最初測定的生物標記物的237個，用于包括在sap的模型中的p值從0.05/284＝0.00018增加至0.05/237＝0.00021。2.認可的是臨床模型中的性別和年齡標準僅通過對年齡變量進行二分法對年齡進行調(diào)整(即性別特異性年齡)。由于認為性別也是重要的，且在匹配的interheart研究中可能未完全出現(xiàn)，我們同意在模型建立隊列中調(diào)整性別。對于吸煙，由于未收集數(shù)據(jù)，因此二手煙未包括在模型中，且將吸煙變量簡化至目前吸煙者對比非吸煙者。3.因此在評估任何生物標記物前強迫進入基礎(chǔ)臨床模型的最終變量為下述(基于sap)：a)先前的cv結(jié)果(y/n)e)ldl膽固醇/hdl膽固醇b)報導(dǎo)的/測量的蛋白尿(y/n)f)目前的吸煙者(y/n)c)男性>55歲或女性>65歲(y/n)g)先前的糖尿病(y/n)d)性別(m/f)h)先前的高血壓(y/n)4.為評估分析相同模型中序數(shù)和連續(xù)數(shù)據(jù)的可能性(具有5個水平的序數(shù)數(shù)據(jù)比具有無限可能的水平的連續(xù)數(shù)據(jù)的劣勢)，運行了敏感性分析，其中使用五分位將192個連續(xù)變量的每一個的原始、非轉(zhuǎn)化數(shù)據(jù)用于將數(shù)據(jù)分為5份并再次運行模型。將結(jié)果與連續(xù)和序數(shù)數(shù)據(jù)混合的模型進行了比較。a.當序數(shù)和連續(xù)生物標記物包括在相同的分析中時，添加至臨床模型時，這些生物標記物在p<0.05/237是顯著的：i.生長/分化因子15ii.胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2iii.血管生成素-2iv.谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶αv.ykl-40vi.n-t原bnp(序數(shù))vii.α-2-巨球蛋白viii.巨噬細胞來源的趨化因子ix.三葉因子3x.過氧鐵氧還蛋白-4b.當連續(xù)生物標記物的原始值轉(zhuǎn)化為5個序數(shù)水平并添加至45個序數(shù)生物標記物時，當添加至臨床模型時，相同的生物標記物在p<0.05/237是顯著的，然而進入順序略微不同。i.胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2ii.生長/分化因子15iii.n-t原bnp(序數(shù))iv.過氧鐵氧還蛋白-4v.谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶αvi.vegfd(序數(shù))vii.ykl-40viii.內(nèi)脂素ix.胰多肽x.b淋巴細胞趨化因子(序數(shù))xi.脂連蛋白由于第一個模型包括序數(shù)和連續(xù)變量，并做出了最少的假設(shè)，它被保留。然而，該模型的比例性的全局測試是顯著的(p＝0.02)，指示第一模型未滿足比例性假設(shè)。且在該模型內(nèi)，基于p<0.05的上確界測試下述變量并非是比例性的：a)高血壓b)谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶αc)n-t原bnp2.這通過重復(fù)使用邏輯回歸的第一模型代替cox模型進行了探索。使用相同順序的方式鑒定了完全相同的生物標記物：i.生長/分化因子15ii.胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2iii.血管生成素-2iv.谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶αv.ykl-40vi.n-t原bnp(序數(shù))vii.α-2-巨球蛋白viii.巨噬細胞來源的趨化因子ix.三葉因子3x.過氧鐵氧還蛋白-43.這提供了關(guān)于包括的生物標記物的保證。然而，由于引起比例性是重要的，我們隨后重復(fù)了cox模型但還包括了3個額外的項：時間與a)高血壓；b)谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶α和c)n-t原bnp的相互作用項。使用該方式，最終的模型如下表5。納入的p<0.05/237或0.00021097；危險比率表示為參數(shù)(nb–如果由于非正態(tài)性變量轉(zhuǎn)化，則sd是轉(zhuǎn)化值的sd)中變化每1sd；*由于時間相互作用該hr以5年f/u為基礎(chǔ)。非比例性的調(diào)整還意為在不同的時間點生物標記物效果的估計有所不同，且應(yīng)該考慮時間。因此對于3個相互作用變量(高血壓、谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶α和nt-原bnp)，在1、3和5年的hr列于下表：上文顯示的cox模型的診斷性質(zhì)如下：a)似然比檢驗：將生物標記物添加至基礎(chǔ)臨床模型，將模型的卡方從245增加至864(lr測試＝619df＝10具有p<0.001)。b)具有95％ci的c統(tǒng)計學(xué)將依賴于研究入口后的時間，其中評估了風(fēng)險，因此在任意選擇的2個時間點報告：第1年：臨床模型＝0.64(0.63,0.66)；臨床模型+生物標記物＝0.76(0.74,0.77)第4年：臨床模型＝0.65(0.63,0.66)；臨床模型+生物標記物＝0.76(0.75,0.78)最大f/u：臨床模型＝0.64(0.63,0.66)；臨床模型+生物標記物＝0.76(0.74,0.78)c)具有4級風(fēng)險概率的模型校準(hosmer-lemeshow)(<5％、5-10％、10-20％、<20％)：在第1年卡方從108至6(p＝0.058)在第4年卡方從358至19(p＝0.089)在最大生存時間卡方從438至56(7.84年)(p＝6.35e-9)d)使用bootstrap方法的凈重新分類指數(shù)(nri)在第1年1.37(95％ci0.23,0.50)在第4年0.54(95％ci0.47,0.61)在最大生存時間(7.84年)0.38(95％ci0.34,0.43)3.結(jié)果的驗證使用驗證設(shè)置，計算了臨床和臨床+生物標記物模型兩者的c統(tǒng)計學(xué)(在模型建立設(shè)置中鑒定)，以及nri的死亡率。還計算了最大化這2個值的切點的敏感性和特異性。在驗證設(shè)置中未完成正向選擇。下表顯示了這些分析的結(jié)果。*為結(jié)果使用模型建立設(shè)置建立的模型使用驗證測試進行測試來自這些分析的結(jié)論是驗證設(shè)置收獲與模型建立設(shè)置相符的發(fā)現(xiàn)。4.對于最終的驗證，使用全部8401位參與者重復(fù)了死亡率的正向選擇過程。對于每個結(jié)果，這些模型以及使用敏感性分析(其中年齡、肌酐和年齡及肌酐兩者添加至基礎(chǔ)臨床模型)的風(fēng)險比的估計示于下文。下文還顯示了在全部8401個運行中鑒定的每種生物標記物的hr和ci的估計，以及源自運行臨床模型1000次和使用引導(dǎo)的臨床+生物標記物1000次的每種模型的c統(tǒng)計學(xué)和nri(即具有替代的隨機抽取的8401中的1000個樣品)。實施例ii為探索甘精酸分配與血管生成素2的相互作用，構(gòu)建了下述曲線，根據(jù)血管生成素2水平的1-5％和1-10％評估了甘精胰島素分配對死亡率的hr。無明顯的模式出現(xiàn)，除了指示甘精胰島素在具有較低血管生成素2水平的人中可以是保護性的。附圖說明圖1：甘精分配與血管生成素2的相互作用；根據(jù)血管生成素2水平的1-5％和1-10％的甘精胰島素分配對死亡率的危險幾率。本發(fā)明的項1.用于評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險的方法，包括：(a)在來自所述受試者的樣品中確定(ii)選自下組的至少一種第一標記物的量：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體；和(ii)任選地至少一種另外的標記物的量；和(b)當至少一種第一標記物的所述量相比參照量改變時，關(guān)聯(lián)所述受試者處于增加的死亡率風(fēng)險。2.根據(jù)項1的方法，其中所述另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素2、生長分化因子15、過氧化物氧還蛋白4、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。3.用于在受試者中評估增加的死亡率風(fēng)險的方法，包括：(a)在來自所述的受試者樣品中確定(ii)選自下組的至少一種第一標記物的量：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子；和(ii)任選地至少一種另外的標記物的量；和(b)當至少一種第一標記物的所述量相比參照量改變時，關(guān)聯(lián)所述受試者處于增加的死亡率風(fēng)險。4.根據(jù)項1-3任一項的方法，其中所述另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl-40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。5.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶，任選地具有至少一種另外的標記物。6.根據(jù)項1-5任一項的方法，其中所述第一和另外的標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、nt-原bnp和血管生成素-2。7.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物是三葉因子3，任選地具有至少一種另外的標記物。8.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物是α-2-巨球蛋白，任選地具有至少一種另外的標記物。9.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物是巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物。10.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物是載脂蛋白b，任選地具有至少一種另外的標記物。11.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物是硒蛋白p，任選地具有至少一種另外的標記物。12.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物是肌腱蛋白c，任選地具有至少一種另外的標記物。13.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物是肝細胞生長因子受體，任選地具有至少一種另外的標記物。14.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物是肝細胞生長因子受體且另外的標記物是嗜鉻粒蛋白a。15.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和三葉因子3。16.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和α-2巨球蛋白。17.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和巨噬細胞來源的趨化因子。18.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：三葉因子3和α-2-巨球蛋白。19.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：三葉因子3和巨噬細胞來源的趨化因子。20.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：α-2巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子。21.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3和α-2-巨球蛋白。22.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3和巨噬細胞來源的趨化因子。23.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子。24.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子。25.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物是三葉因子3、α-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子和α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶。26.根據(jù)項1-4任一項的方法，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體。27.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一和另外的標記物是nt-原bnp、α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、生長分化因子15、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、血管生成素-2、ykl-40、過氧鐵氧還蛋白-4和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。28.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一和另外的標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c、肝細胞生長因子受體、nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。29.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述另外的標記物選自下組：生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。30.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體。31.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一和另外的標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c、肝細胞生長因子受體、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。32.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c。33.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述另外的標記物選自下組：生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40和嗜鉻粒蛋白a。34.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c。35.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述第一和另外的標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p、肌腱蛋白c、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40和嗜鉻粒蛋白a。36.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述死亡率是心血管死亡率如致死性心肌梗死、致死性中風(fēng)和/或心臟衰竭。37.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述增加的死亡率風(fēng)險在接下來的1-7年內(nèi)。38.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中：(i)受試者為前糖尿病患者或糖尿病患者；(ii)受試者具有至少50歲的年齡；和/或(iii)受試者具有既往心血管病癥。39.根據(jù)項38的方法，其中所述受試者：(i)為前糖尿病患者或糖尿病患者；且(ii)具有至少50歲的年齡；且(iii)具有既往心血管病癥。40.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述受試者罹患一種或多種選自下組的風(fēng)險因子：既往心血管病癥、蛋白尿、男性、至少50歲的年齡、吸煙者、糖尿病患者或前糖尿病患者、升高的血膽固醇水平、升高的肌酐水平、肥胖和高血壓。41.根據(jù)項40的方法，其中所述受試者罹患下述風(fēng)險因子：既往心血管病癥、蛋白尿、男性、至少55歲的年齡、升高的血膽固醇水平、吸煙者、前糖尿病患者或糖尿病患者和高血壓。42.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述受試者具有至少55、至少60、至少63或至少65歲，優(yōu)選至少63的年齡。43.根據(jù)前述的項任一項的方法，其中所述樣品是體液和/或組織提取物。44.根據(jù)項43的方法，其中所述體液是血清。45.至少一種選自下組的第一標記物和任選地至少一種另外的標記物在評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險中的用途：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c、和肝細胞生長因子受體，其中確定來自受試者的樣品中所述第一標記物相比所述標記物的參照量所改變的量指示所述風(fēng)險。46.根據(jù)項45的用途，其中所述另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧化物氧還蛋白4、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。47.根據(jù)項45-46任一項的用途，其中所述另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素2、生長分化因子15、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。48.根據(jù)項45-47任一項的用途，其中所述至少一種第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子，和任選地至少一種另外的標記物。49.根據(jù)項45-48任一項的用途，其中所述至少一種第一標記物選自下組：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、硒蛋白p和肌腱蛋白c，和任選地至少一種另外的標記物。50.根據(jù)項45-49任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶，任選地具有至少一種另外的標記物。51.根據(jù)項45-50任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是三葉因子3，任選地具有至少一種另外的標記物。52.根據(jù)項45-51任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-2-巨球蛋白，任選地具有至少一種另外的標記物。53.根據(jù)項45-52任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是巨噬細胞來源的趨化因子，任選地具有至少一種另外的標記物。54.根據(jù)項45-53任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是載脂蛋白b，任選地具有至少一種另外的標記物。55.根據(jù)項45-54任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是硒蛋白b，任選地具有至少一種另外的標記物。56.根據(jù)項45-55任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是肌腱蛋白c，任選地具有至少一種另外的標記物。57.根據(jù)項45-56任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是肝細胞生長因子受體，任選地具有至少一種另外的標記物。58.根據(jù)項45-57任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和三葉因子3。59.根據(jù)項45-58任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和α-2巨球蛋白。60.根據(jù)項45-59任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和巨噬細胞來源的趨化因子。61.根據(jù)項45-60任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是三葉因子3和α-2-巨球蛋白。62.根據(jù)項45-61任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是三葉因子3和巨噬細胞來源的趨化因子。63.根據(jù)項45-62任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-2巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子。64.根據(jù)項45-63任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、和α-2-巨球蛋白。65.根據(jù)項45-64任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3和巨噬細胞來源的趨化因子。66.根據(jù)項45-65任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子。67.根據(jù)項45-66任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子。68.根據(jù)項45-67任一項的至少一種第一標記物的用途，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體。69.根據(jù)項45-68任一項的用途，其中所述另外的標記物為生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40和嗜鉻粒蛋白a。70.根據(jù)項45-69任一項的用途，其中所述第一標記物是α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c。71.標記物組和任選地至少一種另外的標記物在評估受試者中增加的死亡率風(fēng)險中的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體，其中確定至少所述標記物的改變的量指示所述風(fēng)險。72.根據(jù)項71的用途，其中所述另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素2、生長分化因子15、過氧化物氧還蛋白4、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。73.根據(jù)項71或72的用途，其中所述標記物組包含三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、和α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和任選至少另外的(標記物)。74.根據(jù)項45-73任一項的用途，其中所述另外的標記物選自下組：nt-原bnp、血管生成素2、生長分化因子15、過氧化物氧還蛋白4、ykl40和胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。75.根據(jù)項71-74任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和三葉因子3和任選地至少一種另外的(標記物)。76.根據(jù)項71-75任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和α-2巨球蛋白和任選地至少一種另外的(標記物)。77.根據(jù)項71-76任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和巨噬細胞來源的趨化因子和任選地至少一種另外的標記物。78.根據(jù)項71-77任一項的用途，其中所述標記物組包含三葉因子3和α-2-巨球蛋白和任選地至少一種另外的標記物。79.根據(jù)項71-78任一項的用途，其中所述標記物組包含三葉因子3和巨噬細胞來源的趨化因子和任選地至少一種另外的標記物。80.根據(jù)項71-79任一項的用途，其中所述標記物組包含α-2巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子和任選地至少一種另外的(標記物)。81.根據(jù)項71-80任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3和α-2-巨球蛋白和任選地至少一種另外的(標記物)。82.根據(jù)項71-81任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3和巨噬細胞來源的趨化因子和任選地至少一種另外的標記物。83.根據(jù)項71-82任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子和任選地至少一種另外的標記物。84.根據(jù)項71-83任一項的用途，其中所述標記物組包含三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子和任選地至少一種另外的標記物。85.根據(jù)項71-84任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體和任選地至少一種另外的標記物。86.根據(jù)項71-85任一項的用途，其中所述另外的標記物選自下組：生長因子分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。87.根據(jù)項71-86任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c和任選地至少一種另外的標記物。88.根據(jù)項71-87任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c和任選地至少一種另外的標記物。89.根據(jù)項71-88任一項的用途，其中所述另外的標記物選自下組：生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40、和嗜鉻粒蛋白a。90.根據(jù)項45-89任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、血管生成素-2和nt-原bnp。91.根據(jù)項71-90任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c、肝細胞生長因子受體、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。92.根據(jù)項71-91任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p、肌腱蛋白c、生長分化因子15、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、血管生成素2、nt-原bnp、ykl40和嗜鉻粒蛋白a。93.根據(jù)項71-90任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c、肝細胞生長因子受體、nt-原bnp、血管生成素-2、生長分化因子15、過氧鐵氧還蛋白-4、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2、骨保護素和嗜鉻粒蛋白a。94.根據(jù)項71-90任一項的用途，其中所述標記物組包含α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、nt-原bnp、血管生成素2、生長分化因子15、過氧化物氧還蛋白4、ykl40、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2。95.根據(jù)項45-89任一項的用途，其中所述標記物組包含肝細胞生長因子受體和嗜鉻粒蛋白a。96.用于實施根據(jù)項1-44任一項的方法的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和/或肝細胞生長因子受體。97.根據(jù)項96的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白、巨噬細胞來源的趨化因子、載脂蛋白b、硒蛋白p、肌腱蛋白c和肝細胞生長因子受體。98.根據(jù)項96或97的試劑盒，其包含特異性確定至少下述所需的試劑：α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、α-2-巨球蛋白和/或巨噬細胞來源的趨化因子。99.根據(jù)項96-98任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶所需的試劑。100.根據(jù)項96-99任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少三葉因子3所需的試劑。101.根據(jù)項96-100任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-2-巨球蛋白所需的試劑。102.根據(jù)項96-101任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少巨噬細胞來源的趨化因子所需的試劑。103.根據(jù)項96-102任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少載脂蛋白b所需的試劑。104.根據(jù)項96-103任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少硒蛋白p所需的試劑。105.根據(jù)項96-104任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少肌腱蛋白c所需的試劑。106.根據(jù)項96-105任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少肝細胞生長因子受體所需的試劑。107.根據(jù)項96-106任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和三葉因子3所需的試劑。108.根據(jù)項96-107任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和α-2巨球蛋白所需的試劑。109.根據(jù)項96-108任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶和巨噬細胞來源的趨化因子所需的試劑。110.根據(jù)項96-109任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少三葉因子3和α-2-巨球蛋白所需的試劑。111.根據(jù)項96-110任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少三葉因子3和巨噬細胞來源的趨化因子所需的試劑。112.根據(jù)項96-111任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-2巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子所需的試劑。113.根據(jù)項96-112任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3和α-2-巨球蛋白所需的試劑。114.根據(jù)項96-113任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3和巨噬細胞來源的趨化因子所需的試劑。115.根據(jù)項96-114任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子所需的試劑。116.根據(jù)項96-115任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、nt-原bnp和血管生成素-2所需的試劑。117.根據(jù)項96-115任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少肝細胞生長因子受體和嗜鉻粒蛋白a所需的試劑。118.根據(jù)項96-115任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少三葉因子3、α-2-巨球蛋白和巨噬細胞來源的趨化因子所需的試劑。119.根據(jù)項96-118任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、三葉因子3、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白所需的試劑。120.根據(jù)項92-119任一項的試劑盒，其包含特異性確定至少α-谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶、巨噬細胞來源的趨化因子、α-2-巨球蛋白、硒蛋白p和肌腱蛋白c所需的試劑。121.用于減少受試者中死亡率的胰島素類似物，其中所述受試者表達相比參照的量減少的量的血管生成素-2。122.如項121中使用的胰島素類似物，其中所述死亡率是心血管死亡率如致死性心肌梗死、致死性中風(fēng)和/或心臟衰竭。123.如項121或122中使用的胰島素類似物，其中所述受試者是前糖尿病患者或糖尿病患者。124.如項121-123任一項中使用的胰島素類似物，其中所述受試者為前糖尿病患者或糖尿病患者且具有至少50歲的年齡。125.如項121-123任一項中使用的胰島素類似物，其中所述受試者為前糖尿病患者或糖尿病患者且具有既往心血管病癥。126.如項121或122任一項中使用的胰島素類似物，其中所述受試者為前糖尿病患者或糖尿病患者，具有至少50歲的年齡且具有既往心血管病癥。127.如項121-126任一項中使用的胰島素類似物，其中所述胰島素類似物是甘精胰島素。當前第1頁12