本發(fā)明涉及體外檢測領(lǐng)域，尤其涉及一種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒及其制備方法。
背景技術(shù)：
：人類免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus，HIV）是一種感染人類免疫系統(tǒng)細胞的慢病毒，屬反轉(zhuǎn)錄病毒的一種。普遍認為，人類免疫缺陷病毒的感染導(dǎo)致艾滋病（AIDS，AcquiredImmuneDeficiencySyndrome，后天免疫缺乏綜合癥），艾滋病是后天性細胞免疫功能出現(xiàn)缺陷而導(dǎo)致嚴重隨機感染及/或繼發(fā)腫瘤并致命的一種疾病。艾滋病自1981年在美國被識別并發(fā)展為全球大流行，至2003年底，已累計導(dǎo)致兩千余萬人死亡。HIV病毒呈球形或卵圓形顆粒，直徑100-140nm，是帶有包膜的RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒，在分類上屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科中的慢病毒亞科。HIV病毒單拷貝基因組RNA長約9.2-9.7Kb。目前發(fā)現(xiàn)有HIV-1和HIV-2兩型，這兩種類型在生物學(xué)特性上很相似，它們的基因組有40%-50%的同源性，其中兩種病毒的核心蛋白具有高度的交叉反應(yīng)。HIV有三個主要的結(jié)構(gòu)基因：env、gag、pol，他們分別編碼產(chǎn)生不同功能的蛋白質(zhì)即抗原，抗原會引起機體免疫應(yīng)答從而產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。根據(jù)HIV基因差異，分為HIV-1和HIV-2，兩型間氨基酸序列的同源性為40%~60%。HIV-1可進一步分為不同的亞型，包括M亞型組、O亞型組和N亞型組。目前全球流行的主要是HIV-1，不同地區(qū)流行的HIV-1亞型存在差異，在美國和西歐流行的主要是B亞型，我國以HIV-1為主要流行株，已發(fā)現(xiàn)的有A、B、B′、C、D、E、F和G共8個亞型，還有不同流行重組型。HIV-2主要在西非數(shù)國流行。近幾年，在歐洲和少數(shù)亞洲國家也陸續(xù)發(fā)現(xiàn)少數(shù)HIV-2病例。1999年起在我國部分地區(qū)發(fā)現(xiàn)并證實少數(shù)HIV-2型感染者。當(dāng)HIV進入人體進行感染時，人體的免疫系統(tǒng)會對HIV的多種病毒蛋白產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。通常感染HIV后5-12周，可在血清中發(fā)現(xiàn)HIV感染的抗體。由于免疫抗原決定簇的抗原決定基序列不同，特別是HIV-1/M型，HIV-1/O型和HIV-2的膜蛋白不同，因此需要特異性抗原以確保免疫分析法能夠成功檢測HIV感染。通過測定近期感染患者（高病毒量）血標本中HIV-1p24抗原，能夠較傳統(tǒng)的抗體檢測法提早6天以上發(fā)現(xiàn)HIV感染。HIV免疫學(xué)檢測經(jīng)歷了幾代的發(fā)展歷程，目前最先進的第4代HIV抗原抗體檢測試劑盒可以同時檢測抗HIV-1/2抗體和p24抗原，縮短了診斷窗口期。臨床檢測人類免疫缺陷病毒抗原抗體的常見方法有酶聯(lián)免疫吸附法、免疫金標法、酶促化學(xué)發(fā)光法，但這些方法都存在著一些不足之處。一、酶聯(lián)免疫吸附法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）被廣泛應(yīng)用，但該方法也存在著下述的不足之處：（1）使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔專用微孔板作為抗原或抗體包被用具和反應(yīng)容器，在使用時只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，無法進行獨立的、單人份的檢測；（2）檢測所用的試劑種類較多，每一種檢測試劑都要用試劑瓶來盛裝，并且每使用一種試劑時都需要更換吸液嘴來分別加注到微孔板的微孔中，不但試劑瓶種類多，加注試劑的操作也極為繁瑣；（3）缺少對檢測信息的相應(yīng)標注，只能通過查看試劑盒外包裝盒的標識才能了解或知悉檢測試劑的生產(chǎn)批號及有效期信息，而且所知悉的信息在檢測過程中不受控，具有很大的隨意性；（4）檢測試劑在檢測過程中處于開放的空間，容易引起各種試劑之間的交叉污染而影響檢測結(jié)果的準確性；（5）檢測過程多采用手工操作，試劑或樣本的加量不很精確，操作過程極為繁瑣和復(fù)雜，容易發(fā)生操作差錯，檢測結(jié)果的準確度和精密度較差；（6）在檢測項目成套試劑的數(shù)量配置及使用上均為項目數(shù)×48/96人份，如果需要檢測10個項目，則試劑的配置及使用數(shù)須為10×48/96人份，如果只有一份樣本需要檢測10個不同的項目，也需要配置10×48/96人份的試劑，存在著不夠經(jīng)濟合理的缺點。二、免疫金標法膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。膠體金在弱堿環(huán)境下帶負電荷，可與抗原、抗體的正電荷基團形成牢固的結(jié)合。免疫金標記技術(shù)(Immunogoldlabellingtechique)主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性，在金標蛋白結(jié)合處，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時，肉眼可見紅色或粉紅色斑點；該方法的優(yōu)點是操作簡便快速，但靈敏度較低。三、化學(xué)發(fā)光法化學(xué)發(fā)光法按發(fā)光原理可分為直接化學(xué)發(fā)光和酶促化學(xué)發(fā)光。酶促化學(xué)發(fā)光主要有辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶兩種，但都有一定的局限性，辣根過氧化物酶主要缺點為：魯米諾在沒有辣根過氧化物酶存在情況下，也會被H2O2氧化自身發(fā)光，本底相對較高，影響信噪比，反應(yīng)動力學(xué)復(fù)雜，影響因素多，結(jié)果不夠穩(wěn)定，要得到靈敏度高且平臺期長的底物不容易。堿性磷酸酶主要缺點為：底物達到平臺期的時間長，底物成本高，導(dǎo)致檢測成本高，患者負擔(dān)重。吖啶酯作為標記物的直接化學(xué)發(fā)光相比酶促化學(xué)發(fā)光具有明細優(yōu)勢，主要表現(xiàn)在：反應(yīng)不需要催化劑，只要堿性環(huán)境即可進行，反應(yīng)迅速，背景發(fā)光低，信噪比高，干擾因素少，試劑穩(wěn)定性好，可以兩點定標，體系簡單，激發(fā)液成本低，吖啶酯易與蛋白質(zhì)聯(lián)結(jié)，且聯(lián)結(jié)后光子產(chǎn)率不減少。技術(shù)實現(xiàn)要素：基于此，有必要提供一種檢測靈敏度較高的人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒及其制備方法。一種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，包括：人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒和人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原標記的化學(xué)發(fā)光標記物。在一個實施例中，所述人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒中，所述人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原與所述羧基化的磁微粒的比例為1：25~100。在一個實施例中，所述人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原標記的化學(xué)發(fā)光標記物中，所述人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原與所述化學(xué)發(fā)光標記物的比例為1:10~100。在一個實施例中，所述羧基化的磁微粒的粒徑為0.05μm~1μm。在一個實施例中，所述化學(xué)發(fā)光標記物為魯米諾、異魯米諾、三聯(lián)吡啶釕或吖啶酯。在一個實施例中，還包括化學(xué)發(fā)光底物液，所述化學(xué)發(fā)光底物液包括A液和B液。在一個實施例中，所述A液為H2O2溶液，所述B液為NaOH溶液。在一個實施例中，還包括人類免疫缺陷病毒化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒定標品。在一個實施例中，所述人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品為COI分別為0~0.5、1~20的血清或血漿。一種上述的人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備方法，包括如下步驟：取羧基化的磁微粒的懸浮液，磁分離去上清后用MES緩沖液重懸，接著加入EDC水溶液，活化羧基化的磁微粒的表面羧基，接著加入人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原，室溫下混懸2h~10h，磁分離去除上清后用Tris緩沖液重懸，得到人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒；以及取人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原，加入碳酸鹽緩沖液后混勻，然后加入化學(xué)發(fā)光標記物后混勻，室溫下避光反應(yīng)1h~2h后除雜，得到人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原標記的化學(xué)發(fā)光標記物。這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒能夠以全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀為檢測工具，完成人類免疫缺陷病毒抗原和（或）抗體的檢測。這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，經(jīng)過實驗，其抗原檢測靈敏度達到1.25IU/mL，相對于傳統(tǒng)的人類免疫缺陷病毒抗原抗體的檢測方法靈敏度至少提高了5倍，這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的檢測精度較高。附圖說明圖1為一實施方式的人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備方法的流程圖；具體實施方式為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖和具體實施例對本發(fā)明的具體實施方式做詳細的說明。在下面的描述中闡述了很多具體細節(jié)以便于充分理解本發(fā)明。但是本發(fā)明能夠以很多不同于在此描述的其它方式來實施，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在不違背本發(fā)明內(nèi)涵的情況下做類似改進，因此本發(fā)明不受下面公開的具體實施的限制。一實施方式的人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，包括：人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒和人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原標記的化學(xué)發(fā)光標記物。優(yōu)選的，人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒中，人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原與羧基化的磁微粒的比例為1：25~100。優(yōu)選的，人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原標記的化學(xué)發(fā)光標記物中，人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原與化學(xué)發(fā)光標記物的比例為1：10~100。優(yōu)選的，羧基化的磁微粒的粒徑為0.05μm~1μm。化學(xué)發(fā)光標記物可以為魯米諾、異魯米諾、三聯(lián)吡啶釕或吖啶酯。其中，化學(xué)發(fā)光標記物優(yōu)選為吖啶酯。在其他的實施例中，上述人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒還包括化學(xué)發(fā)光底物液。化學(xué)發(fā)光底物液包括A液和B液。A液可以為H2O2溶液，B液可以為NaOH溶液。本實施例中，A液為濃度為0.1mol/L的H2O2溶液，B液為濃度為0.25mol/L的NaOH溶液。在其他的實施例中，上述人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒還包括人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品。人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品為COI分別為0~0.5、1~20的血清或血漿。具體的，人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品可以采用人類免疫缺陷病毒抗原抗體陰性的血清或血漿、將人類免疫缺陷病毒抗體陽性材料投人類免疫缺陷病毒抗原抗體陰性的血清或血漿配制成COI分別為0~0.5、1~20的血清或血漿。這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒用于人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測時，利用全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀對人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品進行檢測，確定Cutoff值，內(nèi)置于電腦軟件；接著測試實際樣本，根據(jù)樣本發(fā)光值計算樣本COI；最后對人類免疫缺陷病毒抗原抗體全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)進行性能（靈敏度、精密度、干擾性）的評價。這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒能夠以全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀為檢測工具，完成人類免疫缺陷病毒抗原抗體的檢測。這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，經(jīng)過實驗，其抗原檢測靈敏度達到1.25IU/mL，相對于傳統(tǒng)的人類免疫缺陷病毒抗原抗體的檢測方法靈敏度至少提高了5倍，這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的檢測精度較高。此外，這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒還具有以下優(yōu)點：1、選擇吖啶酯作為標記材料，并應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，該發(fā)光體系為直接化學(xué)發(fā)光，與傳統(tǒng)的酶促化學(xué)發(fā)光相比，該反應(yīng)不需要酶的參與，更加節(jié)約成本；2、選用吖啶酯的化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)RLU范圍寬，RLU能達到200~5000000，而傳統(tǒng)的人類免疫缺陷病毒抗原抗體的檢測方法的吸光度范圍為0~4；3、吖啶酯化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)重復(fù)性高，批內(nèi)及批間差均在5%以內(nèi)，這是其它化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)難以達到的；4、化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)已實現(xiàn)樣本的定性，通過內(nèi)置Cutoff到測試軟件，只需測試樣本就可直接得到樣本的COI；5、化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)可以實現(xiàn)全自動化，試劑及樣本的添加全有儀器完成，操作更加簡便，減少了人為的誤差。如圖1所示的上述人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備方法，包括如下步驟：取羧基化的磁微粒的懸浮液，磁分離去上清后用MES緩沖液重懸，接著加入EDC水溶液，活化羧基化的磁微粒的表面羧基，接著加入人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原，室溫下混懸2h~10h，磁分離去除上清后用Tris緩沖液重懸，得到人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒。MES（2-(N-嗎啡啉)乙磺酸）緩沖液的濃度為0.02M，pH為5.5。Tris緩沖液的濃度為0.1M并且含有2%BSA，pH為8.0。EDC（1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺）水溶液的濃度為10mg/mL~20mg/mL，EDC與羧基化的磁微粒的比例為0.05：0.1~1。優(yōu)選的，人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒中，人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原與羧基化的磁微粒的比例為1：25~100。優(yōu)選的，羧基化的磁微粒的粒徑為0.05μm~1μm。取人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原，加入碳酸鹽緩沖液后混勻，然后加入化學(xué)發(fā)光標記物后混勻，室溫下避光反應(yīng)1h~2h后除雜，得到人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原標記的化學(xué)發(fā)光標記物。碳酸鹽緩沖液濃度為0.1M，pH為9.0~9.5，除雜的操作為離心脫鹽柱脫鹽，具體操作為：先分別用純凈水及TBS緩沖液（40mMTris-HCl，0.5%BSA，1%NaCl，pH8.0）處理離心脫鹽柱，最后加入得到的人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原標記的化學(xué)發(fā)光標記物，最后收集離心管中的液體。優(yōu)選的，人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原標記的化學(xué)發(fā)光標記物中，人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原與化學(xué)發(fā)光標記物的比例為1：10~100?；瘜W(xué)發(fā)光標記物可以為魯米諾、異魯米諾、三聯(lián)吡啶釕或吖啶酯。其中，化學(xué)發(fā)光標記物優(yōu)選為吖啶酯。得到的人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒和人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原標記的化學(xué)發(fā)光標記物組合即可得到上述人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒。這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒在使用時，還需要化學(xué)發(fā)光底物液和人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品?；瘜W(xué)發(fā)光底物液和人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品可以自行配制得到。化學(xué)發(fā)光底物液包括A液和B液。A液可以為H2O2溶液，B液可以為NaOH溶液。本實施例中，A液為濃度為0.1mol/L的H2O2溶液，B液為濃度為0.25mol/L的NaOH溶液。具體的，人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品可以采用人類免疫缺陷病毒抗原抗體陰性的血清或血漿、將人類免疫缺陷病毒抗體陽性材料投人類免疫缺陷病毒抗原抗體陰性的血清或血漿配制成COI分別為0~0.5、1~20的血清或血漿。這種人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備方法簡單方便，制得的人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的檢測靈敏度較高，具有良好的應(yīng)用前景。以下為具體實施例。實施例1：人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的制備（1）人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒的制備：取含有50mg粒徑為0.05μm~1μm的羧基化的磁微粒（MagnaBind?，貨號21353）懸浮液，磁分離去上清，用0.02M，pH為5.5MES緩沖液重懸，加入1mL新配置的10mg/mL的EDC水溶液，活化磁珠表面羧基，加入1mg人類免疫缺陷病毒單克隆抗體（biorbyt，貨號orb48780）或人類免疫缺陷病毒抗原（廠家？，貨號？），室溫下混懸6h，磁分離，去除上清，用含2%BSA的0.1M，pH為8.0的Tris緩沖液重懸到1mg/mL，得到人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒，每瓶5mL分裝保存于4℃?zhèn)溆?。?）人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原標記的吖啶酯的制備：取50μL濃度為25mg/mL的人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原，加入150μL濃度為0.1M、pH為9.0~9.5的碳酸鹽緩沖液，混勻，然后加入1.5μL濃度為5mg/mL的吖啶酯溶液混勻，室溫下避光反應(yīng)，1.5h后取出，用2mL的zeba離心脫鹽柱脫鹽處理，脫鹽過程中首先分別用純凈水及TBS緩沖液進行處理，最后加入得到的人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原標記的吖啶酯溶液，收集離心管中的液體至保存管得到人類免疫缺陷病毒單克隆抗體或人類免疫缺陷病毒抗原標記的吖啶酯，每瓶5mL分裝保存于4℃?zhèn)溆?。?）人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品的制備：用人類免疫缺陷病毒抗原抗體陰性的血清或血漿、將人類免疫缺陷病毒抗體陽性材料投人類免疫缺陷病毒抗原抗體陰性的血清或血漿配制成COI分別為0~0.5、1~20的血清或血漿，每瓶1.0mL分裝，4℃保存?zhèn)溆?。實施?：人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測方法以全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（YHLO，貨號iFlash3000）為檢測工具，方法學(xué)模式為雙抗體/雙抗原夾心法，即儀器依次加入100μL的樣品、50μL的含有人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原包被的羧基化的磁微粒以及50μL的樣本處理液，反應(yīng)20min后，再加50μL的含有人類免疫缺陷病毒單克隆抗體及人類免疫缺陷病毒抗原標記的吖啶酯以及50μL的測試稀釋液，反應(yīng)20min后，進行磁分離，儀器將反應(yīng)混合物送入暗室，依次加入發(fā)光底物A液（H2O2）及B液（NaOH）進行發(fā)光反應(yīng)，最后記錄發(fā)光值。實施例3：人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒性能評價采用實施例2中的方法對人類免疫缺陷病毒抗原抗體定標品進行檢測，得到Cutoff值。接著測試實際樣本，根據(jù)樣本發(fā)光值計算樣本COI。靈敏度的檢測：參照CLSIEP17-A文件推薦實驗方案，計算人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的靈敏度，求得的抗原靈敏度為1.25IU/mL。精密度測定：分別取COI為10的兩個人類免疫缺陷病毒抗體陽性樣品及抗原陽性樣品，每個樣本各做3個平行，用三批試劑盒進行檢測，計算試劑盒批內(nèi)及批間差，結(jié)果表明該試劑盒批內(nèi)及批間差均小于5%。干擾性實驗：取混合血清分別添加干擾物包括：結(jié)合膽紅素、游離膽紅素、血紅蛋白、抗壞血酸、甘油酯，添加比例按照1：20進行，分別測定混合血清及添加了各種干擾物后混合血清的測值，計算二者之間的偏差，以±10%為可接受范圍。結(jié)果表明，干擾性均達到NCCLS的文件標準，可用于臨床實驗室人類免疫缺陷病毒抗原抗體狀況的準確評估。實施例4、人類免疫缺陷病毒抗原抗體化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的對比實驗分別用化學(xué)發(fā)光檢測方法和傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法對濃度為20IU/mL、10IU/mL、5IU/mL、2.5IU/mL、1.25IU/mL、0.625IU/mL、0.312IU/mL、0.156IU/mL、0.078IU/mL、0IU/mL、的人類免疫缺陷病毒抗原陽性樣品做檢測，兩種方法檢測靈敏度相比，數(shù)據(jù)如下表所示：濃度化學(xué)發(fā)光檢測（COI）酶聯(lián)免疫吸附法檢測（COI）20IU/mL11.923.3110IU/mL6.651.625IU/mL3.710.762.5IU/mL1.930.421.25IU/mL1.170.300.625IU/mL0.810.220.312IU/mL0.720.160.156IU/mL0.600.1410.078IU/mL0.410.140IU/mL0.140.12靈敏度（IU/mL）1.2510由上表可以看出，化學(xué)發(fā)光檢測方法的靈敏度較酶聯(lián)免疫吸附法提高了約5倍。以上所述實施例僅表達了本發(fā)明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發(fā)明的保護范圍。因此，本發(fā)明專利的保護范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準。當(dāng)前第1頁1 2 3