本發(fā)明屬于分析檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種酒類含氮化合物的分析方法，特別是一種國(guó)窖1573酒中含氮化合物的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
國(guó)窖1573是我國(guó)高品質(zhì)濃香型白酒之一，它開放式操作的工藝特點(diǎn)和獨(dú)特的釀造環(huán)境鑄就了其制曲和釀酒微生物的紛繁復(fù)雜以及發(fā)酵的多途徑香味物質(zhì)代謝，孕育了國(guó)窖1573酒特有的豐富呈香呈味物質(zhì)。其酒質(zhì)無(wú)色透明、窖香幽雅、綿甜爽凈、柔和協(xié)調(diào)、尾凈香長(zhǎng)、風(fēng)格典型，深受消費(fèi)者的喜愛。
國(guó)窖1573酒中的含氮化合物與其他物質(zhì)一樣是國(guó)窖1573酒中重要的組成成分，其對(duì)國(guó)窖1573酒的風(fēng)味和典型性都有一定的影響。國(guó)內(nèi)外研究者采用定性定量的辦法已經(jīng)鑒定出許多種影響成品國(guó)窖1573酒風(fēng)味的物質(zhì)。主要是酯類、酸類、醇類、多酚類化合物、羥基類化合物和氨基酸這6大類物質(zhì)。其中白酒中的游離的氨基酸往往會(huì)和還原糖發(fā)生美拉德反應(yīng)生成吡嗪、吡咯、噻唑等含氮化合物。這些含氮化合物雖然在國(guó)窖1573酒中含量甚微，但該類化合物風(fēng)味閾值低，具有堅(jiān)果香、焙烤香、焦香等怡人風(fēng)味，是國(guó)窖酒中重要的香味組分。并且它對(duì)其他香味物質(zhì)有一定的協(xié)同作用。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)國(guó)窖1573酒中的含氮化合物的研究尚無(wú)太多。有研究報(bào)道白酒中的含氮量物質(zhì)往往小于1mg/L，所以應(yīng)用常規(guī)的氣相色譜法(FID檢測(cè)器)直接進(jìn)樣分析存在一定困難。本發(fā)明旨在采用頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，對(duì)市面上國(guó)窖1573酒酒樣中的含氮化合物進(jìn)行分析研究，建立一種國(guó)窖1573酒中含氮化合物的定性定量分析方法，操作簡(jiǎn)單、易行，適用性廣泛。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種國(guó)窖1573酒中含氮化合物的檢測(cè)方法，所述的這種方法要解決現(xiàn)有技術(shù)中測(cè)定國(guó)窖1573酒中的含氮化合物不準(zhǔn)確的技術(shù)問題。
本發(fā)明一種國(guó)窖1573酒中含氮化合物的鑒定方法，包括下列步驟：
1)一個(gè)提取國(guó)窖1573酒中含氮化合物的步驟：首先準(zhǔn)備國(guó)窖1573酒酒樣，先用去離子水稀釋至酒精度為10％的溶液體系，然后取5mL該酒樣，添加1g氯化鈉、20μL2-甲氧基-3-甲基吡嗪置于15ml或20mL頂空瓶中，頂空瓶用硅膠墊皮密封，SPME條件為：將萃取頭插入到頂空瓶中，并使萃取頭處于樣品之上2cm，恒溫水浴溫度45～55℃下，萃取40～50min；萃取完成后，迅速將萃取頭插入氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)樣口，于250℃下解吸4～6min；
2)一個(gè)利用氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)分析步驟1)所得到的國(guó)窖1573酒中的含氮化合物的步驟：
氣相色譜條件：HP-5MS毛細(xì)管色譜柱，其參數(shù)為60m×0.25mm、0.25μm；手動(dòng)不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣口溫度250℃；程序升溫：初始溫度40℃，保留6min，以3℃/min的速率升至100℃，以5℃/min的速率升至230℃，保留20min；
NPD溫度：250℃；氫氣流速：2.0mL/min；空氣流速：60mL/min；載氣He，流速30mL/min；
MS條件：EI電離源，電子能量70eV，掃描范圍30～550amu，離子源溫度230℃；傳輸線溫度280℃；四極桿溫度150℃；
3)一個(gè)對(duì)檢出的含氮化合物進(jìn)行定性分析的步驟，未知化合物的質(zhì)譜通過(guò)與wiley7nDatabase，NIST11及標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比進(jìn)行定性；
4)一個(gè)對(duì)檢出的含氮化合物進(jìn)行定量分析的步驟，稱取一定量標(biāo)準(zhǔn)品，配制于無(wú)水乙醇中作為單標(biāo)貯備液，準(zhǔn)確吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)貯備液用模擬酒，所述的模擬酒為體積百分比為10％的乙醇溶液，配制成一系列濃度的混合標(biāo)樣；其中內(nèi)標(biāo)物質(zhì)為2-甲氧基-3-甲基吡嗪。
進(jìn)一步的，所述的分析檢測(cè)儀器為氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用儀。
進(jìn)一步的，所述的定量方法為內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。
本發(fā)明采用了頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，對(duì)國(guó)窖1573酒中的含氮化合物進(jìn)行分析研究，建立一種適用于國(guó)窖1573酒中含氮化合物的有效定性定量分析方法。本發(fā)明操作簡(jiǎn)單、易行，達(dá)到了滿足生產(chǎn)快速檢測(cè)需求的目的，適用性廣泛。
附圖說(shuō)明
圖1為市售國(guó)窖1573酒中的含氮化合物色譜圖。
具體實(shí)施方式
為進(jìn)一步闡釋采用頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)快速檢測(cè)并定性定量國(guó)窖1573酒中含氮化合物的方法，下面結(jié)合實(shí)例作更詳盡的說(shuō)明。
實(shí)施例1
本方法主要采用頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)國(guó)窖1573酒中含氮化合物進(jìn)行快速檢測(cè)及定性定量，具體步驟如下：
1)提取國(guó)窖1573酒中含氮化合物：首先準(zhǔn)備國(guó)窖1573酒酒樣，先用去離子水稀釋至酒精度為10％的溶液體系，然后取5mL該酒樣，添加1g氯化鈉、20μL2-甲氧基-3-甲基吡嗪置于20mL頂空瓶中，頂空瓶用硅膠墊皮密封，SPME條件為：將萃取頭插入到頂空瓶中，并使萃取頭處于樣品之上2cm，恒溫水浴溫度50℃下，萃取45min；萃取完成后，迅速將萃取頭插入氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)樣口，于250℃下解吸5min；
2)用氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)分析步驟1)所得到的國(guó)窖1573酒中的含氮化合物、并對(duì)其含氮化合物進(jìn)行定性定量分析：
氣相色譜條件：HP-5MS毛細(xì)管色譜柱，其參數(shù)為60m×0.25mm、0.25μm；手動(dòng)不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣口溫度250℃；程序升溫：初始溫度40℃，保留6min，以3℃/min的速率升至100℃，以5℃/min的速率升至230℃，保留20min；
NPD溫度：250℃；氫氣流速：2.0mL/min；空氣流速：60mL/min；載氣He，流速30mL/min；
MS條件：EI電離源，電子能量70eV，掃描范圍30～550amu，離子源溫度230℃；傳輸線溫度280℃；四極桿溫度150℃；
3)檢出物質(zhì)的定性：未知化合物的質(zhì)譜通過(guò)與wiley7nDatabase，NIST11及標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比進(jìn)行定性；
4)定量分析：稱取一定量標(biāo)準(zhǔn)品，配制于無(wú)水乙醇中作為單標(biāo)貯備液，準(zhǔn)確吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)貯備液用模擬酒，所述的模擬酒為體積百分比為10％的乙醇溶液，配制成一系列濃度的混合標(biāo)樣；其中內(nèi)標(biāo)物質(zhì)為2-甲氧基-3-甲基吡嗪。
表1本發(fā)明方法國(guó)窖1573酒中的含氮化合物檢測(cè)結(jié)果
由表1可知，利用氣相色譜-氮磷檢測(cè)器-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)共檢測(cè)出國(guó)窖1573酒中9種含氮化合物，其中噻唑類3種、吡嗪類5種、吡咯類1種。該方法能快速定性出多種含氮化合物，準(zhǔn)確測(cè)定出國(guó)窖1573酒中含氮化合物的含量。